 org/PropertyValue»> Элементы питания AA/пальчиковая(R6;LR6;FR6) org/PropertyValue»> С сертификатом о калибровке нетЭтот товар из подборокКомплектация *
Параметры упакованного товара Единица товара: Штука Длина, мм: 496
Произведено
Указанная информация не является публичной офертой Отзывы о лазерном уровне MATRIXОставить свой отзыв На данный момент для этого товара нет расходных материаловСпособы получения товара в МосквеДоставка Вес брутто товара: 2.405 кг В каком городе вы хотите получить товар? выберите городАбаканАксайАктауАлександровАлыкельАльметьевскАнадырьАнгарскАрзамасАрмавирАрсеньевАртемАрхангельскАстраханьАхтубинскАчинскБалаковоБалашовБалезиноБарнаулБатайскБелгородБелогорскБерезникиБийскБиробиджанБлаговещенскБодайбоБокситогорскБорБорисоглебскБратскБрянскБугульмаБугурусланБуденновскБузулукВеликие ЛукиВеликий НовгородВеликий УстюгВельскВитебскВладивостокВладикавказВладимирВолгоградВолгодонскВолжскВолжскийВологдаВолховВольскВоркутаВоронежВоскресенскВыборгВыксаВышний ВолочекВязьмаВятские ПоляныГеоргиевскГлазовГорно-АлтайскГрозныйГубкинскийГусь-ХрустальныйДальнегорскДедовскДербентДзержинскДимитровградДмитровДонецкДудинкаЕвпаторияЕгорьевскЕкатеринбургЕлецЕссентукиЗаводоуковскЗеленодольскЗлатоустЗубовоИвановоИгнатовоИжевскИзбербашИнтаИркутскИшимЙошкар-ОлаКазаньКалининградКалугаКаменск-УральскийКаменск-ШахтинскийКамень-на-ОбиКанашКанскКарагандаКарасукКаргопольКемеровоКерчьКинешмаКиришиКировКиселевскКисловодскКлинКлинцыКоломнаКолпашевоКомсомольск-на-АмуреКоролевКостромаКотласКраснодарКрасноярскКропоткинКудьмаКузнецкКуйбышевКумертауКунгурКурганКурскКызылЛабинскЛабытнангиЛаговскоеЛангепасЛенинск-КузнецкийЛесосибирскЛипецкЛискиЛуневоЛюдиновоМагаданМагнитогорскМайкопМалые КабаныМахачкалаМеждуреченскМиассМинскМихайловкаМичуринскМоскваМуравленкоМурманскМуромНабережные ЧелныНадеждаНадымНазраньНальчикНаро-ФоминскНарьян-МарНаходкаНевинномысскНерюнгриНефтекамскНефтеюганскНижневартовскНижнекамскНижний НовгородНижний ТагилНовая ЧараНовозыбковНовокузнецкНовороссийскНовосибирскНовочебоксарскНовочеркасскНовый УренгойНогинскНорильскНоябрьскНурлатНяганьОбнинскОдинцовоОзерскОктябрьскийОмскОнегаОрелОренбургОрехово-ЗуевоОрскПавлодарПангодыПензаПермьПетрозаводскПетропавловскПетропавловск-КамчатскийПикалевоПлесецкПолярныйПригородноеПрокопьевскПсковПятигорскРеутовРоссошьРостов-на-ДонуРубцовскРыбинскРязаньСалаватСалехардСамараСанкт-ПетербургСаранскСарапулСаратовСаянскСвободныйСевастопольСеверныйСеверобайкальскСеверодвинскСеверскСерпуховСимферопольСлавянск-на-КубаниСмоленскСоликамскСочиСтавропольСтарый ОсколСтерлитамакСургутСызраньСыктывкарТаганрогТаксимоТамбовТаштаголТверьТихвинТихорецкТобольскТольяттиТомскТуапсеТулаТуркестанТюменьУдомляУлан-УдэУльяновскУрайУральскУрюпинскУсинскУсолье-СибирскоеУссурийскУсть-ИлимскУсть-КутУсть-ЛабинскУфаУхтаФеодосияХабаровскХанты-МансийскХасавюртЧайковскийЧебоксарыЧелябинскЧеремховоЧереповецЧеркесскЧитаЧусовойШарьяШахтыЭлектростальЭлистаЭнгельсЮгорскЮжно-СахалинскЯкутскЯлтаЯлуторовскЯрославль Самовывоз: бесплатно
 35454559326172,43.86685562133789]» data-short-name=»ул. Коминтерна, д. 155″ data-all-goods-available=»0″> м.Буревестник,г. Нижний Новгород, ул. Коминтерна, д. 155 пн. – вс.: 9:00 – 20:00 В корзинуСервис от ВсеИнструменты.руМы предлагаем уникальный сервис по обмену, возврату и ремонту товара! Средний срок ремонта для данной модели составляет 35 дней Обратиться по обмену, возврату или сдать инструмент в ремонт вы можете в любом магазине или ПВЗ ВсеИнструменты. ру.Гарантия производителяГарантия производителя 2 годаГарантийный ремонтЗдесь вы найдете адреса расположенных в вашем городе лицензированных сервисных центров.
| Может понадобиться |
Буревестник, г. Нижний Новгород, ул. Коминтерна, д. 155 По предзаказу на 8 мая, после 13:00 В корзину
Парк культуры,Отзывы о лазерном уровне MATRIXОставить свой отзыв Цена/качество: Удобство использования: Точность показаний:
 org/Review» data-comment-type=»comment» data-good-id=»662039″ data-parent-comment-id=»1086490″ data-comment-author=»Мещеряков Михаил»>Цена/качество: Удобство использования: Точность показаний: Хороший прибор для домашнего использования Безусловно есть, но не критичны для моих требований Строили дом, друзья дали в помощь. Реально помог, облегчит многие работы и уровень цоколя, стены, полы, уклоны отопления. Понравилось, что все принадлежности в кейсе, удобно хранить и транспортировать. Как только вернул, сразу заказал такой-же на все инструменты.ру. Дома
| Может понадобиться |
)Кнопки включения расположены сверху и забиваются пылью,отчего начинают залипать.
точный.
Это основная причина повреждения инструмента. За такую цену хорошая точность с минимальной погрешностью на двольно дальние расстояния. Удобный чемодан для хранения. Уровень лазерный, 150мм, штатив 1100мм, самовыравнивающийся Matrix 35033
Код товара: 63918
В наличии до 10 шт.
| ||||||||||||||||||||||
|
Лазерный нивелир в ударопрочном корпусе. | ||||||||||||||||||||||
|
Цена указана за 1 шт. |
5 мм/м
Комплектуется специальным штативом и пластиковым кейсом, позволяющим с удобством транспортировать и хранить набор. Имеет функцию автоматического построения плоскости для горизонтальной и вертикальной разметки в помещении. Лазерный уровень matrix 35033 со штативом
Средняя цена
Укажите приемлемую цену — как только цена снизится, мы сразу вам сообщим
Мы отправили вам письмо — подвердите, пожалуйста, адрес
Характеристики
Общие характеристики | |
|---|---|
Тип нивелира | лазерный ротационный |
Максимальная дальность измерения (без приемника) | 10 м |
Точность | 0. |
Функции | |
Автоматическое выравнивание | есть |
Отключение выравнивания | есть |
Встроенный пузырьковый уровень | есть |
Поворотное основание | есть |
Построение плоскостей | |
Количество перекрестий (угол 90°) | 1 |
Количество вертикальных линий | 1 |
Количество горизонтальных линий | 1 |
Угол самовыравнивания | 4 ° |
Цвет луча | красный |
Количество лучей | 2 шт. |
Комплектация | |
Штатив в комплекте | есть |
Максимальная высота штатива | 1.1 м |
Элементы питания | АА (2 шт.) |
Батарейки в комплекте | есть |
Кейс | есть |
Прочие характеристики | |
Резьба под штатив 5/8″ | есть |
Класс лазера | 2 |
Длина волны | 650 нм |
Дополнительно | |
Гарантийный срок | 12 мес. |
Смотрите также
Уровень лазерный Matrix самовыравнив кейс в Хабаровске | Интертул
Код товара:
55457
Артикул производителя:
35033-MX
Вы можете приобрести этот товар по розничной цене в Хабаровске:
3 960,00 pуб.
Добавить в корзину
Хотите приобрести дешевле?
Предварительная дата выдачи: Сегодня — чт. — 6 мая
| ← | Май 2021 | → | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Пн | Вт | Ср | Чт | Пт | Сб | Вс |
| 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 1 | 2 |
| 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 |
| 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 |
| 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 |
| 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 |
| 31 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
Добавить к сравнениюУдалить из сравнения
Добавить в закладкиУдалить из закладок
-
Описание
Лазерный уровень MATRIX применяется на строительных, ремонтных площадках для нанесения разметки, точек уклона.
Инструмент имеет ударопрочный металлический корпус, что значительно увеличивает его рабочий ресурс. В комплект к уровню идет надежный штатив и удобный пластиковый кейс, что облегчает использование и транспортировку. Уровень оснащен функцией автоматического построения плоскости для вертикальной и горизонтальной разметки в помещении.Технические характеристики
- Цвет луча — красный
- Резьба под штатив, дюйм — 5/8
- Поверка — нет
- Элементы питания — AA/пальчиковая(R6;LR6;FR6)
- Количество и напряжение элементов питания — 2х1.5B
- Внесен в госреестр — нет
- Количество лучей, шт — 2
- Направление лучей — горизонталь/вертикаль/крест
- Тип выравнивания — автоматическое
- 360 градусов — нет
- Штатив в комплекте — есть
- Количество аккумуляторов в комплекте — нет
- Магнитное крепление — нет
- Дальность построения без приемника, м — 10
- Тип — линейный
- С сертификатом о калибровке — нет
- Время работы на одном заряде, ч — 3
- Длина волны, нм — 650
- Температура хранения, °С — от 0 до +50
- Точность, мм/м ±0. 5
- Класс лазера- 2
- Вес, кг — 0,42
Комплектация
- Лазерный уровень;
- 2 батарейки АА;
- Регулировочная пластина;
- Штатив;
- Очки;
- Инструкция;
- Гарантийный талон;
- Пластиковый кейс.
Вес, кг: 2,41
Длина, мм: 496
Ширина, мм: 133
Высота, мм: 279Особенности лазерного уровня MATRIX
Простота хранения и транспортировки
Наличие пластикового кейса облегчает хранение и транспортировку уровня и всех его комплектующих.Устойчивость конструкции
У лазерного уровня имеется специальный штатив на трех опорах, он надежно фиксирует прибор.Преимущества
- Надежность;
- Ударопрочный корпус;
- Функция автоматического построения плоскости для разметки;
- Погрешность ±0. 5 мм/м;
- Размер уровня 150 мм;
- Высота штатива 1100 мм.
Товар дня да Тип Уровень лазерный Размер Особенности 150мм, штатив 1100мм, самовыравнивающийся в пластиковом кейсе Тип линейный Дальность построения (м) 10 м Цвет луча красный Особенности самовыравнивание, блокировка выравнивания, штатив в комплекте -
Отзывы (1)
Отзывы с оценкой
+ Добавить отзыв
Андрей Иванович из города: Хабаровск31.
отличная модель 10.2016Опыт использования: месяц
Достоинства:
Вы видели цену?! За такие копейки уровень со штативом!!! Отлично!!!
Недостатки:
Точность. До «ПРОФИ» немного не дотягивает, но для домашнего ремонта подходит 100%.
Комментарий:
Делал дома ремонт, был нужен уровень. Консультант предупредил, что он не «ПРОФИ», дает погрешность. Но цена была очень привлекательна и жадность взяла свое.
Выписал, получил, начал пользоваться. Не жалею. Уровень отличный, все точно и четко. Рекомендую всем!!!Полезность отзыва: Да 0 / Нет 0
Источник: Интертул
- Доставка
Инструмент имеет ударопрочный металлический корпус, что значительно увеличивает его рабочий ресурс. В комплект к уровню идет надежный штатив и удобный пластиковый кейс, что облегчает использование и транспортировку. Уровень оснащен функцией автоматического построения плоскости для вертикальной и горизонтальной разметки в помещении.
5
5 мм/м;
10.2016
Выписал, получил, начал пользоваться. Не жалею. Уровень отличный, все точно и четко. Рекомендую всем!!!Внимание! Фирма-производитель может по своему усмотрению изменять комплектацию, конструкцию и дизайн товара. Поэтому, чтобы не возникло недоразумений, перед покупкой советуем уточнять у менеджера нашей компании информацию о комплектации и технических характеристиках конкретной модели.
Цена на сайте действует только при оформлении заказа через интернет-магазин и может отличаться от цены в магазинах.
5 лучших лазерных уровней, обзоры и методы нивелирования
Эти устройства с батарейным питанием излучают точные лучи света, которые остаются ровными и вертикальными на больших расстояниях — идеально подходят для установки шкафов, дверей, плитки, отделки и многого другого.
Вот наш выбор четырех основных типов самонивелирующихся лазеров с указаниями по использованию каждого из них.
Laser Level Обзоры
1. Трехплоскостной лазерный уровень: Bosch GLL3-80
Фото Джеймса УорреллаВстречайте единственный лазерный уровень, который одновременно проецирует три перпендикулярных луча на 360 градусов на стены, потолок и пол.Он также снимает одиночные горизонтальные или вертикальные линии. В нем нет движущихся частей, поэтому батареи и детали служат дольше.
Технические характеристики: 1,7 фунта, видимость 65 футов, точность ¼ дюйма на 100 футов. Включает крепление с реечной регулировкой высоты.
Около 600 долларов; boschtools.com
2. Точечный лазерный уровень: Johnson 40-6670
Фото Джеймса Уоррелла Это устройство снимает две отвесные балки — одну вверху, одну вниз — и это все, что вам нужно для установки дверей или отметки мест расположения потолочных креплений.
Понравились яркие точки и удобное резиновое покрытие корпуса.
Технические характеристики: 1,27 фунта, видимость 100 футов, точность до дюйма на 100 футов. Включает визирную пластину для улучшения видимости луча.
Около 90 долларов; johnsonlevel.com
3. Крестообразный лазерный уровень: Craftsman 48250
Фото Джеймса УорреллаПроецирует горизонтальные и отвесные балки под углом 120 градусов по отдельности или вместе.Подходит для облицовки стен и полов плиткой. Как и эти другие лазеры, он издает звуковой сигнал, когда находится вне уровня, но этот луч может быть заблокирован, например, чтобы помочь вам разложить обшивку лестницы.
Технические характеристики: 1,5 фунта, видимость 100 футов, точность до дюйма на 100 футов. Включает регулируемое основание.
Около 90 долларов; craftman.com
4. Ротационный лазерный уровень: DeWalt DW074KD
Фото Джеймса Уоррелла Вращающийся луч создает горизонтальную линию на 360 градусов.
Используйте его для проектов на нескольких стенах, таких как кухонные шкафы и поручни для стульев. На открытом воздухе приемник обнаруживает невидимый луч на расстоянии до 600 футов.
Технические характеристики: 4,5 фунта, видимость 100 футов, точность до дюйма на 100 футов. Включает приемник, настенное крепление и визирную пластину.
Около 465 долларов; dewalt.com
5. Уровни современного духа
Уровень торпеды Savage с подсветкой TLL049M
Фото Джеймса УорреллаВыточенный из куска авиационного алюминия, этот уровень длиной 9 дюймов прочный и удобный.Сильные магниты из редкоземельных металлов позволяют ему цепляться за железные водосточные трубы и стальные шпильки, а флаконы с подсветкой могут оказаться полезными в темных помещениях.
Около 30 долларов; для сантехники, стального каркаса и узких мест. Домашнее депо.
Empire True Blue E80.
24 Двутавровая балка Фото Джеймса Уоррелла Этот прочный 24-дюймовый уровень — универсальная и легкая рабочая лошадка для водопровода и выравнивания всего, от шкафов до столбов забора.Он имеет градуированную пробирку, на которой измеряется шаг с шагом дюйма, что полезно для проверки уклона желоба или дорожки.
Около 25 долларов; для столярных, сантехнических и ландшафтных работ. empirelevel.com
Stabila 41048 R-образная балка
Фото Джеймса Уоррелла R-образное поперечное сечение легко захватить, и, по заявлению производителя, оно на 120 процентов прочнее, чем его топовые уровни с коробчатой балкой.Используйте эту 48-дюймовую модель для подвешивания дверей в качестве линейки — у нее есть три непрерывных края для четких линий — или даже в качестве стяжки. Очистить несложно.
Около 180 долларов; для столярных работ, ландшафтного дизайна. stablea.com
Уровень техники
1. Облицовка потолка (оловом)
Иллюстрация Грегори НемекаПотолочные панели лучше всего смотрятся, если один ряд располагается по центру над главным дверным проемом.Отметьте потолок на расстоянии 12 дюймов от центра дверного проема, где края панели будут приземляться. Перенесите отметку на противоположную сторону комнаты. Используя трехплоскостной лазер, совместите один луч с обеими метками и перекладиной, где вы хотите, чтобы перпендикулярный край центральной панели приземлился. Прибейте первые ряды панелей по лазерным линиям.
2. Установить косяк
Иллюстрация Грегори Немека Установите точечный лазер на расстоянии нескольких дюймов от косяка так, чтобы точка находилась по центру между краями косяка.
Удерживая измерительную ленту горизонтально по средней линии бокового косяка в каждом месте шарнира, проверьте, где луч упирается в ленту. Установите прокладку между косяком и штифтом в этих местах до тех пор, пока не будут совпадать все размеры косяка и балки.
3. Облицовка стен
Иллюстрация Грегори НемекаИзмерьте и отметьте центральную точку области, которую нужно выложить плиткой. Установите перекрестный лазерный луч достаточно далеко от стены, чтобы лучи охватывали всю площадь и пересекались в отмеченной центральной точке.Работая в одном квадранте за раз, распределите клей, затем начните укладывать плитку вдоль вертикальной балки. Плитка до горизонтальной балки. Закончите один квадрант перед тем, как начать следующий.
4. Установите Wainscot
Иллюстрация Грегори Немека Отметьте стену в том месте, где должен располагаться верхний край бортовой доски.
Установите ротационный лазерный луч в центре комнаты на штатив, включите лазер и отрегулируйте скорость вращения луча до тех пор, пока вокруг комнаты не появится сплошная линия.Отрегулируйте высоту штатива, пока лазерная линия не совпадет с отметкой на стене.
Гиполипидемическое соединение цетабен вызывает изменения морфологии Гольджи и движения пузырьков.
Олбрайт Дж. Д., Де Врис В. Г., Ларгис Е. Е., Майнер Т. Г., Рейх М. Ф., Шаффер С. А., Шеперд Р. Г., Упеслацис Дж. (1983) Потенциальные антиатеросклеротические агенты. 2. Аналоги цетабена (аралалкиламино) и (алкиламино) бензойной кислоты. J Med Chem 26: 1378–1393
CAS PubMed Google Scholar
Allan VJ, Schroer TA (1999) Мембранные двигатели.Curr Opin Cell Biol 11: 476–482
Статья CAS PubMed Google Scholar
Angermüller S, Fahimi HD (1981) Селективная цитохимическая локализация пероксидазы, цитохромоксидазы и каталазы в печени крысы с 3,3′-диаминобензидином.
Гистохимия 71: 33–44
CAS PubMed Google Scholar
Beier K, Völkl A, Hashimoto T., Fahimi HD (1988) Избирательная индукция пероксисомальных ферментов гиполипидемическим препаратом безафибратом.Обнаружение модуляций с помощью автоматического анализа изображений в сочетании с иммуноэлектронной микроскопией и иммуноблоттингом. Eur J Cell Biol 46: 383–393
CAS PubMed Google Scholar
Brown MS, Goldstein JL (1999) Протеолитический путь, который контролирует содержание холестерина в мембранах, клетках и крови. Proc Natl Acad Sci U S A 96: 11041–11048
Статья CAS PubMed Google Scholar
Burkhardt JK, Echeverri CJ, Nilsson T, Vallee RB (1997) Сверхэкспрессия субъединицы динамитина (p50) динактинового комплекса нарушает динеин-зависимое поддержание распределения мембранных органелл.
J Cell Biol 139: 469–484
Статья CAS PubMed Google Scholar
Chandoga J, Rojekova I, Hampl L, Hocman G (1994a) Цетабен и фибраты по-разному влияют на активность пероксисомальных ферментов. Biochem Pharm 47: 515–519
Статья CAS PubMed Google Scholar
Чандога Дж., Хэмпл Л., Турецкий Л., Роекова И., Уликова Е., Хокман Г. (1994b) Цетабен является исключительным типом пролифератора пероксисом.Int J Biochem 26: 679–696
Статья CAS PubMed Google Scholar
Коул Н.Б., Липпинкотт-Шварц Дж. (1995) Организация органелл и мембранный трафик микротрубочками. Curr Opin Cell Biol 7: 55–64
Статья CAS PubMed Google Scholar
de Figueiredo P, Brown WJ (1999) Клофибрат ингибирует мембранный перенос в комплекс Гольджи и индуцирует его ретроградное движение к эндоплазматическому ретикулуму.
Cell Biol Toxicol 15: 311–323
Статья PubMed Google Scholar
de Pace DM, Esfahani M (1987) Влияние истощения холестерина на морфологию клеток. Anat Rec 219: 135–143
PubMed Google Scholar
Duden R, Griffiths G, Frank R, Argos P, Kreis TE (1991) Beta-COP, белок 110 кД, связанный с везикулами, не покрытыми клатрином, и комплексом Гольджи, демонстрирует гомологию с бета-адаптином.Cell 64: 649–665
Статья CAS PubMed Google Scholar
Engfelt WH, Shackelford JE, Aboushadi N, Jessani N, Masuda K, Paton VG, Keller GA, Krisans SK (1997) Характеристика клеток UT2. Индукция пероксисомальной 3-гидрокси-3-метилглутарил-кофермента А-редуктазы. J Biol Chem 272: 24579–24587
Статья CAS PubMed Google Scholar
Eskelinen E-L, Tanaka Y, Saftig P (2003) На кислотном крае: новые функции для белков лизосомных мембран.
Trends Cell Biol 13: 137–145
Статья CAS PubMed Google Scholar
Фаркуар MG, Palade GE (1998) Аппарат Гольджи: 100 лет прогресса и противоречий. Trends Cell Biol 8: 2–10
Статья CAS PubMed Google Scholar
Gaynor EC, Graham TR, Emr SD (1998) COPI в ER / Golgi и внутри-Golgi транспорте: указывают ли дрожжевые мутанты COPI путь? Biochim Biophys Acta 1404: 33–51
Статья CAS PubMed Google Scholar
Gorvel JP, Chavrier P, Zerial M, Gruenberg J (1991) Rab5 контролирует раннее слияние эндосом in vitro.Cell 64: 915–925
Статья CAS PubMed Google Scholar
Grimmer S, Iversen TG, van Deurs B, Sandvig K (2000) Транспорт рицина от эндосомы к Гольджи регулируется холестерином. Mol Biol Cell 11: 4205–4216
CAS PubMed Google Scholar
Hansen GH, Niels-Christiansen L-L, Thorsen E, Immerdal L, Danielsen EM (2000) Истощение холестерина в энтероцитах.
J Biol Chem 275: 5136–5142
Статья CAS PubMed Google Scholar
Хиршберг К., Липпинкотт-Шварц Дж. (1999) Кинетика секреторного пути и анализ передачи белков от комплекса Гольджи к поверхности клетки in vivo. FASEB J 13 (дополнение 2): S251 – S256
Google Scholar
Ho WC, Allan VJ, Van Meer G, Berger EG, Kreis TE (1989) Рекластеризация разбросанных элементов Гольджи происходит вдоль микротрубочек.Eur J Cell Biol 48: 250–263
CAS PubMed Google Scholar
Ihrke G, Neufeld EB, Meads T, Shanks MR, Cassio D, Laurent M, Schroer TA, Pagano RE, Hubbard AL (1993) Клетки WIF-B: модель in vitro для исследования полярности гепатоцитов. J Cell Biol 123: 1761–1775
Статья CAS PubMed Google Scholar
Ihrke G, Martin GV, Shanks MR, Schrader M, Schroer TA, Hubbard AL (1998) Апикальные белки плазматической мембраны и эндолин-78 перемещаются через субапикальный компартмент в поляризованных гепатоцитах WIF-B.
J Cell Biol 141: 115–133
Статья CAS PubMed Google Scholar
Keller P, Simons K (1998) Холестерин необходим для поверхностного транспорта гемагглютинина вируса гриппа. J Cell Biol 140: 1357–1367
Статья CAS PubMed Google Scholar
Клауснер Р.Д., Дональдсон Дж. Г., Липпинкотт-Шварц Дж. (1992) Брефельдин А: понимание контроля мембранного движения и структуры органелл.J Cell Biol 116: 1071–1080
Статья CAS PubMed Google Scholar
Ковач В., Уолтер И., Стангл Х. (2001) Цетабен-индуцированные изменения морфологии и пероксисомальных ферментов в клетках гепатомы крысы Mh2C1 и клетках гепатобластомы человека HepG2. Histochem Cell Biol 115: 509–519
CAS PubMed Google Scholar
Kreis TE (1990) Роль микротрубочек в организации аппарата Гольджи.
Цитоскелет клеточного мотила 15: 67–70
CAS PubMed Google Scholar
Krisans SK, Ericsson J, Edwards PA, Keller GA (1994) Фарнезил-дифосфатсинтаза локализована в пероксисомах. J Biol Chem 269: 14165–14169
CAS PubMed Google Scholar
Laemmli UK (1970) Расщепление структурных белков во время сборки головки бактериофага Т4.Nature 227: 680–685
PubMed Google Scholar
Linstedt AD, Hauri HD (1993) Giantin, новый консервативный мембранный белок Гольджи, содержащий цитоплазматический домен размером не менее 350 кДа. Mol Biol Cell 4: 679–693
CAS PubMed Google Scholar
Локк М., Хьюи П. (1983) Тайна неокрашенных цистерн комплекса Гольджи. J Histochem Cytochem 31: 1019–1032
CAS PubMed Google Scholar
Mayor S, Sabharanjak S, Maxfield FR (1998) Холестерин-зависимое удержание GPI-заякоренных белков в эндосомах.
EMBO J 17: 4626–4638
Статья CAS PubMed Google Scholar
Miwako I, Yamamoto A, Kitamura T, Nagayama K, Ohashill M (2001) Потребность в холестерине для выхода катион-независимого маннозо-6-фосфатного рецептора из мультивезикулярных поздних эндосом в Гольджи. J Cell Sci 114: 1765–1776
CAS PubMed Google Scholar
Mu FT, Callaghan JM, Steele-Mortimer O, Stenmark H, Parton RG, Campbell PL, McCluskey J, Yeo JP, Tock EP, Toh BH (1995) EEA1, ранний белок, связанный с эндосомами.EEA1 представляет собой консервативный альфа-спиральный белок периферической мембраны, фланкированный цистеиновыми «пальцами» и содержащий кальмодулин-связывающий мотив IQ. J Biol Chem 270: 13503–13511
Статья CAS PubMed Google Scholar
Патон В.Г., Шакелфорд Дж.Э., Крисанс С.К. (1997) Клонирование и субклеточная локализация изопентенилдифосфатдиметилаллилдифосфат-изомеразы хомяка и крысы.
J Biol Chem 272: 18945–18950
Статья CAS PubMed Google Scholar
Pecot MY, Malhotra V (2004) Мембраны Гольджи остаются отделенными от эндоплазматического ретикулума во время митоза в клетках млекопитающих.Cell 116: 99–107
Статья CAS PubMed Google Scholar
Pelham HR (1996) Динамическая организация секреторного пути. Cell Struct Funct 21: 413–419
CAS PubMed Google Scholar
Ponnambalam S, Girotti M, Yaspo ML, Owen CE, Perry AC, Suganuma T, Nilsson T, Fried M, Banting G, Warren G (1996) Гомологи приматов крысиного TGN38: первичная структура, экспрессия и функциональные последствия.J Cell Sci 109: 675–685
CAS PubMed Google Scholar
Prescott AR, Lucocq JM, James J, Lister JM, Ponnambalam S (1997) Отчетливая компартментализация TGN46 и бета 1,4-галактозилтрансферазы в клетках HeLa.
Eur J Cell Biol 72: 238–246
CAS PubMed Google Scholar
Пресли Дж. Ф., Коул Н. Б., Шроер Т. А., Хиршберг К., Заал К. Дж., Липпинкотт-Шварц Дж. (1997) Транспорт ER-to-Golgi, визуализированный в живых клетках.Nature 389: 81–85
Статья CAS PubMed Google Scholar
Rapp S, Saffrich R, Anton M, Jäkle U, Ansorge W, Gorgas K, Just WW (1996) Пероксисомное движение на основе микротрубочек. J Cell Sci 109: 837–849
CAS PubMed Google Scholar
Рогальский А.А., Зингер С.Дж. (1984) Ассоциации элементов аппарата Гольджи с микротрубочками. J Cell Biol 99: 1092–1100
Статья CAS PubMed Google Scholar
Sandoval IV, Bonifacino JS, Klausner RD, Henkart M, Wehland J (1984) Роль микротрубочек в организации и локализации аппарата Гольджи.
J Cell Biol 99: 113s – 118s
Статья CAS PubMed Google Scholar
Schmidt K, Schrader M, Kern HF, Kleene R (2001) Регулируемая апикальная секреция зимогенов в поджелудочной железе крысы. Вовлечение гликозилфосфатидилинозитол-заякоренного гликопротеина GP-2, лектина ZG16p и микродоменов, обогащенных холестерином-гликосфинголипидом. J Biol Chem 276: 14315–14323
CAS PubMed Google Scholar
Schrader M, Baumgart E, Völkl A, Fahimi HD (1994) Гетерогенность пероксисом в клеточной линии гепатобластомы человека HepG2.Доказательства различных субпопуляций. Eur J Cell Biol 64: 281–294
CAS PubMed Google Scholar
Schrader M, Burkhardt JK, Baumgart E, Lüers G, Spring H, Völkl A, Fahimi HD (1996) Взаимодействие микротрубочек с пероксисомами. Трубчатые и сферические пероксисомы в клетках HepG2 и их изменения, вызванные лекарствами, активными в отношении микротрубочек.
Eur J Cell Biol 69: 24–35
CAS PubMed Google Scholar
Schrader M, King SJ, Stroh TA, Schroer TA (2000) Визуализация в реальном времени выявляет пероксисомный ретикулум в живых клетках.J Cell Sci 113: 3663–3671
CAS PubMed Google Scholar
Shanks MR, Cassio D, Lecoq O, Hubbard AL (1994) Улучшенная линия гибридных поляризованных клеток гепатомы крысы. Генерация и сравнение с его родственниками-гепатомами и гепатоцитами in vivo. J Cell Sci 107: 813–825
PubMed Google Scholar
Shechter I, Klinger E, Rucker ML, Engstrom RG, Spirito JA, Islam MA, Boettcher BR, Weinstein DB (1992) Солюбилизация, очистка и характеристика укороченной формы скваленсинтетазы печени крыс.J Biol Chem 267: 8628–8635
CAS PubMed Google Scholar
Stamellos KD, Shackelford JE, Shechter I, Jiang G, Conrad D, Keller GA, Krisans SK (1993) Субклеточная локализация скваленсинтазы в клетках печени крыс.
J Biol Chem 268: 12825–12836
CAS PubMed Google Scholar
Stangl H, Kovacs W, Böck P, Kremser K (1995) Дифференциальная индукция пероксисомальных ферментов гиполипидемическими средствами в клеточных линиях гепатомы человека (HepG2) и крысы (Mh2C1).Eur J Clin Chem Clin Biochem 33: 775–783
CAS PubMed Google Scholar
Танака Р.Д., Эдвардс П.А., Лан С.Ф., Фогельман А.М. (1983) Регулирование активности редуктазы 3-гидрокси-3-метилглутарил-кофермента А в миобластах птиц. Механизм действия 25-гидроксихолестерина. J Biol Chem 258: 13331–13339
CAS PubMed Google Scholar
Thyberg J, Moskalewski S (1985) Микротрубочки и организация комплекса Гольджи.Exp Cell Res 159: 1–16
CAS PubMed Google Scholar
Turner JR, Tartakoff AM (1989) Ответ комплекса Гольджи на изменения микротрубочек: роль метаболической энергии и мембранного движения в организации комплекса Гольджи.
J Cell Biol 109: 2081–2088
Статья CAS PubMed Google Scholar
Vaisberg EA, Grissom PM, McIntosh JR (1996) Клетки млекопитающих экспрессируют три различные тяжелые цепи динеина, которые локализованы в разных цитоплазматических органеллах.J Cell Biol 133: 831–842
Статья CAS PubMed Google Scholar
Ward TH, Полищук RS, Caplan S, Hirschberg K, Lippincott-Schwartz J (2001) Поддержание структуры и функции Гольджи зависит от целостности экспорта ER. J Cell Biol 155: 557–570
Статья CAS PubMed Google Scholar
Уоррен Г., Левин Т., Мистели Т. (1995) Митотическая разборка аппарата Гольджи млекопитающих.Trends Cell Biol 5: 413–416
Статья CAS PubMed Google Scholar
Уэллс, Вашингтон (2001) Давай сделаем Гольджи.
J Cell Biol 155: 498–499
Статья CAS PubMed Google Scholar
Wiemer EA, Wenzel T, Deerinck TJ, Ellisman MH, Subramani S (1997) Визуализация пероксисомального компартмента в живых клетках млекопитающих: динамическое поведение и ассоциация с микротрубочками.J Cell Biol 136: 71–80
Статья CAS PubMed Google Scholar
% PDF-1.4
%
1461 0 объект
>
эндобдж
xref
1461 114
0000000016 00000 н.
0000005186 00000 п.
0000005365 00000 н.
0000005498 00000 п.
0000005559 00000 н.
0000005915 00000 н.
0000006097 00000 н.
0000006581 00000 н.
0000006728 00000 н.
0000007392 00000 н.
0000007539 00000 н.
0000008055 00000 н.
0000008202 00000 н.
0000008698 00000 п.
0000008843 00000 н.
0000009318 00000 п.
0000009463 00000 п.
0000009901 00000 н.
0000010046 00000 п.
0000010392 00000 п.
0000010537 00000 п.
0000011015 00000 п.
0000011160 00000 п.
0000011794 00000 п.
0000011939 00000 п.
0000012102 00000 п.
0000012247 00000 п.
0000012410 00000 п.
0000012555 00000 п.
0000012717 00000 п.
0000012864 00000 п.
0000013027 00000 н.
0000013174 00000 п.
0000013337 00000 п.
0000013484 00000 п.
0000013647 00000 п.
0000013794 00000 п.
0000013957 00000 п.
0000014104 00000 п.
0000014267 00000 п.
0000014414 00000 п.
0000014577 00000 п.
0000014721 00000 п.
0000015053 00000 п.
0000016246 00000 п.
0000016391 00000 п.
0000016430 00000 п.
0000016539 00000 п.
0000016650 00000 п.
0000016907 00000 п.
0000017505 00000 п.
0000019707 00000 п.
0000021870 00000 п.
0000023082 00000 п.
0000024300 00000 п.
0000024821 00000 п.
0000025090 00000 н.
0000025615 00000 п.
0000025892 00000 п.
0000028084 00000 п.
0000029278 00000 н.
0000030488 00000 п.
0000030630 00000 п.
0000030720 00000 п.
0000030985 00000 п.
0000031525 00000 п.
0000031804 00000 п.
0000032324 00000 п.
0000034630 00000 п.
0000037024 00000 п.
0000039436 00000 п.
0000041841 00000 п.
0000042089 00000 п.
0000044417 00000 п.
0000047068 00000 п.
0000189969 00000 н.
0000206301 00000 н.
0000206391 00000 н.
0000213096 00000 н.
0000213369 00000 н.
0000213440 00000 н.
0000223991 00000 н.
0000224266 00000 н.
0000224842 00000 н.
0000226054 00000 н.
0000238404 00000 н.
0000239613 00000 н.
0000255885 00000 н.
0000273223 00000 н.
0000273803 00000 н.
0000336205 00000 н.
0000336474 00000 н.
0000336654 00000 н.
0000336683 00000 п.
0000337104 00000 н.
0000343748 00000 н.
0000343789 00000 н.
0000348330 00000 н.
0000348371 00000 п.
0000348466 00000 н.
0000348557 00000 н.
0000348694 00000 п.
0000349214 00000 н.
0000350424 00000 н.
0000350594 00000 н.
0000351026 00000 н.
0000351116 00000 н.
0000351460 00000 н.
0000351543 00000 н.
0000351626 00000 н.
0000351710 00000 н.
0000351788 00000 н.
0000351876 00000 н.
0000002576 00000 н.
трейлер
] / Назад 4
7 >> startxref 0 %% EOF 1574 0 объект > поток h ެ VkTSW7 и bD
Астроциты отображают комплексные и локализованные отклики кальция на стимуляцию единичным нейроном в гиппокампе
Введение
Астроциты важны для обработки информации в головном мозге (Volterra and Meldolesi, 2005).
Эта концепция получила поддержку, когда было показано, что астроциты отвечают на глутамат повышением внутриклеточного кальция ([Ca 2+ ] i ) (Cornell-Bell et al., 1990). Передача кальциевых сигналов астроцитами запускает высвобождение глиотрансмиттеров, которые могут регулировать рецепторы NMDA (Parri et al., 2001), рецепторы AMPA (Fiacco and McCarthy, 2004) и тормозящие синапсы (Kang et al., 1998) и модулируют гетеросинаптическую депрессию (Serrano et al. , 2006), пресинаптическое высвобождение глутамата (Jourdain et al., 2007) и долгосрочное потенцирование (Henneberger et al., 2010). Передача нейрон-глиальных сигналов также увеличивает синаптический вес в гипоталамусе (Gordon et al., 2009) и модулирует активность корковой сети in vivo (Fellin et al., 2009). Однако несколько исследований ставят под сомнение важность передачи сигналов кальция астроцитами в синаптическую передачу и пластичность (Fiacco et al., 2007; Petravicz et al., 2008; Agulhon et al.
, 2010). Таким образом, необходимы дополнительные исследования, касающиеся сложной природы нейрон-глиальных взаимодействий и свойств вызванных нейронами кальциевых событий астроцитов.
Астроциты демонстрируют сложные морфологические взаимодействия с нейронами и другими астроцитами. Один астроцит связывается с сотнями дендритов (Halassa et al., 2007) и до 10 5 синапсов (Bushong et al., 2002) и соединяется с другими астроцитами посредством щелевых контактов (Giaume and Venance, 1998). В то же время отдельный нейрон проходит через территорию многих астроцитов (∼5 астроцитов / 8000 мкм 2 ) в гиппокампе (Nixdorf-Bergweiler et al., 1994).Таким образом, популяция астроцитов, вероятно, реагирует на активность отдельного нейрона. Действительно, коллатеральная стимуляция Шеффера вызывает изменения [Ca 2+ ] и от 15% (Pasti et al., 1997) до 62% (Porter and McCarthy, 1996) астроцитов в поле зрения микроскопа. Группы корковых астроцитов также реагируют на зрительные стимулы (Schummers et al.
, 2008) и демонстрируют паттерны активации, координированные с субпопуляциями нейронов (Schipke et al., 2008), предполагая, что астроциты образуют функциональные домены рядом с нейронами (Fellin, 2009).Однако о пространственных отношениях между отдельным нейроном и отвечающей популяцией астроцитов не сообщалось.
Чтобы понять, как организованы домены нейрон – астроцит, необходимо использовать метод активации одного нейрона. Деполяризация интернейронов (Kang et al., 1998) или клеток CA1 (Navarrete and Araque, 2008) с использованием методов patch-clamp может запускать кальциевые ответы астроцитов. Однако прямая механическая и электрическая стимуляция астроцитов может вызвать глиальный кальций (Hassinger et al., 1996; Ангуло и др., 2004; Bernardinelli et al., 2004) и усложняют измерения [Ca 2+ ] и . Недавние достижения в оптогенетике предоставили мощные подходы к неинвазивному картированию нейронных цепей (Wang et al., 2009). Здесь мы применили эту технологию с использованием канала родопсина-2 (ChR2) (Nagel et al.
, 2003) для управления активацией одного нейрона in situ и исследования нейрон-глиальных взаимодействий без острого физического возмущения клеток. Стимуляция одной клетки СА1 гиппокампа индуцировала [Ca 2+ ] i изменения в астроцитах с надежностью, которая была связана с положением астроцитов и зависела от глутаматергических и пуринергических путей.Кроме того, ансамбли астроцитов точно реагировали на нейрональную стимуляцию, предполагая, что астроциты организуются в функциональные домены и реагируют как сеть клеток. Этот тип координации, вероятно, необходим для модуляции нейрональной активности в микросхемах гиппокампа.
Результаты
Стимуляция пирамидных нейронов гиппокампа
in situ с использованием ChR2 Исследования нейрон-глиальных взаимодействий in situ технически сложны из-за трудностей в получении клеточной специфичности и разрешения отдельных клеток.Распространенным подходом к изучению этих взаимодействий в срезах является использование методов фиксации патч-зажима для стимуляции нейронов и / или прямой электрической стимуляции с помощью электрода.
Оба метода вызывают некоторый уровень острого механического разрушения ткани и могут напрямую вызывать повышение внутриклеточного кальция в астроцитах (Hassinger et al., 1996; Angulo et al., 2004; Bernardinelli et al., 2004). Однако недавние достижения в области оптогенетических методов позволили преодолеть многие из этих проблем и теперь представляют собой мощную альтернативу для стимуляции нейронов без необходимости использования внешних пипеток или электродов (Zhang et al., 2006). Более того, нацеленная экспрессия ChR2, как было показано, обеспечивает необходимую клеточную специфичность и разрешение отдельных клеток для активации нейронов и картирования нейронных цепей (Petreanu et al., 2007).
Мы были заинтересованы в том, чтобы определить, можно ли использовать ChR2 для исследования нейронно-глиальных взаимоотношений в органотипических срезах гиппокампа, в которых архитектура и схемы гиппокампа в значительной степени сохранены (Bekenstein and Lothman, 1991; Caeser and Aertsen, 1991; Frotscher and Gähwiler) , 1988; Frotscher et al.
, 1990; Gähwiler, 1981; Zimmer and Gähwiler, 1984). Мы использовали штамм вируса Semliki Forest, который избирательно управляет экспрессией в нейронах (Lundstrom et al., 2003; Haber et al., 2006), чтобы доставить ChR2 к одиночным пирамидным нейронам CA1 в 10–14 DIV органотипических срезах гиппокампа. Были созданы вирусные частицы, чтобы одновременно управлять экспрессией генов ChR2-Venus и направленной на мембрану mCherry (mCherry-f), чтобы очертить морфологию пирамидных клеток. Пиколитровые количества вируса вводили микропипеткой в слой пирамидных клеток СА1 для достижения экспрессии отдельных клеток.В течение 20 часов после доставки вируса было обнаружено, что одиночные NeuN-положительные пирамидные нейроны экспрессируют ChR2-Venus и mCherry-f (рис. 1 A , B ). ChR2-Венера была обнаружена во всем теле клетки, аксоне и дендритах пирамидных клеток, а также обнаружена в дендритных шипах (Рис. 1 B ). Таким образом, SFV можно использовать для нацеливания ChR2 на отдельные пирамидные клетки.
для экспрессии канала родопсина-2 в одиночных пирамидных нейронах гиппокампа и клеточный ответ на свет. A , Конфокальная проекция изображения Z-стека одиночной пирамидной клетки CA1 в органотипическом срезе гиппокампа, инфицированном SFV, управляющим экспрессией ChR2-Venus и mCherry-f. Сигнал Венеры был усилен анти-GFP. Иммуноокрашивание NeuN (синий) показывает ядро пирамидных клеток CA1. Локализация Венеры иллюстрирует клеточную локализацию ChR2, тогда как флуоресценция mCherry-f (красный цвет) показывает морфологию клетки CA1. B , Схема вирусного вектора (pSCA PD), используемого для создания вирусов леса Семлики (вверху), и изображение вторичного апикального дендрита пирамидного нейрона CA1, экспрессирующего ChR2-Venus (зеленый), mCherry (красный), и оверлей изображения (желтый). C , Репрезентативная запись прикрепленных к клеткам пирамидных клеток, инфицированных ChR2.
Зараженные клетки запускают AP при освещении синим светом от диапазона лазера Kr / Ar (488) или лампы Hg, отфильтрованной для FITC (FITC). Напротив, свет Kr / Ar лазера 568 нм (568), проходящий белый свет прицела (TWL) или белый свет лабораторного помещения (LWL) не вызывают возбуждения. D , Пользовательский фильтр возбуждения (510–530 нм) с фильтром нейтральной плотности 50% (50%) может быть использован для визуализации клеток, экспрессирующих Венеру, без активации ChR2.В качестве положительного контроля был применен синий свет (FITC), чтобы нейрон мог проявлять пиковое поведение. Масштабные линейки: A , 50 мкм; B , 10 мкм.
ChR2 представляет собой катионный канал, управляемый светом, который открывается при освещении в диапазоне света 350–550 нм (Nagel et al., 2003). Мы подтвердили, что ChR2-инфицированные пирамидные клетки в органотипической культуре деполяризуются в ответ на освещение синим светом, измеряя наличие AP с прикрепленными к клеткам записями.
Действительно, AP были вызваны из различных источников света, включая диапазон 488 нм Kr / Ar лазера и ртутную лампу, отфильтрованную для FITC (рис. 1 C ). Продолжительное воздействие этих источников синего света на пирамидные нейроны, экспрессирующие ChR2, индуцировало AP. Однако в этих условиях частота пикового поведения AP быстро снижалась в течение нескольких секунд, указывая на усталость нейронов или темное состояние ChR2 (Ritter et al., 2008). Напротив, свет Kr / Ar лазера с длиной волны 568 нм не запускал AP (рис. 1 C ).Чтобы визуализировать белок ChR2 в инфицированных нейронах без активации ChR2, мы использовали тег Venus на ChR2. Венера представляет собой вариант YFP со сдвигом в зелено-желтый цвет (Nagai et al., 2002), который обычно возбуждается фильтрами возбуждения YFP в диапазоне 490–510 нм. Было показано, что этот диапазон длин волн открывает ChR2, но вызывает меньшую силу тока, чем свет 450-490 нм (Boyden et al., 2005). Изготовленный на заказ фильтр (диапазон 510–530 нм), соединенный с фильтром нейтральной плотности 50% для уменьшения интенсивности света, был добавлен для визуализации Венеры без индукции AP (рис.
1 D ). Таким образом, в то время как освещение синим светом генерирует AP в пирамидных клетках, свет с длиной волны 568 и 510–530 нм (частично ослабленный) их не генерирует и, таким образом, может безопасно использоваться для визуализации.
ChR2 обеспечивает точный временной контроль над нейрональной активностью и был полезен для регулирования частоты спайков (Boyden et al., 2005; Zhang et al., 2006). Чтобы отобразить ответы астроцитов на активность нейронов в срезах гиппокампа, мы сначала разработали систему для активации ChR2 с помощью точных световых импульсов.Оптическое волокно малого диаметра (внутренняя сердцевина 100 мкм), подключенное к лазерному диоду с длиной волны 445 нм, использовалось для доставки света к поверхности среза независимо от светового пути микроскопа. Этот метод успешно использовался для импульсного фотолиза (Parpura and Haydon, 1999; Bernardinelli et al., 2005). Луч 635 нм, генерируемый отдельным диодом, был направлен по тому же оптическому пути, чтобы направить оптическое волокно на инфицированные нейроны без активации ChR2 (данные не показаны).
Длительность и интенсивность световых импульсов контролировались компьютером и согласовывались с записями, прикрепленными к клеткам.Чтобы определить, какие условия освещения (например, мощность и продолжительность) можно использовать для эффективного генерирования одиночных AP в инфицированных нейронах CA1, клетки подвергали воздействию последовательностей 1, 5, 10 и 100 мс световых импульсов 445 нм с различной интенсивностью (0,002, Мощность света 0,1, 0,22, 0,71 и 1 мВт) (рис.2 A , B ). Синхронизация световых импульсов и вызванных AP для каждого условия была проанализирована (рис. 2 B ), а настройки длительности и интенсивности импульса, дающие одиночные AP, были извлечены из данных.Стимуляция на 5 мс, 0,22 мВт давала надежные точки доступа. Затем определяли максимальную частоту AP, которая может быть надежно сгенерирована стимуляцией ChR2, посылая серию 5 мс (интенсивность 0,22 мВт) света с частотой 5, 10, 20, 25, 50 и 100 Гц (рис. 2 C ). . Для каждой частоты определялся процент AP (из 50 возможных), а также доля очень многочисленных AP (рис.
2 D ). Мы обнаружили, что точки доступа могут быть точно вызваны на частотах до 25 Гц. На более высоких частотах достоверность отклика снижалась.В целом, эти результаты демонстрируют, что вирусная экспрессия ChR2 и лазерная световая стимуляция могут использоваться для избирательной активации одиночных пирамидных нейронов гиппокампа in situ , а частота APs может точно контролироваться (до 25 Гц) в пирамидных нейронах CA1.
поездов вызванного светом потенциала действия в пирамидных нейронах CA1 в органотипических срезах. A , Прикрепленные к клеткам записи пирамидной клетки СА1, экспрессирующей ChR2. Показаны точки доступа (черные следы), генерируемые пятью последовательными последовательностями световых импульсов 100-10-5-1 мс (синяя кривая).На нижних панелях показаны световые импульсы с большим увеличением 100-10-5-1 мс соответственно. Освещение на 100 мс может вызвать до 11 AP, а световые импульсы длительностью всего 1 мс могут генерировать одиночные AP.
B , Параметры освещения, позволяющие точно генерировать одиночные AP в пирамидных ячейках CA1. Количество AP, генерируемых при разном времени освещения (100, 10, 5, 1 мс) с различной интенсивностью света (0,002 мВт, n = 44, N = 9; 0,1 мВт, n = 50, N = 10; 0.22 мВт, n = 50, N = 10; 0,71 мВт, n = 45, N = 9; 1 мВт, n = 50, N = 10). Оптимальная продолжительность и мощность стимула, дающего одиночные AP, были извлечены из графика [пунктирная красная линия; 5 мс (черные кружки) при 0,22 мВт или 10 мс (незакрашенный ромб)]. C , Прикрепленные к клеткам записи клеток CA1, показывающие AP, вызванные 10 последовательными последовательностями 5-10-20-25-50-100 Гц из пяти световых импульсов (черные линии, записи клеток; синие линии, световые импульсы).Нижние кривые показывают большее увеличение для каждой последовательности из пяти световых импульсов.
D , данные о популяции для эксперимента, описанного в C , показывающие процент AP из 50 возможных (черные треугольники; N = 9), вызванных с разной частотой световых поездов, и процент сверхмногочисленных AP (открытые ромбики; N = 9). График показывает, что AP не могут быть точно вызваны для частот выше 25 Гц ( n указывает номер события; N указывает количество экспериментов).
Визуализация кальция в астроцитах при использовании ChR2 для стимуляции нейронов
Отображение кальция в астроцитах облегчается тем фактом, что эфирные красители AM преимущественно загружаются в глиальные клетки in situ, (Kang et al., 1998) и in vivo, (Hirase et al., 2004). Индикаторные красители с синим спектром возбуждения и зеленым излучением, такие как Fluo-3 AM (Dani et al., 1992; Araque et al., 2002), Fluo-4 AM (Simard et al., 2003; Schipke et al., 2008). ), Calcium Green 1 (Fiacco and McCarthy, 2004) и Oregon Green – BAPTA-1 (Agulhon et al.
, 2010), обычно используются для определения уровня внутриклеточного кальция. Однако эти красители несовместимы с ChR2, потому что они имеют перекрывающиеся длины волн возбуждения. Доступны более длинноволновые индикаторы кальция, такие как краситель на основе родамина Rhod-2 с максимумами возбуждения и испускания флуоресценции при 552 нм и 581 нм соответственно. Этот краситель успешно использовался для измерения изменений кальция в астроцитах (Gordon et al., 2009; Gourine et al., 2010). Однако этот краситель не может быть оптимальным для наших исследований, поскольку он загружается в митохондрии (Hajnóczky et al., 1995) и используется для обнаружения изменений кальция в митохондриях астроцитов (Boitier et al., 1999). CaO — еще один доступный длинноволновый краситель (максимумы возбуждения и излучения при 549 и 576 нм, соответственно), который потенциально совместим с использованием ChR2 и ранее использовался для измерения уровня цитозольного кальция в глии мозолистого тела путем массовой загрузки формы AM ( Schipke et al.
, 2002) или ионофорезом в острых срезах (Duffy and MacVicar, 1995). Мы обнаружили, что AM форма CaO преимущественно загружается в астроциты органотипических срезов гиппокампа.Как показано на фиг. 3, A и B , глутамин синтетаза и GFAP-положительные астроциты были селективно нагружены AM-формой CaO. Окрашивание СаО было обильным по всему астроциту, включая клеточные процессы, что свидетельствует о цитоплазматической и ядерной локализации красителя. Важно отметить, что нейроны не включали CaO (рис. 3 A , B ). Эти результаты показывают, что CaO может быть успешно загружен в астроциты и потенциально полезен для выявления изменений кальция в астроцитах органотипических срезов.
Мониторинг спонтанных и вызванных возвышений астроцитов Ca 2+ с помощью Calcium Orange AM. A , Изображение, взятое из типичного органотипического объема среза гиппокампа, загруженного CaO. CaO (красный) совместно локализован с астроцитарным маркером глутаматсинтетазы (GS; зеленый)._b0b06b4d.jpg)
Тела нервных клеток пирамидного слоя СА1 не загружены СаО (звездочки). B , GFAP-положительные астроциты (зеленые) в радиатном слое также были загружены CaO (красный), тогда как GFAP-отрицательные клетки (звездочка) не были.Нижние изображения в A и B представляют собой более высокие увеличения пунктирных прямоугольников. C – E , Типичные кривые, показывающие изменения флуоресценции CaO, нанесенные на график во времени. CaO сообщил о спонтанных колебаниях Ca 2+ в астроцитах ( C ), Ca 2+ событиях, вызванных агонистом mGluR DHPG ( D , полоса показывает время применения DHPG; N = 3 ), а вызванный Ca 2+ увеличивается при прямой коллатеральной стимуляции Шеффера электродом ( E , стрелка указывает время электростимуляции; N = 3).Изображения в E показывают отдельные конфокальные плоскости астроцитов, загруженных CaO (серые).
Наложение псевдоцвета на нижнем изображении представляет увеличение флуоресценции CaO после стимуляции (красный). F , Репрезентативные следы интенсивностей CaO, наблюдаемые в соме четырех выбранных астроцитов (см. Пронумерованные клетки на левом изображении), прилегающих к апикальной дендритной проекции нейрона, экспрессирующего CA1 ChR2. Освещение с частотой 25 Гц в течение 1 с, направленное на тело нейронной клетки, вызывало повышение уровня Ca 2+ в различных астроцитах.Наблюдаемые изменения Ca 2+ были либо отдельными событиями (кривая 1), либо множественными событиями (кривая 2), происходящими после светового стимула и с различными временными задержками. Некоторые астроциты не ответили на стимуляцию нейронов (кривая 3) или показали сложные ответы (кривая 4). Псевдоцветное изображение в правом нижнем углу показывает единственную конфокальную плоскость загруженных СаО астроцитов (серый) и дендритов, экспрессирующих ChR2-Венеру (зеленый), через 2 секунды после нейрональной стимуляции.
Красный цвет показывает увеличение сигнала CaO после стимуляции. G , Репрезентативные следы интенсивностей CaO, наблюдаемые во время астроцитарного процесса. Повышение Ca 2+ обычно инициировалось на границе между астроцитарными процессами и нейронными дендритами (область 1 в рамке; кривая 1) и, как было обнаружено, распространялось вдоль отростков астроцитов (область 2 в рамке; кривая 2), достигая тела клетки (выделено рамкой). область 3; кривая 3). На графике указано время события, связанного с кальцием (красная стрелка) после стимула (пунктирная линия). На изображении показаны CaO (красный) и ChR2 – Венера (зеленый).Белыми стрелками выделены астроцитарные отростки. H , Показаны следы от трех репрезентативных астроцитов до трех последовательных стимулов (отправляемых каждые 2 минуты). Верхний график показывает пропущенное событие Ca 2+ после третьего стимула, средний график показывает соответствие между стимулами и ответами, а нижний график показывает пропущенное событие Ca 2+ для второго стимула.
Масштабные линейки: B , 50 мкм; F , 40 мкм; G , 20 мкм.
Затем мы подтвердили, что CaO может сообщать о событиях [Ca 2+ ] и в астроцитах в различных условиях. Известно, что астроциты испытывают спонтанные колебания [Ca 2+ ] i in situ , которые не зависят от активности нейронов (Fatatis and Russell, 1992; Parri et al., 2001; Nett et al., 2002). В астроцитах, нагруженных CaO, наблюдалось спонтанное увеличение интенсивности CaO (рис.3 C ), которое сохранялось даже в присутствии блокатора натриевых каналов TTX (данные не показаны) (Nett et al., 2002). Интенсивность флуоресценции СаО и частота событий в астроцитах радиального слоя также увеличивались при нанесении в ванну агониста метаботропных рецепторов глутамата (mGluR) DHPG (рис. 3 D ) (Bernstein et al., 1998; Zur Nieden and Deitmer, 2006) и индуцируется коллатеральной стимуляцией Schaeffer электродом (рис.
3 E ) (Perea and Araque, 2005a). Таким образом, CaO является полезным красителем для сообщения о спонтанных и вызванных изменениях кальция в цитозоле. Важно отметить, что CaO имеет длину волны возбуждения, совместимую с одновременным использованием ChR2 (рис.1 С ).
ChR2 в клетках CA1 вызывает [Ca
2+ ] i ответов в астроцитах Деполяризация одиночного пирамидного нейрона CA1 с помощью техники цельноклеточного патч-зажима, как сообщается, индуцирует [Ca 2+ ] i увеличение количества астроцитов в stratum radiatum (Navarrete and Araque, 2008). Мы продолжили это открытие, проверив, может ли стимуляция одиночных клеток CA1 с помощью ChR2 запускать повышение [Ca 2+ ] – в астроцитах радиального слоя.Тела отдельных клеток, экспрессирующих ChR2, освещали светом 445 нм через оптическое волокно, помещенное между поверхностью среза и объективом микроскопа, без физического нарушения среза.
Поле зрения для визуализации перемещалось вдоль апикального дендрита клеток CA1 в stratum radiatum, следуя флуоресценции ChR2-Венеры, как описано. Световые потоки, доставляемые с частотой 25 Гц в течение 1 с, вызывали увеличение [Ca 2+ ] и в астроцитах, прилегающих к апикальным дендритам (рис.3 F ). Изменения в [Ca 2+ ] и наблюдались либо как отдельные кальциевые события, либо как последовательность событий, происходящих после светового стимула с различными временными задержками, как описано ранее (Navarrete and Araque, 2008). Часть астроцитов не ответила, тогда как некоторые показали очень сложные ответы, особенно в тех случаях, когда клетка имела повышенную базальную спонтанную активность Ca 2+ (фиг. 3 F ). Вызванные возвышения [Ca 2+ ] и обычно инициировались в точке контакта между астроцитарным отростком и дендритом и, как было обнаружено, распространялись на сому (рис.3 G ) (Nett et al.
, 2002). Эти результаты демонстрируют, что астроциты вдоль апикальных дендритных проекций ChR2-экспрессирующих клеток CA1 показывают подъемы [Ca 2+ ] –, вызванные световой стимуляцией нейронов.
Неожиданно мы наблюдали, что многие астроциты, показывающие повышение [Ca 2+ ] и , вызванное первым из трех стимулов, показали переменную реакцию на следующие два стимула (рис. 3 H ). Возможность индуцированного светом утомления нейронов и неспособности вызвать последовательную деполяризацию нейронов была маловероятной, потому что AP успешно запускались при 25 Гц, когда последовательности повторялись в течение 10 последовательных испытаний (рис.2 С ). Это предполагало, что астроциты либо показали низкую вероятность ответа, либо проявили физиологическую адаптацию к последовательным нейрональным стимулам. Чтобы решить эту проблему, 10 последовательных нейронных стимулов давались с 2-минутными интервалами (рис. 4 A , B ), и для каждого стимула измеряли процент отвечающих астроцитов, а также процент клеток, показывающих изменения частоты колебаний.
Повышение кальция в астроцитах с амплитудой> 2 SD выше исходного уровня в течение 15-секундного временного окна после стимула считалось вызванным синхронизированным кальциевым ответом (рис.4 C , вверху) (подробные сведения об используемом временном окне см. В разделе «Материалы и методы») (Navarrete and Araque, 2008). Изменения частоты кальциевых колебаний измеряли путем сравнения частоты событий за 1 минуту до стимула и через 1 минуту после стимула (рис. 4 C , внизу). Интересно, что только 1,5 ± 1,0% астроцитов показали синхронизированные ответы, и только 2,7 ± 1,9% астроцитов повысили частоту своих колебаний до 8 из 10 нейронных стимулов ( N = 7, n = 124).Фактически, 0 из 124 астроцитов в семи экспериментах ответили на> 8 из 10 стимулов синхронными ответами или изменениями частоты колебаний (рис. 4 D , E ). Затем мы определили процент астроцитов, показывающих вызванное повышение кальция для каждого из 10 стимулов. В среднем каждый стимул вызывал синхронизированные ответы или колебательные изменения в 16–26 и 19–21% наблюдаемых астроцитов, соответственно (рис.
4 F , G ). Эти диапазоны оставались постоянными на протяжении всех 10 стимулов, причем 1-й и 10-й стимулы имели одинаковое количество отвечающих астроцитов (рис.4 H ). Это говорит о том, что астроциты имеют относительно низкую надежность ответа на нейрональные стимулы и не проявляют значительных адаптивных изменений к последовательным событиям деполяризации нейронов.
Stratum radiatum демонстрируют различные ответы на стимуляцию одиночными клетками CA1. A , Изображение, показывающее максимальную проекцию стопки Z ChR2-экспрессирующей клетки CA1 (зеленый; mCherry-f) и одноплоскостное изображение астроцитов, нагруженных CaO (красный), соответствующее полю, используемому для кальция изображения в этом эксперименте.Пронумерованы отдельные астроциты. B , Репрезентативные следы кальциевых событий в пронумерованных астроцитах в A . Десять последовательных стимулов (длительность 1 с, 25 Гц) отправлялись каждые 2 мин (пунктирная синяя линия).
C , Каждое кальциевое событие с амплитудой> 2 SD в течение 15-секундного временного окна после стимула считалось вызванным синхронизированным кальциевым событием. Подсчитывали количество вызванных синхронизированных ответов для каждого астроцита в поле зрения (верхний график; черные полосы).Повышение частоты событий, связанных с кальцием, также измеряли путем сравнения частоты событий за 1 минуту до и через 1 минуту после стимуляции. Количество вызванных повышений кальциевых колебаний подсчитывали для каждого астроцита (нижний график; белые столбцы). D , E , Астроциты были ранжированы по их чувствительности к 0–10 из 10 нейронных стимулов. Показаны вызванные синхронизированные ответы (черные полосы в D ; n = 124, N = 7) и вызванные увеличения кальциевых колебаний (белые полосы в E ).Для измерения фоновых событий, вызванных спонтанными кальциевыми событиями в астроцитах, те же измерения были выполнены при стимуляции клетки CA1, экспрессирующей eGFPf вместо ChR2 (серые столбцы в D и E ; n = 105, N = 7).
Считалось, что астроциты, показывающие> 2 из 10 вызванных синхронизированных ответов ( D ) или 3 из 10 вызванных повышений кальциевых колебаний ( E ), обладают значительными ответами, превышающими фон.Нечувствительные астроциты становятся более многочисленными после световой стимуляции eGFPf по сравнению с клетками ChR2. F , G , Подсчитывали количество отвечающих астроцитов на один стимул. Доля отвечающих астроцитов оставалась постоянной на протяжении 10 стимулов для измеренных синхронизированных ответов ( F ) или изменений частоты колебаний ( G ) (несущественно; ANOVA). H , Средняя доля отвечающей глии на 10 стимулов.Шкала 100 мкм.
Затем мы были заинтересованы в изучении того, как спонтанные события передачи сигналов кальция в астроцитах могли искажать наши измерения вызванных событий кальция.
Чтобы определить это, мы провели контрольные эксперименты, в которых мы измерили уровень фоновых кальциевых событий в астроцитах после лазерной стимуляции 445 нм. В этих экспериментах мы использовали SFV для управления экспрессией мембранно-направленного eGFP вместо ChR2. Мы обнаружили, что ~ 2 из 10 синхронизированных ответов и 3 из 10 изменений частоты колебаний, вероятно, были связаны со спонтанными кальциевыми событиями в астроцитах (рис.4 D , E ). Объединение процентного содержания клеток выше этих измеренных фоновых уровней показало, что 35,9 ± 3,7% всех астроцитов показали синхронизированные ответы (фиг. 5 A , процент клеток, показывающих> 2 из 10 синхронизированных ответов), а 28,7 ± 3,7% продемонстрировали колебательные изменения ( Рис. 5 ( B , процент ячеек, показывающих> 3 из 10 изменений частоты), теперь называемых респондентами. В этих диапазонах 6,9 ± 4,8 и 4,4 ± 2,8% синхронизированных ответов и колебательных изменений в астроцитах были связаны со случайным совпадением спонтанного повышения кальция с вызванными событиями (рис.
5 А , В ).
Вызванные кальциевые ответы астроцитов зависят от силы стимула и требуют распространения AP через нейрональные каналы Na + . A , Число астроцитов, показывающих> 2 из 10 вызванных синхронизированных ответов, было значительно больше, когда клетки CA1 экспрессировали ChR2 по сравнению с eGFPf (двусторонний, непарный тест t ). B , Количество астроцитов, показывающих> 3 из 10 вызванных повышений частоты колебаний кальция, было значительно больше, когда клетки CA1 экспрессировали ChR2 по сравнению с eGFPf (двусторонний, непарный тест t ). C , D , Доля отвечающих астроцитов была значительно ниже, когда время освещения клеток CA1 уменьшилось до 400 мс ( n = 109, N = 8) или когда частота освещения уменьшилась до 10 Гц ( n = 110, N = 7) как для синхронизированных откликов ( C ), так и для изменения частоты ( D ).
E , F , Блокирование AP с помощью ТТХ 1 мкм уменьшало количество отвечающих астроцитов до фоновых уровней ( n = 135, N = 8), когда изменения кальция отслеживались либо снаружи, либо внутри ( n = 109, N = 9) площадь пятна (см. Схему в G ).Никаких различий между обработкой ТТХ внутри и за пределами освещенной области не наблюдалось, что позволяет предположить, что прямая дендритная стимуляция не является ответственной за наблюдаемые отклики кальция (двусторонний, непарный тест t ). G , Схема стимулированных областей (область серого эллипса) по сравнению с наблюдаемыми областями (область в рамке), используемая для анализа в E и F . CTRL, Control.
Мы также определили влияние силы и продолжительности стимула на процент отвечающих астроцитов.Как сокращение длительности стимула (с 1 с до 400 мс), так и уменьшение частоты световой стимуляции (с 25 до 10 Гц) значительно уменьшили количество отвечающих (рис.
5 C , D ). Таким образом, более сильная стимуляция увеличивает надежность ответов астроцитов.
Чтобы исключить возможность того, что основной профиль кальциевых ответов астроцитов был уникальным для свойств органотипических срезов, мы провели дополнительные эксперименты на острых срезах гиппокампа.Мы загрузили астроциты CaO в острые срезы гиппокампа и закрепленные патчем пирамидные нейроны CA1. Затем мы подвергали клетки CA1 последовательности импульсов деполяризующего напряжения (клетки деполяризовались от -70 до +40 мВ в течение 10 мс с частотой 25 Гц в течение 1 с) для генерации потенциалов действия (рис. 6 A ) с эквивалентной скоростью. к тем, которые индуцируются ChR2 в органотипических срезах (рис. 4). Мы обнаружили, что астроциты в острых срезах ведут себя так же, как астроциты в срезах органотипа. Деполяризация нейронов индуцировала синхронизированное увеличение кальция в некоторых астроцитах, расположенных вблизи апикальных дендритов CA1 (рис.
6 А ). Важно отметить, что астроциты показали переменную реакцию на последовательности стимулов и следовали распределению, которое было аналогично астроцитам в органотипических срезах (рис. 6 B ). В среднем, как наблюдалось с ChR2 в органотипических срезах, низкая доля астроцитов ответила на один стимул (22,4 ± 3,1% в острых срезах против 21,3 ± 1,1% в органотипических срезах) (рис. 6 C ). Во время 10 последовательных нейрональных стимулов очень мало астроцитов ответили на 80% стимула в обоих случаях острого (2.7 ± 1,4%) и органотипических (1,5 ± 1,0%) срезов. Эта пропорция оставалась довольно постоянной при повторных стимулах (рис. 6 D ). Мы обнаружили среднее снижение реакции астроцитов на стимулы с 8 по 10 в острых срезах. Однако это снижение не было значительным (ANOVA, p > 0,05). Таким образом, основной профиль кальциевых ответов астроцитов сходен в органотипических и острых срезах после методов стимуляции каналом родопсина-2 и патч-кламп, соответственно.
Сравнение вызванных кальциевых ответов в астроцитах из органотипических и острых срезов гиппокампа. A , Репрезентативная кривая (верхняя кривая) изменения интенсивности CaO в астроците из острого среза. График показывает синхронизированное повышение кальция в астроцитах в двух из трех событий деполяризации нейронов, вызванных методиками фиксации целых клеток (красные стрелки). Нижняя кривая показывает последовательность деполяризующих импульсов 25 Гц, генерируемых в патч-зажиме. На вставке изображена кривая с большим увеличением (красная пунктирная рамка), показывающая появление AP во время 10-миллисекундного импульса +40 мВ.Изображение справа показывает загруженные CaO астроциты (красные) вокруг пирамидного нейрона CA1, заполненного Alexa Fluor-488 (зеленый) через пипетку с патч-зажимом. B , Астроциты были ранжированы по их чувствительности к 0–10 из 10 последовательных нейронных стимулов. Цельноклеточные реакции, вызванные патч-зажимом, в острых срезах (красные столбцы; N = 9) сравнивали с вызванными ChR2 синхронизированными ответами в органотипических срезах (черные столбцы; N = 16).
C , Средняя доля отвечающих астроцитов на 10 стимулов в органотипических срезах (черная полоса) по сравнению с острыми срезами (красная полоса). D . Доля отвечающих астроцитов оставалась постоянной на протяжении семи стимулов и демонстрировала небольшое ослабление от стимулов с 8 до 10 (несущественно; ANOVA).
Свойства вызванных кальциевых событий в астроцитах
Установив, что вызванная активность, опосредованная ChR2, регулирует кальциевые события астроцитов, мы затем протестировали события, которые приводят к кальциевым ответам астроцитов. Мы обнаружили, что снижение нейронной активности с помощью блокатора каналов Na + TTX значительно снижает количество респондеров до фоновых уровней (рис.5 E , F , TTX снаружи). Этот результат вряд ли можно отнести к прямым эффектам TTX на ChR2, потому что канал функционирует в присутствии этого ингибитора (Zhang and Oertner, 2007). Затем мы проверили, связаны ли наблюдаемые кальциевые события с прямой активацией ChR2 (например, с локальной деполяризацией нейронов) или же вовлечено распространение потенциала действия.
Хотя прямое освещение было маловероятным, поскольку область светового пятна находилась на расстоянии не менее половины поля зрения (75 мкм) от области изображения (рис.5 G , слева), мы не обнаружили значительного увеличения количества кальциевых событий (рис. 5 E , F , TTX внутри) при мониторинге астроцитов в освещенной области (рис. 5 G , справа). Эти данные предполагают, что стимуляция ChR2 в нейронах не активирует напрямую локальные астроциты; скорее, функциональные нейрональные каналы Na + необходимы для вызванных кальциевых событий на астроцитах.
Интересно, что потенциалы обратного распространения (BP AP) в клетках CA1 снижаются под действием ТТХ (Jaffe et al., 1992; Стюарт и Сакманн, 1994; Spruston et al., 1995) и могут вызывать кальциевые ответы в астроцитах через эндоканнабиноидный путь (Navarrete and Araque, 2008). Мы изучили возможность того, что АП БП и активация эндоканнабиноидных рецепторов необходимы для кальциевых ответов астроцитов в нашей системе.
Однако нанесение ванны антагониста каннабиноидного рецептора типа 1 (CB 1 ) AM251 не уменьшало процент отвечающих клеток (фиг. 7 A , B ).Напротив, ингибирование mGluR класса I, mGluR1 и mGluR5 с помощью LY367385 и MPEP, соответственно, значительно уменьшило количество синхронизированных респондеров без значительного воздействия на респондеров, испытывающих увеличение частоты событий, связанных с кальцием. Блокирование транспортеров глутамата с помощью 100 нм TFB-TBOA (Bozzo and Chatton, 2010) не привело к значительному изменению процента респондеров (фиг. 7 A , B ). Однако в четырех из девяти экспериментов вызванное повышение кальция во всей популяции астроцитов наблюдалось после применения TFB – TBOA (рис.7 C ), что предполагает некоторые эффекты повышения внеклеточного уровня глутамата. Эти результаты показывают, что ТТХ-чувствительные каналы Na + и передача сигналов глутамата через mGluR1 / 5 важны для регулирования надежности кальциевых ответов астроцитов.
Свойства вызванных кальциевых событий в астроцитах. A , Применение в ванне антагониста рецептора CB 1 AM251 (2 мкм) не изменяло количество астроцитов, показывающих вызванные синхронизированные ответы ( n = 136, N = 8).Ингибирование астроцитарных метаботропных рецепторов глутамата mGluR5 и mGluR1 с помощью MPEP (50 мкм) и LY367385 (LY; 100 мкм), соответственно, значительно снижает чувствительность астроцитов ( n = 111, N = 8). Ингибирование глиального транспортера глутамата с помощью TFB-TBOA (100 нм) не привело к значительному изменению доли отвечающих астроцитов ( n = 126, N = 7). И 12-часовая обработка срезов с помощью VAMP / синаптобревинового токсина TeNT (100 нг / мл, n = 135, N = 9) и блокирование щелевых соединений и полуканалов CBX (20 мкм, n = 135, N = 7) не влияли на вызванные кальциевые ответы.Однако при применении с CBX антагонист пуринергических рецепторов P2Y 1-2 сурамин (100 мкм, n = 110, N = 7) блокировал ответы астроцитов.
Блокатор паннексина-1 пробенецид (1 мМ, n = 119, N = 8) также сильно ингибировал вызванное повышение кальция. B , Фармакологические соединения, используемые в A , имели менее выраженные эффекты на вызванное повышение частоты кальция. CTRL в A и B относится к стимуляции ChR2 при 25 Гц в течение 1 с в отсутствие ингибиторов. C , Репрезентативные следы (20 наложенных) вызванных ответов при нанесении ванны TFB – TBOA. Во время некоторых стимулов TFB-TBOA вызывал высоко синхронизированный кальциевый ответ астроцитов в популяции астроцитов. Стрелки показывают время возбуждения нейронов. D , Наложенный средний след вызванных событий, зарегистрированных в CA1 при стимуляции коллатералей Шеффера у нелеченных (черная линия; n = 120 событий, N = 6) и обработанных TeNT (серая линия; n = 140, N = 7) срезов культур.
Гистограмма показывает средние значения пиковой максимальной амплитуды контрольных (черная полоса) и обработанных TeNT (серая полоса) срезов ( p <0,0001, критерий Стьюдента t ). E , Реакция астроцитов, когда окно обнаружения кальциевых событий было уменьшено до 5 с. Показаны синхронизированный ответ, вызванный ChR2 (черные столбцы; n = 124, N = 7) и контроли eGFPf (серые столбцы; n = 105, N = 7). F , Астроциты, показывающие> 1 из 10 вызванных синхронизированных ответов (вместо 2 с окном обнаружения 15 с), имели значимые ответы выше фона. G , Использование временных окон 5 и 15 с дает одинаковое количество вызванных ответов астроцитов.
Астроциты могут общаться друг с другом на большие расстояния, распространяя межклеточные ответы [Ca 2+ ] i через волны Ca 2+ (Cornell-Bell et al., 1990). Волны распространяются со скоростью 15–27 мкм / с и могут привлекать сотни клеток в радиусе 200–350 мкм (Kang and Othmer, 2009).
Было показано, что волны Ca 2+ встречаются в органотипических культурах гиппокампа (Dani et al., 1992) и in vivo (Hirase et al., 2004; Nimmerjahn et al., 2009). И АТФ, и щелевые соединения вносят вклад в глиальные кальциевые волны в изолированных тканях ЦНС (Dani et al., 1992; Newman, 2001; Charles and Giaume, 2002; Haas et al., 2006). Чтобы исследовать, может ли сцепление астроцитов вносить вклад в процент отвечающих астроцитов, мы применили блокатор щелевых соединений CBX. Поскольку CBX оказывает ингибирующее действие на потенциалы действия при концентрациях выше 50 мкМ (Zsiros and Maccaferri, 2005; Tovar et al., 2009), мы выбрали концентрацию 20 мкм, которая успешно использовалась другими для блокирования щелевых соединений в органотипических срезах (Hanstein et al., 2009). Однако блокирование щелевых контактов не повлияло на надежность событий астроцитов. Это предполагает, что прямое связывание астроцитов не является критическим для вызванных глиальных кальциевых ответов, которые мы наблюдали (Рис.
7 A , B ). Однако мы обнаружили, что одновременное ингибирование пуринергических рецепторов (для блокирования возможной АТФ-опосредованной связи между астроцитами) и щелевых соединений сильно блокирует глиальные кальциевые ответы (рис.7 A , B ). Чтобы дополнительно оценить вклад межастроцитарных ассоциаций в опосредование вызванных ответов, мы выполнили дополнительный анализ, в котором мы сократили временное окно для обнаружения глиальных кальциевых событий (с 15 до 5 с) (подробности см. В разделе «Материалы и методы»). Однако мы обнаружили, что доля отвечающих астроцитов и их близость к дендритам не зависели от выбранного временного окна (Рис. 7 E – G ). Это указывает на то, что ассоциации между астроцитами не участвуют в управлении наблюдаемым паттерном вызванной реакции.Это также предполагает, что передача сигналов АТФ может регулировать глиальный кальциевый ответ независимо от его роли в распространении кальциевых волн.
Картирование ответов астроцитов на нейрональную стимуляцию
Наши предыдущие результаты показывают, что в среднем отдельные астроциты в stratum radiatum демонстрируют низкую способность отвечать на повторную стимуляцию клеток CA1 (1,5 ± 1,0% астроцитов ответили на 8 из 10 стимулов синхронным увеличением кальция).
Напротив, надежность ответа всей окружающей популяции астроцитов клетки CA1 была действительно высокой со 100% вероятностью, что по крайней мере один астроцит ответит [~ 20% астроцитов отвечают на каждый из 10 стимулов (рис.4 F , G )]. Это говорит о том, что астроциты организуются в функциональные домены и демонстрируют совместные ответы на активацию одной клетки. Чтобы исследовать, проявляют ли астроциты в гиппокампе какую-либо форму структурной организации вокруг клеток CA1, мы картировали положение отвечающих астроцитов вдоль апикальной дендритной проекции клеток CA1. Стереотипное апикальное дендритное дерево CA1 состоит из первичного дендрита, который разветвляется в stratum radiatum и дает начало вторичным дендритам.Вторичные дендриты также разветвляются на третичные дендриты перед образованием дендритного пучка (Spruston, 2008). Дополнительные небольшие ветви (теперь называемые косыми) также исходят от первичных, вторичных и третичных дендритов (Spruston, 2008).
Чтобы определить, влияет ли положение астроцита относительно стимулированного нейрона на его способность реагировать на вызванную активность в этом нейроне, мы измерили синхронизированные кальциевые ответы астроцитов в основных дендритных подобластях. Мы проанализировали долю респондеров в первичной, вторичной и третичной подобластях дендритного дерева.Мы обнаружили, что первичная дендритная область клеток CA1 поддерживает самую высокую долю респондеров (рис. 8 A ) (53,3 ± 8,9%, N = 9). Доля респондентов была меньше во вторичной и значительно снизилась в третичных субрегионах (13,8 ± 3,7%, N = 6). Таким образом, астроциты в первичной дендритной подобласти показали наибольшую вероятность ответа. В соответствии с этим, большинство респондеров были вертикально ближе к соме клетки CA1 (рис.8 В ). Более того, усредненная максимальная чувствительность астроцитов в первичной подобласти была значительно выше, чем в третичной подобласти (Рис. 8 C ).
Респондеры не были значительно ближе к дендритам (первичным, вторичным, третичным или наклонным), чем не отвечающие (рис. 8 D ), что указывает на относительно однородное радиальное распределение респондеров в области, покрытой апикальными дендритами. Интересно, что респонденты в среднем находились значительно дальше от основного дендрита (первичного, вторичного или третичного), чем от ближайшего косого дендрита (рис.8 E ). Регулировка временного окна для обнаружения событий астроцитов от 15 до 5 с показала тот же результат (рис. 8 F ), предполагая, что взаимодействия между астроцитами не способствовали организации ответов. Из этих коллективных результатов видно, что существует «вертикальный» градиент ответа вызванного увеличения кальция в астроцитах с высокой реактивностью около сомы, которая постепенно снижается во вторичные и третичные дендритные субрегионы. Этот градиент отклика ограничен средним радиальным расстоянием 18.9 ± 1,6 мкм от дендритной ветви.
Эти данные показывают среднюю зону активации астроцитов, окружающих одиночную клетку CA1 (Рис. 8 G ).
Картирование местоположения кальциевых ответов астроцитов. A , Доля респондеров (астроцитов, испытывающих> 2 из 10 синхронизированных возвышений Ca 2+ , вызванных фотостимуляцией ChR2) была рассчитана для трех субрегионов апикальных дендритов, представленных в G (средние значения: первичный, 53.3 ± 8,9%, N = 9; вторичный, 33,4 ± 8,7%, N = 8; и третичное, 13,8 ± 3,7%, N = 7). Средние значения для первичных и третичных дендритных областей значительно различались ( p = 0,0077, ANOVA с сравнением Даннета с первичной дендритной областью). B . Вертикальное расстояние до клеточной сомы определяли для каждого астроцита вдоль апикальных дендритов клеток CA1. Расстояния были нанесены для каждого астроцита в зависимости от количества синхронизированных ответов (0, 260.
8 ± 10,6 мкм, n = 137; 1, 239,1 ± 12,4 мкм, n = 93; 2, 203,3 ± 14,7 мкм, n = 76; 3, 166,3 ± 15,7 мкм, n = 46; 4, 152,2 ± 19,0 мкм, n = 35; 5, 161,0 ± 17,6 мкм, n = 23; 6, 136,8 ± 20,6 мкм, n = 18; 7, 157,5 ± 26,3 мкм, n = 12; 8, 138,3 ± 11,1 мкм, n = 19; 9, 185,7 ± 62,0 мкм, n = 3). Средние значения значительно различались ( p <0,0001, ANOVA с сравнением Даннета с первым столбцом показаны на графике), что указывает на то, что респондеры ближе к нейронной соме. C , Астроциты в первичной подобласти показали наибольшую максимальную реакцию по сравнению с другими подобластями (средние значения: первичная, 72,9 ± 4,7%, N = 7; вторичная, 52,9 ± 9,2%, N = 7; третичный — 41,7 ± 6,5%, N = 6) ( p = 0,021, дисперсионный анализ со сравнением Даннета). D , Расстояние от астроцита до дендрита не определяло уровень ответа ( p = n.
s.). E , Респондеры в среднем находятся дальше от основных дендритов, чем от любого другого дендрита (двусторонний тест Манна – Уитни). F , Расстояние от астроцитов до дендритов (любых или основных дендритов) существенно не отличается (двусторонний критерий Манна – Уитни), когда окно обнаружения сокращается с 15 до 5 с. G , Двумерная схема, иллюстрирующая расположение респондеров вдоль апикальных дендритов клеток CA1.
Одна из сложностей в интерпретации исследования картирования заключается в том, что реорганизация связности аксонов (таких как коллатерали аксонов CA1) в органотипических срезах может способствовать формированию паттернированного глиального ответа (Aniksztejn et al., 2001). Чтобы выяснить, является ли нейромедиатор, высвобождаемый из аксонов ChR2-инфицированных нейронов, ответственным за передачу сигналов глиального кальция после стимуляции, мы провели эксперименты на срезах, предварительно обработанных TeNT (16-24 ч), который эффективно блокирует синаптическую передачу путем расщепления мембранного белка, ассоциированного с везикулами (VAMP ) / синаптобревин (Schiavo et al.
, 1992; Capogna et al., 1997; Verderio et al., 1999). Мы проверили эффективность этого токсина путем измерения вызванных потенциалов в клетках CA1 органотипических срезов, инкубированных с и без TeNT.TeNT значительно снизил амплитуду вызванных событий (рис.7 D ) (-68,7 ± 3,6 пА, N = 7, n = 140 против -23,3 ± 2,6 пА, N = 6, n = 120; p <0,0001, непарный t тест). Несмотря на значительный эффект на высвобождение везикул и нейротрансмиссию, TeNT не уменьшал ChR2-опосредованные вызванные глиальные кальциевые события (фиг. 7 A , B ). Эти результаты подтверждают, что реорганизация аксональных окончаний в пределах радиального слоя органотипических срезов не вносит значительного вклада в паттерн-глиальный ответ.
Поскольку ответы астроцитов не модулируются ингибированием везикулярного высвобождения с помощью TeNT (рис. 7 A , B ), мы исследовали другие пути, которые могут приводить к увеличению внеклеточной передачи сигналов АТФ и глутамата в ответ на нейронную активность.
Среди этих путей постулируется высвобождение АТФ и, возможно, глутамата через нейрональные полуканалы паннексина (Thompson and Macvicar, 2008). Действительно, высвобождение АТФ через паннексин-1 было продемонстрировано в ненейрональных клетках (Bao et al., 2004; Locovei et al., 2006; Хуанг и др., 2007). Интересно, что мы обнаружили, что применение пробенецида, блокатора паннексина, но не полуканалов коннексина (Silverman et al., 2008; Silverman et al., 2009), значительно снижает долю отвечающих астроцитов, а также снижает частоту событий, связанных с кальцием (рис. 7 ). А , В ). Поскольку паннексин-1 обогащен дендритами клеток CA1 (Ray et al., 2005; Zoidl et al., 2007), это открытие повышает вероятность того, что паннексины позволяют нейронам способствовать повышению уровня кальция в близлежащих астроцитах посредством невезикулярного высвобождения. молекул, таких как АТФ и глутамат.
Обсуждение
Транзитенты внутриклеточного кальция — одно из самых удивительных свойств астроцитов.
Они возникают спонтанно и в ответ на стимуляцию нейронов как in vitro, , так и in vivo и участвуют в нескольких физиологических функциях как нейронов, так и глиальных клеток (Perea and Araque, 2005b). Недавние исследования показали, что кальциевая передача сигналов астроцитов регулирует синаптическую передачу и пластичность в различных областях ЦНС (Serrano et al., 2006; Jourdain et al., 2007; Гордон и др., 2009; Henneberger et al., 2010), и считается, что передача сигналов между нейронами и астроцитами вносит вклад в обработку информации более высокого порядка в головном мозге (Schipke et al., 2008; Fellin, 2009).
Здесь мы раскрыли несколько важных аспектов кальциевых событий астроцитов в гиппокампе. Сначала мы создали систему доставки вирусных генов, чтобы избирательно управлять экспрессией ChR2 в одиночных пирамидных нейронах CA1, и продемонстрировали, что световые импульсы могут эффективно контролировать их пиковый характер в гиппокампе, что согласуется с другими сообщениями (Schoenenberger et al.
, 2008). Мы также определили минимальные требования для световой активации ChR2 в органотипических срезах и максимальный выход клеток CA1 в нашей системе. Это было критически важно, потому что мы наблюдали, что астроциты демонстрируют переменный ответ на стимуляцию одиночными клетками CA1. Мы обнаружили, что отдельные астроциты в среднем имели относительно низкую точность при ответе на последовательные стимулы. Напротив, популяции астроцитов обладают высокой надежностью. Чтобы понять, как реагирующие астроциты были функционально организованы, мы исследовали ответы вдоль дендритного дерева отдельных клеток CA1 и обнаружили, что клетки в первичной дендритной области и расположенные ближе всего к соме имели наиболее устойчивые ответы.Наши результаты дополнительно раскрывают сложность зависимой от активности нейрон-глиальной коммуникации и обеспечивают новое понимание организации астроцит-нейронных сетей в головном мозге.
Мы обнаружили, что кальциевые события в астроцитах зависели от силы стимула и требовались mGluR класса I и ТТХ-чувствительные натриевые каналы.
Уменьшение количества отвечающих клеток после ингибирования mGluR1 / 5 согласуется с важностью mGluR в опосредовании кальциевых событий астроцитов в ответ на глутамат (Schools and Kimelberg, 1999; Fiacco and McCarthy, 2004; Zur Nieden and Deitmer, 2006; D’Ascenzo et al., 2007). Известно, что дендриты выделяют нейротрансмиттеры (Rall and Shepherd, 1968) и некоторые другие соединения (Waters et al., 2005). В пирамидных нейронах как эндоканнабиноиды (Sjöström et al., 2003), так и глутамат (Zilberter, 2000) являются потенциальными передатчиками обратной связи, высвобождаемыми дендритами. Механизмы, лежащие в основе высвобождения этих факторов из нейронов, еще предстоит полностью понять, но они могут быть связаны с BP APs в дендритах (Kreitzer and Regehr, 2002). Астроцитарные отростки пересекаются с дендритными ветвями и хорошо подходят для обнаружения AP BP в дендритах.Фактически, мы наблюдали, что передача сигналов кальция астроцитам обычно инициируется в точках контакта между астроцитами и дендритами (Рис.
3 G ). В соответствии с ролью AP BP в ответах астроцитов на кальций, мы обнаружили, что ChR2-опосредованные ответы астроцитов эффективно блокируются TTX (рис. 5 E , F ), который, как известно, блокирует AP BP в апикальных дендритах Пирамидные клетки CA1 (Jaffe et al., 1992). Важно отметить, что только несколько очень дистальных астроцитов (на расстоянии до 487 мкм от сомы пирамидных клеток вдоль апикального дендритного дерева) показали вызванные кальциевые события, тогда как астроциты, расположенные ближе к соме, были более чувствительными.Этот проксимально-дистальный градиент кальциевых ответов астроцитов на стимуляцию нейронов может быть связан со сниженной эффективностью APs BP по вторжению в дистальные дендриты (Callaway and Ross, 1995; Spruston et al., 1995). Дополнительная работа необходима, чтобы определить, как BP AP могут управлять паттернами глиальных ответов.
Недавняя работа Navarette и Araque (2008, 2010) показала, что деполяризация нейронов CA1 вызывает локальную передачу сигналов кальция в астроцитах, расположенных вблизи апикальных дендритов.
Это было опосредовано высвобождением эндоканнабиноидов нейронами и активацией рецепторов CB 1 на астроцитах.Активация рецептора CB 1 , в свою очередь, способствовала высвобождению глутамата из астроцитов и стимуляции нейрональных рецепторов NMDA и пресинаптических mGluR. Тот факт, что рецепторы CB 1 не требуются для ответов астроцитов в нашей системе, можно объяснить режимом и уровнем нейрональной стимуляции. Возможно, более низкие уровни нейрональной стимуляции приводят к кальциевым событиям в астроцитах, которые не зависят от рецептора CB 1 , тогда как сильная и устойчивая деполяризация нейронов посредством патч-зажима способствует высвобождению эндоканнабиноидов.Дополнительные исследования с использованием новых вариантов ChR2, которые показывают меньшую инактивацию в ответ на постоянный свет (Lin et al., 2009), могут быть полезны для оценки эффектов более сильной нейрональной стимуляции в запуске кальциевых ответов астроцитов.
Дендриты пирамидных нейронов неокортекса (Zilberter, 2000) и клетки Пуркинье мозжечка (Levenes et al.
, 2001), как полагают, выделяют глутамат, и это может служить для активации близлежащих астроцитов. Здесь мы идентифицировали глутамат, а также АТФ, как часть механизма, вызывающего кальциевые события в астроцитах.Одним из белков-кандидатов, который может регулировать их высвобождение из дендритов, является паннексин-1. В самом деле, опосредованный паннексином отток АТФ был описан для эритроцитов и вкусовых клеток (Locovei et al., 2006; Huang et al., 2007). Интересно, что в пирамидных клетках гиппокампа паннексин-1 экспрессируется с постсинаптической плотностью (Ray et al., 2005; Zoidl et al., 2007), в которой он может служить каналом для переноса молекул, таких как АТФ и, возможно, глутамат ( Томпсон и Маквикар, 2008 г.). В соответствии с ролью паннексинов в передаче сигналов, которые модулируют кальциевые ответы астроцитов, применение пробенецида, ингибитора паннексина (Silverman et al., 2008) снизили как процент отвечающих астроцитов, так и частоту их кальциевых событий. Удивительно, но обработка срезов карбеноксолоном (который также блокирует паннексин-1) (Locovei et al.
, 2007) не снижает глиальных кальциевых ответов. Однако, поскольку известно, что карбеноксолон ингибирует AP в зависимости от дозы (Tovar et al., 2009), мы использовали низкую концентрацию CBX (20 мкм), чтобы повысить специфичность препарата в отношении ингибирования щелевых контактов (Hanstein et al., др., 2009). Такая концентрация CBX в органотипических срезах может оказаться неэффективной для блокирования паннексина-1, поскольку использовались более высокие концентрации (Locovei et al., 2007). Эксперименты, направленные на избирательное снижение экспрессии паннексина-1 в нейронах CA1, будут полезны для исследования роли паннексина-1 в стимуляции кальциевых событий в соседних астроцитах посредством зависимого от активности высвобождения АТФ и / или глутамата из дендритов.
В настоящее время в этой области ведутся серьезные дебаты относительно важности передачи сигналов кальция астроцитами в регуляции синаптических свойств. Несколько групп обнаружили, что кальциевые сигналы астроцитов и высвобождение глиотрансмиттеров, таких как глутамат, АТФ и d-серин, служат для активации нейрональных рецепторов и изменения свойств синаптической передачи по различным путям.
Это имеет важное значение как для базальной синаптической передачи (Angulo et al., 2004; Pascual et al., 2005; Perea and Araque, 2007; Gordon et al., 2009), так и для долгосрочной пластичности (Yang et al., 2003; Panatier et al., 2006; Henneberger et al., 2010). Однако некоторые недавние исследования показывают, что кальциевые события в астроцитах не вызывают изменений в базальной передаче или пластичности (Fiacco et al., 2007; Petravicz et al., 2008; Agulhon et al., 2010). В этих исследованиях кальциевые события в астроцитах не влияли ни на какие параметры синаптической передачи.Причины этих несоответствий неясны, но могут быть связаны со сложной природой коммуникации нейрон-астроцит. Наши результаты показывают, что активность отдельного нейрона может влиять на кальциевые свойства сложной сети астроцитов. Примечательно, что способность отдельного астроцита проявлять повторяющиеся ответы на последовательную стимуляцию нейронов довольно низка (1–3% астроцитов реагируют максимум на 8 из 10 последовательных стимулов).
Однако, если принять во внимание всю окружающую популяцию астроцитов клетки CA1, ответ будет точным.Интересно, что ингибирование щелевых контактов и изменение временного окна для обнаружения кальциевых событий показало, что взаимодействие между астроцитами вряд ли объясняет сложный паттерн наблюдаемых глиальных ответов. Однако расположение астроцита играет важную роль в определении надежности ответа астроцита. Влияние этих переменных (низкая надежность отдельных астроцитов и местоположения астроцитов) важно и должно учитываться при интерпретации событий передачи сигналов кальция астроцитами, вызванных нейронами.
Представленные здесь результаты продвигают наше понимание пространственных и функциональных отношений между нейронами и глией в головном мозге. Кроме того, они указывают на то, что кальциевые ответы астроцитов можно модулировать с помощью различных механизмов. Это исследование подчеркивает сложную природу нейрон-глиальных взаимодействий, которые способствуют обработке информации в головном мозге.
Топ-10 лучших лазерных уровней 2021 года
Можно ли представить строительный бизнес без качественного лазерного уровня? Как насчет ремонтного мастера, который все еще зависит от невысокого уровня, чтобы исследовать свои проекты? Невообразимое 21 -й век.
Таким образом, купить лучший лазерный нивелир не составит труда. Но какой из них вы выберете? Лазерный уровень с перекрестными линиями — лучший вариант? А как насчет точности и долговечности? В голове могут возникать всевозможные вопросы.
Laser Level Hub призван ответить на эти вопросы. В этой статье мы поможем вам найти лучший лазерный уровень по деньгам и вашим требованиям.
Лучшие выборы для лучших лазерных уровней:Полное руководство по лучшему лазерному линейному уровню
Мы выбрали эти 10 моделей, которые являются лучшими для строителей и ремонтников.Итак, вперед и сделайте свой выбор.
Если вы заинтересованы в покупке других типов, ознакомьтесь с нашими руководствами по точечным лазерам или обзорами ротационных лазерных уровней.
Вот 10 лучших лазерных уровней в 2021 году:
# 1 — Leica Lino ML180 Laser Level для профессионалов
Лучший профессиональный многолинейный лазерный уровень: Leica Lino ML180
Pros- Самый точный лазерный нивелир на рынке
- Лазерный приемник XCR Catch и пульт дистанционного управления для удобного мониторинга и использования
- Возможность работы с двумя батареями, время автономной работы до 10 часов
- Самонивелирующийся для маркировки на больших расстояниях
Leica, известная своими отличными цифровые фотоаппараты, также производит одни из лучших инженерных инструментов, о чем свидетельствует этот мощный лазерный уровень премиум-класса с перекрестной линией 90 градусов.
Возможно, самым большим преимуществом Leica Lino ML180 является лазерный приемник XCR Catch, который дополняет этот красный лазерный уровень класса II.
Это мечта инженера-одиночки, который любит (или вынужден) работать в одиночестве, потому что вы можете настроить лазер с помощью пульта дистанционного управления, управляя приемником. Лазерный приемник издает звуковой сигнал, когда вы находитесь прямо или рядом с лазерной линией, что упрощает нанесение маркировки.
Наряду с дистанционной регулировкой, электронным самовыравниванием, точкой отвеса и возможностью использовать как аккумуляторные, так и щелочные батареи, мы ставим его на первое место в этом списке лучших лазерных уровней для профессионалов.
Примечание. В этот комплект входят бесплатные красные очки и лазерная пластина, поэтому нет необходимости тратить дополнительные средства на аксессуары.
Полезные советы
В комплект поставки входит никель-металлогидридная аккумуляторная батарея (Ni-MH). Вы можете носить с собой пару щелочных батареек AA, чтобы работа не прекращалась. Пользователи также сообщили об использовании литий-ионных аккумуляторов для повышения производительности и эффективности.
Лазерные нивелиры Leica известны своей высокой точностью и долгим сроком эксплуатации — двумя факторами, которые абсолютно необходимы в современной инженерной мысли, которая стремится к совершенству.Получите это сегодня.
# 2 — Многолинейный лазерный уровень Leica Lino L4P1
Лучший внутренний лазерный уровень на рынке: Leica Lino L4P1
Плюсы- Создает в общей сложности пять точек разметки для легкого выравнивания
- Вариант с двумя батареями; остается до 24 часов
- Простота настройки и эксплуатации
- Эта модель немного тяжелая, что делает ее менее портативной
Еще одна модель Leica Geosystems в этом списке, это 180-градусный мульти -линейный лазерный уровень, который не обещает ничего, кроме удовольствия от работы.
Будь то строительство стальных стоек, внутренняя отделка или простая задача, например, установка книжных полок для вашей личной библиотеки в гостиной, Lino L4P1 выполнит свою работу.
Обладая высокой точностью, как обещают все помощники по компоновке Leica, этот высококачественный лазерный нивелир поставляется с значительно упрощенным руководством по эксплуатации, что облегчает его использование и для новичков.
Это незаменимый элемент для работ, требующих как линейных, так и точечных лазерных лучей, и где требуется разметка от стены до стены или от потолка до потолка.Широкий ассортимент и простая настройка (что здесь является важным моментом) делают этот красный лазерный уровень идеальным выбором для профессионалов.
Работает от литий-ионного аккумулятора, одного заряда которого хватает на 24 часа. Чего еще вы желаете от продвинутого лазерного уровня?
Вердикт
Бренда Leica, а также простоты использования и точной разметки на многолинейных осях достаточно, чтобы показать, почему Leica LINO L4P1 является фаворитом публики.
# 3 — Bosch GLL3-330CG 360-градусный трехплоскостной линейный лазерный уровень с зеленым лучом
Лучший 360-градусный лазерный уровень: Bosch GLL3-330CG
Плюсы- Технология двойного питания (литий-ионная батарея + батарея AA поддержка) с индикатором уровня заряда батареи
- Импульсный режим
- Уровень можно закрепить на лестнице (когда штатив недоступен)
Best Feature
- Возможность подключения по Bluetooth позволяет управлять лазерным уровнем из другой комнаты (до 10 футов)
Этот лазерный нивелир Bosch 360 для домашнего мастера — умный, надежный и всемогущий.Обладая некоторыми из величайших современных функций, он действительно помог немецкому бренду 19 -го -го века остаться на рынке.
Мы говорим о встроенной поддержке Bluetooth, когда пользователи могут использовать свой смартфон для управления уровнем, не находясь в одной комнате. Как это круто?
И добавьте к этому функцию, где вы можете видеть уровень заряда батареи в реальном времени, что поможет вам быть готовым в случае нехватки электроэнергии.
Технология двойного питания также является приятной особенностью, которую мы никогда не видели ни в одном другом лазерном уровне.Так что даже если там, где вы работаете, нет розетки, скажем, на стройке посреди пустыни или леса, вы можете обойтись батареями AA.
Вы можете закрепить этот инструмент на лестнице, использовать его в импульсном режиме — все это делает его мощным станком, который помогает выполнять разовую настройку.
Вы любитель, который в свободное время занимается ремонтом? Ищете лазерный уровень для строительства настилов? Может, закончить эту незавершенную столярную работу? Тогда это будет лучшим вложением, которое вы сделаете за весь год.
Это один из самых ярких лазерных уровней в этом списке с зеленым лучом, который всегда лучше красного, и дает полную ценность за ваши деньги. Мы не видим конкурентов, приближающихся к тому, что Bosch вложил в этого зверя.
com/embed/ckeZvDf9eaA?wmode=opaque»/>
Полезные советы
- Бесплатное приложение Bosch Leveling Remote для Android можно загрузить здесь.
Если вы сторонник Bosch, не нужно дважды думать. По мощности, как любой электроинструмент Bosch, эта модель Bosch GLL3-330CG занимает первое место в списках бестселлеров на рынке и является единственным лазерным уровнем с Bluetooth.Это не разочаровывает!
# 4 — DEWALT DW089K Самовыравнивающийся трехлучевой линейный лазерный уровень
DeWALT — американская торговая марка, популярная благодаря своим инновационным функциям в электроинструментах. DW089K — один из лучших лазерных уровней, известный своей компактностью в компактном корпусе.
Лучший лазерный уровень для строителей: Dewalt DW089K
Плюсы- Отдельные кнопки для каждого луча (всего 3 луча; красный цвет)
- Микро-ручка для облегчения перемещения луча
- Пыле- и водонепроницаемость
- Расстояние между гусеницами 4 дюйма
- Лазерный диод не виден при солнечном свете
- Без маятникового замка
Лучшие характеристики
- Третий вертикальный луч — это удобная функция, которая помогает строителям при раскладке под углом 90 градусов и подрядчики. Второй лазер не нужен, если вы хотите создать прямоугольные перегородки для обследования конструкций на уровне цоколя и формации.
Второй лазер не нужен, если вы хотите создать прямоугольные перегородки для обследования конструкций на уровне цоколя и формации.DeWALT действительно знает, как объединить большинство функций в свои долговечные модели. Сама третья балка является привлекательной особенностью для строителей, которые хотят проектировать внутри помещения для выравнивания и съемки.
Дальность луча составляет до 50 футов, но нам не очень понравилась его видимость среди бела дня. Тем не менее, он лучше всего работает в помещении даже в дневное время.
Отдельные кнопки помогают экономить электроэнергию; в нем используются 4 батарейки типа АА, и вы можете рассчитывать на время работы более 30 часов. Время автономной работы этого самонивелирующегося лазерного уровня DeWALT хорошее по сравнению с другими моделями в списке, с комплектом для хранения, обеспечивающим дополнительное место для резервных аккумуляторов.
Большой клиренс не требует отдельной платформы, так как вы можете закрепить ее на полу или на штативе для съемки.
Хотя обязательная фиксация маятника отсутствует, DeWALT DW089K компенсирует его с помощью ручки микронастройки.Это помогает настроить линию для макета без необходимости перемещать весь инструмент вперед и назад, пока вы не найдете нужное место.
В целом, это лучший лазерный уровень для строителей при выполнении проектов, связанных с квадратными перегородками и решетчатыми потолками.
DeWALT DW089K поставляется в прочном корпусе, является одним из самых точных лазерных нивелиров на рынке, имеет трехлетнюю ограниченную гарантию (включая годичное бесплатное обслуживание, которое вам не потребуется), имеет степень защиты IP54 и заслуживает доверия. американцами.
Наконечники
- Его можно прикрепить к штативу для проецирования на стену в комнате
- Ответы на самые распространенные вопросы можно найти на веб-сайте DeWALT
DeWALT DW089K — наш лучший выбор для строителей, потому что он нет ничего, что не может сделать этот инструмент DeWALT.
Действуй!
# 5 — Dewalt DW089LG 3 x 360 ° зеленый линейный лазерный уровень
Если вам нужна большая яркость и более надежная система питания, то позвольте представить вам лучший лазерный уровень для всей комнаты — DeWALT DW089LG.Это просто апгрейд вышеупомянутой модели.
Лучший лазерный уровень Green Line для строителей: DEWALT DW089LG
Pros- Литий-ионная аккумуляторная батарея 12 В (с зарядным устройством)
- 4 мощных зеленых лазерных луча
- Сильное магнитное основание
- Фиксирующий маятник предотвращает внутренние повреждения
Best Feature
- Зеленый лазерный луч с поддержкой макета 360 градусов
Миллионы строителей в Штатах и во всем мире доверяют DW089LG, поскольку он может генерировать три лазера с зеленым лучом на 360 градусов, что позволяет вам: выполнять работы по уровню, отвесу или квадрату любого типа.
Его 4-кратные мощные зеленые лазерные лучи обеспечат вам видимость на расстоянии до 100 футов даже средь бела дня и без необходимости в очках для улучшения лазерного излучения или прицельной карте (которые поставляются бесплатно с этой моделью).
Литий-ионный аккумулятор 12 В — еще одна замечательная особенность этого профессионального лазерного уровня. Зарядное устройство позволяет при необходимости быстро заряжать запасной аккумулятор без необходимости бежать в хозяйственный магазин во время работы. С двумя вышеупомянутыми моделями это может быть так, особенно если вы работаете с лазерами непрерывно.
Еще одна особенность, которая нам понравилась в этой электростанции DeWALT, — это отсутствие функции автоматического выключения. Вы действительно не хотите, чтобы лазерный уровень отключался через 20 минут, когда вы работаете над проектом квадратной формы в ванной комнате. Это действительно может затруднить поток и производительность.
Добавьте к этому рейтинг IP65 и очень большой комплект для хранения, инструмент превосходит все точки зрения.
Мы уверены, что это лучший линейный лазер для строительства, потому что нет другой модели, которая могла бы сравниться с его универсальностью.Вы заметили, что у этой модели нет минусов?
Наконечники
- Если вы хотите работать при дневном свете, используйте бесплатную целевую карту для более точной съемки
Этот электроинструмент DeWALT вмещает в своем маленьком корпусе так много, что вы обязаны удивляй себя каждый раз, когда зажигаешь его.
Это дает полное соотношение цены и качества.
# 6 — Bosch GCL100-80C 12V Cross-Line Laser с точками отвеса
Самый компактный лазерный уровень: Bosch GCL100-80C
Еще один пионер в области макетных станков, Bosch известен своей прочной конструкцией и точностью.
Лазерный нивелир с красной перекрестной линией GCL100-80C оснащен точками отвеса для упрощения задач компоновки в любых заданных условиях, технологией VisiMax, которая обеспечивает большую яркость красного луча и энергоэффективность (благодаря литий-ионной батарее 12 В) и обеспечивает точный диапазон до 100 футов.
Он идеально подходит как для дневных, так и для ночных задач, так как вы можете настроить его самостоятельно, без дополнительных рук, благодаря функции самовыравнивания. Этот маленький зверь сделает ваши строительные работы проще и короче — от облицовки плиткой и заборов до стеллажей и земляных работ.
Советы
Вы можете зарегистрировать продукт на веб-сайте Bosch после покупки, чтобы получить дополнительный год гарантии.
Нажмите здесь, чтобы узнать больше.
Этот лазерный нивелир Bosch известен прежде всего своей производительностью при укладке плитки, а благодаря всем характеристикам, которыми он может похвастаться, он является надежным инструментом профессионала.
# 7 — DEWALT DW088K Самовыравнивающийся лазерный уровень с перекрестными линиями
Если вышеупомянутая модель была лучшим лазерным уровнем DeWALT, то DW088K — его кузен, обладающий почти теми же функциями, за исключением дополнительного луча.
Лучший самонивелирующийся лазерный уровень с поперечной линией: DEWALT DW088K
Плюсы- Прочная и долговечная конструкция
- Позволяет использовать на открытом воздухе на высоте до 165 футов
- Доступная цена
- Без механизма блокировки
- Балка не виден при солнечном свете
Best Feature
- Он легче DW089K, что делает его легко переносимым
Если вы ищете лазерный уровень для установки в шкафу и других аналогичных мероприятий в помещении, вам необходимо остановиться ваша охота здесь.
Вы нашли своего кандидата.
DW088K прекрасно переносится, так что вы можете брать его с собой на стройплощадку, не беспокоясь о логистике.
Добавьте к этому простоту и удобство использования, будь то укладка плитки или работа с водопроводной системой, и лазерный уровень окупится всего за несколько месяцев. Малый бизнес любит его за надежность и высокую точность.
Единственный недостаток отсутствия системы блокировки может отпугнуть домашних плотников, но если это не ваша область внимания, то это будет идеальным выбором.
DW088K — лучший лазерный нивелир с перекрестными линиями, который мы встречали на рынке, недорогой и портативный.
Сделано для строителей, которые занимаются установкой настенных светильников, подвесных потолков и перегородок — максимальная отдача за кражу.
Советы
- Лазерные аксессуары DeWALT, такие как очки и карты-мишени, могут оказаться очень полезными, если вы собираетесь работать при дневном свете
Если вы ведете небольшой бизнес, который занимается строительством дома, обследованием ванных комнат , плотницких работ и облицовки плиткой, этот DeWALT DW088K станет отличным подарком для ваших вложений.
Не сомневайся на этот счет.
# 8 — Самовыравнивающийся горизонтальный / вертикальный лазерный уровень Makita SK104Z
Лучший маленький лазерный уровень для небольших проектов: Makita SK104Z
Плюсы- Функция быстрого самовыравнивания (блокировка занимает 3 секунды)
- Автоматически выключается для экономии энергии
- Компактная и прочная конструкция
- Используются щелочные батареи, которые быстро разряжаются при непрерывном использовании
Один из самых доступных лазерных уровней в этом списке, этот здесь от Makita это компактный лазерный уровень, идеально подходящий для начинающих и пользователей, которые много передвигаются.
Makita всегда проигрывала таким брендам, как DeWALT и Bosch, но то, что отличает ее от включения в этот список, — это высокая мобильность и производительность. Этот красный лазерный уровень с диапазоном действия до 50 футов при дневном свете позволяет выполнить большинство работ по планировке.
Вопреки распространенному мнению, он также может выступать в качестве уровня поперечной линии при укладке плитки и других строительных целях.
Помимо быстрой 3-секундной блокировки механизма самовыравнивания, Makita SK104Z также имеет функцию автоматического отключения.Эта последняя функция необходима, потому что эта модель работает от щелочных батареек АА, поэтому энергоэффективность здесь не ваш друг. Но автоматическое выключение может испортить вашу точность, если вы находитесь в середине проекта.
В целом, это хороший маленький лазерный уровень класса II для начинающих и мелких рабочих. Его легко носить с собой, а также он подходит для любого штатива (с резьбой 1/4 дюйма) для большей маневренности.
Verdict Этот портативный лазерный уровень от Makita идеально подходит для большинства пользователей, у которых есть требования к разметке и маркировке для небольших работ, таких как строительство полок / шкафов, облицовка плиткой и установка гипсокартона.
Купи сейчас!
# 9 — Новый лазерный нивелир линии Красного Креста PLS180
Модернизированная версия популярной модели PLS 180, эта маленькая машинка была выпущена только в сентябре 2017 года. И через несколько месяцев она нашла место среди великих. Узнайте, почему…
Лучший лазерный уровень для электриков: новый PLS180
Плюсы- 30 часов работы с 3 батареями AA
- Магнитный настенный кронштейн
- Простой в использовании
Опыт работы с Pacific Laser Systems (PLS) — лучший описывается как беспроблемный опыт.Вам не нужно беспокоиться о слишком большом количестве переключателей или функций. Просто нивелир с помощью красного лазера и все. Для людей, которые не знают, PLS теперь принадлежит Fluke.
Этот лазерный уровень PLS прошел испытания на падение с высоты одного метра, что означает, что он идеально подходит для строительных работ.
Но больше, чем прочная конструкция, от других брендов, таких как Bosch и DeWALT, его отличает удобство использования.
Даже начинающие строители и любители (без большого опыта) могут использовать этот инструмент — просто установите, включите и начинайте работу над процессом квадратной резки или укладки плитки.
По сравнению с оригинальным PLS180, эта новая модель более точна и рассчитана на более долгую работу. Его трехлетняя гарантия явно не пригодится, потому что этот инструмент будет работать долгие годы.
Это лучший лазерный уровень для электриков и, возможно, одна из самых простых конструкций на рынке. Вы не будете разочарованы, владея им.
ВердиктЕсли вы ищете лазерный уровень высшего класса, который не слишком сложен в эксплуатации и вписывается в ваш бюджет, новый PLS180 должен быть вашим идеальным выбором.
# 10 — Klein Tools 93LCLS Лазерный уровень с перекрестными линиями и отвесом
Еще одна марка 19 -го -го века, которая также является личным фаворитом, — Klein Tools. Американский производитель, он известен своими высококачественными лазерными уровнями для дома, которые составляют прямую конкуренцию DeWALT.
Хороший дешевый лазерный уровень для строителей: Klein Tools 93LCLS
Плюсы- Водо- и грязеотталкивающий
- Прочный и сверхпрочный
- Хорошая цена
- Батарейный контейнер сделан из некачественного пластик
Best Feature
- Легко читаемые лазерные линии с вертикальным отвесом 90 градусов
Если вам нужен красный лазерный уровень для выкладки стен или навесных шкафов, и вам нужно работать в большие, длинные комнаты, тогда эта модель Klein Tools — ваш идеальный выбор.
Он имеет очень большой радиус действия при использовании в помещении и очень высокую точность даже на самом большом расстоянии. Хотя это не работает, когда вы используете его на открытом воздухе, он по-прежнему остается одним из лучших в своем ценовом диапазоне.
Помимо низкой цены, эту модель Klein Tools можно также использовать в качестве потолочного лазерного уровня благодаря монтажному кронштейну на 360 градусов.
И вам даже не понадобится штатив, чтобы использовать его; лестница сделает работу.
В целом, несмотря на то, что в этой модели не так много изломов, она удовлетворяет требованиям большинства профессионалов в области внутреннего строительства и домашних мастеров.
Если вы ищете лучший доступный лазерный уровень для строителей, не ищите где-нибудь еще. Это оно.
ВердиктКак и PLS, Klein Tools известна своей простотой и широким ассортиментом инструментов. Помимо некачественной сборки, на которую можно не обращать внимания, при использовании этого лазерного уровня нет ничего, что могло бы пойти не так.
Резюме
Все десять лучших лазерных уровней, которые мы рассмотрели, нам очень нравятся. Но, как видите, каждый со своими особенностями служит разным целям.
Leica Lino ML180 настоятельно рекомендуется профессиональным строителям и подрядчикам, которым нужен лазерный уровень превосходного качества для превосходной работы. В то время как Lino L4P1 — лучший выбор для внутренних работ по выравниванию.
Если DW089K — наш лучший выбор среди лучших лазерных уровней для строителей — имеет трехлучевой лазер, его двоюродный брат DW088K очень портативен.
Третья модель DeWALT в списке — DW089LG имеет более четкий и яркий зеленый луч для работы на больших расстояниях. В то время как Bosch поддерживает Bluetooth, PLS и Klein Tools известны своим простым дизайном и функциями.
Какую бы модель вы ни выбрали, вы можете быть уверены в одном — они являются лучшими в своем классе на текущем рынке электроинструментов. Мы заботимся о ваших инвестициях и поэтому составили список только лучших из лучших. Удачной покупки!
Что такое лазерный уровень?
Проще говоря, лазерный уровень — это электроинструмент, который проецирует красный или зеленый луч в виде вертикальной или горизонтальной (или обеих) линий вокруг себя, которые равномерно нивелируются со всех сторон.
Если лазерный уровень расположен в центре комнаты и проецирует горизонтальную линию на стены, линия будет иметь одинаковую длину со всех сторон от пола.
Его приложения включают возведение в квадрат, выравнивание и другие столярные и строительные работы, где выравнивание требуется от единой контрольной точки.
Зачем нужен лазерный уровень?
Вы когда-нибудь пробовали создать домашнюю галерею самостоятельно?
Надо просто определиться с макетом, забить эти гвозди, повесить фоторамки. Насколько это может быть сложно, правда?
К сожалению, многие, кто все же пытался создать галерею самостоятельно, обнаружили обратное.
Используйте лазерный уровень для развешивания картин на стене
Представьте себе:
Вы стоите на лестнице с уровнем в одной руке и молотком и гвоздем в другой. Вы хотите повесить серию фотографий, и вы хотите повесить их по прямой линии.
Проблема в том, что вам физически невозможно удержать уровень и забить кучу гвоздей.
Итак, вы одалживаете электрический молоток у соседей, чтобы помочь вам с вашей задачей, но вскоре понимаете, что вам все еще нужны обе руки, чтобы держать его.
Чем вы сейчас занимаетесь?
Вы можете либо забить нейлоновую нить с обеих сторон стены (что означает добавление ненужных отверстий в стене), чтобы направлять выравнивание, либо вы можете попросить другого человека помочь вам.
Если бы только ваш уровень мог прикрепиться к стене без использования гвоздя, чтобы удерживать его, то повесить эти фотографии было бы так просто.
Ну, угадайте, что?
Если в вашем ящике с инструментами есть даже дешевый лазерный уровень, то вы можете выполнить эту и многое другое!
Лазерный нивелир — универсальный инструмент для создания макетов для проектов по декорированию дома
Лазерные нивелиры в наши дни стали стандартом в строительстве и гражданском строительстве.
Из них можно делать шкафы, проверять выравнивание окон, дверей, мансардных и слуховых окон, а также для бетонных и асфальтовых работ.
Если эксперты сейчас используют эти инструменты, почему бы и вам не использовать?
Почему выбирают лазерные уровни вместо спиртовых / пузырьковых уровней?
Нет ничего плохого в использовании спиртовых или пузырьковых уровней, но правда в том, что есть строительные работы, где их невозможно использовать.
Возьмем, к примеру, сценарий во введении.Уровни духа / пузырьков помогут вам создать ориентир, но для этого вам понадобится опыт.
Кроме того, вы действительно хотите добавить в стену ненужные отверстия?
Помимо эстетики, еще одна причина, по которой я не рекомендую спиртовые и пузырьковые уровни для строительства, заключается в том, что они точны только для длины уровня (от 1 до 4 футов), что означает, что вам придется постоянно проверять выравнивание до другого конца вашего рабочего пространства.
Что, если бы ваше рабочее место было 30 футов в длину?
Конечно, это займет много времени, чтобы измерить.
Духовный / пузырьковый уровень
Духовный / пузырьковый уровни имеют флаконы, которые не полностью заполнены жидкостью, в большинстве случаев цветным спиртом. Поскольку флакон заполнен не полностью, в трубке есть пузырек.
Если спиртовой / пузырьковый уровень помещается на действительно горизонтальную или действительно вертикальную поверхность, пузырь остается в середине уровнемера.
К сожалению, середина калибра для одного может быть на несколько миллиметров для другого.
Кроме того, если вы хотите работать с наклоном, почти невозможно поддерживать уровень на одном уровне, особенно если вам нужно постоянно двигаться в процессе.
Именно в таких ситуациях лучше всего использовать лазерные уровни.
Некоторые из преимуществ лазерных уровней по сравнению со спиртом / пузырьками:
- Лазерные уровни просты в использовании . Одним нажатием кнопки вы можете без проблем создать направляющую, проверить выравнивание и даже прямоугольность. Если у вас есть лазерный уровень, вам даже не понадобится меловая линия. Поговорим об удобстве!
- Лазерные нивелиры высокоточные с точностью до долей миллиметра.
- Лазерные нивелиры упрощают работу с уклонами . Во-первых, вы можете установить их, чтобы они могли оставаться в том же положении, пока вы завершаете свою работу. Во-вторых, настройки не меняются даже при перемещении в другое место — если, конечно, вы этого не хотите.
Различные типы лазерных уровней
Прежде чем перейти к техническим аспектам лазерных уровней, я хочу рассказать вам немного истории.
Регулировка светового луча — довольно современная технология. Впервые он был использован в 1996 году для сердечного мониторинга.
Вскоре это было обнаружено другими профессионалами и было развито в технологии в других областях, таких как, в данном случае, строительство.
На протяжении многих лет ученые и инженеры оттачивали технологию, в результате чего были созданы лазерные нивелиры высочайшего качества, которые являются компактными, доступными по цене и могут использоваться во многих практических приложениях.
Вы когда-нибудь видели военный фильм, где жертва обнаруживает, где находится снайпер, через красную лазерную точку на его одежде?
Ну лазерные нивелиры такие.
Они испускают световые лучи, которые можно использовать в качестве ориентира для любых работ по компоновке или выравниванию.
Сегодня есть как минимум три вида, с которыми вы столкнетесь, покупая лазерный уровень. Они делятся на категории в зависимости от того, как они излучают свет. У каждого из этих лазерных уровней есть свои преимущества и недостатки.
1. Точечные лазеры / отвесы
Трехточечная лазерная центровка Bosch с самовыравниванием GPL 3
Как следует из названия, этот лазерный уровень проецирует одну или несколько контрольных точек на рабочую поверхность.Он работает так же, как уровень воды и отвес, только намного точнее на больших расстояниях.
Проблема с точечными лазерами заключается в том, что они имеют более короткие диапазоны, чем другие типы лазерных уровней, и поэтому их трудно использовать для каких-либо других целей, кроме как в качестве ориентира.
Диапазон цен варьируется от 20 до 500 долларов. Более дешевые модели используются исключительно в помещении, а более дорогие — на улице.
2. Линейные лазеры
BOSCH GLL40-20G Самовыравнивающийся поперечный лазер с зеленым лучом
Линейные лазеры проецируют прямую линию от одной точки к другой на расстоянии от 64 до 100 футов.
В зависимости от модели лазерного линейного уровня он может проецировать несколько линий, что позволяет вам проверять «прямолинейность», а также «прямоугольность».
Линейные лазеры обычно компактны и могут устанавливаться на лестнице или даже на штатном штативе для камеры.
Большинство линейных лазеров предназначены для использования внутри помещений, и их трудно увидеть при ярком свете, но новые модели оснащены лучшими светодиодами, чем на открытом воздухе.
Кроме того, некоторые модели имеют технологию импульсного света и могут использоваться с лазерными извещателями для наружного применения.В зависимости от характеристик лучший лазерный уровень может стоить от 100 до 600 долларов.
3. Ротационные лазерные уровни
Ротационные лазерные уровни проецируют линию уровня, очень похожую на линейный лазер, и эта линия вращается вокруг комнаты на 360 градусов. Помимо однолинейного генератора, есть также возможности вертикального подъема и вертикального опускания.
CST / berger RL25HVCK Внутренний / внешний ротационный лазерный нивелир
Большинство моделей для удобства имеют дистанционное управление. Ротационный лазерный нивелир отличается высокой точностью и идеально подходит для наружных работ , таких как укладка фундаментов и труб или выравнивание дорог.
Хотя ротационный лазер более мощный, чем линейный, он также более громоздкий и более дорогостоящий. Одно устройство может стоить от 250 до 2000 долларов.
Вам понадобится более прочное основание, если вы хотите установить ротационный лазерный уровень, потому что он намного больше линейного лазера. Те, которые предназначены для фундаментных работ, могут быть очень большими и должны устанавливаться на платформе или тракторе.
Что можно сделать с лазерным уровнем?
С годами лазерные нивелиры стали меньше, проще в использовании, точнее и доступнее.Сегодня его используют не только на крупных строительных объектах, но и в домашних хозяйствах, которым необходимо выполнять работу для двух или трех человек самостоятельно.
Как правило, лазерные уровни используются для работ по разметке, требующих высокой точности.
Некоторые общие приложения включают установку потолочной плитки, канализационных труб или даже такие простые, как установка перил для стульев.
Некоторые виды применения лазерных уровней внутри помещений:
- Выровняйте полы с помощью однолинейного лазерного луча.
- Убедитесь, что ваши стены перпендикулярны и прямые, с помощью трехлучевого линейного лазера.
- Прикрепите его к потолочному креплению, чтобы облегчить установку потолочных капель.
- Используйте два лазера, чтобы проверить высоту дверей или окон.
- Установите перила для стульев и обшивку стен в вашем доме
- Используйте штатив для установки шкафов и декоративных элементов, даже рамок для картин на стене.
- Совпадающие точки на полу и потолке
С лазерным детектором или ротационным линейным лазером вы также можете использовать лазерные уровни на открытом воздухе.
Некоторые из самых популярных наружных работ:
- Измерение грунта
- Проверка и выравнивание стоек и балок на настилах, крыльцах и заборах
- Выравнивание кладки
- Установка макета для новой строительной площадки
- Проверить место высота для улучшения дренажной установки
- Может использоваться для контурного земледелия для лучшего полива.
Как выбрать лучший лазерный уровень?
Вот 7 факторов, которые следует учитывать при выборе лазерного уровня:
1.Диапазон точности и видимости
Когда вы говорите, что лазерный уровень является точным, это означает, что он может определять уровень рабочей поверхности на доли дюйма.
Инструмент с классом точности + 5 / 16in. менее точен, чем те, у которых + 1 / 8in. Чем точнее будет лазерный уровень, тем лучше.
Между тем под дальностью видимости понимается расстояние, на котором лазер может быть виден невооруженным глазом.
Чем больше дальность видимости, тем больше рабочие поверхности, с которыми можно работать.
Большинство лазерных диодов класса 2 можно увидеть на расстоянии до 50 футов в помещении. Если вы работаете на небольших и средних строительных площадках, то 50 футов должно быть достаточно.
Однако для крупномасштабного строительства вам понадобятся инструменты большей наглядности.
2. Ручное нивелирование VS Самовыравнивающиеся / Автоматические нивелирующие лазеры
Некоторые дешевые лазерные уровни — это ручное нивелирование , что означает, что пользователь должен взглянуть на пузырчатую виалу, чтобы проверить, выровнено ли устройство или нет. .
Чтобы вручную выровнять устройство, вам потребуется отрегулировать несколько винтов с накатанной головкой, которые, разумеется, громоздки для начинающих пользователей.
Самовыравнивающиеся лазеры имеют внутренний маятник , который выполняет выравнивание за вас.
Как следует из названия, он автоматически выравнивается до 5 градусов — даже если поверхность не является полностью горизонтальной / вертикальной, если наклон находится в пределах 5 градусов, вы можете использовать ее в качестве ориентира.
Если блок сотрясается и выходит за пределы уровня на 6 градусов, то обычно мигает индикатор отклонения от уровня.
У обоих типов есть свои преимущества и недостатки. Оба типа полезны, за исключением того, что самонивелирующиеся лазеры сэкономят ваше время и могут обеспечить более точные результаты.
Между тем, большинство лазеров с ручным нивелированием практически не требуют технического обслуживания, в то время как может быть трудно обнаружить, если лазер с самонивелированием не откалиброван.
3. Горизонтальные двухлучевые лазеры VS
Горизонтальные лазеры излучают только лазерный луч и полезны для проверки выравнивания пола.Он способен выделять неровности на рабочей поверхности, его возможности ограничены, но он также может быть дешевле по сравнению с двухлучевыми лазерами.
Между тем, двухлучевой лазер излучает два луча — горизонтальный и вертикальный. Большинство двухлучевых лазерных уровней имеют отдельные кнопки для двух лучей, поэтому их можно использовать отдельно, что обеспечивает большую гибкость.
Лазер этого типа можно использовать одновременно в качестве линий отвеса и нивелира. Лучше всего использовать его для нанесения лески на пол и стены под углом 90 градусов, обеспечивая тем самым прямоугольность поверхности.
Некоторые двухлучевые лазеры проецируют поперечную линию вместо отдельных горизонтальных и вертикальных линий. Эти типы двухлучевых лазеров идеально подходят для установки гораздо больших настенных светильников, а также перегородок и подвесных потолков.
Ротационные лазеры также являются двухлучевыми лазерами, в которых один луч представляет собой вертикальную точку на потолке, а другой — горизонтальную линию вокруг комнаты.
Этот вид лазерного уровня лучше всего подходит, если вы хотите проверить выравнивание стен и если вам нужно установить обшивку или мебель, которая охватывает всю комнату.
4. Лазерные детекторы (лазерные приемники)
Лазерные детекторы или лазерные приемники имеют две основные цели: до расширять рабочий диапазон лазерного уровня и обеспечивать возможность использования лазерных уровней на открытом воздухе или при ярком освещении. световые условия.
Большинство детекторов издают звуки, чтобы помочь вам выйти на уровень — быстрый сигнал для перемещения детектора вниз, медленный сигнал для перемещения вверх, устойчивый сигнал, когда вы находитесь на уровне.
Решение о покупке лазерного детектора зависит от того, для каких приложений вы хотите использовать свой лазерный уровень.
Если вы не собираетесь устанавливать лазерный уровень на открытом воздухе, то лазерный детектор может оказаться не лучшим вложением.
Важно отметить, что не все лазерные нивелиры поддерживают лазерные детекторы , поэтому, если у вас есть намерение покупать детекторы в будущем, сначала проверьте технические характеристики вашего лазерного уровня.
5. Рейтинг IP
IP означает « Защита от проникновения » и относится к качеству герметизации продукта и его эффективности в предотвращении проникновения посторонних предметов (таких как грязь и вода) в сердцевину продукта. .
Первая цифра IP-рейтинга относится к размеру объектов, которые могут проникнуть в продукт, а вторая цифра относится к способности продукта отталкивать или защищать от влаги.
6. Монтажная резьба
Варианты монтажа важны, потому что есть определенные приложения, когда мы хотим, чтобы лазерный уровень был стабильным.
Например, если мы хотим сохранить балки на определенной высоте или в определенном положении, нам пригодятся монтажные резьбы.
Большинство лазерных уровней можно установить на стандартный штатив, в то время как для других требуется специальное крепежное приспособление.
Само собой разумеется, что чем стандартнее крепежная резьба лазерного уровня, тем проще его установить, поскольку для этой цели можно использовать штатив для камеры.
7. Самое главное: что делать с лазерным уровнем?
Как я уже указывал ранее, наиболее важное соображение при выборе лучшего лазерного уровня зависит от того, что вы хотите с ним делать.
Таким образом, лазер Dewalt из приведенных выше обзоров линейных лазерных уровней не конкурирует друг с другом.
Каждую из них можно использовать для определенных приложений, при этом каждая новая модель поддерживает большее количество приложений, чем более старые.
- Однолучевые лазеры: лучше всего подходят для проверки выравнивания стен или полов перед установкой плитки или вентиляционных отверстий
- Двухлучевые лазеры (простые горизонтальные и вертикальные лазеры): могут использоваться для переноса точек на полу на потолок, простая установка освещения, а также преимущества однолучевых лазеров
- Двухлучевые лазеры (поперечные лазеры) : лучше всего подходят для компоновки и монтажа электрических и сантехнических систем, стен и дверей, а также для монтажа плитка на стены. Это также полезно, когда вам нужно установить длинный ряд настенной арматуры и мебели.
- Трехлучевые лазеры или компоновочные лазеры: обладает всеми преимуществами горизонтальных и вертикальных лазеров, плюс третий отвес проверяет прямоугольность стен и полов. Он лучше всего подходит для столярных работ и работ, требующих большого количества измерений на 90 и 45 градусов.
- Ротационные лазеры / линейные лазеры с лазерными детекторами: эти лазеры лучше всего подходят для рабочих площадок, расположенных в хорошо освещенных местах, а также на площадках более 50 футов.
Это также полезно, когда вам нужно установить длинный ряд настенной арматуры и мебели.Принадлежности поставляются с лазерным уровнем
Большинство лазерных уровней можно использовать прямо из коробки, просто нажав кнопку. Лучшие лазерные нивелиры обычно имеют крепежное оборудование, включенное в комплект.
Чтобы улучшить характеристики лазерного уровня, вы можете приобрести следующее:
- Штативы: , чтобы инструмент оставался стабильным.
- Лазерные детекторы: для использования вне помещений и для увеличения дальности
- Нивелирные стержни и рейка: для облегчения нивелирования устройства
Как использовать лазерный уровень?
Установка лазерного уровня
- Первое, что вам нужно сделать перед использованием лазерного уровня, — это установить его на плоской поверхности.Лучше всего для этого использовать штатив.
- Для ручного уровня убедитесь, что пузырьки находятся посередине (на «уровне»). Если нет, поверните винты возле флакона, пока не выровняетесь. Включите уровень и пользуйтесь.
- Самонивелирующемуся лазеру потребуется несколько секунд, чтобы он сам выровнялся. Некоторые устройства излучают мигающий свет, если они находятся вне уровня. В этом случае вам нужно будет отрегулировать сам блок. Включите уровень и пользуйтесь.
- Если нет стены, от которой лазерный луч может отражаться, вы можете использовать лазерный детектор, чтобы найти луч. Обратитесь к руководству, чтобы определить, как лазерный детектор будет сигнализировать о «выравнивании».
Обратитесь к руководству, чтобы определить, как лазерный детектор будет сигнализировать о «выравнивании».Подвешивание картинок с лазерным уровнем
- Определите желаемую высоту рамки для картин.
- Сделайте небольшую отметку на стене, которая будет служить ориентиром для самой верхней части рамы.
- Включите лазерный уровень и совместите его горизонтально с отметкой на стене. Убедитесь, что он ровный.
- Теперь возьмите рамку для картины и измерьте длину от верха рамки до подвесного механизма.
- Используйте расстояние, полученное от # 4, и измерьте от лазера вниз.
- Сделайте отметку на стене, в зависимости от того, сколько рамок вы хотите повесить в одном месте.
- Забейте гвоздь по оставленной вами отметке.
- Поместите рамки для картин и проверьте выравнивание вверху с помощью лазера. Установите лазерный уровень на штатив на устойчивой земле.
Использование лазерного уровня для укладки настенной плитки
Во многих домах высота от пола до потолка не всегда постоянна внутри комнаты, поэтому использование пола в качестве основы для настенной плитки не всегда может быть хорошей идеей.
Вы можете добиться идеального расположения первого ряда плиток, выполнив следующие действия:
- Определите точку на стене, всего в нескольких дюймах от стены. Убедитесь, что расстояние от пола до этой точки меньше высоты плитки.
- Включите лазерный уровень и совместите горизонтальную линию с точкой, указанной на шаге 1.
- Совместите конец прямой доски шириной 2 дюйма с лазерной линией и прикрутите доску к стене.
- Положите первый ряд ваших плиток на верхнюю часть доски.Так получится идеально ровный первый ряд.
- Продолжайте укладывать плитки на стену до желаемой высоты.
- После того, как все плитки будут надежно установлены, снимите плинтус.
- Плитка для нижнего ряда, вырезанная по индивидуальному заказу, для сохранения ровных линий затирки.
Использование лазерных уровней для установки потолочных светильников
Полы и потолки обычно имеют одинаковые размеры, поэтому, если вы устанавливаете потолочные светильники, лучше всего сначала разложить их на полу, чтобы избавиться от жесткой шеи.
- Отметьте положение потолочных светильников на полу.
- Установите лазер на штатив и включите его.
- Совместите направленный вниз луч с центром приспособления, отмеченным на полу.
- Используйте направленный вверх луч, чтобы отметить место на полу.
- На полу измерьте длину от балки до точек, где будет крепиться приспособление.
- Отметьте размеры, найденные в # 5 на потолке.
- Поднимите потолочное крепление и установите.
Часто задаваемые вопросы
Лазерные уровни повреждают глаза?
В этих уровнях используются диоды класса 2, которые можно увидеть невооруженным глазом, но их лучи маломощны и не вызывают повреждения глаз, если не смотреть прямо на источник луча.
В чем разница между зеленым и красным лазером?
- Человеческий глаз видит зеленый свет лучше, чем красный, поэтому зеленые лазеры можно увидеть на больших расстояниях.
- При использовании на открытом воздухе, особенно при ярком свете, как зеленый, так и красный лазер трудно обнаружить, и для этого потребуется лазерный детектор.
Как часто следует калибровать лазерный уровень?
Большинство самонивелирующихся лазерных уровней не нуждаются в калибровке, однако, если вы хотите быть уверены, вы можете приносить их в аккредитованный магазин каждые шесть месяцев для проверки.
Таким образом, вы также можете выявить проблемы на ранней стадии и, следовательно, предотвратить сбой устройства.
Могу ли я проверить калибровку самостоятельно?
В идеале да, но только если вы понимаете, как работают уровни.
Самый простой способ сделать это — направить луч или точку на одну стену на расстоянии примерно 5-10 метров.
Затем поверните уровень на 180 градусов и проверьте, совпадает ли он с другой линией.
В противном случае лазерный уровень не откалиброван и должен быть возвращен или доставлен в сервисный центр.
Заключение
Лазерные уровни экономят время, силы и деньги. Они идеально подходят для работ, требующих точности и аккуратности.
Если вы серьезный профессионал в области строительства, лазерные нивелиры — отличное вложение на долгую перспективу.
, потому что вы будете использовать их много раз для самых разных проектов.
Даже если вы не строите для жизни, у лазерных уровней есть много пользы. Теперь вы можете проверить выравнивание столов на стульях одним нажатием кнопки или создать свой собственный прикроватный столик на выходные!
Поистине, лазерные уровни просто необходимы в любом наборе инструментов. Наконец, я надеюсь, что мои обзоры лазерного уровня помогут вам в выборе лучшего лазерного уровня.
ВВЕДЕНИЕ
% PDF-1.4
%
1 0 obj
>
эндобдж
7 0 объект /Заголовок
/Предмет
/ Автор
/Режиссер
/ Ключевые слова
/ CreationDate (D: 202105051-00’00 ‘)
/ Компания (CHU-RENNES)
/ CrossMarkDomains # 5B1 # 5D (www.tandfonline.com)
/ CrossmarkDomainExclusive (истина)
/ CrossmarkMajorVersionDate (08 марта 2016 г.)
/ ModDate (D: 20160610154641 + 02’00 ‘)
/ SourceModified (D: 20160308102919)
/ doi (10.1586 / 14787210.2016.1164032)
>>
эндобдж
2 0 obj
>
эндобдж
3 0 obj
>
эндобдж
4 0 obj
>
эндобдж
5 0 obj
>
эндобдж
6 0 obj
>
поток
приложение / pdfdoi: 10.
1586 / 14787210.2016.1164032
븛 EV! J ߹; IG_K% ~ W _, / 7zMku9DXGg9̧Cȑwnh544Sq \%? | M & iń5`) Y7 Ղ E ڔ 4 g &
ɫD; kM 낢 SS @ rcxVWz \ ݊ R
Bnt ~
[mh_XͮrU / *) | bwbM $ Op: W {Źe
C>
№3п-Х «4ОД
! M0) b} db4TZQAHamilton Beach (35033) Обзор фритюрницы
Hamilton Beach 35033 ReviewHamilton Beach производит несколько различных моделей фритюрниц различных форм, размеров и назначения. Модель 35033, вероятно, является их лучшей фритюрницей среднего размера, если вы не ищете чего-то особенного, например, внешней технологии Cool-Touch.
Для кого предназначен этот продукт? Этот продукт отлично подойдет небольшой семье или заядлому любителю жареного во фритюре. Даже если вам нужно приготовить вторую партию, эта фритюрница Hamilton Beach быстро нагревается и может оставаться нагреваемой столько, сколько необходимо. Это отличная сделка для прибора из нержавеющей стали, который по-прежнему превосходит многие фритюрницы с аналогичной ценой. В нем по-прежнему отсутствуют функции фритюрницы премиум-класса, такие как система автоматического слива, так что это будет отличным компромиссом между ценой и характеристиками.
Не каждый может выкинуть на фритюрницу более 100 долларов, и это нормально.
При заказе фритюрницы Hamilton Beach 35033 вы получите комплект съемных деталей, в том числе: основание фритюрницы с боковыми ручками, съемную сковороду для фритюрницы, в которую можно заливать масло, корзину для фритюрницы и крышку с возможностью фильтрации. . Вы также получите руководство, чтобы узнать, как выполнять простые функции.
Обзор функций фритюрницы Hamilton Beach 35033Емкость масла — Емкость масла для этой фритюрницы составляет 2.8 литров. Мы видим фритюрницы размером от 1 литра до 4,5 литра, так что это вполне удобно посередине. Он по-прежнему может приготовить много еды, поэтому в большинстве случаев он должен быть достаточно подходящего размера.
Магнитная вилка — Стандартная функция большинства фритюрниц — разъединяющийся магнитный шнур. Это стандартно из соображений безопасности.
Вы не можете довести до кипения горячее масло в кастрюле и попасть в аварию, когда вы случайно дернете шнур, в результате чего фритюрница опрокинется.Горение масла чрезвычайно опасно, поэтому, если вы ищете фритюрницу без этой функции, удачи.
Съемные части — Как уже упоминалось, вы получаете подставку, кастрюлю для масла, крышку и корзину. Вы даже получаете съемный нагревательный элемент, что означает, что вы можете использовать посудомоечную машину для мытья всего, кроме нагревательного элемента. Вы также можете положить все эти детали (без нагревательного элемента) в раковину, чтобы мыть вручную с помощью мыльной губки.
Цифровой таймер — Хотя это не очень впечатляющий дисплей, Hamilton Beach все же потребовалось время, чтобы установить цифровой таймер со звуковыми сигналами, чтобы помочь вам отслеживать время приготовления.Это не добавляет фритюрнице особой ценности, но может быть полезно, если вы действительно плохо следите за временем.
Темп. Наберите — это типичный циферблат, который находится в диапазоне от 0 до 375 ° F. Однако на циферблате не так много цифр, поэтому, если вы собираетесь набрать конкретный номер, будьте готовы к использованию всего нескольких цифр. здесь или там.
Крышка — Крышка представляет собой основу из нержавеющей стали с прохладной сенсорной ручкой. Существует система вентиляции, которая помогает улавливать часть пара, хотя она будет работать лучше, если вы купите фильтр для установки в нее.Для Гамильтон-Бич кажется немного странным и дешевым не поставлять один, а ставить место специально для него.
1500 Мощность — При мощности 1500 Вт фритюрница Hamilton Beach 35033 обладает большой мощностью. Фритюрницы обычно находятся в диапазоне от 1000 до 1800, и чем больше фритюрница, тем больше требуется мощности. Учитывая емкость 2,8 л, мощность нагрева, вероятно, аналогична другим моделям примерно того же размера / цены.
Эта фритюрница Hamilton Beach 35033 чрезвычайно удобна в сборке и использовании.Все части собраны вместе. Чтобы запустить его, подключите его и поверните шкалу температуры вверх. Будет световой индикатор, сообщающий вам, когда устройство включено. Второй световой индикатор сообщит вам, когда масло будет нагрето. Оттуда просто положите продукты в корзину и дайте начать жарение во фритюре. Когда вы закончите смазывать маслом, выключите фритюрницу и дайте ей остыть, прежде чем приступать к очистке.
АльтернативыЭлектрическая фритюрница Presto Fry Daddy
Если вам кажется, что такой размер фритюрницы Hamilton Beach подходит, вам, вероятно, лучше остановиться на этой модели.Однако, если вы не уверены и рассматриваете возможность фритюрницы, которая больше похожа на апгрейд, мы предлагаем ознакомиться с нашим обзором T-Fal FR8000 . Он также из нержавеющей стали и немного больше — 3,5 литра.