Ушм кировского завода: ушм кировского завода

иванов и., 09.12.2019

Недостатки: 1. не очень высокие максимальные обороты
2. нет защит, но за эти деньги их ни у кого нет
3. все-таки этот инструмент надо рассматривать как 125. Оно и безопасней будет в виду отсутствия электрических защит
4. мудреный фиксатор кожуха

Комментарий: Инструмент не мой. Сосед отдал на тест-драйв, попросил оценить его со всех сторон.
Хочу всех обрадовать. Я вскрыл редуктор и был удивлен. Ответственно заявляю, хвост шпинделя вращается в роскошном закрытом подшипнике.
В этом ценовом диапазоне в лучшем случае вкладыш, а то и вообще, шпиндельный вал задним концом вращается в теле редуктора…
Кстати, смазки в редукторе набито по-честному, добавлять не надо.

ВЫВОД: со 125м кругами и корщетками инструмент прослужит гораздо дольше, чем зеленый Бош

Игорь Игоревич, 06.12.2019

Недостатки: 1. Низкая скорость вращения шпинделя — соответственно медленно режет.2. Шумная3. Нет кейса

Комментарий: Брал для домашего/дачного/гаражного использования. Себя оправдала. Вполне хорошая машина, но на отличную не тянет….

М, 29.10.2019

Недостатки: не обнаружил

Комментарий: .

Masilla, 17.10.2019

Недостатки: отсутствие кейса,
тяжеловата

Комментарий: Надо было срочно купить недорогую болгарку для работы по бетону. Выбор пал на эту. Иногда круг все же тормозился (при максимальном погружении), но не увязал в бетоне. Редуктор почти не грелся (давал перерывы, чтобы не перегревать круг). Скорость реза порадовала.
Держать в руках удобно, но вес чувствуется.

Прошел год использования. За это время резал и бетон и металл. Резал и сам и знакомые. Все довольны — вполне нормальный инструмент

cheeter c., 14.10.2019

Недостатки: крупный редуктор, немного неудобно в труднодоступных местах..

Комментарий: достойный инструмент за эти деньги. Рекомендую

Имя скрыто, 28.06.2019

Недостатки: Как у всех болгарок провод у ручки может перебиться, заранее обмотал изолентой для крепости.

Комментарий: Удобна для небольших сварочных работ. Сам для этого покупал.

Племзавод У., 15.06.2019

Недостатки: Не заметил.

Комментарий: Покупал как временную замену большой болгарки Кировского завода. Оказалось, что эта модель почти ни в чём не уступает. Наоборот: Решет лучше, брызг металла гораздо меньше. При меньшей почти в два раза мощности используется диски гораздо меньшей толщины, и за счёт этого времени на резку больше не требуется. Режет тихо и чисто. Можно работать на неполных оборотах.

ya, 22.03.2019

Недостатки: мощность реально на уровне 500вт
максимальная скорость по ощущениям маловата.
нет фиксатора включения, как точилом не попользуешься 🙁

Комментарий: искал именно с регулятором и поменьше, диолд оказался самым дешевым, но как проверил потом мах мощность не сравнима со вторым моим тоже 1200вт БОРТом, а я еще выбирал не взять ли на 950вт. а так для дома само то, но при выборе надо проверять хватит ли вам ее мощи, а то не сильно прижмешь и диск останавливается, Борт в таких же условия фиг остановишь.

Юрий -., 19.02.2019

Недостатки: Поначалу сильно шумел редуктор, но сейчас приработался и при работе на холостом ходу слышен только шум двигателя.
А вообще по большому счеты недостатков не обнаружил.

Комментарий: Брал для домашних работ, искал именно с регулятором оборотов недорогую. В хозяйстве уже более трех лет, пользуюсь регулярно.
За такие деньги оказался отличный выбор.
Для шлифработ — отличная. Для массовой резки металла конечно надо брать 230 мм, но и эта справляется неплохо. А то, что относительно небольшая — это как раз зачастую плюс.

Аренда и услуги штробореза в Калининске в Саратовской области

Уфа, Участка Нагаевского лесничества, Аэродром за Белой, Некрасовский, Земмашина, Никольский, п/л Черемушки, 1623 км, Кузнецовский свх, Королево, УЕ-394/3, Степановский, Кордон N6, 1636 км, Турбаза Юбилейная, Жилино, РВ-1, Зауфимское лесн-во, Управление а/д Самара-Челябинск, 6 км, Садовый, Ветошниково, п/л свх Цветы Башкирии, 1626 км, Южный Парк, Вагоны ЭП 765, Забельский, Станции Уршак, Аркаул, Нефтяной Парк, Пожарной Части (городок), 8 Марта, 1637 км, Аэропорт с поселками, Карпово, МК-111, Самохваловка, 1638 км, 1628 км, Аэропорт, Кордон лесн-во, Аэродром Китайка, Ивановский, Черниковское лесн-во, Дудкино, Правая Уфимка, Лесопункт (3 Пристань), Дорогино, Левая Белая, Лощинная, Зинино, УЕ-394/13, Новая Александровка, Дубки, Санаторий Зеленая Роща, Новые Черкассы, Мечта, Воронки, Вотикеево, Баланово, Федоровка, Дема, Нагаево, Тихая Слобода, Кордон Уфимское лесн-во, Базилевка, Зеленая Роща, 4 Кордон, Колония-поселение 5, Локотки, свх МВД, 1 Кордон, Касимово, Демское лесн-во, свх Цветы Башкирии, 1646 км, Нагаевский Кордон, Камышлинского мелькомбината, 1629 км, Мельничное Озеро (строение), СУ-820, Кордон N5, 738 км, Чесноковка Верхняя, Поляна, Кордон Рядом с Мелькомбинатом, 6 Кордон Калининского р-на, Князево, 3 Кордон, Старые Турбаслы, ПМС-49, Мокроусово, Янгаул, Атаевка, Искино, Мельничный, Александровка, 635 км, 1624 км, Заречный, 637 км, Елкибаево, Некрасово, Уфимский, Алексеевка, Булгаково, Камышлы, Ольховое, Центральной усадьбы конезавода 119, Песчаный, Стуколкино, 22 км, 24 км, Южная, Волково, Дмитриевка, Подымалово, Ясный, Ягодная Поляна, Жуково, Мармылево, Мармылева, Мысовцево, Сергеевка, Березовка, Зубово, Лебяжий, Нижегородка, Асаново, Асан, Кармасан, Юлушево, Грибовка, Кириллово, Светлая, Курочкино, Рождественский, Тауш, Рзд Тауш, Разъезда Тауш, Горново, Горново ОПХ, Карюгино, Красный Яр, Кумлекуль, Черновский, Чернолес, Чернолесовский, Якшиваново, Колокольцево, Кручинино, Лесной, Миловка, Начапкино, Новый, Сперанский, Вавилово, Михайловка, Мударисово, Суровка, Казырово, Николаевка, Нурлино, Вольно-Сухарево, Ушаково, Бурцево, Исаково, Крючевка, Русский Юрмаш, Юрмаш, Шамонино, Шмитово, Глумилино, Лекаревка, Таптыково, Новые Карашиды, Покровка, Черкассы, Чуварез, Геофизиков, Загорский, Лодыревка, Торфяной, Чесноковка, Бейгулово, Новотроевка, Октябрьский, Первомайский, Шемяк, Санатория Юматово имени 15-летия БАССР, Уптино, Юматово, ст Юматово, Станция Юматово, Юматовского сельхозтехникума, Мысовка, Авдон, Платоновка, Петровка, Кипчак, Дубрава, Кустарево, Падеевка, Шмидтово, Лавочное, Опытное хозяйство, Троицкое, Уршак, Кундряк, Зубово-ст.Уршак-промзона-аэропорт, Фомичево, Осоргино, Дебовка, Курасково, Дема-2, 2 Кордон, 5 Кордон, 6 Кордон Кировского р-на, Южный, Федоровский, Искинский, Нагаевский, Новочеркасский, Турбаслинский, Алексеевский, Авдонский, Булгаковский, Дмитриевский, Жуковский, Зубовский, Кармасанский, Кирилловский, Красноярский, Миловский, Михайловский, Николаевский, Ольховский, Русско-Юрмашский, Таптыковский, Черкасский, Чесноковский, Шемякский, Юматовский, Бижбулякский, Бижбуляк, Кандры-Куль, Пчельник, Лассирма, Елбулак-Матвеевка, Калиновка, Ивановка, Седякбаш, Седяк-Баш, Барш, Аитово, Каримово, Мулланур-Вахитово, Базлык, Мусино, Егоровка, Кистенли-Богданово, Пурлыга, Биккулово, Дюсяново, Каныкаево, Демский, Ольховка, Тулубаево, Азнаево, Елбулактамак, Елбулак-Тамак, Тукай, Тукаево, Качкиново, Нижняя Курмаза, Антоновка, Ермолкино, Тумаш-Елга, Иттихат, Рудники, Усак-Кичу, Зириклы, Новая Самарка, Мишаровка, Малый Седяк, Лысогорка, Красная Горка, Красногорка, Кенгер-Менеуз, Ибрайкино, Верхняя Курмаза, Чулпан, Кунакулово, Касимовка, Касымовка, Разаевка, Веселая Роща, Каменка, Прогресс, Василькино, Набережный, Боголюбовка, Хомутовка, Сухоречка, Новый Биктяш, Мурадымово, Исякаево, Чегодаево, Милисоновка, Мелисоновка, Кош-Елга, Сосновка, Вишневка, Менеуз-Москва, Зириклытамак, Зириклы-Тамак, Степановка, Сармандеевка, Игнашкино, Канарейка, Кистенли-Ивановка, Кожай-Икские Вершины, Кожай-Максимово, Сене-Пурнас, Малый Менеуз, Светловка, Такмаккаран, Павловка, Шкапово, Рзд Шомыртлы, Шомыртлы, Дубровка, Новая Васильевка, Новомихайловский, Базлыкский, Калининский, Зириклинский, Биккуловский, Аитовский, Елбулактамакский, Кош-Елгинский, Кенгер-Менеузовский, Каменский, Сухореченский, Зианчуринский, Исянгулово, Алибаево, Башкирская Чумаза, Самаза, Мухамедьяново, Ниязгулово, Чумаза, Юлдыбаево, Юлдашево, Абуляисово, Бужан, Малиновка, Агурда, Акдавлетово, Баишево, Ильмаля, Сагитово, Новокасмартский, Новокасмарский, Азимган, Байдавлетово, Ибраево, Сазала, Серегулово, Сулейманово, Бикбау, Трушино, Верхняя Бикберда, Карадыган, Нижняя Бикберда, Бурангул, Каргала, Каргалы, Куюбарово, Верхняя Акберда, Верхний Муйнак, Габбасово, Мазитово, Нижний Муйнак, Нижняя Акберда, Средний Муйнак, Умбетово, Башкирская Ургинка, Ургин, Новопетровское, Русская Ургинка, Ишемгул, Центральной усадьбы совхоза Иняк, Калимуллино, Караберда, Кузебеково, Назарово Первое, Новониколаевка, Арсеново, Центральной усадьбы Сакмарского свх, Арсёново, Назарово, Валишино, Тирякле, Фермы 4 Сакмарского свх, Богдановка, Кинзябулатово, Кугарчи, Малый Муйнак, Худабандино, Аккундуз, Биккужа, Верхний Сарабиль, Луч, Малое Байдавлетово, Нижний Сарабиль, Идяш, Лукьяновский, Утягулово, Юнаево, Башкирский Бармак, Верхнее Мамбетшино, Кужанак, Кызылярово, Георгиевский, Нижнее Мамбетшино, Яныбаево, Абзаново, Аютово, Новопавловка, Янги-Юл, Биштиряк, Казанка, Идельбаково, Тазларово, Хасановский, Новые Чебенки, Бикберда, Таулыкай, Яргаиш, Юлдаш, Иткулово, фермы N 3 Сакмарского совхоза, Фермы N 3 Сакмарского свх, Абзановский, Абуляисовский, Баишевский, Байдавлетовский, Бикбауский, Исянгуловский, Казанбулакский, Каргалинский, Кужанакский, Муйнакский, Новопетровский, Новочебенкинский, Сакмарский, Суренский, Тазларовский, Утягуловский, Яныбаевский, Иглинский, Иглино, Ягодная, Госпитомник, Красный Ключ, Петрово-Федоровка, Петрофедоровск, Еленинский, Калтыманово, Алаторка, Баранцево, Верный, Калининское, Кировское, Кировский, Новая Березовка, Новоберезовка, Пушкинское, Фрунзе, Ясная Поляна, Шакша, Шакшинка, Ивано-Казанка, Асканыш, Братский, Поступалово, Родники, Слутка, Шипово, Охлебинино, Мончазы, Турбаслы, Акбердино, Амитово, Бибахтино, Блохино, Карамалы, Старый Юрмаш, Балтика, Буденновский, Буденный, Загорское, Ленинское, Ленинск, Субакаево, Кальтовка, Ворошиловское, Ворошиловка, Коммунар, Кузнецовка, Ленинский, Новосимское, Новосимка, Ольгинское, Первомайское, Петровское, Юремис-Надеждинское, Юремис Надеждино, Чкаловское, Минзитарово, Кляшево, Сарт-Лобово, Сарт Лобово, Старые Карашиды, Уктеево, Пятилетка, Булан-Турган, Булан Турган, Старая Кудеевка, ж/д будка 1688 км, Октябрьское, Социалистический, Тикеево, Чуваш-Кубово, Чуваш Кубово, Куршаки, Новокубово, Старокубово, Чуваши, Песчано-Лобово, Лобовка, Тавтиманово, Авангард, Ключевское, Ключевский, Кушкуль, Новотроицкое, Покровск, Спасское, Урожай, Кудеевский, Ауструм, Богдановское, Вознесенка, Заветы Ильича, Искра, Преображенка, Симское, Урман, Улу-Теляк, Кузнецовский, Фаткуллино, Шуктеево, Шухтеево, Кирова, Высокая, ж/д будка 1705 км, Майский, Амирово, Подольский, Расмикеево, Ресмикеево, Суражский, Суражск, Нижние Лемезы, Манагора, Тау, Ташлы-Елга, Ташлы Елга, Улу-Елан, Улу-Ялан, Красный Восход, Ашинский, Веселый, Рассвет, ж/д будка 1712 км, Казаяк-Хуснуллино, Орловка, Устюговка, Черный Ключ, Тюлько-Тамак, Тюлько Тамак, Казаяк, Рзд Казаяк, Мамаевка, Лемеза, ж/д будка 1708 км, Шеланы, Улу-Карамалы, Преображенская, Балажи, Резвово, Урунда, Белорецк, Новобакаево, Малая Ашинка, 1719 км, Новоуфимск, Казаяк-Кутуш, Родниковая, Акбердинский, Ауструмский, Балтийский, Ивано-Казанский, Калтымановский, Кальтовский, Красновосходский, Лемезинский, Надеждинский, Охлебининский, Тавтимановский, Уктеевский, Улу-Телякский, Урманский, Чуваш-Кубовский, Черноземельский, Комсомольский, Адык, Артезиан, Ачинеры, Кумской, Нарын Худук, Прикумский, Сарул, Буровой, Андратинский, Светлый Ерек, Радужный, Теегин Герл, Меклята, Яковлево, Чанта, Рыбачий, Кек Усн, Чапчачи, Шин Тег, Цува, Рагульский, Майхара, Булмукта, Дружный, Раздольный, Маныч, Мелиоратор, Халтрин Бор, Лагань, Озерный, Прилузский, Объячево, Архиповка, Бедьвож, Беляевская, Берёзовка, Березники, Ваймес, Ваймос, Векшор, Велдоръя, Верхняя Седка, Верхолузье, Вухтым, Гостиногорка, Гуляшор, Гурьевка, Гыркашор, Загарская, Занулье, Изъяшор, Колобово, Коржинский, Корольки, Крутотыла, Кыддзявидзь, Кыддзявидз, Летка, Лёхта, Ловля, Лойма, Малая Беберка, Маловыльгорт, Мишаково, Мутница, Нижний Лунвож, Ношуль, Оброчная, Оньмесь, Орысь, Остаповская, Пожемаяг, Прокопьевка, Ракинская, Слудка, Спаспоруб, Тарачево, Талица, Тыдор, Тылай, Ударник, Ула, Урнышевская, Усть-Лопъю, Чекша, Черёмуховка, Чернушка, Чёрныш, Читаево, Якуньёль, Анкерская, Вотинская, Галахтионовская, Гарь, Запольская, Ивановская, Карповская, Козловская, Кузнецовская, Матвеевская, Тарасовская, Тарбиевская, Уркинская, Тупеговская, Калининская, Ожындор, Паневская, Паневский, Пожмадор, Вавиловка, Лихачевская, Сидор-Чой, Сэпсикт, Яковлевская, Осиновка, Поромшор, Климовская, Лукинчи, Керос, Кулига, Мехбаза, Ручпозъя, Кулига (Слудский с/с), Ураки, Керес, Плёсо, Поруб, Поруб-Кеповская, Крысовка, Моздокский, Веселое, Веселовское, Виноградное, Киевское, Кизляр, Луковская, Малгобек, Нижный Малгобек, Нижний Малгобек, Ново-Осетинская, Новоосетинская, Павлодольская, Предгорное, Притеречный, Раздольное, Сухотское, Терская, Хурикау, Тельмана, Тельман, Ново-Георгиевское, Новогеоргиевское, Комарово, Черноярская, Мирный, Дружба, Елбаево, Елбаев, Советский, Л.Кондратенко, Луковский, Осетинский, Осетинская, Кусово, Теркум, Моздок-2, Малый Малгобек, Мальый Малгобек, Моздок, Казань, Большие Дербышки, Борисково, Брикетный, Левченко, Петровский, Азино, Аки, Акинская поляна, Алтан, Аметьево, Большие Клыки, Борисоглебское, Бутырки, Водозабор, Водорем 42, Вознесенское, Воровского, Гаремовский, Голубое Озеро, Горки, Грабаровский, Дальний, Дружбы, Займище, Залесный, Индивидуальный, Кадышево, Калинина, Каймары, Калуга, Карьер, Киндери, Красно-октябрьское Лесничество, Куземетьево, Кульсеитово, Леваневского, Макаровка, Малые Клыки, Малые Дербышки, Мастерские ПРММ, Нагорный, Нефтяников, Новая Сосновка, Новая Стройка, Новое Юдино, Ново-Караваево, Новониколаевский, Нокса, Парижской Коммуны, Птицефабрика, Савиново, Санаторий Крутушка, Свердлова, Светлое Озеро, Семиозерка, Слобода Гривка, Слобода Кызыл-Армейская, Слобода Кизическая, Совхоз 5, Совхоз Северный, Совхоз Юдино, Старое Аракчино, Станция переливания крови, Строителей, Суворовское училище, Тихий, Юдино, ЦРМ, Царицыно, Урицкого, Шигали, Щербаково, Яшь-Кечь, Путевая машинная станция 455, Путевая часть 21, Стройдвор 2, Строймонтаж, Большие Отары, Восточный, Зеленый, Крутовка, Кукушкино, Малые Отары, Плодопитомник, Семхоз 16, Семхоз 17, Совхоз Озерный, Учхоз, Салмачи, Отары, Старое Победилово, Белянкино, Константиновка, Самосырово, Чебакса, Чернопенье, Усть-Абаканский, Усть-Абакан, Ах-Хол, Баинов, Бейка, Вершино-Биджа, Весеннее, Доможаков, Ербинская, Зеленое, Имени Ильича, Калинино, Камызяк, Камышовая, Капчалы, Кирба, Ковыльная, Красноозерное, Курганная, Московское, Мохов, Оросительный, Райков, Расцвет, Салбык, Сапогов, Солнечное, Тазьмин, Ташеба, Тигей, Трояков, Тутатчиков, Уйбат, Усть-Бюр, Хоных, Чапаево, Чарков, Шурышев, Калинино-2, Тепличный, Сахарный, Заря, Вершино-Биджинский, Сорск, Весенненский, Доможаковский, Московский, Опытненский, Райковский, Расцветовский, Сапоговский, Солнечный, Усть-Бюрский, Чарковский, Вурнарский, Вурнары, Абызово, Авруй, Азим-Сирма, Айгиши, Алгазино, Альмень-Сунары, Альменево, Анаткас-Абызово, Апнеры, Артеменькино, Большие Торханы, Большие Хирлепы, Большие Яуши, Булатово, Буртасы, Волонтер, Вурман-Кибеки, Вурманкасы, Елабыш, Ермошкино, Ершипоси, Илдымкасы, Ишлей, Кадыши, Киберли, Кивсерт-Мурат, Кивсерт-Янишево, Кивьялы, Кожар-Яндоба, Кожиково, Кольцовка, Кошлоуши, Кошлауши, Кукшум, Кумаши, Кумбалы, Кюльхири, Кюмель-Ямаши, Кюстюмеры, Лесные Шигали, Малды-Кукшум, Малдыкасы, Малые Яуши, Мамалаево, Мачамуши, Мулакасы, Мунъялы, Напольное Тугаево, Новые Яхакасы, Одиково, Ойкас-Яндоба, Ойкас-Яуши, Ойкас-Кибеки, Ойкасы, Орауши, Ослаба, Пайки, Пинер-Айгиши, Пуканкасы, Рунги, Санарпоси, Сендимиркино, Синь-Алдыши, Синьял-Яуши, Синьялы, Старые Шорданы, Старые Яхакасы, Сугут-Торбиково, Сявалкас-Хирпоси, Сявалкасы, Тимерчкасы, Тувалькино, Тузи-Мурат, Тузи-Сярмус, Тюлюкасы, Тюмбеки, Усландыр-Янишево, Усландырь-Янишево, Хирпоси, Хора-Сирма, Хорапыр, Хорн-Кукшум, Хумуши, Чалым-Кукшум, Чаркли, Чиршкас-Мураты, Чирш-Хирлепы, Чириш-Шинеры, Шинеры, Шоркасы, Эпшики, Ямбахтино, Янгорчино, Янишево, Хорнзор, Синь-Сурьял, Зеленовка, Апнерка, Авыр-Сирмы, Талхир, Азимсирминское, Алгазинское, Апнерское, Большеторханское, Большеяушское, Буртасинское, Вурманкасинское, Вурнарское, Ермошкинское, Ершипосинское, Кольцовское, Малояушское, Ойкас-Кибекское, Санарпосинское, Сявалкасинское, Хирпосинское, Шинерское, Солонешенский, Солонешное, Ануйский, Барсуково, Березово, Большая Тихая, Быстрый, Демино, Елиново, Лютаево, Матвеевка, Медведевка, Новая Жизнь, Партизанский, Рыбное, Сибирячиха, Степное, Тальменка, Тележиха, Тог-Алтай, Топольное, Туманово, Чапаевский, Чегон, Черемшанка, Юртное, Ангелинский, Андреевская, Бельчанский, Бойкопонура, Васильевка, Греки, Гречаная Балка, Гривенская, Гришковское, Джумайловка, Долиновское, Журавлевка, Зареченское, Лебеди, Малаи, Масенковский, Могукоровка, Мащенский, Новониколаевская, Пригибский, Рашпили, Редант, Рогачевский, Северный, Старовеличковская, Степной, Кущевский, Кущевская, Алексеевское, Большая Лопатина, Благодатный, Благополученский, Братское, Водяная Балка, Водянский, Гудко-Лиманский, Глебовка, Гослесопитомник, Заводской, Звездочка, Знамя Коммунизма, Ивано-Слюсаревское, Иванослюсаревское, Ильинское, Исаевский, Картушина Балка, Кисляковская, Красная Заря, Красная Поляна, Красная Слободка, Красное, Красный, Крутоярский, Кубанец, Лопатина, Новоивановское, Новобатайский, Нардегин, Нижнеглебовка, Нижняя Глебовка, Нововысоченский, Нововысочинский, Новомихайловское, Новостепнянский, Новый Урожай, Объездная Балка, Осенний, Пионер, Подшкуринский, Полтавский, Полтавченское, Пролетарский, Ровный, Семеновка, Серебрянка, Средние Чубурки, Таврическое, Тауруп Первый, Таурупп Первый, Тауруп Второй, Таурупп Второй, Федорянка, Цукерова Балка, Чекуновка, Шкуринская, Кисляковка, Усть-Лабинский, Александровский, Безлесный, Болгов, Вимовец, Воровский, Воронежская, Восточная, Двубратский, Железный, Кадухин, Кирпильская, Кубанский, Ладожская, Неелинский, Некрасовская, Новоекатериновка, Новолабинская, Новоселовка, Огонек, Пятихатский, Саратовский, Свободный, Северский, Семенов, Семеновский, Согласный, Суворовское, Тенгинская, Финогеновский, Херсонский, Потаенный, Сокольский, Усть-Лабинск, Няндомский, Анташиха, Абатурово, Большой Двор (Воезеро), Бор, Боровская, Бурачиха, Васильевская, Шипаховский, Великая Речка, Холмолеево, Гавриловская (Лимь), Гора, Грудиха, Междудворье, Заболотье-1, Заозерный, Зарученье, Зеленевская, Ивакша, Казаковская, 23-го квартала, Кипровская, Корехино, Котовская, Курниково, Курья, Лельма, Лепша-Новый, Логиновская, Макаровская, Мальшинская, Новая, Петариха, Новая Икса, Полоха, Поповская, Пустарево, Пустырево, Солюга, Ступинская, Тарза, Федосеевская, Шестиозерский, Шожма, Погост (Воезеро), Лепша, Шалакуша, Алексеевская, Бережная, Большая Орьма, Большое Матьзеро, Большой Двор (Моша), Бряшниха, Будринская, Вахрамеиха, Вельская, Верховье, Верхотина, Волковская, Гавриловская, Горевская, Горка (Воезеро), Горка, Горка Грехнева, Горка Дуплева, Григорьевская, Гридино, Гришинская, Даниловская, Дровневская, Заболотье-2, Задняя, Занаволок, Ивашково, Ившинская, Икса, Ильинский Остров, Климушина, Конда, Кондратовская, Конинская, Кривцы, Кстово, Кувшиниха, Кузьминская, Кулемиха, Кырчема, Лобановская-1, Лобановская-2, Лужная, Лупачиха, Макаров Двор, Малое Матьзеро, Малая Орьма, Манушкин Остров, Мартевская, Милехинская, Монастырский Остров, Мостовая, Наволок, Наумовская, Нестеровская, Низ, Низ (Воезеро), Низ (Канакша), Никоновская, Ореховская, Ортевская, Осковская, Остров, Павловская, Пал, Пархиева, Пигинская, Погост, Подлесная, Поздеиха, Полинская, Проково, Ручей, Рябово-Матьзеро, Савинская, Село, Сибирь, Сидорова Гора, Сафонова Гора, Суегра, Тарасово, Торновская, Турлаевская, Тухачиха, Федотовская, Федьковская, Филипповская, Фофаново, Холопье, Хомкино, Шернинская, Шолга, Шултус, Юдинская, Дом отдыха Озерки, Демьяновская, Еремеевская, Охтома, Лещево, Мартыновская, СОТ Озерки, СОТ Дружба, СОТ Строитель, СОТ Рябинка, СОТ Сельский, Няндома, Каргополь-2, Мглинский, Авраменков, Антоненков, Беловодка, Бобрец, Борец, Борщов, Бурчак, Бушевщина, Быковка, Василевка, Великая Дуброва, Великий Бор, Вельжичи, Велюханы, Ветлевка, Владимировка, Водославка, Войтовка, Вормино, Воробьевка, Высокое, Вьюнище, Гапоновка, Голяковка, Гриневка, Деремна, Дивовка, Дуброва, Дунаевщина, Еловец, Ельники, Зайцовка, Заречье, Зеленый Гай, Зимодровка, Красный Источник, Источник, Кабановка, Кадецк, Корунский, Католино, Кипти, Киселевка, Красная Ковалиха, Кокоты, Колодезки, Конопаковка, Косенки, Красногорки, Красные Косары, Крымок, Курчичи, Лайковка, Ленинский Уголок, Лещовка, Лещевка, Липки, Луговец, Луговка, Лукавица, Ляховка, Малая Деременка, Первое Мая, Мглинщина, Медведьки, Молодьково, Нетяговка, Нижняя Дуброва, Новая Романовка, Новые Чешуйки, Осколково, Парфеновка, Передовик, Петьково, Подгаев, Подгаево, Полховка, Помазовка, Попелевка, Поповка, Портники, Пугачевка, Разгонов, Разрытое, Резуновщина, Репище, Рудня, Санники, Седки, Селянка, Семки, Симонтовка, Слобода, Соколовка, Старая Романовка, Старые Чешуйки, Трусовка, Филоновка, Халимонки, Хомяковка, Харновка, Хорновка, Хоружовка, Цинка, Черновица, Черноводка, Черноручье, Шеверды, Шелудьки, Шимановский, Шумарово, Шутиловка, Ясенок, Ястребец, Шабловка, Мглин, Мглинское городское поселение, Беловодское сельское поселение, Вельжичское сельское поселение, Ветлевское сельское поселение, Краснокосаровское сельское поселение, Новоромановское сельское поселение, Осколковское сельское поселение, Симонтовское сельское поселение, Соколовское сельское поселение, Новочешуйковское сельское поселение, Молодьковское сельское поселение, Высокское сельское поселение, Шумаровское сельское поселение, Тотемский, Великий Двор (Толшменское МО), Данилов Починок, Кудринская, Матвеево, Медведево, Мосеево (Пятовское МО), Никольское, Погорелово, Маныловский Погост, Пятовская, Середская, Устье, Маныловица, Текстильщики, Боярское (Толшменское МО), Брагинская, Быково, Фоминское, Камчуга, Село (Толшменское МО), Чуриловка, Климовская (Калининское МО), Нелюбино, Якуниха, Ивакино, Великий Двор (Великодворское МО), Горбенцево, Царева, Федоровская, Усть-Еденьга, Княжиха, Савино, Мыс, Слободино, Таборы, Черняково, Угрюмовская, Великий Двор (Мосеевское МО), Мясокомбината, Мясокомбинат, Осовая, Исаево (Вожбальское МО), Успенье, Ваулово, Голебатово, Дор, Ермолица, Купеково, Лучкино (Толшменское МО), Нефедьево, Подол, Предтеча, Синяково, Фролово, Чертовское, Юренино, Внуково, Воронино, Давыдиха, Красный Бор, Нефедиха, Подлипное, Антушево, Бережок, Гагариха, Гридинская (Вожбальское МО), Давыдково, Завражье, Залесье (Вожбальское МО), Захаровская, Илюхинская, Крутая Осыпь, Лодыгино, Маринская, Мишуково, Никитинская, Паново, Пахтусово, Семеновская (Вожбальское МО), Сергеево, Сродино, Тельпино, Чешинская, Шулево, Ярцево, Марьинская, Мелехов Починок (Мосеевское МО), Мелешово, Никитин Починок, Гридинская (Калининское МО), Екимиха, Зуиха, Игначево, Исаево (Калининское МО), Кашинское, Козловка, Конюховская, Коровинская, Левинское, Ленино, Лукинская, Максимовская, Останинская (Калининское МО), Перевоз, Петухово, Радчино, Рязанка, Село (Калининское МО), Сластничиха, Засека, Манылово, Соколово, Черепаниха, Кормакино, Куземкино, Федотово, Ляпино, Поселки, Горелая, Заборная, Запольная, Колупаиха, Коченьга, Лобаниха, Неклюдиха, Слуда, Совинская, Тихониха, Филинская (Медведевское МО), Бобровица, Горка (Мосеевское МО), Дягилево, Зыков Конец, Кожинская, Кондратьевская, Лучкино (Мосеевское МО), Мосеево (Мосеевское МО), Филяково, Фоминская, Холкин Конец, Часовное, Леваш, Нижняя Печеньга, Аникин Починок, Воротишна, Галкино, Казаково, Камешкурье, Климовское (Толшменское МО), Круглица, Кузнечиха, Левино, Лобаново, Починок, Пузовка, Родионово, Ручей Лубянка, Сафониха, Синицыно, Суровцово, Терентьевская, Трызново, Тупиковицы, Фатьянка, Филино, Френиха, Холм, Хреново, Широбоково, Шульгино, Боярское (Погореловское МО), Горка (Погореловское МО), Залесье (Погореловское МО), Комарица, Косновица, Котельное, Мальцево, Маслиха, Петрилово, Подгорная, Родная, Светица, Семенково, Топориха, Фроловское, Юбилейный, Варницы, Ветстанция, Ворлыгино, Воробьево, Выдрино, Галицкая, Глубокое, Дедов Остров, Десятина, Ивойлово, Княжая, Лесниково, Лось, Лунево, Малая Поповская, Молоково, Подстанция Тотьма-2, Останинская (Пятовское МО), Притыкино, Малая Семеновская, Усть-Царева, Углицкая, Чаловская, Чоботово, Энергетиков, Антушева Гора, Великодворская, Вершининская, Гавшино, Жаровский Погост, Концевская, Пелевиха, Петрищева Гора, Слободка, Снежурово, Уваровская, Филинская (Мосеевское МО), Большой Горох, Любавчиха, Ухтанга, Зайцево, Лом, Карица, Гремячий, Пустошь, Большая Семеновская, Тотьма, Великодворское, Великий Двор, Вожбальское, Исаево, Гридинская, Залесье, Останинская, Медведевское, Филинская, Мосеевское, Мсеевское, Мосеево, Мелехов Починок, Толшменское, Боярское, Погореловское, Пятовское, Панинский, Панино, свх Михайловский 1 отделение, Тойда 1-я, Племзавод Тойда 1 отделение, Тойда 2-я, Племзавод Тойда 2 отделение, Агарков, Александровка 2-я, Алексеевка (Красноновское с/п), Алое Поле, Большой Мартын, Большие Ясырки, Барсучье, Березняги, Богородицкое, Борщево, Верхняя Катуховка, Георгиевка, Ивановка 1-я, Икорецкое, Казиновка, Козьминский, Калмычек, Катуховские Выселки 2-е, Красные Холмы, Красный Лиман, Красный Лиман 1-й, Красный Лиман 2-й, Криуша, Криушанские Выселки 1-е, Малый Мартын, Первомайского отделения конезавода N11, Малые Ясырки, Марьевка, Мировка, Михайловка 1-я, Михайловка 2-я, Нащекинские Выселки, Никольское 1-е, Никольское 2-е, Новоалександровка, Новоданковский, Новоепифановка, Новохреновое, Отрада, Пады, Партизан, свх Первомайский, Перелешино, Перелешинский, Пылевка, Росташевка, Софьинка, Тарасовка, Тойда, Тойденский, Усманские Выселки, Хавенка, Хитровка, Чернавка, Шанинский, Шарко-Бакумовка, Щербачевка, Капканчиковы Дворики, Племсовхоз Победа Октября 3 отделение, Комсомольское, свх Михайловский 2 отделение, Мичуринский, свх Михайловский 3 отделение, Тимирязевский, свх Михайловский 4 отделение, свх Михайловский 5 отделение, Политотдельский, Алексеевка (Перелешинское г/п), Конезавод N11 Первомайское отделение, свх Петровское отделение, Новопокровка, Гусевский, Брянское, Двинское, Еловое, Жаворонково, Жигули, Ивашкино, Ильино, Каспийское, Костино, Красногорское, Краснополье, Кубановка, Лермонтово, Липово, Ломово, Лощинка, Майское, Маяковское, Междуречье, Михайлово, Мичуринское, Мишкино, Новостроевка, Новостройка, Ольховатка, Очаково, Подгоровка, Поддубы, Покровское, Приозерное, Пролетарское, Синявино, Таманское, Фурманово, Яровое, Ясное Поле, Гусев, Дзержинский, Барсуки, Дворцы, Дурнево, Жилетово, Звизжи, Карцово, Кожухово, Куровской, Льва Толстого, Маковцы, Острожное, Плюсково, Полотняный Завод, Пятовский, Редькино, Сени, Старки, Товарково, свх Чкаловский, Осеньево, Огарево, Каравай, Потапово, Барятино, Батуево, Бели, Беляйково, Богданово, Бойково, Болобоново, Буланцево, Васильевское, Вертебы, Волохово, Гамышево, Горбенки, Головино, Городище, Грибаново, Груздовка, Дерминка, Дорохи, Дубенки, Дубинино, Дюкино, Дятьково, Екимково, Ерино, Железцово, Желтыкино, Жильнево, Завалины, Заполье, Захарово, Камельгино, Косатынь, Кашенки, Кирьяново, Колышево, Кольцово, Копоня, Копылово, Корокино, Корчажкино, Косово, Костиково, Крутицы, Крыцыно, Крюково, Куровское, Ладово, Лапино, Ларинское, Латышево, Лопатино, Лычево, Люблинка, Малое Болынтово, Макарово, Малиновское, Матово, Меленки, Мишнево, Мурзино, Недетово, Никола-Ленивец, Новое Уткино, Новоскаковское, Носыкино, Обухово, Пановка, Пахомово, Петрушино, Покров, Ползино, Росино, Рындино, Свинухово, Смагино, Старое Уткино, Староскаковское, Темново, Товарково 1-е, Троскино, Тучнево, Хлестово, Совхоз им Ленина, Чапаевка, Чуносово, Шадеево, Шестаково, Шеняно-Слобода, Щуплово, Юдинки, Якшуново, Ярлыково, Озеро, Прокудино, Прудново, Давыдово, Лужное, Антоново, Амур-Ключ, Адамовское, Бабенки, Акатово, Акишево, Большое Болынтово, Карамышево, Андреевское, Андреевка, Субботино, Карловка, Бышковичи, Колышкино, Никулинки, Девятилово, Куприяново, Озерна, Детьково, Учхоза, Миленки, Шубартовка, Засецкий, О.Слобода, Пруднево, Полотняно-Заводской, Ворсобино, Полевая, Широкая, Садовая, Кондрово, Жиздринский, Авдеевка, Азарьевский, Белые Ямы, Белый Колодец, Березовский, Будылевка, Васюковский, Великое Поле, Верхнее Ашково, Винский, Высокий Холм, Гололобовка, Гремучий Колодец, Гуда, Дальний Фомин, Дедное, Дубище, Дубищенский, Дынное, Зикеево, Иванково, Ильюшенка, Кленки, Совхоз Коллективизатор, свх Коллективизатор, Комиссаровский, Кондрыкино, Копнов Пруд, Коренево, Коробино, Кресты, Куликово, Кулюшкино, Лиховатка, Лукавец, Луки, Митинка, Младенск, Мужитино, Мурачевка, Нижнее Ашково, Акимовка, Никитинка, Овсорок, Овсорокской, Овсорочки, Огорской Участок, Огорь, Озерская, Озерная, Орля, Ослинка, Павловские Расчистки, Песочня, Петровский Участок, Плотавец, Плужень, Полом, Полюдово, Потье, Прокопенковский, Редьково, Скурынск, Солоновка, Стайки, Студенец, Судимир, Сукремль, Тихоновка, Турьевка, Улемец, Улемль, Щигры, Яровщина, Иночка, Лесоучасток, Озерской, Прогон, Нижняя Акимовка, Верхняя Акимовка, Фомин, Сахарное Поле, Жиздра, Казарма 126 километр, Большие Желтоухи, Бережки, Большие Савки, Буда, Верхняя Песочня, Волое, Выползово, Гавриловка, Дуброво, Малая Песочня, Малые Зимницы, Тягаево, Фоминичи, Шайковка, Якимово, Чужбиновка, Санатория Нагорное, Анновка, Воскресенск, Малые Желтоухи, Малые Савки, Липовка, Тешевичи, Кулаковка, Зимнички, Косичино, Косичено, Примерный, Кузнецы, Ближнее Натарово, Б.Натарово, Леонов Починок, Соломоновка, Пчелка, Мироновка, Коновка, Большое Заборье, Большуха, Малая Большуха, Черная, Бакеевка, Смирновка, Дурино, Голосиловка, Дебря, Дебри, Анисово Городище, Вежи, Ужать, Прудки, Новосельцы, Малиновский, Михалево, Острая Слобода, Раменное, Лосиное, Милеев, Овражек, Ракитня, Глиньково, Дальнее Натарово, Кушляновка, Мамоново, Момоново, Пупово, Синьгово Верхнее, Верхнее Синьково, Верхнее Синьгово, Синьгово Нижнее, Нижнее Синьково, Нижнее Синьгово, Усохи, Устрожино, Винозаводчик, Новоселки, Неполоть, Пробуждение, Сельцы, Нижняя Песочня, Милеево, Зимницы, Нагорное, Дуб, Киров, сдт Сосновый бор, сдт Иночка 2, сдт Березка, СНТ Красная Заря, СНТ Керамик, СНТ Надежда, сдт Восход, СТ Поляна, СТ Радуга, СНТ Иночка, Мариинский, 3747 км, Антибесская, Белогородка, Благовещенка, Бобровский, Большой Антибес, Заборье, Зенкино, Знаменка, Кайдулы, Камышенка, Кийский, Кирсановка, Колеул, Комиссаровка, Красные Орлы, Куркули, Малопесчанка, Мальковка, Малый Антибес, Милехино, Мелехино, Николаевка 1-я, Николаевка 2-я, Обояновка, Пихтовка, Подъельники, Правдинка, Приметкино, Предметкино, Пристань 2-я, Раевка, Рубино, Святогорка, Столяровка, Суслово, Таежно-Александровка, Таежно-Михайловка, Тенгулы, Тонгул, Туйла, Тундинка, Тюменево, Уколь, Чистопольский, Юрьевка, Лесная Дача, 10-й Разъезд, Мариинск, Малмыжский, Аг-Юл, Агельдино, Аджим, Азбаев Ключ, Азелино, Акбатырево, Актюба, Алдарово, Аргыж, Арпорек, Арык, Ахпай, Большая Шабанка, Большой Китяк, Большой Сатнур, Верхний Шугурак, Верхняя, Верх-Гоньба, Веселая Горка, Гари, Гоньба, Дерюшево, Захватаево, Илемас, Илемаска, Каксинвай, Каксинша, Каменный Ключ, Канамаш, Кинерь, Кондаки, Кошай, Куженерка, Кулапинский, Курлово, Кучерга, Малая Кучка, Малая Шабанка, Малый Китяк, Малый Сатнур, Мари-Малмыж, Марс, Марьял, Мелетские Горки, Мелеть, Нижний Шугурак, Новая Коса, Новая Смаиль, Новая Тушка, Ново-Ильинск, Новое Кошкино, Новый Буртек, Новый Ирюк, Новый Кокуй, Новый Малмыж, Нослы, Носок, Носокский Лесоучасток, Пахотная, Перескоки, Пивоварово, Пижинерь, Платынерь, Плотбище, Подосиново, Порез, Поречке Китяк, Постниково, Пукшинерь, Ральники, Рожки, Савали, Салкым-Чишма, Средний Ноныгерь, Старая Коса, Старая Тушка, Старые Бакуры, Старый Бурец, Старый Буртек, Старый Ирюк, Старый Кокуй, Старый Ноныгерь, Сунцово, Тан, Тат-Верх-Гоньба, Троедворка, Троицкий, Удмурт Китяк, Урнек, Хода, Шагабань, Шишинерь, Шурги, Янгулово, Сива, Малмыж, Аджимское, Арыкское, Большекитякское, Каксинвайское, Константиновское, Мари-Малмыжское, Мелетское, Новосмаильское, Плотбищенское, Преображенское, Ральниковское, Рожкинское, Савальское, Староирюкское, Старотушкинское, Тат-Верх-Гоньбинское, Малмыжское городское поселение, Слободской, Абдалы, Абросимовцы, Агеево, Алексеево, Амур, Бабичи, Бажинцы, Бакули, Балабаны, Барамзы, Баталово, Баташи, Бахиево, Башарово, Белая Гора, Белохолуницкий разъезд, Бережане, Бобино, Богомазы, Большие Логуновы, Большие Раскопины, Большие Сколотни, Большое Бузаново, Большое Мышкино, Боровица, Боровые, Боронское, Бочелягино, Будино, Бурино, Бушуевы, Вага, Вареницы, Вахруши, Верстаковщина, Верхнее Мочагино, Верхние Булдаки, Верхние Кропачи, Вершининцы, Воробьи (Бобинское с/п), Воробьи, Воробьи (Стуловское с/п), Воронье, Вотское, Выдринцы, Головизнины, Горская Речка, Дворец, Деветьярово (Бобинское с/п), Деветьярово, Деветьярово (Каринское с/п), Денисовы, Деньгины, Долматовы, Евстрашинцы, Ерусалимы, Ефимовы, Забегаево, Закаринье, Замедянцы, Запиваловы, Зониха, Зотовы, Зяблицы, Зямино, Ившины, Игумново, Илюшинцы, Калининцы, Кардаши, Карино, Карповы, Касаткин Перевоз, Кассины, Качушинцы, Кисели, Клюкино, Ключи, Князевы, Кобляки, Коковино, Колодкины, Коневы, Конец (Сухоборское с/п), Конец, Конец (Шиховское с/п), Копысы, Корюгино, Косолаповы, Красногорье, Круглово, Кузьминек, Курешники, Кусакины, Лапихинцы, Лекма, Летский Рейд, Лопари, Лопаткины, Лубни, Луза, Лутошкино, Ляпуни, Маклаки, Маленики, Малые Касьяны, Малые Логуновы, Малые Раскопины, Малые Серовы, Малые Сколотни, Марковцы, Машкачи, Мезриха, Митино, Митинцы, Митюково, Мишкины, Мокины, Моргуновы, Мяконьки, Навалихины, Нагорена, Нижнее Мочагино, Нижние Булдаки, Нижние Кропачи, Низовцы, Никульчино, Новые Минчаки, Овсянники, Огорельцевы, Одинцы, Озерница, Омсино, Осарт, Осинцы, Пантелеевы, Паскино, Перекоп, Пески, Петрино, Петровы, Петровцы, Пискуны, Подгорена, Подгорное, Подлевские, Подсобное Хозяйство, Попляхи, Пронинцы, Прудовица, Пушкари, Пыреги, Разъезд, Роговое, Рыбопитомник, Рычажное, Усть-Рычажное, Рябины, Савинцы, Салтыки, Самсины, Сапожнята, Светозарево, Селиверстовцы, Семаки, Семенихины, Семеновы, Сидоры, Сизево, Силяновы, Ситники, Скоковы, Слободка (Ильинское с/п), Слободка (Денисовское с/п), Совье, Солдаткинцы, Сорвино, Стеклофилины, Степкины, Столбово, Стрелковы, Стулово, Суворовы, Суднишниковы, Сунцовы (Шиховское с/п), Сунцовы, Сунцовы (Ленинское с/п), Сухоборка, Татауровцы, Тиминцы, Титихинцы, Той-Дой, Тороповщина, Трушковы, Ужоговица, Усолье, Фаришонки, Харинцы, Хлюпинцы, Центральный, Черная Гора, Чижи, Чирки (Шестаковское с/п), Чирки, Чирки (Лекомское с/п), Чирки (Ленинское с/п), Чирковский Завод, Шабалинское, Шамарданово, Широво, Шихово, Шмагины, Шунки, Щуково, Холуново, Юксеево, Яговкино, Ярославль, Бажгалы, Березник, Веселово, Подберезы, Понизовье, Рубежница, Большие Серовы, Турбаза, сдт Березка-3 (Гнусино), сдт Приозерное (Гнусино), сдт Природа-1 (Гнусино), сдт Товарищ (Гнусино), сдт Заречье (Гнусино), сдт Урожайный (Гнусино), сдт Ивушка-2 (д. Богомазы), сдт Эра (д. Богомазы), сдт Машиностроитель (д. Карповы), сдт Карьеры (д. Никульчино), сдт Энергия (д. Шихово), сдт Биохимик-2 (д. Луза), сдт Боровинка-5 (д. Баташи), сдт Шинник-6 (д. Шунки), сдт Энергетик-2 (д. Столбово), сдт Природа (д. Столбово), сдт Зониха-2 (д. Рубежница), сдт Луза (д. Осинцы), а/д Вятка, Межколхозстрой, Успенское, Оглоблино, Соковни, Бобинское, Денисовское, Закаринское, Каринское, Озерницкое, Светозаревское, Стуловское, Сухоборское, Шестаковское, Шиховское, Вахрушевское городское поселение, Выборгский, урочище Зеленая Роща, Бородинское, Возрождение, Гаврилово, Гвардейское, Глебычево, Гончарово, Ермилово, Житково, Кирилловское, Кондратьево, Красная Долина, Красносельское, Красный Сокол, Лесогорский, Лосево, Поляны, Рощино, Селезнево, Соколинское, Токарево, Цвелодубово, Горское, Дымово, Козлово, Маслово, Ояярви, Ручьи, Свободное, Холмово, 21 км, Глубокое(Возрожденская), Дружноселье, Красный Холм, Никифоровское, Сосновая Горка, Ханила, Лебедевка, Толоконниково, Градуево, Овсово, Озерное, Пальцево, Смирново, Вязы, Ключевое, Прибылово, Верхнее Черкасово, Джатиево, Перово, Светлое, Улыбино, Черкасово, Балтийское, Малышево, Барышево, Вещево, Вещево поселок при железнодорожной стан, Гранитное, Зверево, Кузьминское, Торфопредприятие Выборгское, Шлюз Гремучий, 90 км, Заходское, Кирпичное, Лейпясуо, Ровное, Балтиец, Большой Бор, Великое, Луговое, Можжевельниково, Торфяновка, Зеркальный, Камышовка, Камышевка, Краснофлотское, Лужки, Мамонтовка, Мысовое, Озерки(Краснодолинская), Пионерское, Рябово, Тарасовское, Борки, Вишневка(Красносельская), Глубокое(Красносельская), Грибное, Дубки (Красносельская), Климово, Коробицыно, Коробицино, Папортниково, Подгорье, Правдино(Красносельская), Пчелино, Синицино, Староселье, Стрельцово, Боровинка, Земляничное, Озерское, Славянское, Ильичево, Майнило, Симагино, Правдино, Правдино(Лосевская), Краснознаменка, Огоньки, Озерки(Первомайская), Ольшаники, Первомайское 1-е, Решетниково, Чайка, Чернявское, Черняевское, Вишневка(Полянская), Горьковское, Зеленый Холм, Клеверное, Межозерное, Местерьярви, Осетрово, Песочное, Военный, Приветнинский карьер, Приветнинское, Приветнинское 1-е, Сосновый Бор, Санаторий Сосновый Бор, Семашко, Семиозерье, Сопки, Старорусское, Урожайное, Уткино, Брусничное, Буслово, Дубки (Селезневская), Карповка, Кравцово, Кутузово, Лесной Кордон, Липовая Аллея, Лужайка, Придорожное, Раппатилы, Усадище, Яшино, Матросово, Медянка, Попово, Свекловичное, Свердлово, Дятлово, Ландышевка, Черничное, Волочаевка, Ганино, д/о Ленстроитель, Каннельярви, Лебяжье, Нахимовское, Овсяное, Победа, Пушное, Большое Поле, Новинка, Новинки, Отрадное, Подберезье, Подборовье, Чулково, Яппиля, Зимино, Боровое, Надежда(п.Симагино), СТ Надежда(п.Симагино), ЛЭТИ, СТ ЛЭТИ, ЛЭТИец, СТ ЛЭТИец, СТ Преображенское, Светлая Гора, СТ Светлая Гора, Приречное, СТ Приречное, Астра (п.Симагино), СТ Астра(п.Симагино), Учительское, СТ Учительское, СТ Возрождение, Ленинское(п.Симагино), СТ Ленинское(п.Симагино), Алакуль, СТ Алакуль, Аврора, СТ Аврора, Ленгипроречтранс, СТ Ленгипроречтранс, Красная Бавария, СТ Красная Бавария, КЭУЛЕНВО, СТ КЭУЛЕНВО, Бавария, СТ Бавария, Лебяжье(п.Лебедевка), СТ Лебяжье(п.Лебедевка), Виктория(п.Лебедевка), СТ Виктория(п.Лебедевка), Лада, СТ Лада, СТ Лебедевка, Энергетик(п.Лебедевка), СТ Энергетик(п.Лебедевка), СТ Мелиоратор, Белые Ночи, СТ Белые Ночи, Смольнинское, СТ Смольнинское, ТОИР, СТ ТОИР, Сосновый Мыс, СТ Сосновый Мыс, Лесник, СТ Лесник, Автодорожник, СТ Автодорожник, Лебедь-1, СТ Лебедь-1, Речное(п.Лебедевка), СТ Речное(п.Лебедевка), Лебедь-2(п.Лебедевка), СТ Лебедь-2(п.Лебедевка), Лебединое, СТ Лебединое, Автотранспортник, СТ Автотранспортник, Аграрник, СТ Аграрник, Эдельвейс, СТ Эдельвейс, Кровельщик, СТ Кровельщик, Росинка, СТ Росинка, СТ Заречье, Восход(п.Селезнево), СТ Восход(п.Селезнево), Связист(п.Селезнево), СТ Связист(п.Селезнево), Лесная Поляна(п.Селезнево), СТ Лесная Поляна(п.Селезнево), Академическое, СТ Академическое, Березка (п.Вещево), СТ Березка(п.Вещево), СТ Ключи, Лес(п.Вещево), СТ Лес(п.Вещево), Малина, СТ Малина, Витон, СТ Витон, ВИТ, СТ ВИТ, Алгоритм, СТ Алгоритм, Алмаз, СТ Алмаз, Гранит (п.Лужки), СТ Гранит(п.Лужки), Конкурент, СТ Конкурент, Апрель, СТ Апрель, Омега, СТ Омега, Березовая Роща (п.Зеленая Роща), СТ Березовая Роща(п.Зеленая Роща), Улисс, СТ Улисс, Система, СТ Система, СТ Зеленая Роща, ВермаЛТД, СТ ВермаЛТД, Родник(п.Зеленая Роща), СТ Родник(п.Зеленая Роща), Ручей(п.Зеленая Роща), СТ Ручей(п.Зеленая Роща), Приморье-2, СТ Приморье-2, Приморье, СТ Приморье, Зеленые Поляны, СТ Зеленая Поляна, Зеленая Поляна, Тигода, СТ Тигода, Роща, СТ Роща, СТ Боровое, Парнас, СТ Парнас, Курортное, СТ Куортное, Куортное, Буревестник, СТ Буревестник, Булат, СТ Булат, Строитель(п.Лейпясуо), СТ Строитель(п.Лейпясуо), Смена(п.Лейпясуо), СТ Смена(п.Лейпясуо), Глубокое(п.Лейпясуо), СТ Глубокое(п.Лейпясуо), Карелия(п.Лейпясуо), СТ Карелия(п.Лейпясуо), Флора(п.Лейпясуо), СТ Флора(п.Лейпясуо), Металлист(п.Лейпясуо), СТ Металлист(п.Лейпясуо), Красногвардеец, СТ Красногвардеец, Красногвардейское, Озерное(п.Лейпясуо), СТ Озерное(п.Лейпясуо), Промбурвод, СТ Промбурвод, АЭРО, СТ АЭРО, ЛИСИ, СТ ЛИСИ, Полезный Отдых, СТ Полезный Отдых, Аква, СТ Аква, Корунд, СТ Корунд, Полесье, СТ Полесье, Морстрой, СТ Морстрой, Надежда(п.Мухино), СТ Надежда(п.Мухино), Березка (п.Мухино), СТ Березка, СТ Березка(п.Мухино), Флора(п.Мухино), СТ Флора(п.Мухино), Звезда, СТ Звезда, Актер, СТ Актер, Антракт, СТ Антракт, Квант, СТ Квант, Скиф(п.Мухино), СТ Скиф(п.Мухино), Лебяжье(п.Мухино), СТ Лебяжье(п.Мухино), Озерное(п.Мухино), СТ Озерное(п.Мухино), Акустика, СТ Акустика, Контур, СТ Контур, Утиный Ручей, СТ Утиный Ручей, Поляны(п.Мухино), СТ Поляны(п.Мухино), НИИ Гипроприбор, СТ НИИ Гипроприбор, Завод Геологразведк, СТ Завод Геологразведк, Райпищекомбинат, СТ Райпищекомбинат, Лесовод(Рощ.ЛПХ), СТ Лесовод(Рощ.ЛПХ), Речное, СТ Речное, Ягодное, СТ Ягодное, Солнечное(п.Рощино), СТ Солнечное(п.Рощино), ЛОМО-1, СТ ЛОМО-1, Водник, СТ Водник, Лесное(п.Рощино), СТ Лесное(п.Рощино), Сосновая Поляна, СТ Сосновая Поляна, Эталон, СТ Эталон, Энергетик(п.Рощино), СТ Энергетик(п.Рощино), Коммунальник, СТ Коммунальник, Родник(п.Рощино), СТ Родник(п.Рощино), Строитель(п.Рощино), СТ Строитель(п.Рощино), Лесные Поляны, СТ Лесные Поляны, Кварц, СТ Кварц, Лето(п.Рощино), СТ Лето(п.Рощино), Наука-2(Университет им Ломоносова), СТ Наука-2(Университет им Ломоносова), Красный Октябрь, СТ Красный Октябрь, СТ Горка, Ленпроект, СТ Ленпроект, СПб Морское Собрание, СТ СПб Морское Собрание, Симагинское-2, СТ Симагинское-2, Воронцово, СТ Воронцово, Виктория(п.Симагино), СТ Виктория(п.Симагино), СТ Симагино, Нептун, СТ Нептун, Спутник(свх Ленинский), СТ Спутник(свх Ленинский), Росток, СТ Росток, Славино, СТ Славино, Сабур, СТ Сабур, Симагинское 1-3, СТ Симагинское 1-3, Центр, СТ Центр, СТ Балтиец, Балтика-1, СТ Балтика-1, Ленводхоз, СТ Ленводхоз, Ручей(п.Решетниково), СТ Ручей(п.Решетниково), Ур. Камни, СТ Ур. Камни, Камни, СТ Камни, Полярник-2, СТ Полярник-2, КЭЧ, СТ КЭЧ, Электрик, СТ Электрик, Парус, СТ Парус, Забава, СТ Забава(п.Красный Холм), Забава(п.Красный Холм), Петровское(Военторг), СТ Петровское(Военторг), Родничок(п.Красный Холм), СТ Родничок(п.Красный Холм), Родник(п.Красный Холм), СТ Родник(п.Красный Холм), СТ Петровское(Выборгжилкомхоз), Петровское(Выборгжилкомхоз), Березовая Роща (п.Пальцево), СТ Березовая Роща(п.Пальцево), Зеленая Долина, СТ Зеленая Долина, Блокадник, СТ Блокадник, Ударник(п.Победа), СТ Ударник(п.Победа), Победитель, СТ Победитель, Карелия(п.Победа), СТ Карелия(п.Победа), Весна (п.Победа), СТ Весна(п.Победа), Астра (п.Лейпясуо), СТ Астра(п.Лейпясуо), Ленинское(п.Ленинское), СТ Ленинское(п.Ленинское), Виктория(п.Победа), СТ Виктория(п.Победа), Березка-Выборг, СТ Березка(п.Красный Холм), Березка (п.Красный Холм), СТ Великое, Хуторок(п.Победа), СТ Хуторок(п.Победа), СТ Луговое, Татьяна, СТ Татьяна, Радуга(п.Победа), СТ Радуга(п.Победа), СТ Междуречье, Бор (п.Зеленая Роща), СТ Бор(п.Зеленая Роща), СТ Ключевое, Бриз, СТ Бриз, Леноблпроект, СТ Леноблпроект, СТ Буслово, Корабел, СТ Корабел, Медик-2, СТ Медик-2, Свет, СТ Свет, Весна(п.Лужайка), СТ Весна(п.Лужайка), СТ Приозерное, Воен.ак.им.Можайского, СТ Воен.ак.им.Можайского, Лари, СТ Лари, Лесное(п.Уткино), СТ Лесное(п.Уткино), Солнечное(п.Медянка), СТ Солнечное(п.Медянка), Родник(п.Каннельярви), СТ Родник(п.Каннельярви), Радуга(п.Каннельярви), СТ Радуга(п.Каннельярви), Домостроитель(п.Каннельярви), СТ Домостроитель(п.Каннельярви), Карелия(п.Каннельярви), СТ Карелия(п.Каннельярви), Песчаное, СТ Песчаное, Энергия, СТ Энегрия, Энегрия, СТ Источник, Симагинское, СТ Симагинское, Синули, СТ Синули, Родничок(п.Каннельярви), СТ Родничок(п.Каннельярви), Вишневское, СТ Вишневское, Журналист, СТ Журналист, Волна, СТ Волна, Театр-студия, СТ Театр-студия, Олимпиец, СТ Олимпиец, Восход(п.Толоконниково), СТ Восход(п.Толоконниково), Вуокса(п.Пески), СТ Вуокса(п.Пески), СТ Пески, Акватория, СТ Акватория, Рассказово, СТ Рассказово, Северная Верфь, СТ Северная Верфь, Елочка(п.Матросово), СТ Елочка(п.Матросово), Медик(п.Матросово), СТ Медик(п.Матросово), Фабрика Сайма, СТ Фабрика Сайма, Спартак, СТ Спартак, ВСЗ, СТ ВСЗ, СТ Лазурное, Лазурное, Выб.молкомбинат, СТ Выб.молкомбинат, Славянка, СТ Славянка, СТ Рассвет, Родничок-10, СТ Родничок-10, Сокол, СТ Сокол, Черемушки, СТ Черемушки, Соколинское-3, СТ Соколинское-3, Каравелла, СТ Каравелла, Раздолье, СТ Раздолье, Забава(п.Вещево), СТ Забава(п.Вещево), СТ Луч, Парнасское, СТ Парнасское, Нерудник, СТ Нерудник, Север СКТБ Галс, СТ Север Галс, Север Галс, Сампо, СТ Сампо, Импульс, СТ Импульс, Гранит(п.Гаврилово), СТ Гранит(п.Гаврилово), Надежда(п.Гаврилово), СТ Надежда(п.Гаврилово), Здоровье(п.Гаврилово), СТ Здоровье(п.Гаврилово), Нива-6, СТ Нива-6, Железнодорожник, СТ Железнодорожник, Новоперовское, СТ Новоперовское, Строитель(п.Гаврилово), СТ Строитель(п.Гаврилово), Озерное(п.Глубокое), СТ Озерное(п.Глубокое), Гавань, СТ Гавань, Глубокое Потребобщество, СТ Глубокое Потребобщество, СТ Глубокое-2, Глубокое-2, Смена(п.Глубокое), СТ Смена(п.Глубокое), Гидролог, СТ Гидролог, СТ Глебычево, Гранит(п.Синицыно), СТ Гранит(п.Синицыно), СТ Ясная Поляна, Долина, СТ Долина, Дормост, СТ Дормост, Приветное, СТ Приветное, Дрема, СТ Дрема, Подсобное, СТ Подсобное, Связист(п.Соколинское), СТ Связист(п.Соколинское), Простор, СТ Простор, СТ Дуб, Дубки(п.Селезнево), СТ Дубки(п.Селезнево), Дубки(п.Лужайка), СТ Дубки(п.Лужайка), Зевс, СТ Зевс, СТ Заполье, Поляны(п.Заполье), СТ Поляны(п.Заполье), Рябиновый Сад, СТ Рябиновый Сад, Электроинструмент, СТ Электроинструмент, СТ Малиновка, Солнечное(п.Селезнево), СТ Солнечное(п.Селезнево), СТ Заходское, Звездочка-1, СТ Звездочка-1, Звездочка-2, СТ Звездочка-2, Зеркальное, СТ Зеркальное, Домостроитель(п.Семиозерье), СТ Домостроитель(п.Семиозерье), Фортэкс, СТ Фортэкс, Надежда(п.Семиозерье), СТ Надежда(п.Семиозерье), СТ Семиозерье, Семиозерье-2, СТ Семиозерье-2, Поле-Сад, СТ Поле-Сад, Полянки, СТ Полянки, ФОРТ-ИНО, СТ ФОРТ-ИНО, Кадастр, СТ Кадастр, Полянки-2, СТ Полянки-2, Крона, СТ Крона, Озерное(п.Местерьярви), СТ Озерное(п.Местерьярви), Связист-3, СТ Связист-3, Молодежное, СТ Молодежное, Поляны(п.Тарасово), СТ Поляны(п.Тарасово), Хуторок(п.Тарасово), СТ Хуторок(п.Тарасово), СТ Подгорное, Самара, СТ Самара, СТ Карьер, СТ Кирилловское, Редан, СТ Редан, Пирометр, СТ Пирометр, Надежда(п.Рябово), СТ Надежда(п.Рябово), Лесной Ручей, СТ Лесной Ручей, Скиф(п.Малышево), СТ Скиф(п.Малышево), Конта, СТ Конта, Птицефабрика 50 лет СССР, СТ Птицефабрика 50 лет СССР, НИИ Радио, СТ НИИ Радио, Кристалл, СТ Кристалл, СТ Ландышевка, Лебедь-2(п.Ландышевка), СТ Лебедь-2(п.Ландышевка), Лебедь, СТ Лебедь, Лебяжье(п.Ландышевка), СТ Лебяжье(п.Ландышевка), СТ Рощино, Лето(п.Лужайка), СТ Лето(п.Лужайка), Магистраль, СТ Магистраль, Локомотив, СТ Локомотив, Космос, СТ Космос, Полет, СТ Полет, СТ Смирново, Озерное(п.Смирново), СТ Озерное(п.Смирново), СТ Лужки, Маринино, СТ Маринино, Мик, СТ Мик, Спутник(п.Попово), СТ Спутник(п.Попово), Микро, СТ Микро, Морское, СТ Морское, Мялки, СТ Мялки, Надежда(п.Никифоровское), СТ Надежда(п.Никифоровское), Наука, СТ Наука, Полянского с/с, СТ Полянского с/с, СТ Нахимовское, Озорной Ручей, СТ Озерной Ручей, Озерной Ручей, Сестрорецкое(п.Ольшаники), СТ Сестрорецкое(п.Ольшаники), Ольшанники, СТ Ольшанники, Ольшанники-2, СТ Ольшанники-2, Факел, СТ Факел, СТ Первомайское, Перовское, СТ Перовское, ЛПАВО Русь, СТ ЛПАВО Русь, Ханнила, СТ Радуга(п.Липовка), Радуга(п.Липовка), Радужное, СТ Радужное, Пб.Энергетик, СТ Пб.Энергетик, Сопки-5, СТ Сопки-5, Черная Речка, СТ Черная Речка, Завод Электроприбор, СТ Завод Электроприбор, СТ Сосоновая Горка, Сосоновая Горка, Фармация, СТ Фармация, СТ Сосновый Бор, СТ Улыбино, Хуторок(п.Кирпичное), СТ Хуторок(п.Кирпичное), Цвелодубовец, СТ Цвелодубовец, Совхоз Шестаковский, СТ Совхоз Шестаковский, Лен ОМЗ, СТ Лен ОМЗ, ЛОМО, СТ ЛОМО, Радио, СТ Радио, Бор (п.Прибылово), СТ Бор(п.Прибылово), Якорь, СТ Якорь, Соколинское-5, СТ Соколинское-5, Выборгского Карьеруправления, СТ Выборгского Карьеруправления, Птицевод, СТ Птицевод, Карпикюля, СТ Карпикюля, Озерки, СТ Озерки, Ударник(п.Каннельярви), СТ Ударник(п.Каннельярви), Шувалово, СТ Шувалово, Березовая Долина, СТ Березовая Долина, Сестрорецкое(п.Ленинское), СТ Сестрорецкое(п.Ленинское), Лесная Поляна(п.Яшино), СТ Лесная Поляна(п.Яшино), Репинские Поляны, СТ Репинские Поляны, Лесное(п.Советский), СТ Лесное(п.Советский), Наука и Техника ДПК, ДПК Наука и Техника, Ленметстрой ДСК, ДСК Ленметстрой, ЦНИИ ТС ДСК, ДСК ЦНИИ ТС, Старорусское ДНП, ДНП Старорусское, Белоярское ДНП, ДНП Белоярское, СНТ Красноозерное, Зеркальное ДНП, ДНП Зеркальное, Овсяное ДНП, ДНП Овсяное, Лебяжье ДНП, ДНП Лебяжье, Северное Сияние ДНП, ДНП Северное Сияние, Зеленая Роща-2, СНТ Зеленая Роща-2, Уткина Заводь, СНТ Уткина Заводь, Росинка ДНП, ДНП Росинка, Западное Солнце ДНП, ДНП Западное Солнце, Пальмира ДНП, ДНП Пальмира, Репино-2 ДНП, ДНП Репино-2, Вилла ДНП, ДНП Вилла, Рощинское, СНТ Рощинское, Северное Поместье ДНП, ДНП Северное Поместье, Алакюль ДНП, ДНП Алакюль, Коопхоз Нива СПК, СПК Коопхоз Нива, Озерное СПК, СПК Озерное, Полесье ДНП, ДНП Полесье, Перспектива, СНТ Перспектива, Иван Соколов, СНТ Иван Соколов, Спутник(п.Симагино), СТ Спутник(п.Симагино), Золотые пески ДНП, ДНП Золотые пески, Лазаревка, Пруды, Мухино, Верховский ДНТ, Полет(п.Глебычево), Выборг, Остров Мюллюсаари, Таммисуо, Харитоново, Кангас, СТ Витамин, СТ Механизатор, СТ Сайменские Дачи, СТ Строитель(г.Выборг), СТ Лимонное, СТ Радуга(г.Выборг), СТ Заря, СТ Заря-2, СТ Красный Холм, СТ Выборгский Горисполком, СТ Медик(г.Выборг), СТ Коммунальщик, СТ Лес(г.Выборг), СТ Лужок, СТ Металлист(г.Выборг), СТ Конфа, СТ Дружба-Таммисуо, СТ Дружба(ВПСЗ), СТ Дружба(КУ), СТ Дружба(СМУ), СТ Джатиево, СТ Большой Лог, СТ Авиатор, СТ Березовая аллея, СТ Бытовик, СТ Лесное, СТ Рябиновый мыс, СТ Зеленая горка, СТ Юг, СТ Заречное, СТ Портовик, СТ Связист, СТ Цветущий мыс, СТ Восход ПМК-252, Высоцк, Остров Козлиный, Остров Мощный, Остров Передовик, Пихтовое, Остров Соммерс, Остров Южный Мыс, СТ Высоцкое, Каменногорск, Гранитный Карьер, Кирки, Перевозное, Рябиновый, 38 км, СТ Горняк, СТ Вуокса(г.Каменногорск), СТ Каменногорской фаб. офсетной бумаги, Приморск, Красный Остров, Манола, Карасевка, СТ Ручеек, СТ Ветеран, СТ Лесное(г.Приморск), СТ Елочка(г.Приморск), СТ Рябинка, СТ Вишенка-1, СТ Урожайное, СТ Вишенка-2, СТ Солнечная Полянка, СТ Красное Яблочко, СТ Приморское, СТ Полянка, СТ Звездочка, СТ Сопки, СТ Белый Камень, СТ Смородинка, Светогорск, СТ Светогорский ЦБК, Лебедянский, свх Агроном, Большие Избищи, Большое Попово, Большой Верх, Волотово, Вязово, Грязновка, Докторово, Донские Избищи, Каменная Лубна, Крутое, Куймань, Куликовка, Культура, Нижнебрусланово, Ольховец, Павелка, Павловское, Покрово-Казацкая, Сахарного Завода, Сезеново, Старое Ракитино, Теплое, Троекурово, Хорошовка, Черепянь, Шовское, Яблонево, Буравцева, Губино, Зуево, Иншаковка, Картавцево, Катениха, Курапово, Мокрое, Надеждино, Новое Ракитино, Романово, Савинки, Старый Копыл, Сурки, Томилино, Хмелевка, Волотовские Дворики, Инициатор, Куликовка Вторая, Сибильда, Яблоновая Голова, Волотовские Озерки, Красивая Меча, Вязова Вершина, Сезеново Первое, Красновка, Малые Иншаки, Пушкаро-Кладбищенская, Куликовка Первая, Парлово, Селище, Тихий Дон, Бобыли, Покрово-Инвалидная, Семицкое, Васильевская Пустошь, Мочилки, Новый Копыл, Петровские Выселки, Троекурово Второе, Кочетовка, Бибиково, Осиново, Стрельниковский, Хрущевка, Тютчево, Лебедянь, Чаплыгинский, Архангельское, Батыревский, Большое Петелино, Большой Снежеток, Борщевка, Борщевка-Бурцева, Борщевка Государственная, Братовка, Буховка, Буховое, Буховские Выселки, Ведное, Волхонские Выселки, Воскресенское, Выглядовка, Выселки, Галкинский, Горлово, Городок, Горюшки, Дачный, Дашино, Демкино, Демкинские Выселки, Денисовка, Добровольный, Дубовое, Дуровщино, Епинетово, Жабино, Журавинки, Заново, Зареченский, Заречная, Заречье Ломовое, Зеленый Колодезь, Зорино, Истобное, Каревка, Колыбельское, Конюшки, Конюшковские Выселки, Кривополянье, Кулики, Лапоток, Лисоградка, Лозовка, Ломовое, Майково, Мелеховое, Мураевка, Набережное, Нарышкино, Новое Петелино, Новополянье, Новосеменовка, Ольшанские Выселки, Пасеково, Петелина, Пиково, Протасьево, Ржевка, Рощинский, Руденки, Свиридовка, Скуратовка, Смычка, Солнцево, Соловое, Старое Петелино, Сторожевая, Струглево, Татищево, Топтыково, Тупки, Урусово, Чечеры, Шишкино, Щербинино, Юсово, Ферма, Чаплыгин, Мошенской, Мошенское, Барышово, Броди, Долгое, Дорохово, Дубишки, Жерновки, Кабожа, Красная Гора, Крупино, Лубенское, Меглецы, Ново-Демидово, Новый Посёлок, Ореховно, Осташево, Петрово, Самуйлово, Слоптово, Тимонино, Устрека, Чувашева Гора, Филиппково, Мельник, Александрово, Алексейково, Ананьевское, Анашкино, Андрюшино, Балашово, Базарово, Безгодково, Бельково, Бережок (Долговское с/п), Берёзно, Березно, Березовик, Борисово, Бродино, Былова Гора, Варыгино, Василёво, Василево, Васильево, Васьково, Ватолино, Воротово, Выскидно, Высокогорье, Выставка, Глазово, Глебово, Гоночарово, Горка (Калининское с/п), Горницы, Городищи, Гринева Гора, Гришкино, Гусево, Деревянный Остров, Дерягино, Дмитрово, Дроблино, Ездуново, Ескино, Ефремово, Забелино, Заболотье, Заднее Село, Закарасенье, Заозерицы, Захаркино, Зиновково, Иванова Горка, Ивановское, Игнатьевское, Исади, Каменный Остров, Каплино, Карманово, Климково, Клирошанское, Колчигино, Конищево, Коршиково, Костелёво, Кочерово, Крачи, Крепужиха, Кривцово, Крутец, Кукшево, Курилово, Лаптево, Ласичиха (Кировское с/п), Луханёво, Лыткино, Львово, Лянино, Марково, Матвеево (Кировское с/п), Меглино, Мелехово, Минино, Минькино, Митрошино, Михеево, Морозово, Моисеиха, Нивка, Никифорково, Никифорово, Николаевское, Никулкино, Новое Долгое, Овинец, Новое Окатьево, Олехово, Остратово, Островно, Осипово, Ореховка, Павлицево, Палутино, Парыжиха, Пестово, Пилигино, Платаново, Плоское, Половниково, Поричье, Прибой, Рагозино, Радолец, Рассохино, Раменье, Ратково, Раха, Рогашино, Рыкулино, Рысово, Сбоево, Сельцо, Семёнкино, Семенкино, Сивцево, Сирочье, Скуратово, Слизениха, Слуды, Смолины, Сокирно, Сосонье, Старое Долгое, Стряпово, Сутоки, Тухани, Тушово, Угол, Ульянково, Фалалеево, Фатьяново, Филистово, Фишино, Хирово, Хирцово, Шатрово, Шипино, Чирково, Чуриково, Чучемля, Щитово, Царёво, Юркино, Юхново, Ягайлово, Языкова Горка, Яковищенские Ключи, Яковищи, Яхново, Бережок (Ореховское с/п), Бережок (Чувашевогорское с/п), Лесная Горка, Горка (Кабожское с/п), Гудково, Лисичиха (Ореховское с/п), Лисичиха (Городищенское с/п), Киверево, Горы, Григорово, Ласичиха (Ореховское с/п), Ласичиха (Чувашевогорское с/п), Матвеево (Калининское с/п), Колыванский, Колывань, Амба, Бобровичинск, Бобровиченск, Большая Черемшанка, Большой Оеш, Боярка, Вдовино, Верх-Тоя, Восход, Вьюны, Дальняя Поляна, Ершовка, Изовка, Кандаурово, Королевка, Крутоборка, Лаптевка, Малая Черемшанка, Малый Оеш, Мальчиха, Марчиха, Новоеловка, Новотроицк, Новотырышкино, Орловский, Охотхозяйство Кашламский Бор, Паутово, Паутовский, Пономаревка, Пристань-Почта, Середино, Сидоровка, Скала, Таловка, Тропино, Умна, Усть-Тоя, Хохловка, Чаус, Черный Мыс, Щукино, Южино, Юрт-Акбалык, Юрт-Ора, Охотхозяйство Кашламский бор, Вьюнский, Кандауровский, Королевский, Новотырышкинский, Пихтовский, Пономаревский, Сидоровский, Скалинский, Соколовский, Адикаевка, Алексеевка 1-я, Анучино, Ахматовка, Батрак, Безруково, Бессоновка, Блиновка, Большие Верхи, Варваровка, Владыкино, Вражское, Гаи, Головинщино, Завиваловка, Залесное, Ивенка, Казанская Арчада, Кевда, Кевдо-Мельситово, Кикино, Клейменовка, Ключище, Кобылкино, Колона, Кочалейка, Крыловка, Кувака, Кургановка, Лермонтовский, Львовская Варежка, Максимовка, Мочалейка, Надеждинка, Низовка, Никольская Арчада, Новая Есинеевка, Покровская Арчада, Покровская Варежка, Пустынь, Радуга, Селитьба, Скворечное, Соболевка, Старая Есинеевка, Телятино, Тулытьба, Тухачевский, Усть-Атмис, Центральная усадьба с-за им Калинина, Калинина Центральная усадьба, Ростовка, Головинщинская Варежка, Междуреченский сельсовет, Анучинский сельсовет, Владыкинский, Головинщинский сельсовет, г. Каменка, Кевдо-Мельситовский, с. Безруково, Кикинский, Кобылкинский, Первомайский сельсовет, Покрово-Арчадинский, Цимлянский, Антонов, Богатырев, Дубравный, Железнодорожный, Камышевская, Карнауховский, Карпов, Карповский, Красноярская, Крутой, Кумшацкая, Лозновская, Лозной, Ломовцев, Маркинская, Новоцимлянская, Паршиков, Ремизов, Рынок-Романовский, Рынок-Каргальский, Саркел, Синий Курган, Сосенки, Терновская, Хорошевская, Аксенов, Цимлянск, Шолоховский, Вешенская, Алимовский, Альшанский, Андроповский, Антиповский, Антоновский, Базковская, Безбородовский, Белогорский, Варваринский, Ващаевский, Верхнетокинский, Гороховский, Громковский, Грязновский, Дубровский, Дударевский, Еланская, Затонский, Зубковский, Калиновский, Кобызевский, Колундаевский, Кочетовский, Краснояровский, Кривской, Криушинский, Кружилинский, Лаврова Балка, Лебяженский, Лосевский, Максаевский, Матвеевский, Меркуловский, Моховской, Нижнекривской, Пигаревский, Плешаковский, Поповский, Рубежинский, Рыбинский, Сингиновский, Солдатовский, Солонцовский, Терновской, Ушаковский, Фроловский, Чукаринский, Щебуняевский, Отделения Пролетарское с-за имени Ильича, Отделения Пролетарское свх им Ильича, Аннино, Арсеньево, Барановка, Бекленевка, Большая Дорогинка, Большое Свистово, Бояринцево, Бычки, Ветлечебницы, Ветлечебница, Виленка, Вилки, Отделения им. Калинина с-за Возрождение, Отделения им Калинина свх Возрождение, Волосовка, Волшута, Глинки, Горбатово, Голдино, Горенка, Горностаевка, Горностаевские Выселки, Грязное, Донцы, Дугинка 1, Дугинка 1-я, Дугинка-1, Дугинка 2, Дугинка 2-я, Дугинка-2, Дугинка 3, Дугинка 3-я, Дугинка-3, Елизаветино, Железнодорожная, Ждановка, Жмурово, Завидовка, Зайчино, Заречье 1, Заречье-1, Заречье 2, Заречье-2, Зенино, Змеинка, Иваньково, Ижеславль, Центрального отделения с-за имени Ильича, Ильича, ЦО с-за им Ильича-центр, Центрального отделения свх им Ильича, Кадушино, Каменный Хутор 1, Каменный Хутор 2, Каморино, Карандеевка, Наталинка, Киндяково, Коллектив, Колчево, Конуры, Кораблинка, Коровинского спиртзавода, Костыли, Красная Звезда, Санатория Красное, Санаторий Красное, Красное Городище, Красный Поселок, Кукуй, Курлышево, Леденевка, Лесищи, Лобановские Выселки, Локня, Лубянка, Маково, Маковские Выселки, Малая Дорогинка, Малинки, Малое Свистово, Малое Треполье, Марьино, Машково, Митякино, Центрального отделения совхоза Мишино, Напольные Выселки, Наумовка, Низок, Ничушки, Новая Деревня, Ново-Николаевка, Новое Киркино, Новопанское, Отделения Новопанское с-за Трепольский, Отделения Новопанское свх Трепольский, Отделение Новопанское свх Трепольское, Нюховецкие Выселки, Оболенки, Огибалово, Осовец, Павелково, Печерники, Печерниковские Выселки, Подобреево, Поздное, Покровское 1, Покровское 1-е, Покровское-2, Покровское 2-е, Половнево, Полыновка, Помозово, Поярково, Пролетарская, Проне-Городище, Протасово, Прудская, Прудские Выселки, Прудские Телятники, Рачатники, Розвальнево, Рябцево, Садовый Поселок, Саларьево, Серебрянь, Старое Киркино, Стрелецкие Выселки, Стубле, Сухотино, Тереховое, Тимофеевка, Толмачевка, Трепольский, Феняево, Фирюлевка, Центрального отделения с-за Фрунзенский, Фрунзенский, Центральное отделение свх Фрунзенский, Хавертово, Хрястово, Чесменка, Чурики, Шамово, Шанчерово, Шепелевка, Щеголево, Щетиновка, Челюкановка, Данковка, Электрострой, 10-й год Октября, Классон, Лещенка, Комаревка, Отделения Возрождение с-за Калининский, Отделения Возрождение свх Калининский, Иваньково 2, Гагарино, Бывшей МТС, Центрального отделения совхоза им Ильича, Красная Звезда 2, Михайлов, Александровка 3-я, Анастасьино, Ахтуба, Белые Ключи, Богатовка, Большая Ольшанка, Васильевский, Казачка, Каменный, Ким, Кологреевка, Колокольцовка, Красноармейское, Круглый, Малая Екатериновка, Монастырское, Нижегороды, Новая Ивановка, Новотепловка, Новые Выселки, Петрозавадовка, Радушинка, Салтыково, Сергиевка, Симоновка, Славновка, Совино, Старая Ивановка, Чихачевка, Шалинка, Широкий Уступ, Шклово, Шумаковка, Яснополянское, Варварина Гайка, Варварина-Гайка, Лебедка, Панцыровка, Панцировка, Винница, Екатериновский, Роднички, Березовый, Большие Турки, Кочетов, Кочетово, Кленовые Вершины, Шубинка, Рязановка, Урусовка, Лашевка, Калининск, Александровское МО, Ахтубинское МО, Казачкинское МО, Колокольцовское МО, Малоекатериновское МО, Новоивановское МО, Озерское МО, Свердловское МО, Сергиевское МО, Симоновское МО, Таловское МО, Широкоуступское МО, Марксовский, Баскатовка, Бобово, Бобровка, Бородаевка, Буденовка, Буерак, Водопьяновка, Водопьяновское, Воротаевка, Восток, Звонаревка, Золотовка, Зоркино, Ильичевка, Караман, Кирово, Колос, Кривовское, Луговское, Новая Земля, Новосельское, Орловское, Осиновский, Подлесное, Полековское, Приволжское, Приволжье, Раскатово, Раскатовское, Сухой, Имени Тельмана, Филипповка, Филлиповка, Фрунзенское, Фурмановка, Чкаловка, Яблоня, Ястребовка, Маркс, Зоркинское МО, Кировское МО, Липовское МО, Осиновское МО, Подлесновское МО, Приволжское МО, Тверь, Бобачево, Власьево, Власьево Новое, ДРСУ-2, свх Калининский, Керамического Завода, Константиновка Новая, Константиновка Старая, Красное Знамя, Литвинки, Лоцманенко, 1 Мая, Перемерки Большие, Перемерки Малые, Пролетарский 1-й, Сахарово, Торфо-Брикетного Предприятия, Химинститута, Элеватор, Деревнище, Борихино, Борихино Поле, Бортниково, Баламутово, Батино, Глазково, Дорошиха, Дубровки, Змеево, Загородный, Лазурная, Сакулино, Шаблино, Новое Брянцево, Старое Брянцево, Городское торфопредприятие 2-е, Крупской, Москва-Санкт-Петербург, Абутьково, Аввакумово, Азарниково, Аксинькино, Амачкино, Ананьино, Андрианово, Андрейково, Анисимово, Арининское, Арисково, Аркатово, Асаевские Горки, Астафьево, Афанасьево, Афимьино, Бакшеево, Балаково, Башмаково, Беблево, Бегуново, Беклемишево, Белавино, Беле-Кушальское, Бельцы, Берглезово, Березино, Беседы, Бирюлино, Благодатная, Благодатное, Блиново, Большие Борки, Большие Горки, Большие Селищи, Большое Бесково, Бордино, Борзенево, Боровлево, Бочарниково, Бреднево, Брусилово, Брыково, Брянцево, Букарево, Букстово, Букетово, Бурашево, Буявино, Васильевский Мох, Васильково, Вахново, Вашутино, Великое Село, Вески, Ветлино, Видогощи, Вишенки, Вишняково, Войлово, Волнино, Вологино, Володеево, Володино, Волосово, Волынцево, Всехсвятское, Гильнево, Гинделево, Глездово, Глинково, Гнильцы, Голениха, Голобово, Головачево, Горбово, Городня, Горохово, Горютино, Гостилково, Греблево, Григорьево, Гришино, Гришкино Большое, Гришкино Малое, Гудово, Даниловское, Дачи, Демьяново, Денисово, Дмитрово-Черкассы, Дмитровское, Доборшино, Долгушево, Долматово, Домниково, Доншино, Дорожкино, Дубково, Дуденево, Дуденцы, Дудино, Дьяково, Дягелево, Езвино, Ельзово, Емельянцево, Жданово, Желнино, Жирносово, Жорновка, Заборовье, Заволжский, Заовражье, Заозерье, Захарьино, Захеево, Зеленец, Зиновьево, Зерново, Зинцово, Ивановские Горки, Ивановское Село, Иванцево, Ивашево, Игнатово, Игрище, Иенево, Избрижье, Изворотень, Измайлово, Каблуково, Кадино, Калиново, Калистово, Калошино, Кашино, Кашенцево, Квакшино, Киверниково, Киево, Киселево, Кишкино, Клеопино, Климтино, Княгинькино, Кобячево, Козино, Козлятьево, Коленовка, Коленово, Колесниково, Колталово, Копылево, Кордон, Кордон 14 км, Коробеино, Коробейкино, Костьково, Котельниково, Котово, Кошелево, Красная Новь, Красново, Круплянка, Крупшево, Крутые Горки, Кувшиново, Кузьминка, Кулицкая, Кулицкий Мох Плат., Кумордино, Кунькино, Курганово, Куркино, Курково, Курово, Кустова Сторожка, Кустово, Лебедево, Левково, Левобережная, Лели, Лесная Поляна, Леушино, Лисицы, Литвинцево, Логуново, Лукино, Лукьяново, Любалево, Люшино, Лямово, Лясково, Малая Избрижка, Малое Бесково, Малое Селище, Малые Борки, Малые Горки, Матвеевское, Матеево, Мачехин Конец, Маяк, Медвежье, Медное, Мелечкино, Мельниково, Мерлово, Мермерины, Металлистов, Миснево, Митенево, Митяево, Михайловское, Мозжарино, Моркино Городище, Мотавино, Мухино-Городище, Мятлево, Наквасино, Напрудное, Настасино, Неготино, Нездылово, Нелидово, Непеино, Нестерово, Нешарово, Никола, Николо-Малица, Николо Малица, Никольская Слободка, Никулино, Новая Ведерня, Новая Слобода, Новенькое, Новое, Новое Семеновское, Новое Труново, Новое Чопрово, Новоселово, Новый Городок, Носово, Оздихово, Озерецкое, Олбово, Опарино, Оритово, Орудово, Орша, Осекино, Осинки, Отмичи, Ошурково, Палагино, Палкино, Панигино, Пантелеево, Пасынково, Пенчино, Пепелышево, Первомайские Горки, Перехожее, Перхурово, Пирогово, Писково, Пищалкино, Пищулино, Погорельцы, Поддубки, Поддубье, Подолово, Полубратово, Полукарпово, Полупустошь, Полустово, Полянское, Поминово, Помисово, Пономарьково, Попцово, Порожки, Порядино, Почеп, Починки, Прибытково, Прокофьево, Прудище, Пуково, Пургасово, Путилово, Путиловские Лагеря, Пушкино, Пчельниково, Пяткино, Рагодино, Раслово, Ремязино, Рождествено, Рождество, Рубцово, Ручково, Рылово, Рябеево, Рябинки, Рязаново, Савватьево, Савватьевское лесн-во, Савватьевское Торфопредприятие, Савкино, Садыково, Салыгино, Саматово, Саморезово, Отдельные дома Санатория Черногубово, Сапково, Сбынь, Секирино, Селино, Сельцо-Подъелышево, Сельцо-Троицкое, Семеновское, Сергиевское, Сеславье, Симоново, Синцово, Славное, Смолино, Солодилово, Сотцы, Софьино, Спас На Сози, Спирково, Спичево, Старая Ведерня, Старенькое, Старково, Старое Семеновское, Старое Чопрово, Старый Погост, Степаньково, Стешево, Стрельниково, Стренево, Судимирка, Сухарево, Суховерково, Сухой Ручей, Сушково, Сущево, Табуково, Тальниково, Тверца, Телятьево, Тенешкино, Теребино, Терехово, Тестово, Тешелово, Титово, Тованово, Трестино, Третьяково, Троица, Трояново, Трубино, Труд, Труново, Тряхинькино, Тукинь, Тураево, Тургиново, Турово, Тутань, Ульяново, Устиново, Федоровское, Федосово, Федоткино, Федурино, Фенино, Ферязкино, Фефелово, Филипцево, Хомутово, Хотмирово, Хохряково, Царево, Цветково, Чадово, Черногубово, Чеченино, Чудово, Чуприно, Чуприяновка, Чуприяново, Шалайково, Шапкино, Шепелево, Шернево, Шестино, Шигалово, Шилово, Шипулино, Ширяево, Ширяково, Эммаусская школа-интернат, Шокорово, Шутово, Щекотово, Щербово, Эммаусс, Эммаус, Юрьевское, Якимцево, Якутино, Якшино, Яменское, Ямки, Ямок, Ярково, Ярнево, Каликино, т/б Дорожник, т/б Лисицкий Бор, Базисный Питомник, Фарафоновка, Красная Пресня, Тухинь, Вязьма, Базыкино, Литобоево, Подстанция ОРТПЦ, 110 км Казармы, Охотничья База, Богородское, Отдельные дома Госпиталя Инвалидов Отече, Аэропорт Змеево, Калинин, Бурашевское, Боровлево-1, Боровлево-2, Заволжское, Кедровый, Лушниково, Львовка, Останино, Пудино, Рогалево, Таванга, Березка, Буровик, Нефтяник, Родник, Сибиряк, Огородник, Ефремовский, Анненка, Банное, Белевка, Береговские Выселки, Благодать, Богово, Болотовка, Болоховское, Большая Дубровка, Большая Корчажка, Большая Сухотинка, Большие Медведки, Большие Плоты, Большое Варково, Брыковка, Буреломы, Быстри, Варламовка, Воейково, Воронское, Вязаловка, Голубочки, Горяиново, Греков Хутор, Гремучий, Даровая, Дмитриевка (Тормасовский с/о), Дмитриевка (Лобановский с/о), Домашнево, Дубики, Екатериновка, Елизаветовка, Залесское, Западная Звезда, Запрудинский, Запрудненский, Запрудино, Запрудное, Земледелец, Иванниково, Иноземка, Ишутино, Калакино, Каланчиновка, Каменский (Степнохуторской с/о), Каталовка, Кириловка, Кислинка, Козье, Колодези, Колчи, Коммунаров, Копыловка, Костомарово, Кочергинка, Кочкино, Кочкинские Выселки, Красивый, Красиловка, Красина, Кременный, Крестище, Круглики, Круглое, Кугушевские Выселки, Кытино, Лаврово, Левшино, Лепяги, Лубянки, Малая Корчажка, Малая Косая, Малая Сухотинка, Малая Хмелевая, Малое Варково, Малые Медведки, Машаровка, Медовая, Медунецкое, Мечнянка, Михнево, Им Мичурина, Мордовка, Мосоловский, Натальино, Непрядва, Никифоровский, Николаевка (Ярославский с/о), Новинское, Новое Глотово, Новое Перевесово, Новокрасивое, Новый Двор, Новый Мир, Овсянниково, Октябрьский (Козьминский с/о), 12 Октябрь, 12 лет Октября, Осиновый Куст, Охотский, Павло-Хутор, Павлов Хутор, Поддолгое, Подзайские Выселки, Пожилино, Первые Пожилинские Выселки, Вторые Пожилинские Выселки, Полутово, Прилепы, Пронищево, Раздолье (Кытинский с/о), Раздолье (Степнохуторской с/о), Разнотоповка, Резвяки, Речки, Рогачевка, Сафоновка, Северная Звезда, Серп и Молот, Скороваровка, Слобода Переселенцев, Слободское, Совхозный, Солдатское, Солнцев Хутор, Сретенка, Старая Косая, Старое Перевесово, Степь-Дубрава, Сторожа, Сторожевое, Стрелечья-Поляна, Стрелечья Поляна, Стрельцы, Ступино, Ступинский, Сухая Меча, Теглево, Тормасово, Трифоновка, Тросна, Труженик, Трусово, Туртень, Успенский, Хмелевое, Хомяково, Хорошавка, Чаплино, Челищев Хутор, Ченское, Черенково, Чернятино, Шкилевка, Шумский, Яндовка, Яновка, Ярославка, Ясеновая, Сельхозтехника, Адамовский, Греково, Левшин Лес, Новый двор, Новодворки, Покровка ДРСУ 6, Степной Хутор, Сухотинка, Малая Андреевка, 325 км, 342 км, Подлутово, Казарма 355 км ж/д, Николаевка (Медведский с/о), Октябрьский (Октябрьский с/о), Каменский (Чернятинский с/о), Подзаяцкое, Ефремов, Ефремов-3, Чернышевский, 62 электроподстанция, 90 электроподстанция, 95 электроподстанция, 102 электроподстанция, 156 электроподстанция, 204 электроподстанция, 222 электроподстанция, Тюмень, Матмассы, Матмасы, Верхний Бор, Казарово, ММС, Мелиораторов, Букино, Быкова, Войновка, Гилева, Губкино, Дорожный, Зайкова, Копытова, Суходольский, Тарманы, Электросети, Воронина, Княжево, Метелева, Труфаново, Утешево, Большой Тараскуль, ТМПО Спутник, Плеханова, Учебное Хозяйство Рощино, Березняковский, Малый Тараскуль, Казачьи Луга, Учебное Хозяйство ТВИККУ, Антипино, Автоприбор, Автотранспортник-2, Аккорд, ДНТ Березка, Березняки, Вишенка, Геолог-3, Дизель-91, Жемчужина, Здоровье, Изыскатель, Калинка, Лаванда, Медик, Медик-3, Надежда, Осень, Русское поле, Садовод, Сосенка, Спутник (Центральный р-н), Строитель, Сундукуль, Текстильщик, Тура, Тюменский, У озера, Энергетик, Энергостроитель, Юбилейное, Яблонька, Матмасский, Трудовик, Авторемонтник, Аккумуляторщик-1, Весна, Виктория, Колос-1, Колос-2, Колос-3, Колос-4, Ласка, Машиностроитель, Мичуринец, Париж, Универсал, Связист, Спутник (Калининский р-н), Судостроитель, Тараскуль, Труд и отдых, Урожайный, Солнышко, Корабельщик, Мебельщик, Рябинушка, Строитель-1, Сосенка-81, Юбилей, Торфяник-1, Приволье, Энтузиастов, Парфеново, Надежда-2, Агросад-Тюмень, Русь, Солнечная Поляна, Рябинка-2, Автоприбор-2, Газовик, Домостроитель, Березка-3, Электрон, Надежда-3, Зауралец, Металлист, Елочка, Меридиан, Тополя, Тополя-1, Тополя-2, Тополя-3, Тюменец, Березовая роща, Топаз, Ручеек, Рябинка, Янтарь, Изобилие, Дубравушка, Плодовое, Липовый остров, Дорожник, Россиянка, Гвоздика, Золотая Осень, Геолог-1, Бирюсинка, Салют, Ямал, Ивушка, Фиалка, Тополек, Строитель-3, Облепиховое, Зеленый Дол, Сосновая поляна, Моторостроитель, Матрешка, Самотлор, Родничок, Ривьера, Незабудка, Хрустальный, Самоцвет, Меркурий, Светлячок, Суходольный, Петровский остров, Ямбург, Сирень, Приборостроитель, Подорожник, Малинка, Иволга, Сигнал, Автомобилист, Аленький цветочек, Аленький цветок, Верхнеборское, Лесник-2, Энергетик-1, Ясень, Фортуна, Полянка, Виктория-1, Вертолет, Поле чудес-2, Аккумуляторщик -2, Конник, Подмосковье, Радуга-2, Матмасское, Ландыш, Осень-1, Поле чудес, Осень-2, Северное, Яровское, Надежда ВОИ, Муравушка, Урайский, Звенящие кедры Тюмени, Тереньгульский, Тереньга, Алешкино, Байдулино, Белогорское, Большая Борла, Гладчиха, Елшанка, Еремкино, Конный Обоз, Коровинка, Красноборск, Леоновский, Лысогорский, Молвино, Снежинки, Назайкино, Новая Ерыкла, Подкуровка, Риновка, Риновский, Скугареевка, Скрипино, Солдатская Ташла, Старая Ерыкла, Тумкино, Федькино, Ясашная Ташла, Гремячий Ключ, Языково, Ташла, Брединский, Бреды, Амурский, Андреевский, Атамановский, Башкирово, Гогино, Княженский, Коряжный, Мирное, Могутовский, Морозовка, Наследницкий, Новоамурский, Новогеоргиевский, Павловский, Рымникский, Светлые Озера, Синий Шихан, Чека, Байтук, Нагайбакский, Фершампенуаз, Александро-Невский, Арсинский, Арсламбаевский, Астафьевский, Балканы, Березовая Роща, Гумбейский, Копаловский, Кассельский, Крупское, Кужебаевский, Куликовский, Курганный, Куропаткинский, Новочерниговский, Остроленский, Переселенческий, Переселенченский, Подгорный, Придорожный, Рассыпная, Слюда, Требиятский, Чернореченский, Пошехонский, Авдеево, Аверковское, Аганино (Ленинский с/о), Аганино (Кладовский с/о), Агафонково, Алабужево, Александровское, Алексино, Андрианова Слобода, Аниково, Артюково, Ануфриево, Аркино, Афанасово, Бабино, Бабка, Бабкино, Байново, Балахонцево, Бараново, Баркино, Белое, Берендяки, Бобарино, Большая Гарь, Большая Луха, Большая Подзеляница, Большие Ветхи, Большие Городища, Большие Дикуши, Большие Ночевки, Большие Погары, Большие Тышные, Большие Ямы, Большое Мильково, Большой Лом, Бошарово, Браниха, Бродово, Брусничная, Ватагино, Вахрамеево, Вахтино, Верещагино, Владычное, Водогино, Волоково, Вощиково, Выпуки, Высоково (Васильевский с/о), Высоково (Князевский с/о), Гаврилково, Гарь-Игнатова, Гарь-Сога, Гаютино, Гвоздево, Глинник, Глухарево, Голенино, Голодяйка (Гаютинский с/о), Голодяйка (Юдинский с/о), Голубково, Горка (Колодинский с/о), Горка (Ленинский с/о), Горка Ратаевская, Григорово (Ермаковский с/о), Григорово (Погорельский с/о), Гузнево, Давыдково (Красновский с/о), Давыдково (Ленинский с/о), Данилково, Деково, Демихово, Дерменино, Дмитриево, Дмитриевское, Дор-Волков, Дор-Патра, Дор-Согожа, Дорок (Свердловский с/о), Дорок (Юдинский с/о), Дряхлово, Дубасово, Дулово, Дуравка, Дыбино, Дятлы, Евсевьево, Ежово, Екимовские, Елехово, Еремино, Ерилово, Ермаково, Естефеево, Желонка, Желудково, Завидово, Заднево, Займа, Займа (Юдинский с/о), Займа-Новая, Займа-Соболева, Зинкино, Зиновка, Зубарево, Зубариха, Ивановское (Колодинский с/о), Ивановское (Свердловский с/о), Измайлово 1, Измайлово 2, Ильинское (Ленинский с/о), Ильинское (Белосельский с/о), Ильинское (Вощиковский с/о), Каменка-1, Каменка-2, Камчатка, Кардинское, Келарево, Кладово (Вощиковский с/о), Кладово (Кладовский с/о), Климовское (Колодинский с/о), Климовское (Ермаковский с/о), Клин, Княгинино, Коворкино, Козицыно, Козлово (Свердловский с/о), Козлово (Холмовский с/о), Колодино, Колодкино, Колотово, Колыберево, Копнинское, Кордон Тульша, Кордон-Гремиловка, Корино, Корнилово, Коробово, Коровино, Коротыгино, Корса, Косьминское, Крапивна, Красково, Красное (Васильевский с/о), Красное (Красновский с/о), Кременево, Крестцы, Кривое, Криково, Крутец (Приухринский с/о), Крутец (Холмовский с/о), Крутово, Кувырдайково, Курбатово, Кученевка, Кученево, Кучино, Ламанцево, Лапушка, Ларионово, Лесное Петраково, Липино, Липовки, Луковник, Лучкино, Лысково, Ляча, Маклаково, Малафеево, Малая Луха, Малеево, Малинники, Малое Мильково, Малые Ветхи, Малые Городища, Малые Дикуши, Малые Ночевки, Малые Тышные, Малые Ямы, Мальгино, Мартьяново, Маслово (Владыченский с/о), Маслово (Ленинский с/о), Маслово (Колодинский с/о), Матюшкино, Медведка, Меледино, Меньково, Мерлево, Мир, Михалково, Мстишино, Мужиково, Нагинское, Надокса, Назарково, Негановское, Непейно, Никиткино, Николо-Раменье, Никольское (Ермаковский с/о), Никольское (Ленинский с/о), Новленское, Новлинское, Новосветка, Новоселка, Ночкино, Обновленское (Погорельский с/о), Обновленское (Ермаковский с/о), Оборино, Овинчищево, Овчинкино, Ожигино, Окатово, Оконцево, Окулово, Олюгино, Опрячково, Орда, Паново (Юдинский с/о), Паново (Князевский с/о), Панфилка, Панфилово, Патрехово, Патрино, Пачеболка, Пегаскино, Пенье, Пеньково, Петелино, Петраково, Печениково, Пигалево, Плетениха, Плешкино, Плишкино, Плосково (Федорковский с/о), Плосково (Холмовский с/о), Погорелка, Погост Пречистое, Погост-Пятницкий, Погост Пятницкий, Подвязная, Подрелино, Покров-Кештома, Покров-Рогули, Полтинкино, Поповское (Владыченский с/о), Починок (Приухринский с/о), Починок (Юдинский с/о), Починок (Кладовский с/о), Починок-Врагов, Починок-Юрнев, Прислонь, Притыкино (Федорковский с/о), Пустошка, Ракоболь, Ревякино, Репино, Рогуля, Родионка, Рождествено (Ермаковский с/о), Рождествено (Октябрьский с/о), Рум-Заводы, Рум Заводы, Русино, Рыкалово, Рюмки, Савинское, Софроново, Сброднево, Сваруха, Свинариха, Селиверстово, Селища, Селянино, Семенцево, Серговка, Середнево, Симаново (Холмовский с/о), Симаново (Васильевский с/о), Скоково, Смешково, Смильково, Созонково, Соколово (Ермаковский с/о), Соколово (Владыченский с/о), Соренжа, Сосновец, Софино, Сохоть, Спас, Старо-Петровское, Старово, Старое Давыдовское, Степанково, Суханово, Сырнево, Тайбузино, Таргобино, Тарсипово, Телешево, Телячьево, Тиманово, Тимино, Тимошино, Тиховка, Толстоухово, Торопихино, Торопово, Трубайка, Убожьево, Ульяновское, Фалелейка, Федорково (Федорковский с/о), Федорково (Белосельский с/о), Федулки, Федяйкино, Фоминское (Холмовский с/о), Фоминское (Колодинский с/о), Фомушино, Харламово, Хмельники, Холм Теплинский, Цыкунино, Чернецкое, Чурсаково, Шаховка, Шигуй, Ширяевское, Ширяйка, Шомино, Шопырево, Щетниково, Щипцово, Юрилово, Юрково, Юрнево, Юрцино, Яковлевское (Ленинский с/о), Яковлевское (Кладовский с/о), Яковцево, Якушево, Никитино, Есипово, Самоново, Николо-Лисино, Поповское (Юдинский с/о), Нижнесогского участка(Ленинский с/о), Дачная, Шишелово, Новосел, Согожанка, Липовая роща, Шельша, Ухра (Вощиковский с/о), Птицефабрики (Кладовский с/о), Пошехонье, Федорковский, Ермаковский, Гаютинский

Путиловский завод — ОАО «Кировский завод»

Путиловский завод, с 1922 по 1934 год — Красный Путиловец) основан в апреле 1801 года как чугунолитейный завод, выполнявший заказы по производству артиллерийских боеприпасов. С 1812 года завод стал развивать машиностроительное направление, приступив к изготовлению паровых машин. Одновременно было освоено литейное производство; завод участвовал в создании архитектурных ансамблей и монументально-скульптурных памятников Санкт-Петербурга и его окрестностей.

В ноябре 1824 г. Петербургский литейный завод был практически уничтожен наводнением. Четыре последующих десятилетия стали для предприятия периодом борьбы за выживание.

В 1868 году завод приобрел известный русский инженер и предприниматель Н. И. Путилов (1820-1880), который за 12 лет превратил металлургическое предприятие в многопрофильный машиностроительный комплекс. В кратчайшие сроки завод стал основным поставщиком рельсов для РЖД, освоил выпуск высококачественных сталей, выпуск боеприпасов, автомобилей, орудий, орудийных башен для линкоров, инструментов, крупногабаритных металлоконструкций, и другие виды промышленной продукции, многие из которых произведены по собственной технологии.Одновременно развивалась социальная инфраструктура предприятия: были открыты больница, столовая, библиотека, разбит парк и построен театр, создана эффективная система профессионального обучения. Именно при Н. И. Путилове были заложены основы многоотраслевого производства.

С тех пор многими поколениями путиловско-кировских рабочих были созданы тысячи поколений машин и промышленного оборудования, опередивших свое время и не имевших мировых аналогов.Многие образцы дали путевку в жизнь целым направлениям развития техники. Таким образом, Кировский завод является одним из пионеров (с 1913 г.) зарождения и развития отечественного турбоэнергетического машиностроения, родоначальником сельскохозяйственной отрасли (с 1924 г.) и по сей день — флагманом отечественного тракторостроения в России. сегмент мощных тракторов. Завод первым в мире организовал серийное производство тяжелых танков (с 1939 г.) и создал первый в мире танк с газотурбинным двигателем Т-80 (1976 г.).Эта традиция продолжается и в новейшей истории Кировского завода.

Созданное Н. И. Путиловым в 1873 году акционерное «Общество Путиловских заводов» за следующие сорок с лишним лет полностью доказало свою жизнеспособность. К началу Первой мировой войны завод стал важнейшим центром отечественного машиностроения, вышел на передовые позиции в России и Европе в области паровозостроения, производства артиллерийского вооружения, кораблестроения, турбиностроения.

Путиловцы были авангардом рабочего движения в стране.Они сыграли важную роль в революционной борьбе и событиях 1905-1907 и 1917 годов. На фронтах Гражданской войны сражалось более 10 тысяч путиловцев, было сформировано 25 боевых воинских частей отрядов, полков, батальонов, дивизий. В период коллективизации тысячи заводских рабочих уехали в деревню для создания колхозов.

Рабочие Путиловского завода сыграли большую роль в революционном движении: в 1891 году они приняли активное участие в подготовке и проведении первого революционного движения в России; во время Революции 1905—1907 устраивались демонстрации, вступали в бой с полицией и казаками, под руководством большевистской организации создавали боевые дружины.

В период 1905-1907 гг. рабочие Путиловского завода устраивали демонстрации в борьбе за свои права. Вступил в бой с полицией и казаками. Создавались под руководством большевистской организации боевые отряды.

В январе 1905 года на заводе началась забастовка, вызванная незаконным увольнением четырех рабочих. После категорического отказа руководства завода в лице его директора С.Петербургские предприятия поддержали забастовку. Противостояние закончилось массовым маршем рабочих 9 (22 января) 1905 г. к Зимнему дворцу. Цель — представить царю прошение о социальных нуждах трудящихся. Мирная демонстрация была встречена на подступах к Зимнему дворцу и расстреляна в упор войсками и казаками. В истории этой трагедии под названием Кровавое воскресенье она также положила начало Первой русской революции 1905-1907 годов.

С 1912 по 1914 год на Путиловском заводе было проведено 108 забастовок.Рабочие откликались на все политические события в стране. Выступали против Ленских расстрелов (трагические события 4 (17) апреля 1912 г. на приисках Ленского золотопромышленного объединения, расположенных в районе г. Бодайбо на Ленском притоке рек Витим и Олекма). В результате забастовки и последующего расстрела рабочих правительственными войсками пострадало, по разным оценкам, от 250 до 500 человек, в том числе погибло 107-270 человек.

Рабочие откликнулись на все политические события в стране, выступили против ленских расстрелов, поддержали забастовку бакинских рабочих, сыграли выдающуюся роль в свержении царизма в феврале 1917 года.В годы Великой Октябрьской социалистической революции в составе частей Красной гвардии штурмовали Зимний дворец и обороняли Смольный, захватили вокзалы, мосты. Заводчане принимали активное участие в защите завоеваний Октябрьской революции в годы Гражданской войны и военной интервенции 1918 г.20. Они изготавливали бронепоезда и орудия для Красной Армии, направили в ее ряды свыше 10 тыс. человек. Было сформировано и вооружено 25 воинских частей и войск. В.И. Ленин неоднократно посещал завод, М.Здесь работал токарем И.Калинин (189699).

Какая УШМ лучше Bosch или Makita • CIMFLOK.COM

На подиуме, как всегда, немецкие производители Bosch и Metabo, а также японский бренд Makita.Эти компании практически вне конкуренции. Их УШМ славятся своей долговечностью и устойчивостью к нагрузкам. Но они также самые дорогие в покупке и обслуживании.

Российские бренды Интерскол и Зубр помогут вам сэкономить. Их качество будет немного уступать Bosch или Metabo, но общий ценник ниже в несколько раз. Кроме того, эти компании давно научились производить качественный, профессиональный инструмент и достойны конкурировать на рынке.

Отдельного внимания заслуживает российский бренд «Лепсе». Эта компания из Кирова производит самые мощные и долговечные УШМ. Здесь не обращают внимания на эргономику и внешнюю привлекательность, как в той же Маките, а работают УШМ в любых условиях и при любой нагрузке. Ремонтопригодность у них на высшем уровне, а ведь инструмент один из самых дешевых на рынке.

Функциональность

Наиболее важные опции, которыми должна быть оснащена лучшая УШМ:

• Защита диска.Защитный кожух является обязательным в инструменте. От этого зависит безопасность операторов.
• Контроль скорости. Важная функция, значительно расширяющая круг задач, выполняемых машиной.
• Дисковый тормоз. Его задача — замедлить и остановить рабочий цикл по окончании работы. Опция также влияет на безопасность. Если тормоза нет, диск будет вращаться до тех пор, пока не остановится под действием силы тяжести. А так они достигают значительной скорости. это опасно для здоровья и даже жизни пользователя.
• Система плавного пуска. Эта функция является обязательной для мощных культиваторов хорошего качества. Инструмент запускается без рывков двигателя.
• Удаление пыли и мусора. УШМ часто оснащается специальной насадкой для подключения пылесоса, удаляющего пыль и мусор во время использования машины.

Также нужно обращать внимание на производителя машины: хороших фирм много, поэтому не ошибиться в выборе сложно. К наиболее проверенным и надежным производителям относятся Бош, Макита, Крюгер, Зубр.обзор этих кофемолок представлен ниже.

Какой фирмы

Важнейшим критерием при выборе строительной техники энтузиасты и мастера считают бренд. Это небезосновательно, ведь название бренда указывает на страну производителя, ценовую категорию, сферу использования. Прежде чем мы начнем наш обзор УШМ 125 мм, дадим характеристику популярных производителей, технику которых можно найти в продаже в большинстве российских интернет-магазинов.

• Метабо. Немецкий бренд выпускает хорошие электроинструменты, которые ценятся среди профессионалов. В ассортименте большой выбор УШМ, поэтому вы сможете купить недорого оборудование от проверенного производителя.
• Хитачи (Хикоки). Продукция компании после ребрендинга имеет хорошее соотношение цены и качества: она устраняет ассоциацию японской компании с дорогой продукцией. Уровень качества по-прежнему достаточен для домашнего использования.
• Зубр. Одна из редких российских компаний, ориентированных не только на бытовой, но и на коммерческий сегмент.Компания выпускает компактные орудия и крупногабаритные косилки на 2,1 кВт.
• Интерскол. Бренд известен в России и СНГ благодаря высоким техническим характеристикам и достойному уровню сборки. Продукция компании считается хорошим выбором для нечастого использования на даче и дома. Модель компании попала в наш рейтинг УШМ 125 бюджетного ценового сегмента благодаря соотношению дешевизны и качества исполнения.
• Элитех. Продукция российского бренда китайского производства.хороший выбор для бытовых нужд: резка арматуры, шлифовка и т.д. Безупречное качество материалов компенсируется низкой ценой.
• ДЕУОЛТ. Американский бренд специализируется на производстве профессионального оборудования. УШМ фирмы заметно дороже российских аналогов, но они более надежны и часто снабжены дополнительными функциями. В нашем рейтинге внимание сосредоточено на моделях на 125 мм, но в каталоге американской компании можно найти и производительные аналоги на 2000 Вт.
• Макита. Производитель одного из лучших электроинструментов полупрофессионального и профессионального сегмента выпускает недорогие и качественные УШМ, которые найдут применение в домашней мастерской и на даче.
• Штурм. Выбирая УШМ на 125 мм и что лучше для дома или дачи, покупатели часто обращаются к продукции этой фирмы: она достаточно надежно собрана, имеет продуманный и стильный дизайн, оснащена такими опциями, как плавный пуск и электронная регулировка. скорости.
• АЕГ. Бренд из Германии, выпускающий хорошие болгарки для работы. Модели бренда дорогие, но в то же время мощные, прочные и удобные в длительном использовании.
• Бош . Всемирно известная компания, в каталоге которой нашлось место как сетевому, так и аккумуляторному электроинструменту. Под немецким брендом выпускают хорошие УШМ профессионального уровня, мощность которых начинается от 750 Вт.

В арсенале каждого домохозяина есть полный набор инструментов, которые необходимы для хозяйственных нужд.Среди них выделяется УШМ или просто УШМ, предназначенная для резки, шлифовки или полировки различных материалов. К выбору кофемолки следует подходить ответственно, учитывая важные критерии выбора. Чтобы их выявить и помочь покупателям купить надежный инструмент, был составлен рейтинг, в котором представлены только лучшие УШМ для домашнего и профессионального использования.

Сравнение УШМ Bosch и Makita

Угловая шлифовальная машина Bosch gws 24-230 выпускается в нескольких модификациях, отметим технические особенности каждой из них.Начнем с болгарки Bosch gws 24-230 BV. Мощность этой машины составляет 2400 Вт. И основная рукоятка, и дополнительная рукоятка поглощают вибрацию на 80%, по заявлению производителя, без утомления при работе. Надежность и прочная конструкция основываются на качественном редукторе и двойном шарикоподшипнике. Мотор хорошо защищен от искр и осколков, которые неизбежны в процессе эксплуатации. Модель Bosch gws 24-230 JBV, имеющая такую ​​же мощность двигателя (2400 Вт). Оснащена системой плавного пуска, регулирующей величину пускового тока, что исключает рывки и поломки механики.Угловая шлифовальная машина Bosch gws 24-230 JBX, характерной особенностью которой является использование инновационной тормозной системы, способной всего за 2,5 секунды остановить шлифовальный диск. Кроме того, блокировка шпинделя и быстрозажимная гайка позволяют быстро заменить рабочий инструмент. Bosch gws 24-230 LVI ничем не отличается от своих предшественников, кроме минимального веса по сравнению с другими инструментами этого класса.

Следующая модель в сравнении — Bosch gws 11-125, которая также представлена ​​на рынке в нескольких модификациях.Первый из них. Bosch gws 11-125 CI, который может похвастаться уникальной системой обнаружения блокировки дисков, которая влечет за собой немедленное автоматическое отключение двигателя. Кроме того, эта модель, в общем, оснащена мотором мощностью 1100 Вт. С целью повышения долговечности за счет обеспечения лучшей вентиляции особо «горячих» зон в корпусе были сделаны дополнительные отверстия. Далее идут Bosch gws 11-125 CIH и CIE, которые аналогичны предыдущей модификации, за исключением того, что имеют 6-ступенчатый выбор числа оборотов, чтобы организовать наиболее оптимальную работу с тем или иным материалом.

Ваша фракция: Восходящее солнце

Расчетное время: 17:00

Разблокирует: Боевой корабль Shogun

Только морские/корабельные юниты, доступные в этом:

2 электростанции

2 завода по переработке руды

1 док, улучшенный

Sea-Wings up the Ass

Превратите их в воздушную форму и перелетите на вражескую базу, как только у вас будет около 10

Сначала уничтожьте возможные башни, затем доки, строительство Двор, отдых

Мое время: 7:15

37.Chrono you not (Северная Америка)

Your Faction: Rising Sun

Par Time: 14:00

Разблокирует: Chronosphere

Обычные стратегии не работают:

2 электростанции сейчас, 03 позже 90

1 Додзё, отправьте 2 инженеров на северо-запад для захвата нефтяных вышек

2 Обогатительные фабрики

1 Док, 1-е обновление

2 Башни обороны Запад, 2 Башни обороны Север

1 Мейнфрейм

Докган, 2-е обновление

Как только вы соберете 3 линкора, переместите их на запад, чтобы атаковать эту базу, отправьте свои крейсера за ними, когда они будут построены

У сёгуна есть невероятный тир, так что вы сможете уничтожить все, что находится на озере

Проделайте то же самое с Северо-западной базой

Чтобы добраться до Последней базы, вам нужно разрушить мост: Удерживайте и дважды нажмите на мост

Уничтожить последнюю базу

Мое время: 11:04

38.СОКРАЩАТЬСЯ. ЗОНА (Аляска, по крайней мере, я так думаю)

Ваша фракция: Rising Sun

Расчетное время: 7:00

Разблокирует: Cryocopter

Натиск пехоты:

Точка маршрута рядом с вражеской базой рядом с Вращающейся статуей 03 3

4 додзё, 1 электростанция, продать двор

Установить додзё у статуи

8 обычных солдат, остальные Tankbuster

Продолжайте как обычно

Мое время: 3:19

Ваша фракция: восходящее солнце

Par Time: 15:00

Разблокировка: Apocalypse Tank

Пехота Praphry:

базы, рядом со зданием поддержки наблюдательного поста

4 додзё, 1 электростанция, продайте верфь

противотанковые истребители, их много Казармы, Военный завод, Строительная площадка, Отдых

Мое время: 3:46

44.Приходи и возьми (Западная часть Северной Америки, это же где Голливуд, верно?)

Ваша фракция: Восходящее солнце

Расчетное время: 16:00

Разблокирует: Decimator Core

Комбинация Striker/Tengu:

2 электростанции, 1 додзё

3 рудоперерабатывающих завода, 2 для вашей базы, 1 южный

1 бухта Меха, улучшенная

15 нападающих

2 дополнительных рудоперерабатывающих завода, 1 юго-западный угол карты, 1 юго-восточный угол карты

Еще 2 электростанции

Еще 1 Mecha Bay, 15 Tengus

Как только ваша армия будет готова, продолжайте производство на случай, если

Отправьте свою армию к восточному краю карты, затем к северо-восточному углу и, наконец, к западу над Вражеская база

Сначала пошлите своих тенгу, чтобы разобраться с их, а затем Страйкеров

Вы хотите, по крайней мере, уничтожить Строительную площадку, Додзё и Меха-Бей, чтобы остановить производство всех юнитов, даже если это означает потерю всех ваших юнитов

Однажды все Враг тэнгу s ушли, отправьте своих на Землю, чтобы убить как можно больше девушек-лучниц

Все, что вам нужно сделать сейчас, это очистить карту его зданий

Мое время: 14:41 (пришлось искать его здания)

45.Red Crush (Юг России)

Ваша фракция: Rising Sun

Время номинальной: 14:00

Разблокирует: Grinder

Натиск пехоты:

Маршрутная точка на руднике в юго-восточном углу карты

3 4 9 Додзё, 1 электростанция, продайте верфь

Установите додзё у шахты

Истребители танков, истребители танков, истребители танков, пока не закончатся деньги

Отправить их всех

Мое время: 4:50

46. Оружие Раса (Юго-Восточная Африка)

Ваша фракция: Rising Sun

Время номинальной: 17:00

Разблокирует: Вакуумный имплодер

Натиск пехоты:

Маршрутная точка на самой северной рудной шахте на острове Мощность

1 Додзё, 4900 с Посадить, продать верфь

Снова ничего, кроме истребителей танков

Отправьте их

Примечание: это может быть довольно сложно осуществить, Враг сильно бьет вас здесь своими особыми способностями, но это вполне возможно сделать.Если вы не можете справиться с этим, просто сделайте обычную комбинацию Страйкер/Тэнгу.

Мое время: 4:10 (Пехотный рывок)

47. Родина (Как вы думаете, где она находится?)

Ваша фракция: Восходящее солнце

Время номинальной: 18:00

Дирижабль Открывает: Киров

Натиск пехоты:

Путевая точка к северу от центра карты у ветряной мельницы

4 додзё, 1 электростанция, продать верфь Основание.Это самый опасный, потому что они построили Двойные клинки, которые вы не можете атаковать

Они, скорее всего, сделают 1 или 2 Двойных клинка, просто протолкнитесь, как только все здания исчезнут, Двойные клинки также будут уничтожены

А пока следите за ваш счетчик отрядов, когда он достигнет 40, отправьте все, что у вас есть, на северо-восток, чтобы уничтожить эту базу

Как только обе эти базы исчезнут, вы можете объединиться на последней базе с обеих сторон

Мое время: 5:54

48. Out of the Blue (Северная Америка)

Ваша фракция: Rising Sun

Расчетное время: 17:30

Разблокирует: Бомбардировщик Century

Натиск пехоты:

Путевая точка к северу от вас, у северной оконечности пляжа.Вы не хотите отправлять их прямо к врагу, потому что в центре карты есть многоствольные турели

4 додзё, 1 электростанция, продать двор

Отправьте свои додзё с этого пляжа на северо-восток к врагу, установите их вверх, когда путь станет узким

Пара обычных солдат, остальные истребители танков

Когда количество ваших отрядов достигнет 30, отправьте их врагу

Отправьте остальные отряды к центру карты, у врага установлены 2 электростанции наверху, который вам нужно уничтожить, чтобы выиграть

Мое время: 4:24

49.Ярость Империи (Юго-Восточный Китай)

Ваша фракция: Восходящее солнце

Расчетное время: 16:00

Разблокирует: Ядро Giga-Fortress

Натиск пехоты:

Путь между островом на западном краю карты и маленький остров в центре карты

Примечание: не подходите слишком близко к этим островам со своими додзё, иначе Гига-крепости уничтожат их

4 додзё, 1 электростанция, продайте двор

как ваши додзё приблизитесь к пункту назначения, некоторые корабли появятся на северном краю карты

Подождите, пока они пройдут мимо, переместите свои додзё на север и разместите их в западной части Большого острова

Пара обычных солдат, отдохните, истребители танков

Приблизительно 20 отрядов отправьте их к врагу

Сначала возможные оборонительные сооружения, затем Додзё, строительная площадка

Как только они исчезнут, переместите свои отряды на юг отсюда, чтобы разрушить вражеские доки.Вы должны сделать это немедленно, иначе они построят еще один MCV

Уничтожьте остальную часть базы

Примечание: если вы недостаточно быстры, враг иногда будет строить рудник в юго-восточном углу карты. Если это произойдет, вам придется перезапустить, так как у вас нет возможности добраться до него.

Мое время: 5:06

Сейчас вы получите достижение:

Завершите все 13 миссий основного пути

До последнего один…

50.Future Warfare (Центр карты мира)

Ваша фракция: —>Советы!!!<---

Номинальное время: 25:00

Разблокирует: FutureTank X-1

Нет обычной стратегии для Последний:

1 Reactor

Отправьте 2 FutureTanks на западной стороне через правый мост к северо-западу от вас

Отправьте 2 FutureTanks на восточной стороне через левый мост к юго-востоку от вас

2 рудоперерабатывающих завода, 1 атомная электростанция , 2-3 зенитных орудия вокруг вашей базы

Теперь начинается раздражающая часть миссии:

Входы на 2 базы на северо-западе и юго-востоке охраняются 4 башнями Spectrum каждая

Вы хотите использовать специальную способность FutureTanks прямо на Спектральные Башни, чтобы уничтожить их по одной.Важно нацеливаться на них напрямую и не пытаться поразить 2 из них одновременно, если вы сделаете это, они выживут с небольшой помощью. Когда вы уничтожите Башню, отступите немного назад и дождитесь перезарядки Способности

После того, как вы уничтожите первые 2 с каждой стороны, 2 танка будут сильно повреждены, поэтому поставьте их позади другого и атакуйте другие Башни этим одним сначала, чтобы сохранить все ваши танки в живых

После того, как вы уничтожили все башни, вы можете отправиться на вражескую базу, сначала на заводы по производству брони, а затем в казармы и на строительную площадку.У ваших танков не должно быть проблем.

Возвращение на вашу базу: 1 аэродром, еще пара зенитных ракетных комплексов

4 МИГа, Twinblade, Twinblades, Twinblades

Вражеские базы должны быть уничтожены в этой точке, отправьте 2 MIG и не менее 2 Twinblade на каждую из ваших пар Futuretank

Загрузите танки в Twinblades. Теперь переместите все свои подразделения на одну из двух последних баз

Сначала отправьте МИГи, чтобы позаботиться о вражеских самолетах, установите свои FutureTanks, чтобы возобновить уничтожение, в то время как Twinblade будут помогать им

То же самое с другой базой

BAM BAM BAM

Примечание. Даже если Врагам удастся уничтожить ваши FutureTanks, вы все равно сможете легко победить, создав больше Twinblade и MIG и разгромив Врага.Просто постройте еще один аэродром, чтобы производить быстрее

Мое время: 14:00 (с уничтоженными танками FutureTanks)

Вы разблокируете:

Если вы следовали моим инструкциям в начале прохождения и оставили 1 испытание сверх установленного времени, завершите его. Теперь, чтобы получить последние 2 достижения:

Мое общее время в игре: 5:41:00

Поздравляем с завершением!

Это пошаговое руководство является собственностью TrueAchievements.com. Это пошаговое руководство и любой включенный в него контент не могут быть воспроизведены без письменного разрешения. TrueAchievements.com и его пользователи не имеют никакого отношения ни к одному из создателей или правообладателей этой игры, и любые товарные знаки, используемые здесь, принадлежат их соответствующим владельцам.

(PDF) Малый проект «МОДЕЛИРОВАНИЕ ПРОЦЕССА УСТАНОВКИ ТОРРЕФАКЦИИ БИОМАССЫ».

1. Цель

Изучить и смоделировать процесс торрефикации и гранулирования биомассы для производства твердого биотоплива.

2. Введение

Биомасса является важным источником энергии для создания более устойчивого общества. Тем не менее, природа создала большое разнообразие биомассы, не говоря уже о

модификациях биомассы, которую человек производит для использования в промышленных или бытовых целях. Таким образом, состав и свойства биомассы подвержены влиянию многих природных и антропогенных факторов. Некоторые из них нуждаются в серьезной доработке, чтобы их можно было использовать в качестве устойчивого топлива в высокоэффективных

цепочках производства энергии из биомассы.Это может быть достигнуто с помощью торрефикации. Торрефикация в литературе упоминается под разными названиями: обжаривание (аналогично обжариванию кофе), медленный

пиролиз, мягкий пиролиз, варка на дровах или высокотемпературная сушка. полностью высохнет и потеряет свою цепкую и волокнистую структуру. При этом способность к измельчению подвергнутой биомассе значительно улучшается. В добавлении

торрефикация увеличивает теплотворную способность биомассы, и ее гигроскопическая природа может быть разрушена с получением гидрофобного материала.В зависимости от применяемых условий торрефикации

торрефицированная биомасса имеет цвет от коричневого до темно-коричневого и приближается по свойствам к углю. Эти изменения делают торрефицированную биомассу

очень привлекательной для сжигания и газификации.

Торрефикация биомассы привлекла широкое внимание благодаря своим преимуществам в качестве самостоятельного процесса улучшения свойств биомассы до уровня, аналогичного

свойствам угля при производстве электроэнергии, или в качестве этапа предварительной обработки перед процессами пиролиза и газификации.Он также нашел применение в других процессах

, таких как производство стали, где он направлен на замену угля или работу вместе с углем путем совместного сжигания угля с биомассой в определенных пропорциях.

было опубликовано множество статей по обзору торрефикации биомассы, но в этом отчете была предпринята попытка взглянуть под другим углом, чтобы показать другие аспекты торрефикации и то, как она связана с другими технологиями

, а также с химией, стоящей за ней. В целом, процесс претерпел большие изменения в технологии, которую он использует, и есть надежда, что это сделает процесс

более ценным и применимым в будущем.Торрефикация материалов из биомассы на протяжении многих лет привлекала огромное внимание из-за ее способности производить высококачественное твердое биотопливо с повышенной долговечностью, отличной способностью к измельчению, более высокой объемной плотностью и теплотворной способностью, а также большей плотностью энергии, как

по сравнению с исходным необработанным материалом биомассы.

3. Теория

Торрефикация обычно является первой стадией, за которой следует пиролиз и, наконец, газификация во время термической обработки биомассы или разложения биомассы.Тем не менее,

сообщаемые условия процесса не совпадают, так как некоторые используют инертные условия, а другие используют другие газы (CO2) и окислительные (O2) среды.

Торрефикация – это процесс предварительной термической обработки, проводимый с целью изменения химических свойств биомассы. Это эндотермический процесс, а это означает, что

требует затрат энергии для запуска процесса, а также для его поддержания. Торрефикация приводит к: (i) улучшенной плотности энергии, (ii) лучшему воспламенению, (iii) меньшему количеству влаги, (iv) более высокому соотношению C/O и C/H, (v) улучшенной измельчаемости, что снижает затраты энергии на измельчение, (vi) биомасса, которая является гидрофобной i.е. что

имеет меньшее сродство к воде, (vii) более гомогенизированная биомасса, т.е. торрефикация выводит летучие вещества, деполимеризует и карбонизирует биомассу и (viii) снижает

микробную активность. Эта модификация улучшает характеристики сгорания, особенно в котлах для производства энергии и для пиролиза и газификации

приложений, а также приводит к лучшему хранению обработанной биомассы.

Кроме того, помимо термической конверсии биомассы, также можно улучшить логистические свойства посредством торрефикации, когда торрефикация сочетается с

уплотнением (брикетированием).Благодаря этой комбинации получаются топливные гранулы с очень высокой плотностью энергии. Применение торрефактии в качестве новой технологии предварительной обработки

представляет интерес только тогда, когда оно приводит к снижению затрат всей цепочки производства энергии из биомассы. Особенно, если учесть, что технология торрефикации

еще не достигла коммерческого статуса. В этом отчете обсуждаются некоторые интересные результаты, при этом внимание уделяется принципам торрефикации

, требованиям к сырью, применению продукта, технологии производства и экономии торрефикации.

3.1. Принцип

Торрефикация – это метод термохимической обработки, предназначенный для рабочей температуры в диапазоне от 200 °C до 300 °C. Он проводится при

атмосферном давлении в отсутствие кислорода и характеризуется низкими скоростями нагрева частиц (< 50 °С/мин). Биомасса частично разлагается в ходе процесса

с выделением различных типов летучих веществ, что приводит к потере массы и химической энергии в газовой фазе. В торре-фракции биомасса теряет относительно на

больше кислорода и водорода по сравнению с углеродом.Лучшим примером является вода после дегидратации, но все органические продукты реакции (уксусная кислота, фураны и метанол) и газы (в основном CO2 и CO) содержат значительное количество кислорода. Торрефикация — это процесс, который эффективно снижает отношение O/C

биомассы. Энергозатраты при измельчении снижаются, и в то же время в измельчаемом порошке устраняются острые края и осколки, что значительно улучшает характеристики подачи. Также доказано, что торрефицированная биомасса обладает гидрофобными свойствами, что дает преимущество при длительном хранении

по сравнению с сырой биомассой.Торрефикация, также называемая мягким пиролизом, предшествует процессу пиролиза в континууме температур, начиная с

сушки и заканчивая газификацией.

Карбонизация биомассы с помощью торрефикации может быть полезна для снижения содержания влаги и повышения теплотворной способности, что делает энергию биомассы

плотной. Торрефикация является возможным методом улучшения свойств биомассы как топлива. Он заключается в медленном нагревании биомассы в инертной атмосфере до максимальной температуры

300°C и определяется как частично контролируемый и изотермический пиролиз биомассы, происходящий в диапазоне температур

200–300°C.Обработка дает твердый однородный продукт с более низким содержанием влаги и более высоким содержанием энергии по сравнению с сырой биомассой.

Биомасса считается углеродно-нейтральным источником топлива на основании представления о том, что биомасса фиксирует атмосферный углерод посредством фотосинтеза. Следовательно,

, когда биомасса собирается из возобновляемых ресурсов, таких как плантации энергетических культур, или берется из сельскохозяйственных отходов, которые обычно сжигаются в поле

(например, стерня пшеницы), тогда работа может выполняться с использованием солнечной энергии. хранится в биомассе.Растущий интерес к биомассе в качестве топлива включает не только сжигание

для производства пара для производства электроэнергии и коммерческих нужд, но и газификацию для производства горючего газа (называемого генераторным газом, когда

содержит большое парциальное давление азота и двуокиси углерода). и синтез-газ (в основном содержащий монооксид углерода и

ограничено, в основном из-за логистики подготовки и накопления массы биомассы и экономики.BiOMASS TORREFACTION был познан как технически

кросс-строгая машина с гидравлическим приводом в Винница, Украина

Молекулярные и клеточные адаптации в гиппокампал-нейроны парвальбумина, посредниками поведенческих реакций на хронический социальный стресс

ВВЕДЕНИЕ

Стресс может усиливать мотивационные побуждения, которые способствуют эволюционно благоприятному поведению, имеющему решающее значение для выживания (1).Однако стрессовые жизненные события или хроническое воздействие неизбежного стресса могут привести к неадекватным клеточным и поведенческим реакциям и внести свой вклад в этиологию психоневрологических заболеваний, таких как большое депрессивное расстройство (БДР) (2–6). Многие психические расстройства, связанные со стрессом, характеризуются измененными поведенческими и физиологическими состояниями, вредными для человека. Однако, в то время как воздействие стресса может сделать некоторых людей восприимчивыми к развитию БДР, другие устойчивы и часто остаются здоровыми (7).Несколько моделей животных, включая «выученную беспомощность», хронический непредсказуемый стресс, стресс ограничения и хронический стресс социального поражения (CSDS), использовались для изучения восприимчивости к стрессу и устойчивости (8-10). Среди них широко использовалась парадигма CSDS, которая привела к исследованиям, которые связывают это индивидуальное расхождение с молекулярной и клеточной адаптацией во многих областях мозга (11, 12). Тем не менее, ключевые молекулярные и клеточные мишени, ответственные за поведенческие реакции на стресс, до конца не изучены.

Изменения вентрального гиппокампа в значительной степени связаны со стрессовыми и эмоциональными реакциями (13, 14). В частности, несколько типов нейронов, включая гранулярные клетки, мшистые клетки и интернейроны в зубчатой ​​извилине (DG), были изучены в отношении депрессивного поведения и антидепрессивного действия (15-18). Ранее мы обнаружили, что молекулярные изменения, избирательно экспрессирующие парвальбумин (PV) в ГАМКергических интернейронах, могут модулировать поведение, подобное депрессии (19, 20). Однако не выяснено, опосредуют ли адаптации возбуждения нейронов и молекулярной экспрессии в нейронах PV индивидуальные различия в уязвимости к стрессу.

В этом исследовании мы обнаружили, что восприимчивость к CSDS обусловлена ​​повышенной активностью нейронов PV в вентральной зубчатой ​​извилине (PV ^vDG ). Кроме того, нейрон-селективное секвенирование РНК PV показало, что CSDS изменяет множественные молекулярные пути, регулирующие функцию митохондрий, синтез белка и синаптогенез, которые могут лежать в основе различий в активности нейронов. Среди нерегулируемых транскриптов в нейронах PV гиппокампа была мРНК Ahnak. Ранее Ahnak был охарактеризован как эндогенный регулятор потенциалзависимых кальциевых каналов L-типа в нейронах PV (20), кардиомиоцитах (21) и Т-клетках (22).Передача сигналов кальция L-типа тесно связана с функцией митохондрий (23, 24), экспрессией генов (25, 26) и пластичностью нейронов (27). Важно, что экспрессия Ahnak в вентральной зубчатой ​​извилине и в нейронах PV также необходима для поведенческой восприимчивости. Вместе это исследование показывает, что молекулярные и клеточные адаптации в нейронах гиппокампа PV, вызванные социальным стрессом, опосредуют поведенческую восприимчивость или устойчивость.

МЕТОДЫ И МАТЕРИАЛЫ

Животные

Все эксперименты с участием животных были одобрены Институциональным комитетом по уходу и использованию животных Рокфеллеровского университета и проводились в соответствии с рекомендациями Национального института здравоохранения.Мышей Floxed Ahnak выращивали и содержали в Университете Рокфеллера, как описано ранее (20). Мышей Floxed Ahnak скрещивали с мышами PV-Cre (инвентарный номер: 008069, The Jackson Laboratory) для получения линии Ahnak KO, селективной к нейронам PV. Cre-зависимых мышей EGFP-L10a (инвентарный номер: 024750, лаборатория Джексона, Бар-Харбор, штат Мэн) скрещивали с мышами PV-Cre для получения нейрон-селективной линии EGFP-L10a PV для трансляции рибосомной аффинной очистки (TRAP). Мы произвели потомство линий Ahnak, селективных по волокну, PV-Cre, PV-селективных EGFP-L10a и PV-селективных Ahnak KO с помощью оплодотворения in vitro (ЭКО) и методов переноса эмбрионов (Центр трансгенных и репродуктивных технологий, Университет Рокфеллера) в предоставить животных, совпадающих по генотипу и возрасту.Все мыши являются самцами и имеют фон C57BL/6, за исключением агрессоров CD1 (штамм 022, Charles River, Kingston, NY), используемых для CSDS. Мышей содержали по 3–5 в клетке с циклом свет/темнота 12:12 и свободным доступом к пище и воде. In vivo было выполнено записей с мышами под наркозом. Все поведенческие тесты проводились во время светового цикла. Все поведенческие эксперименты начинали с самцов мышей в возрасте 8-12 недель. Трансгенных мышей случайным образом распределяли в экспериментальные стрессовые условия на основе их генотипа.Для экспериментов по доставке генов с помощью AAV трансгенных мышей случайным образом распределяли в экспериментальные вирусные группы, а затем в экспериментальные стрессовые условия. Экспериментаторов не ослепляли в отношении генотипа при проведении или анализе экспериментов, за исключением биохимических экспериментов, но мыши из каждой группы были равномерно распределены по оборудованию и запускались параллельно во время поведенческих тестов.

Стереотаксическая хирургия

Все стереотаксические операции выполнялись на стереотаксическом инструменте для мелких животных Angle Two (Leica Biosystems, Buffalo Grove, IL) со шприцевым насосом для микроинъекций (UMP3 UltraMicroPump, World Precision Instruments, Sarasota, FL).Самцов мышей (возраст 7-8 недель) анестезировали смесью кетамина (100 мг/мл) и ксилазина (10 мг/мл). AAV5-hSyn-GFP и AAV5-hSyn-Cre-GFP были получены от UNC Vector Core, а AAV5-hSyn-DIO-mCherry (50459), AAV5-hSyn-DIO-hM4D(Gi)-mCherry (44362) и AAV5- hSyn-DIO-hM3D(Gq)-mCherry (44361) были приобретены у Addgene. Вирусы (500 мкл/сторона) вводили билатерально в vDG (AP -2,7 ML+/-2,0 DV -2,2, мм относительно брегмы) шприцем Hamilton Neuros на 2 мл со скоростью 0,1 мкл/мин. Иглу оставляли еще на 10 мин, а затем медленно извлекали.Стереотаксические инъекции были подтверждены с помощью иммуногистохимии, и животные с инфекцией за пределами vDG или без инфекции в vDG были исключены из анализа данных. За мышами наблюдали в течение 48 ч, чтобы гарантировать полное восстановление после операции. Эксперименты начались через 3 недели после стереотаксической операции, чтобы обеспечить оптимальную экспрессию вирусов AAV. Предыдущие исследования показывают, что однократная низкая доза кетамина оказывает длительное антидепрессивное действие на грызунов до 8 дней (28-30). В этом исследовании мы использовали кетамин в качестве анестезии для стереотаксических операций и AAV-опосредованной доставки генов.Поскольку мы провели эксперименты через 3 недели после стереотаксической операции, мы считаем, что любой потенциальный эффект кетамина ослаб до начала экспериментов. Важно отметить, что все контрольные группы на Рисунке 2 и Рисунке 5A-E подверглись той же процедуре анестезии и стереотаксической инъекции контрольного AAV, что позволяет предположить, что наблюдаемый нами результат связан с ингибированием или активацией, опосредованным DREADD (конструкторский рецептор, активируемый исключительно дизайнерскими лекарственными средствами). Рисунок 2) или Ahnak KO и не подвержен влиянию кетамина.

Хронический стресс социального поражения

Хронический стресс социального поражения (CSDS) проводили, как описано ранее (31). Вышедших на пенсию самцов мышей-размножителей CD-1 подвергали скринингу в течение трех дней подряд, и агрессоров отбирали в соответствии со следующими критериями: (i) латентный период до начальной атаки был менее 60 с и (ii) скрининговая мышь подвергалась нападению в течение 2 дней подряд. Десять дней подряд подопытных мышей помещали в домашнюю клетку предварительно экранированного агрессора CD-1 на 5 мин физической атаки, а затем разделяли перфорированной перегородкой на оставшиеся 24 ч до следующего поражения через 24 ч.Каждая экспериментальная мышь подвергалась воздействию различных агрессоров каждый день. Параллельно не подвергавшихся стрессу контрольных мышей помещали парами в идентичную домашнюю клетку, разделенную перфорированной перегородкой на время сеансов поражения. Они никогда не имели физического или сенсорного контакта с мышами CD-1. После 10 дней социального поражения всех агрессоров и подопытных мышей разделяли и содержали отдельно. Через 24 часа был проведен тест SI.

Подпороговый стресс социального поражения

Подпороговый стресс социального поражения (SSDS) проводили, как описано ранее (32).Подопытных мышей помещали в домашнюю клетку предварительно отобранного агрессора CD-1 на 5 мин физической атаки. Через 15 минут подопытных мышей подвергали еще одной 5-минутной физической атаке нового агрессора CD-1. Это повторилось еще раз, в общей сложности три сеанса поражения. Через 24 часа был проведен тест SI.

Тест на социальное взаимодействие

Тест на социальное взаимодействие (SI) проводили, как описано ранее (31). Тест состоял из двух фаз, каждая из которых длилась 150 секунд, во время которых подопытным мышам разрешалось исследовать открытое поле (42 см х 42 см х 42 см) с ограждением из проволочной сетки (шириной 10 см х 6 см).5 см глубина х 42 см высота). На первом этапе ограждение из проволочной сетки было пустым. На втором этапе новую мышь-агрессора CD-1 помещали внутрь проволочной сетки. Количество времени, проведенное экспериментальными мышами в зоне взаимодействия, окружающей ограждение из проволочной сетки, собирали и анализировали с помощью устройства видеослежения и программного обеспечения EthoVision XT 7 (Noldus Information Technology, Leesburg, VA). Отношение SI рассчитывали путем деления количества времени, которое экспериментальные мыши провели в зоне взаимодействия во второй фазе, на время в первой фазе [отношение SI = (время фазы 2)/(время фазы 1)].Восприимчивых мышей определяли по отношению SI ниже 1, тогда как устойчивых мышей определяли по отношению SI больше 1 (31).

Тест предпочтения сахарозы

Тест предпочтения сахарозы (SPT) был адаптирован из предыдущих исследований (20). В течение 1-дневного периода привыкания мышам давали на выбор две бутылки с водой. На следующий день бутылки заменяли новыми бутылками, содержащими либо воду, либо 2% раствор сахарозы. Потребление воды и раствора сахарозы измеряли в разные моменты времени (0 и 4 часа для острого эксперимента с CNO или 24 часа для хронического CNO и экспериментов с генетическим нокаутом).Предпочтение сахарозы было представлено как процентное предпочтение сахарозы ((потреблено сахарозы/(потреблено вода+сахароза)) X 100).

Управление по лекарственным средствам

Для электрофизиологических экспериментов in vivo восприимчивых мышей отбирали после теста SI. Введение кетамина (10 мг/кг, внутрибрюшинно, k2753, Sigma-Aldrich) происходило через 24 часа после теста SI и за 1 день до эксперимента по регистрации in vivo .

Для всех экспериментов Gi и Gq DREADD CNO (3 мг/кг, т.p., C0832, Sigma-Aldrich) (33). Для хронического введения CNO животным h5MDi во время CSDS (рис. 4c) CNO вводили за 30 мин до каждого поражения в течение всех 10 дней поражения. Тест SI проводился без наркотиков. Для введения CNO животным hM4Di после CSDS (рис. 4h) CNO вводили за 30 минут до теста SI и SPT. Для введения CNO животным hM3Dq во время SSDS (рис. 4m) CNO вводили за 30 минут до первого сеанса подпорогового поражения. Тест SI-1 проводился без наркотиков.Для хронического введения CNO животным h4MDq (фиг. 4M) CNO вводили один раз в день в течение 10 дней, начиная со дня после острого введения и теста SI-1. Тест SI-2 проводился без наркотиков.

Животных анестезировали инъекцией уретана (1 мг/кг, внутрибрюшинно). Для краниотомии мышей помещали в стереотаксическую раму (David Kopf Instruments, CA), в которой голова животного фиксировалась с помощью пары ушных стержней и перпендикулярного зубчатого стержня.Температуру тела непрерывно контролировали с помощью ректального термометра и поддерживали на уровне 33 ± 1°С, помещая животное на грелку. Измерения были получены из вентрального гиппокампа. Стереотаксические координаты (в мм, переднезадние [-2,92] измерены от брегмы; латеральные [±2,00] указаны от средней линии; дорсовентральные [-2,20] от поверхности мозга) были установлены в соответствии с атласом мозга мышей Франклина и Паксиноса (3-е издание). . Использовались силиконовые зонды высокой плотности с 4 хвостовиками (Buzsaki32, NeuroNexus Inc., МИ). Хвостовики располагались на расстоянии 250 мкм друг от друга и имели по 8 регистрирующих участков в каждом (диаметром 160 мкм для каждого участка; импеданс 1–3 МОм), расположенных в шахматном порядке с вертикальным расстоянием 20 мкм. Зонды были подключены к плате усилителя RHD 2132 с 32 каналами (Intan Technologies, Калифорния), смонтированы на микроманипуляторе (Luigs & Neumann, Германия) и осторожно введены в окно краниотомии, нацеленное на слой гранулярных клеток зубчатой ​​извилины в вентральной части. гиппокамп (AP –2,9 мм, L 2 мм, DV –2.2 мм). Данные были сэмплированы на частоте 20 кГц.

Для обнаружения всплесков мы использовали полностью автоматизированный подход с программным обеспечением для кластеризации MountainSort (общедоступно на https://github.com/flatironinstitute/mountainlab). Пики были проверены с использованием программного обеспечения MountainView, доступного в том же пакете, и различные параметры были импортированы в Matlab для процедуры сортировки пиков (Matlab Signal Processing Toolbox, Mathworks, MA). Для процедуры сортировки спайков изначально были рассчитаны две характеристики спайка: задержка от минимума до пика и поведение всплеска.Нейроны с узкой волновой формой, вероятно, предполагаемые парвальбумин-положительные корзинчатые клетки (34), были классифицированы как нейроны с минимальной амплитудой менее 0,4 мс; широкие волны были классифицированы как нейроны с полупиками длиннее 0,4 мс. Для пачечного поведения был рассчитан индекс пачек из отношения частотного распределения интервалов между пиками в 0-10 мс к частотному распределению интервалов между пиками в 200-300 мс. Нейроны с индексом разрыва выше 1,8 считались возбуждающими нейронами (35).Для дальнейшего разделения возбуждающих нейронов мы воспользовались нашим собственным предыдущим опытом внутриклеточной записи с помощью мшистых клеток и клеток-зерен (36). Общее количество нейронов, обнаруженных у всех проанализированных животных в исследовании (n = 772), прошло классификацию первого этапа на основе латентного периода до пика и индекса всплеска (BI). Были классифицированы три деления: предполагаемые возбуждающие клетки (черные точки, n = 336, BI > 1,8), узковолновые (красные точки, n = 142, латентность ≤ 0,4 мс) и широковолновые (зеленые точки, n = 294, латентность > 0.4 мс) предполагаемые интернейроны. На основании бимодального распределения тока постгиперполяризации (АГП), измеренного от первой производной спайка, возбуждающие нейроны были далее классифицированы на предполагаемые мшистые клетки (n = 133, АГП < 70) и предполагаемые клетки-зерна (n = 203, АГП < 70). > 70). В экспериментах с патч-зажимом внутриклеточные потенциалы действия мшистых клеток показывают значительно меньший AHP по сравнению с мшистыми клетками (LM, неопубликованные данные). Для анализа МАИ в наших экспериментах мы использовали первую производную возбуждающих спайков (dx=dV/ds), чтобы избежать возможных ошибок, вызванных переменным расстоянием соответствующих клеток до регистрирующего электрода.Этот подход также максимизирует различия в AHP, вызванные потенциально различной динамикой между проводимостями ионных каналов в двух типах нейронов. Мы заметили бимодальное распределение AHP в возбуждающих нейронах и в соответствии с ним установили порог 70 (мкВ/мс) как разделение между мшистыми клетками (< 70) и клетками-зернами (> 70).

Электрофизиология срезов

4-недельных мышей усыпили CO ₂ . После декапитации и удаления головного мозга поперечные срезы (толщиной 400 мкм) нарезали с помощью Vibratome 1000 Plus (Leica Microsystems, IL) при 2 °C в растворе для резки, содержащем (в мМ): 87 NaCl, 25 NaHCO ₃ , 2.5 KCl, 0,5 CaCl ₂ , 7 MgCl ₂ , 25 глюкозы, 75 сахарозы и насыщены 95% O ₂ и 5% CO ₂ . После разрезания срезы оставляли для восстановления на 30-45 мин при 35°С, а затем на 1 ч при комнатной температуре в регистрирующем растворе (аКСФ). Раствор aCSF содержал (в мМ): 125 NaCl, 25 NaHCO ₃ , 2,5 KCl, 1,25 NaH ₂ PO ₄ , 2 CaCl ₂ , 1 MgCl _{5% 2} 4 и O2 и 5% CO2). Запись пэтч-кламп цельных клеток выполняли с помощью системы Multiclamp 700B/Digidata1550A (Molecular Devices, CA) и вертикального микроскопа Olympus BX51WI (Olympus, Япония).Отдельный срез помещали в регистрационную камеру (RC-27L, Warner Instruments, США) и постоянно перфузировали оксигенированным aCSF при 24 °C (TC-324B, Warner Instruments, США) со скоростью 1,5–2,0 мл/мин. Записи патч-зажима целых клеток были получены из нейронов PV, идентифицированных на основе их размера, формы и положения в субгранулярном слое, с использованием записывающих пипеток (Glass type 8250, King Precision Glass, Inc., CA), которые вытягивали в горизонтальном съемнике пипеток. (Narishige, NY) до сопротивления 3–4 МОм и заполненного внутренним раствором, содержащим (в мМ): 126 K-глюконат, 4 NaCl, 1 MgSO ₄ , 0.02 CaCl ₂ , 0,1 BAPTA, 15 глюкоза, 5 HEPES, 3 АТФ, 0,1 GTP (рН 7,3). Чтобы измерить срабатывание нейронов PV, вводили ток 100 пА с установленным начальным мембранным потенциалом -70 мВ. Свойства одиночных потенциалов действия измерялись по первому потенциалу действия, индуцированному ступенчатым введением тока. Данные были получены при частоте дискретизации 50 кГц, отфильтрованы при частоте 1 кГц и проанализированы в автономном режиме с использованием программного обеспечения pClamp10 (Molecular Devices, CA).

Трансляция аффинной очистки рибосом (TRAP)

TRAP проводили, как описано ранее (37, 38).Вкратце, мышей TRAP, селективных по отношению к нейронам PV, подвергали CSDS. Свежесобранные гиппокампы мышей PV-TRAP. Гомогенаты гиппокампа непораженных, устойчивых и восприимчивых мышей использовали для иммунопреципитации EGFP-меченых полисом из нейронов PV, и мРНК, прикрепленные к полисомам, выделяли, а РНК дополнительно очищали с использованием RNeasy Micro Kit (Qiagen, Hilden, Germany). Все образцы РНК были проверены на высокое качество с использованием набора Bioanalyzer RNA 6000 Pico Kit (Agilent, Сан-Диего, Калифорния). 1 нг общей РНК использовали для создания полноразмерной кДНК с использованием набора Clontech SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit.Затем 1 нг кДНК использовали для приготовления библиотек с использованием набора для подготовки образцов ДНК Illumina Nextera XT. Библиотеки с уникальными штрих-кодами объединяли в равных молярных соотношениях и секвенировали на секвенаторе Illumina NextSeq 500 для получения одиночных прочтений размером 150 п.н. в соответствии с протоколом производителя. Необработанные данные можно найти в базе данных Gene Expression Omnibbus (GEO) Национального центра биотехнологической информации (NCBI) (GSE184027).

Биоинформатический анализ

После секвенирования адаптер и низкокачественные базы были вырезаны с помощью fastp (39) из необработанных файлов секвенирования в формате FASTQ.Очищенные чтения были сопоставлены с эталонным геномом сборки 10 Mus musculus с использованием STAR версии 2.7.1a (40). После выравнивания количество фрагментов на килобазу транскрипта на миллион картированных прочтений (FPKM) для всех генов в каждом образце рассчитывали с помощью R-пакета edgeR(41). Для анализа дифференциальной экспрессии генов между образцами использовали DESeq2(42), применяя стандартный режим сравнения между двумя экспериментальными группами. Значения P были рассчитаны в DESeq2 с поправкой на множественное тестирование с использованием процедуры Бенджамини-Хохберга.Ingenuity Pathway Analysis использовали для анализа клеточных путей с дифференциально экспрессируемыми генами. Затем значения P для DEG были загружены в программу Ingenuity Pathway Analysis (Qiagen), которая использовалась для анализа клеточных путей, определяемых дифференциально экспрессируемыми генами.

Количественная ПЦР (кПЦР)

2,5 нг/2 мкл полученной кДНК из препарата библиотеки TRAP использовали для каждой реакции кПЦР с 10 мкл TaqMan Fast Advanced Master Mix (Applied Biosystems), 1 мкл праймера Ahnak Prime Time для кПЦР (интегрированная ДНК). Технологии, мм.PT.56a.13518996) или 1 мкл праймера Actb Prime Time для количественной ПЦР (IDTDNA, Mm.PT.58.28

0.g) и 7 мкл воды. Образцы нагревали до 50°С в течение 2 мин, 95°С в течение 10 с, затем 40 циклов 95°С в течение 15 с, 60°С в течение 1 мин. Образцы нормализовали по Actb как гену домашнего хозяйства. Уровни мРНК выражали с использованием метода 2™ΔΔCt (43).

Иммуногистохимия

Животных глубоко анестезировали CO ₂ и транскардиально перфузировали PBS с последующим введением 4% параформальдегида (PFA) в PBS.Мозг постфиксировали в 4% PFA в течение ночи при 4°C, а затем подвергали криозащите с использованием 30% сахарозы в PBS в течение не менее 24°C с последующим замораживанием и помещением в среду Tissue Tek OCT (Sakura Finetek USA Inc., CA). ). Для сбора корональных срезов толщиной 40 мкм использовали криостат. Для всех окрашиваний между группами использовали одну и ту же смесь основного раствора блокирующего буфера и антител. Иммуногистохимию проводили бок о бок между группами. Свободно плавающие срезы промывали в PBS и затем инкубировали в блокирующем буфере (0.5% Triton X-100, 5% нормальная козья сыворотка, в PBS) в течение ~2□ч при комнатной температуре. Затем срезы инкубировали в течение ночи (∼16□ч) при 4□°C в первичных антителах, разведенных в блокирующем буфере. Первичные антитела были следующими: анти-eGFP (куриные поликлональные, GFP-1020, Aves, 1:1000), анти-Cre рекомбиназа (мышиные моноклональные, MAB3120, Millipore, 1:200), анти-парвальбумин (мышиные моноклональные, PV235). , Swant, 1:1000 или поликлональные антитела морских свинок, GP72, Swant, 1:1000) и анти-mCherry (мышиные моноклональные, 3A11, DSHB (UIOWA), 1:500).После инкубации срезы трижды промывали в PBS и инкубировали с вторичными антителами, конъюгированными с Alexa-fluor (козьими анти-морскими свинками, А-11073, Invitrogen, 1:5000; козьими анти-кроличьими (31460) и козьими анти-мышиными (31460). 31430), Thermo Fisher Scientific, 1:5000). После вторичной инкубации срезы трижды промывали в PBS и помещали на предметные стекла с твердым покрытием Vectashield (Vector Labs, CA) для микроскопии. Конфокальные изображения были получены на системе конфокальной визуализации Zeiss LSM 710 (Carl Zeiss Microscopy, Thornwood, NY) с использованием 20×□/0.8□Н.А. воздуха или 100×□/1,4□N.A. масляно-иммерсионные объективы (Carl Zeiss Microscopy, Thornwood, NY). Усиление, время экспозиции и все другие связанные настройки были постоянными на протяжении каждого эксперимента. Все группы изображений обрабатывались параллельно с помощью Fiji.

Вестерн-блоттинг

Ткани гиппокампа мыши лизировали буфером для лизиса (Pierce IP Lysis Buffer, 87788, Thermo Fisher Scientific), дополненным смесью ингибиторов протеазы и фосфатазы (78442, Thermo Fisher Scientific). Тканевые лизаты гомогенизировали с помощью измельчителя тканей (10 ударов, 02-911-529, Thermo Fisher Scientific) и центрифугировали при 800 х g в течение 5 мин.Уровни белка в супернатанте измеряли методом ВСА. Образцы смешивали со стандартным буфером для образцов белка и кипятили на горячей плите в течение 2 мин, после чего подвергали SDS-PAGE с 4–20% гелями Novex Tris-Glycine (Sigma-Aldrich) с последующим переносом белка на нитроцеллюлозную мембрану. . Мембраны подвергали иммуноблотингу с инкубацией первичных антител против Ahnak (кроличьи поликлональные, RU2024, 1:5000) или против Gapdh (мышиные моноклональные, MAB374, Millipore, 1:5000) с последующей инкубацией козьих антикроличьих антител, связанных с пероксидазой хрена. или вторичное антитело против мыши (1:5000, Thermo Fisher Scientific).Связывание антител определяли с помощью системы детекции иммуноблоттинга с усиленной хемилюминесценцией (Perkin Elmer LLC WESTERN LIGHTNING PLUS-ECL, Thermo Fisher Scientific) и пленки для авторадиографии Kodak. Полосы количественно оценивали с помощью денситометрии с использованием программного обеспечения NIH Image 1.63.

RNAscope

Через один день после тестов SI животных анестезировали и быстро обезглавливали. Мозги быстро извлекали и замораживали в сухом льду. Срезы вырезали толщиной 20 мкм, помещали на предметные стекла и хранили при -80°C.Срезы фиксировали в 4% PFA в течение 15 минут, обезвоживали в последовательных концентрациях этанола (50%, 70% и 100%) и обрабатывали с помощью мультиплексного флуоресцентного анализа RNAscope (320293, RNAScope, Advanced Cell Diagnostics, Inc., Калифорния). Срезы гибридизовали со смесью селективных зондов на парвальбумин (Mm-Pvalb, 421931) и Ahnak (Mm-Ahnak, 576971). Затем срезы контрастировали DAPI и закрывали покровным стеклом. Конфокальные изображения были получены на системе конфокальной визуализации Zeiss LSM 710 с использованием 100×□/1.4□Н.А. масляный иммерсионный объектив (Carl Zeiss Microscopy). Поскольку каждое изображение содержало только несколько клеток, для каждой vDG было взято несколько изображений стопки, которые обрабатывались независимо. Z-стеки были взяты с шагом 1 мкм. Усиление, время экспозиции и все другие связанные параметры были постоянными для каждого количественного изображения. Чтобы создать проекционное изображение для каждой ячейки PV, каждый набор проекций стопки был сложен по оси z с максимальной интенсивностью с использованием Фиджи. Круговые ROI были нарисованы вокруг всех клеток, экспрессирующих PV, в vDG.Затем эти области интереса использовались для анализа точек и количества клеток с использованием Фиджи. Всего было проанализировано n=73-102 клеток PV в vDG на группу. Анализировали 2-3 среза на мышь и всего 3-4 мыши на группу.

Статистические данные

Все данные представлены в виде средних значений ± стандартная ошибка среднего, за исключением графиков для скрипки и круговых диаграмм. Размеры выборки для биохимии, электрофизиологии и CSDS были определены на основе наших эмпирических данных, накопленных в лаборатории, и предыдущих исследований с использованием CSDS (10, 44, 45). Размеры выборки и статистические методы указаны в подписи к каждому рисунку.Статистический анализ проводили с использованием двустороннего непарного t-критерия Стьюдента, однофакторного дисперсионного анализа, двухфакторного дисперсионного анализа или двухфакторного дисперсионного анализа с повторными измерениями (см. Резюме статистического анализа в дополнительной таблице 1). ANOVA парных распределений Гаусса сопровождались апостериорным критерием Бонферрони. Для определения нормальности использовали комплексный критерий нормальности Д’Агостино-Пирсона. Для негауссовых распределений нескольких групп использовался критерий Крускала-Уоллиса с последующим апостериорным критерием множественных сравнений Данна.Для статистического анализа и графической подготовки использовали GraphPad Prism 6 или 8. p < 0,05 считали порогом статистической значимости. Статистическая значимость показана как *p<0,05, **p<0,01, ***p<0,001, ****p<0,0001, иначе указано на рисунках или в подписях к рисункам.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Активность нейронов PV в vDG связана с поведенческими реакциями на CSDS

vDG участвует в контроле настроения, реакциях на стресс и антидепрессантном действии (18, 46, 47).Чтобы оценить роль нейронов vDG в поведенческих исходах, вызванных стрессом, мы зафиксировали активность нейронов vDG у мышей, перенесших CSDS (рис. 1А). Парадигма CSDS использует этологически значимые стрессоры, включая физическое поражение и сенсорный контакт с мышами-агрессорами в течение 10 дней, чтобы вызвать социальное избегание и ангедоническое поведение, что измеряется социальным взаимодействием (SI) с новой мышью-агрессором и потреблением сахарозы (10, 31). ). Тест SI дает отношение SI времени, проведенного в зоне взаимодействия в присутствии или в отсутствие нового агрессора, для выявления уязвимых (коэффициент SI ниже 1) и устойчивых (коэффициент SI равен или выше 1) групп (рис. 1B). , C, дополнительная фигура S1).Непобежденные контрольные мыши оставались парами без социального поражения или контакта с агрессорами и демонстрировали коэффициенты SI, подобные устойчивым мышам.

(A) Диаграмма и временная шкала электрофизиологических записей CSDS и интра-vDG. (B) Репрезентативные животные, изображающие разделение животных на непобежденный контроль (ND), устойчивые (Res, отношение SI ≥ 1) и восприимчивые (Sus, отношение SI < 1) группы (односторонний ANOVA, непобежденные (n=23), Res (n=23) и Sus (n=15)). (C) Примеры тепловых карт, отображающих время, проведенное на арене СИ с агрессором в клетке. (D) Все обнаруженные нейроны (n = 772) прошли первую стадию классификации на основе полной латентности и пикового индекса (BI), чтобы отличить предполагаемые возбуждающие клетки (черные точки, n = 336, BI > 1,8). ), предполагаемые нейроны PV с узкой формой волны (красные точки, n = 142, латентность ≤ 0,4 мс) и предполагаемые интернейроны с широкой волной (зеленые точки, n = 294, латентность> 0,4 ​​мс). Масштабные полосы для репрезентативных сигналов представляют 1 мс. (E) Возбуждающие нейроны были дополнительно классифицированы на предполагаемые мшистые клетки (n = 133, AHP < 70) и предполагаемые клетки-зерна (n = 203, AHP > 70) на основе бимодального распределения тока AHP, измеренного от первого производная шипа. (F-I) Гистограммы показывают частоту (среднее значение ± стандартная ошибка среднего) предполагаемых типов нейронов, проанализированных в соответствующих экспериментальных группах. Каждая черная точка представляет собой нейрон. ( F ) Восприимчивость связана со снижением частоты спайков нейронов PV, которое устраняется кетамином (n = 31/7 (нейронов/мыши) ND мышей; 36/7 устойчивых мышей, 37/5 восприимчивых мышей и 38/ 3 для восприимчивых мышей, получавших кетамин).( G ) Восприимчивость связана со снижением частоты спайков GC, которое устраняется кетамином (n = 61/7 (нейроны/мыши) ND мышей, 47/7 устойчивых мышей, 41/5 восприимчивых мышей и 54/3 восприимчивых мышей). мышей, получавших кетамин). ( H ) Кетамин увеличивает частоту спайков MC (n = 31/7 (нейроны/мыши) ND мышей, 49/7 для устойчивых мышей, 27/5 для восприимчивых мышей и 26/3 восприимчивых мышей, получавших кетамин. ( I ) CSDS или кетамин не изменяли частоту спайков в других тормозных нейронах (n = 85/7 (нейронов/мыши) мышей ND, 97/7 устойчивых мышей, 62/5 восприимчивых мышей и 50/3 восприимчивых мышей, получавших кетамин).* p < 0,05, ** p < 0,01, *** p < 0,001, односторонний ANOVA с сравнением Bonferroni post hoc .

Чтобы выяснить, вызывает ли CSDS адаптацию базальной активности нейронов в vDG, мы записали нейроны vDG, используя in vivo записей кремниевого зонда высокой плотности у анестезированных животных. Используя известные характеристики динамики возбуждения, мы классифицировали и разделили дискретные классы нейронов. Например, нейроны были классифицированы на основе ширины (задержки до пика) формы волны их спайков (рис. 1D.см. раздел «Методы и материалы») на нейроны с «узкой» и «широкой» волновой формой, чтобы отделить предполагаемые быстрые импульсы PV-позитивных нейронов от других классов клеток в гиппокампе (34). Кроме того, анализ разрыва, маркера динамики внутреннего возбуждения, который отличает предполагаемые возбуждающие нейроны широкой волны от тормозных нейронов в vDG, дополнительно разделил нейроны на широкие тормозные нейроны и возбуждающие нейроны (35). Кроме того, мшистые клетки имеют небольшой ток AHP после потенциала действия (48) по сравнению с гранулярными клетками (см. Методы), и, основываясь на бимодальном распределении амплитуды тока AHP, мы дополнительно разделили возбуждающие нейроны в предполагаемых мшистых клетках и предполагаемые гранулярные клетки (рис. 1E).

Наши результаты показали, что у восприимчивых мышей частота возбуждения предполагаемых PV нейронов была значительно увеличена у восприимчивых мышей по сравнению с непобежденными или устойчивыми мышами (рис. 1F). Напротив, частота возбуждения предполагаемых гранулярных клеток была значительно снижена у восприимчивых мышей по сравнению с частотой у непобежденных или устойчивых мышей (рис. 1G). Однако не было обнаружено различий в частоте возбуждения мшистых клеток между непобежденными, восприимчивыми или устойчивыми группами (рис. 1H).Чтобы выяснить, могут ли известные быстродействующие антидепрессанты обратить вспять вызванную CSDS адаптацию активности нейронов (49), мы вводили кетамин восприимчивым мышам и регистрировали активность нейронов. Кетамин улучшал увеличение частоты возбуждения предполагаемых нейронов PV и восстанавливал их до уровня, сравнимого с непобежденными или устойчивыми мышами (рис. 1F). Кроме того, лечение кетамином увеличивало скорость возбуждения в предполагаемых гранулярных и мшистых клетках (рис. 1G, H). Однако частота возбуждения других тормозных нейронов (CCK, SOM и т.) не изменились у устойчивых и восприимчивых мышей с лечением кетамином или без него по сравнению с контрольными мышами (рис. 1I). Вместе эти данные свидетельствуют о том, что вызванные CSDS изменения активности нейронов PV ^vDG и клеток-зерен (GC ^vDG ) могут играть критическую роль в дивергентных поведенческих реакциях на стресс. Противоположная направленность индуцированных CSDS изменений в нейронах PV и GCs, вероятно, возникает из-за перисоматического ингибирования больших популяций GC нейронами PV (50, 51).Наши предыдущие исследования показали, что селективное ингибирование передачи сигналов кальция или активности нейронов в нейронах PV индуцирует поведенческий фенотип, подобный антидепрессанту (19, 20), и это представление также подтверждается снижением активности нейронов PV ^vDG кетамином (рис. 1F). ). Таким образом, мы стремились определить, способно ли ингибирование или активация PV ^vDG придавать или подавлять устойчивость к CSDS соответственно.

Активность PV в vDG опосредует поведенческую реакцию на CSDS

Чтобы оценить, опосредует ли активность нейронов PV ^vDG поведенческие реакции на CSDS, мы использовали DREADD (дизайнерские рецепторы, активируемые исключительно дизайнерскими препаратами) (52) для манипулирования PV ^vDG активность нейронов in vivo .vDG мышей PV-Cre двусторонне инъецировали Cre-зависимым hM4Di-mCherry или пустым вектором mCherry (фиг. 2A) для селективной экспрессии hM4Di-mCherry в PV ^vDG (фиг. 2B). Во-первых, мы оценили, повлияет ли повторное хемогенетическое ингибирование нейронов PV одновременно с CSDS на дивергенцию поведения. Мыши, экспрессирующие hM4Di или mCherry в PV ^vDG , подверглись CSDS, во время которого за 30 минут до каждого сеанса поражения вводили агонист DREADD клозапин N-оксид (CNO) для подавления активности нейронов во время и после каждого социального стресса (рис. 2C).Интересно, что повторное ингибирование активности нейронов PV ^vDG способствовало устойчивости, о чем свидетельствует повышенный коэффициент SI (рис. 2D, E, дополнительная фигура 2A). Кроме того, повторная обработка CNO приводила к смягчению индуцированного стрессом ангедонического поведения в тесте предпочтения сахарозы (SPT) (10) у мышей, экспрессирующих hM4Di в PV ^vDG , по сравнению с mCherry (рис. 2F).

(A) Стратегия введения вируса для экспрессии hM4Di-mCherry или mCherry в vDG мышей PV-Cre. (B) Репрезентативные изображения, демонстрирующие экспрессию hM4Di-mCherry в vDG (левое изображение; масштабная линейка, 200 мкм) и изображения с большим увеличением пунктирной прямоугольной области, демонстрирующие селективную экспрессию hM4Di-mCherry в нейронах PV (правые изображения; масштабная линейка , 50 мкм). (C) Хронология повторных обработок CNO во время CSDS и поведенческих экспериментов. (D) Повторная обработка CNO привела к увеличению отношения SI (двусторонний дисперсионный анализ, отсутствие поражения (ND): mCherry (n=8) и hM4Di (n=12), поражение: mCherry (n=15) и hM4Di (n=14)). (E) Круговые диаграммы, показывающие количество устойчивых и восприимчивых животных после повторных инъекций CNO во время CSDS. (F) Обработка Chronic-CNO во время CSDS привела к тому, что у мышей hM4Di наблюдалось повышенное содержание сахарозы по сравнению с контрольной группой mCherry (двусторонний дисперсионный анализ, отсутствие поражения: mCherry (n=8) и hM4Di (n=12), поражение: mCherry ( n=16) и hM4Di (n=16)). (G) Хронология CSDS, острого лечения CNO и поведенческих экспериментов. (H) Острое лечение CNO привело к увеличению отношения SI только в hM4Di, но не в контрольной группе mCherry во время теста SI-2 (двухфакторные повторные измерения ANOVA, mCherry (n=6) и hM4Di (n=9)) . (I) После острого лечения CNO группа hM4Di показала повышенное предпочтение сахарозы в SPT по сравнению с контрольной группой mCherry (непарный двусторонний t-критерий, mCherry (n=6) и hM4Di (n=10)). (J) Стратегия введения вируса для экспрессии hM3Dq-mCherry или mCherry в vDG мышей PV-Cre. (K) Репрезентативные изображения, демонстрирующие экспрессию hM3Dq-mCherry в vDG (левое изображение; масштабная линейка, 200 мкм) и изображения с большим увеличением пунктирной прямоугольной области, демонстрирующие избирательную экспрессию hM3Dq-mCherry в нейронах PV (правые изображения; масштабная линейка , 50 мкм). (L) Хронология SSDS, лечения CNO и поведенческих экспериментов, а также схема SSDS. (M) Сравнение коэффициента SI, полученного для SI-1 (тестировано после однократной инъекции CNO сразу после SSDS) и SI-2 (тестировано после повторных ежедневных инъекций CNO в течение 10 дней). После хронических инъекций CNO мыши hM3Dq демонстрировали повышенное социальное избегание по сравнению с контрольной группой mCherry (двусторонние повторные измерения ANOVA, mCherry (n = 12) и hM3Dq (n = 15)). (N) Круговые диаграммы, показывающие количество устойчивых и восприимчивых животных в результате повторных инъекций CNO после SSDS. (O) После повторных инъекций CNO мыши hM3Dq показали снижение предпочтения сахарозы по сравнению с контрольной группой mCherry в SPT (непарный двусторонний тест t , mCherry (n=12) и hM3Dq (n=15)). Данные выражены как среднее ± SEM, и изображены отдельные точки данных. Post-hoc Множественные сравнения Бонферрони использовались для дисперсионного анализа. * р <0,05, ** р <0,01, *** р <0,001.

Учитывая, что восприимчивые к стрессу мыши, которым вводили кетамин, демонстрировали скорость возбуждения PV ^vDG , аналогичную непобежденным и устойчивым к стрессу мышам (рис. 1F), мы задались вопросом, может ли острое ингибирование PV ^vDG быть достаточным для обращения вспять социального избегания. и ангедоническое поведение у мышей, восприимчивых к стрессу.Для решения этой проблемы мышей подвергали воздействию CSDS для получения восприимчивых мышей, экспрессирующих либо hM4Di, либо пустой вектор mCherry в качестве контроля. Через 48 часов после первоначального теста SI (SI-1) только восприимчивым мышам (коэффициент SI <1,0) вводили CNO за 30 минут до последующего теста SI (SI-2) (рис. 2G). Примечательно, что острое введение CNO было способно ослабить восприимчивость, о чем свидетельствует повышенный коэффициент SI (рис. 2H) и время, проведенное в зоне взаимодействия с агрессором (дополнительная рис. 2B).Это улучшение социального избегания вернулось к показателям SI, аналогичным показателям SI-1, при тестировании еще через 48 часов (SI-3), до которого CNO не вводили (рис. 2H). Чтобы проверить, может ли острое ингибирование PV ^vDG обратить вспять вызванное стрессом ангедоническое поведение, мы вводили CNO во время КПТ. Действительно, однократное введение CNO увеличивало предпочтение сахарозы у мышей, экспрессирующих hM4Di, по сравнению с контрольными мышами mCherry (рис. 2I).

Затем мы оценили, будет ли хемогенетическая активация PV ^vDG достаточной для возникновения восприимчивости к стрессу.Мы двусторонне инъецировали Cre-зависимый AAV, экспрессирующий hM3Dq-mCherry, или пустой вектор mCherry в vDG мышей PV-Cre (рис. 2J) для селективной экспрессии hM3Dq-mCherry в PV ^vDG (рис. 2K). Мы приняли парадигму подпорогового стресса социального поражения (SSDS), которая использует 3 сеанса социального стресса в 1 день (32) и проверили влияние острой активации PV ^vDG CNO во время SSDS или повторной активации после SSDS на поведение (рис. 2L). . В то время как острое лечение CNO во время SSDS не вызывало существенной разницы между мышами hM3Dq и контрольными мышами mCherry (дополнительная фигура 2C, D), последующая повторная ежедневная активация нейронов PV ^vDG после SSDS приводила к поведенческой восприимчивости, на что указывает снижение отношения SI ( Рисунок 2M, N, дополнительный Рисунок 2E) и снижение предпочтения сахарозы (Рисунок 2O).Однако повторное введение CNO мышам hM3Dq, не подвергавшимся воздействию предыдущих стрессоров, не вызвало этого снижения (дополнительная фигура 2F-H). Эти данные свидетельствуют о том, что, хотя повторного или острого торможения достаточно для обеспечения устойчивости к социальному стрессу, активация этих нейронов должна происходить неоднократно в течение многих дней, чтобы стимулировать восприимчивость к стрессу, что потенциально указывает на то, что происходит во время CSDS.

Молекулярные адаптации в нейронах PV гиппокампа связаны с различными поведенческими последствиями после CSDS

Чтобы определить, связаны ли молекулярные адаптации в нейронах PV гиппокампа с устойчивостью или восприимчивостью к CSDS, мы создали профили экспрессии, специфичные для нейронов PV, используя TRAP/RNA- последовательный подход (53).Мы использовали линию TRAP, зависимую от рекомбиназы Cre, скрещенную с линией PV-Cre, для селективной экспрессии рибосомного белка L10a, слитого с усиленным зеленым флуоресцентным белком (EGFP), в нейронах PV (рис. 3А). После CSDS гомогенаты гиппокампа мышей непобежденных, устойчивых и восприимчивых мышей использовали для иммунопреципитации полисом, меченных EGFP, из нейронов PV, а мРНК, прикрепленные к полисомам, выделяли и секвенировали (рис. 3B). Важно отметить, что TRAP, специфичный для PV-нейронов, показал высокую селективность, о чем свидетельствует высокое обогащение мРНК PV, но не маркерами других типов нейронов, нейроглии и типов клеток в кровеносных сосудах, что предполагает жесткую селективность (рис. 3C).

(A) Схема трансгенной PV-специфичной линии EGFP-L10a для TRAP. Репрезентативные изображения, показывающие экспрессию EGFP-L10a в vDG (левое изображение; масштабная линейка, 200 мкм) и изображения с большим увеличением пунктирной прямоугольной области, демонстрирующие избирательную экспрессию EGFP-L10a в нейронах PV (правые изображения; масштабная линейка, 50 мкм). (B) Хронология CSDS и последующего расслоения гиппокампа, TRAP и RNAseq. (C) Обогащение маркерных генов в данных TRAP/RNAseq. (D-F) Графики вулканов DEG в сравнениях непобежденных (ND) и Res ( D ), ND и Sus ( E ) и Res и Sus ( F ). (G) Диаграмма Венна для ДЭГ (отсечка, p<0,05). (HJ) 4 главных пути значительно изменились в Res vs Sus (H) , ND vs Res ( I ), ND vs Sus ( J ) и сравнениях. (K-M) Тепловые карты DEG в верхнем пути в каждом сравнении.Использовали среднее значение экспрессии генов (ND (n=4), Res (n=4) и Sus (n=3)).

RNA-seq выявил 458 дифференциально экспрессируемых генов (DEG) между непобежденными и устойчивыми мышами, 1976 DEG у непобежденных и восприимчивых мышей и 3475 DEG у устойчивых и восприимчивых мышей (рис. 3D-G). Был проведен анализ путей с помощью DEG (рис. 3H-J), а также между устойчивыми и восприимчивыми мышами или непобежденными генами, связанными с окислительным фосфорилированием (рис. 3K), митохондриальной дисфункцией (дополнительный рисунок 3B), передачей сигналов EF2 (рис. 3L) или Передача сигналов mTOR (дополнительная фигура 3B) была выражена по-разному.Напротив, изменения в экспрессии генов, связанных с синаптогенезом, были самыми разными между непораженными и восприимчивыми мышами (рис. 3J, M). Эти результаты свидетельствуют о том, что изменения митохондриального, белкового синтеза, клеточного метаболизма и синаптических путей в нейронах PV гиппокампа могут вызывать адаптивные изменения в активности нейронов PV ^vDG и поведенческих реакциях на CSDS.

Хронический стресс изменяет экспрессию Ahnak в гиппокампе

Наше предыдущее исследование идентифицировало Ahnak как регулятор «депрессивного» поведения, возможно, отчасти из-за его роли в переносе VGCC L-типа на поверхность, что позволяет Ahnak регулировать ответы нейронной активности (20).Примечательно, что мы обнаружили, что у восприимчивых мышей повышена мРНК Ahnak в нашем наборе данных TRAP/RNAseq (p = 0,0399, дополнительная таблица 2). Чтобы подтвердить, связаны ли поведенческие реакции на CSDS с изменениями экспрессии Ahnak, мы подвергли мышей CSDS с последующим SI-тестом и сбором тканей головного мозга (рис. 4A). Во-первых, мы провели иммуноблотинг на белок Ahnak во всем гиппокампе. Уровни белка Ahnak были снижены в гиппокампе устойчивых мышей, но повышены в гиппокампе восприимчивых мышей по сравнению с непобежденными контрольными мышами (рис. 4B-C).Уровни Ahnak в гиппокампе также обратно коррелировали с коэффициентом SI (рис. 4D) и временем, проведенным в зоне взаимодействия, содержащей мышь-агрессор (дополнительная фигура 4A). Эти данные показывают, что CSDS индуцирует изменения экспрессии Ahnak в гиппокампе в противоположных направлениях, в зависимости от поведенческой реакции отдельных мышей.

(A) Схема и временная шкала CSDS и сбора тканей. (B-D) Иммуноблоттинг белка Ahnak с использованием лизатов гиппокампа. ( B ) Репрезентативные изображения иммуноблотинга Анака и Гапда в качестве контроля. ( C ) Количественная оценка иммуноблотов (односторонний ANOVA, непобежденные (n=23 мыши), Res (n=23 мыши) и Sus (n=15 мышей)). ( D ) Ahnak гиппокампа обратно коррелирует с отношением SI (pearson r : r = -0,4172, p = 0,0008, n = 61 мышь) (E) Репрезентативные изображения экспрессии m PV и AhnakRNA РНКскоп.Масштабная линейка, 5 мкм. (F) Экспрессия мРНК Ahnak в нейронах vDG PV из групп Non-defeat, Res и Sus (критерий Крускала-Уоллиса с post hoc Множественные сравнения Данна: Non-defeated (n=102 клетки), Res (n=94) клетки) и Sus (n=73 клетки). (G) Экспрессия мРНК Ahnak в нейронах vDG PV обратно коррелирует с отношением SI (pearson r : r = -0,8401, p =0,0240, n= 10 мышей). Все данные нормализованы к группе ND. * p <0.05, ** р <0,01, *** р <0,001, **** р <0,0001.

Наше предыдущее исследование показало, что мыши Ahnak KO, селективные в отношении нейронов PV, демонстрировали антидепрессантоподобное поведение (20). Однако гомогенаты, используемые для иммуноблоттинга, включают белок всех типов клеток и субрегионов гиппокампа. Чтобы оценить, индуцирует ли CSDS изменения экспрессии Ahnak в нейронах PV, мы обратились к оценке мРНК Ahnak в PV ^vDG в непораженном, стрессоустойчивом и восприимчивом мозге мышей с использованием RNAscope, флуоресцентного анализа РНК in situ гибридизации ( 54).Мы использовали селективный зонд для мРНК Ahnak вместе с селективным зондом для мРНК PV, чтобы указать расположение нейронов PV и количественно оценить экспрессию Ahnak в PV ^vDG (рис. 4E). Количество точек Ahnak на PV ^vDG было значительно увеличено у восприимчивых мышей по сравнению с количеством у непобежденных контрольных или устойчивых мышей, в то время как у устойчивых мышей наблюдалось значительное снижение экспрессии Ahnak по сравнению с непобежденными контрольными мышами ( Рисунок 4F). Кроме того, мРНК Ahnak в PV ^vDG обратно коррелирует с коэффициентом SI и зоной взаимодействия, содержащей мышь-агрессора (рис. 4G и дополнительная рис. 4B).Этот результат согласуется с двунаправленным изменением белка Ahnak в тканях гиппокампа восприимчивых и устойчивых мышей по сравнению с непобедимыми контрольными мышами. Эти результаты в целом указывают на то, что экспрессия Ahnak гиппокампа в нейронах PV ^vDG изменяется с помощью CSDS, особенно повышается у мышей, чувствительных к стрессу.

Делеция Ahnak в нейронах vDG или PV придает поведенческую устойчивость к CSDS. 2) избирательно в нейронах ПВ.Чтобы удалить Ahnak избирательным образом, мы создали Cre-loxP-опосредованную вентральную зубчатую извилину (vDG), специфичную для нокаута Ahnak (KO) мышей. Мы использовали мышей Floxed Ahnak (20), которым инъецировали аденоассоциированный вирус (AAV), экспрессирующий рекомбиназу Cre, слитую с GFP, или пустой вектор GFP в качестве контроля под промотором синапсин человека в вентральную зубчатую извилину (vDG) для селективного удаления Ahnak в нейроны vDG (cKO

(A) Диаграмма и график условного нокаутирующего подхода с использованием стереотаксических инъекций AAV контроля AAV-Cre-GFP или AAV-GFP. ( B ) Типичное конфокальное изображение коронарного среза мозга, окрашенного на GFP и Ahnak, показывающее выборочную делецию Ahnak в нейронах vDG. Масштабная линейка, 500 мкм (слева), 50 мкм (справа). (C) Мыши Ahnak cKO ^vDG демонстрируют более высокое отношение SI, чем GFP-контроль (продолжение) (двусторонний ANOVA, без поражений (ND): продолжение (n = 16) и cKO ^vDG (n = 17), побеждены: Cont (n=19) и cKO ^vDG (n=18)). (D) Круговые диаграммы, показывающие количество устойчивых и восприимчивых животных в результате CSDS. (E) Мыши Ahnak cKO ^vDG демонстрируют сниженное стресс-индуцированное ангедоноподобное поведение в тесте предпочтения сахарозы после CSDS (двусторонний ANOVA, ND: Cont (n=6) и cKO ^vDG (n=6) ), побежденные: Cont (n=9) и cKO ^vDG (n=10)). (F) График поведения и диаграмма условного нокаута для Ahnak cKO ^PV . ( G ) Конфокальные изображения, показывающие отсутствие мРНК Ahnak в нейронах PV ^vDG у мышей с условной делецией в нейронах PV (cKO ^PV ). (H) После CSDS мыши cKO ^PV демонстрируют более высокое отношение SI по сравнению с контрольными мышами (fl/fl) (двусторонний ANOVA, ND: fl/fl (n=12) и cKO ^PV (n =12), побеждены: fl/fl (n=21) и cKO ^PV (n=19)). (I) Круговые диаграммы, показывающие количество устойчивых и восприимчивых животных в результате CSDS. (J) Мыши Ahnak cKO ^PV демонстрируют повышенное предпочтение сахарозы после CSDS по сравнению с контролем (двусторонний дисперсионный анализ, ND: fl/fl (n=12) и cKO ^PV (n=12), поражение: fl /fl (n=10) и cKO ^PV (n=13)).Данные выражены как среднее значение ± SEM, и изображены отдельные точки данных. Post-hoc Множественные сравнения Бонферрони использовались для дисперсионного анализа. * p < 0,05, ** p < 0,01 и нс, недостоверно.

Затем мы исследовали, влияет ли избирательная делеция Ahnak в нейронах PV на вызванные стрессом поведенческие реакции. Чтобы избирательно удалить Ahnak в нейронах PV, мы получили потомство от скрещивания мышей Floxed Ahnak с линией рекомбиназы Cre, специфичной для нейронов PV (cKO ^PV ) (рис. 5F), что приводит к PV-селективному Ahnak KO (20) (рис. 5G). ).Мы подвергали мышей Ahnak cKO ^PV (f/f; Cre-положительные) и контрольных мышей (f/f; Cre-отрицательные) CSDS и проводили тест SI и SPT (рис. 5F). Побежденные мыши Ahnak cKO ^PV показали повышенное отношение SI по сравнению с побежденными контрольными мышами fl / fl (рис. 5H и дополнительная фигура 5B), что дало большую часть устойчивых мышей (рис. 5I). Кроме того, пораженные мыши Ahnak cKO ^PV демонстрируют повышенное потребление сахарозы по сравнению с пораженной контрольной группой, что предполагает ослабление ангедоноподобного поведения, вызванного CSDS (рис. 5J).Непобедимые мыши Ahnak cKO ^PV и контрольные мыши демонстрируют сопоставимое поведение в тесте SI (рис. 5H, дополнительная рис. 5B) и SPT (рис. 5J). Поразительно, но эти результаты согласуются с результатами, полученными при условной делеции Ahnak в vDG (cKO ^vDG ). В целом эти данные свидетельствуют о том, что увеличение экспрессии Ahnak, наблюдаемое в PV ^vDG у восприимчивых мышей (рис. 4E-G), необходимо для создания поведенческой восприимчивости от CSDS.

Поскольку Ahnak и повышенная активность PV необходимы для поведенческой восприимчивости, мы затем стремились оценить, влияет ли делеция Ahnak в нейронах PV на активность нейронов PV. срезы от Ahnak cKO ^PV и контрольных мышей (дополнительная фигура 6A).Частота возбуждения, вызванная инъекцией тока в нейронах PV у мышей Ahnak cKO ^PV , была значительно снижена по сравнению с контрольной группой (дополнительная фигура 6B-C), что указывает на роль Ahnak в модуляции возбуждения PV. Анализ свойств потенциала действия показывает, что Ahnak cKO ^PV не влияет на порог напряжения, амплитуду потенциала действия и послегиперполяризацию (AHP), но увеличивает ширину полуамплитуды (дополнительная фигура 6D-H). Эти результаты подразумевают, что снижение возбудимости нейронов PV за счет делеции Ahnak может способствовать поведенческой устойчивости или восприимчивости к препятствиям после CSDS.

Обсуждение

Здесь мы демонстрируем, что активность нейронов PV ^vDG и изменения экспрессии Ahnak в гиппокампе имеют решающее значение для формирования восприимчивости или устойчивости к CSDS. Наше исследование дополняет предыдущие исследования с использованием парадигм хронического стресса у грызунов для выявления различных клеточных и молекулярных адаптаций, включая ионные каналы, синаптические белки, факторы транскрипции, микроРНК и эпигенетические регуляторы в ключевых нервных цепях, регулирующих восприимчивость или устойчивость к стрессу, включая миндалины, таламические и гиппокампальные цепи. как катехоламинергические цепи (11, 12, 55).В этом исследовании мы выявили причинно-следственную связь активности нейронов PV ^vDG с поведенческой восприимчивостью или устойчивостью к CSDS. Мы также определили, что между устойчивыми мышами и восприимчивыми мышами возникло много расходящихся паттернов экспрессии генов по сравнению с непобежденными мышами. Например, DEG, связанные с окислительным фосфорилированием и передачей сигналов EIF2, в значительной степени снижены у устойчивых мышей, но повышены у восприимчивых мышей по сравнению с непобежденными мышами (рис. 3K, L). Однако DEG, связанные с синаптогенезом или передачей сигналов mTOR, состоят из смеси генов с повышенной или пониженной экспрессией как у устойчивых, так и у восприимчивых мышей (рис. 3M и дополнительная рис. 3B).Эти результаты свидетельствуют о том, что активные молекулярные изменения, связанные с функцией митохондрий, энергетическим метаболизмом, трансляцией белков и синаптической пластичностью, лежат в основе адаптации возбуждения нейронов PV в восприимчивых к стрессу и устойчивых группах. Мы также выявили расходящиеся изменения Ahnak в лизатах гиппокампа и PV ^vDG (рис. 4). Однако паттерн изменений возбуждения нейронов PV несколько отличается от такового при генных изменениях. Активация нейронов PV увеличивается только у восприимчивых мышей, но скорость активации у устойчивых мышей сравнима с таковой у непобежденных контролей (Рисунок 1), что напоминает предыдущие наблюдения в нейронах VTA (56-58).Только у мышей, восприимчивых к стрессу, наблюдается повышенная активация дофаминовых нейронов, проецирующихся от VTA к NAc, и сниженная активация дофаминовых нейронов, проецирующихся от VTA к mPFC (56, 57). Хотя у устойчивых мышей в VTA и NAc регулируется значительно больше генов, чем у восприимчивых мышей (10), устойчивые мыши проявляют активацию на контрольном уровне в обоих вышеупомянутых цепях (58). Эта адаптация импульсной активности у устойчивых мышей была объяснена гомеостатической адаптацией внутренних свойств за счет повышающей регуляции гиперполяризационно-активируемого тока в качестве возбуждающей движущей силы в сочетании с активацией калиевых каналов в качестве тормозной движущей силы внутренней возбудимости нейронов (58). .Таким образом, DEG, наблюдаемые у устойчивых мышей, могут вызывать механизм гомеостатического контроля, чтобы аналогичным образом поддерживать возбуждение нейронов PV со скоростью, сравнимой с непобежденными мышами.

Ранее мы идентифицировали Ahnak как эндогенный регулятор VGCC L-типа у мышей (20). Генетические исследования человека указывают на то, что измененная функция VGCC L-типа связана с патофизиологией множественных психических расстройств, включая большое депрессивное расстройство, биполярное расстройство, шизофрению и спектр аутизма (59-64). VGCC L-типа участвуют в быстром антидепрессивном действии кетамина (65) и скополамина (66).Эти наблюдения поднимают потенциальную связь между Ahnak-опосредованными путями и депрессивно-подобным поведением, вызванным стрессом, и его улучшением антидепрессантами. В этом исследовании мы наблюдали, что уровень Ahnak снижается или повышается в нейронах PV гиппокампа выборочно у устойчивых или восприимчивых мышей, соответственно (рис. 4), а делеция Ahnak в нейронах PV способствует поведенческой устойчивости после CSDS (рис. 5). Возможно, что эти изменения в Ahnak способствуют, по крайней мере частично, регуляции возбуждения нейронов PV.Эта ключевая роль Ahnak в нейронах PV для поведения, индуцированного CSDS, предположительно обусловлена ​​его регуляцией VGCC L-типа. N-концевая область Ahnak связывается с Ca _v 1.2, порообразующей α1-субъединицей L-типа, а ее C-концевая область поддерживает β-субъединицу VGCC и комплекс p11/Anxa2 (20). Экспрессия на клеточной поверхности Ca _v 1.2 и Ca _v 1.3 и ток кальция L-типа были значительно снижены в нейронах Ahnak KO по сравнению с контролями дикого типа (20). Поскольку передача сигналов кальция L-типа, опосредованная VGCC, опосредует экспрессию ядерных генов, синаптическую пластичность и гомеостатический контроль нейронных схем (27), измененные уровни Ahnak в нейронах PV, вероятно, модулируют опосредованную передачей сигналов кальция адаптацию нейронов.Примечательно, что экспрессия генов большинства субъединиц VGCC L-типа не изменяется по сравнению со стрессовыми группами, за исключением гена Cacnb1 (p = 0,0244 для Res vs Sus, дополнительная таблица 2). Таким образом, мы предлагаем модель, согласно которой изменения Ahnak потенциально изменяют перенос VGCC L-типа на плазматическую мембрану и, таким образом, изменяют активность каналов, что, возможно, приводит к генным изменениям, имеющим отношение к путям митохондрий, синтеза белка и синаптогенеза.

В головном мозге Ahnak поддерживает p11, изменения которого играют важную роль в патофизиологии и антидепрессивном действии (67).Ранее мы наблюдали, что белки, но не уровни мРНК p11 и Anxa2, были сильно дестабилизированы в отсутствие Ahnak (20), что указывает на то, что p11-опосредованные пути также могут быть вовлечены в адаптацию нейронов PV в ответ на CSDS. В этом исследовании мы обнаружили, что мРНК p11 также значительно повышена в восприимчивой группе по сравнению с контрольной группой без поражения (среднее значение RPKM 14,810 в Sus против 11,144 в группе без поражения, p = 0,0385) или устойчивыми мышами (среднее значение RPKM 14,810 в группе Sus против поражения). 10,126 в Рез, р = 0.0058) в наборе данных TRAP (дополнительная таблица 2). P11 играет роль в экспрессии генов, регулируя SMACA3, фактор ремоделирования хроматина, и, возможно, вместе с Supt6, партнером по связыванию РНК-полимеразы II, также известным как шаперон гистонов (16, 68, 69). Таким образом, ядерные пути p11 могут способствовать генным изменениям, связанным с митохондриями, путями синтеза белка и синаптогенеза, которые мы идентифицировали в этом исследовании. В дополнение к ядерной роли, недавние исследования указывают на роль p11 во внутренней возбудимости мембран, которая опосредована генной регуляцией Kv3.1β калиевые каналы в нейронах гиппокампа PV (70) или каналы HCN2 (гиперполяризационно-активируемые калиевые и натриевые каналы, управляемые циклическими нуклеотидами) в холинергических интернейронах в прилежащем ядре (32). Важно отметить, что предполагается, что ингибирование Kv3.1β играет роль в терапевтическом действии антидепрессантов, селективных ингибиторов обратного захвата серотонина (СИОЗС), путем подавления нейронов PV ^vDG посредством Gi-связанной передачи сигналов (70). В соответствии с этими наблюдениями мы также наблюдали подавление активации нейронов PV у устойчивых мышей, а также у восприимчивых мышей, получавших кетамин (рис. 1F).В совокупности эти исследования предполагают ингибирование PV как общий клеточный механизм, связанный с биологической устойчивостью, а также с фармакологическими действиями двух разных классов антидепрессантов.

Интересно, что недавнее исследование Medrihan et al. предположили, что сниженный канал Kv3.1 и функция p11 в PV ^vDG будут придавать восприимчивость после стресса (71). Хотя мыши Ahnak cKO ^PV демонстрируют устойчивость после CSDS (рис. 5F-J), мыши p11 cKO ^PV демонстрируют стрессоустойчивость после SSDS(71), вероятно, благодаря многим другим партнерам по связыванию p11 в PV ^vDG , включая mGluR5, SMARCA3, Supt6 и 5-HT5A (16, 19, 70).Кроме того, время модуляции PV ^vDG или сетевой активности vDG до, во время и после стресса, вероятно, влияет на поведенческий результат. В этом исследовании мы показываем, что торможение каждый день хронического стресса (рис. 2A-D), а также острое торможение после стресса (рис. 2E-G) приводит к устойчивости к стрессу. Однако Медрихан и соавт. наблюдали, что острое хемогенетическое ингибирование vDG ^PV во время SSDS повышает восприимчивость к стрессу в тесте социального взаимодействия. Необходимы дальнейшие исследования активности нейронов PV ^vDG во время CSDS, чтобы полностью понять их участие в поведенческих реакциях, вызванных CSDS.Важно отметить, что в большинстве исследований CSDS до сих пор в основном используются самцы мышей, что ограничивает последствия, вытекающие из этих исследований. Однако в последние годы модели CSDS были адаптированы для использования на самках мышей (72-75). Из-за гендерных различий в распространенности аффективных расстройств (76, 77) оправдано использование этих новых моделей и проверка наших результатов на женщинах.

Недавно было обнаружено, что усиление нейрогенеза в гиппокампе у взрослых ингибирует популяцию чувствительных к стрессу GC в vDG, придавая стрессоустойчивость (47).Интересно, что делеция Ahnak способствует нейрогенезу гиппокампа (78). CSDS-индуцированное сокращение Ahnak в гиппокампе может способствовать нейрогенезу гиппокампа как альтернативному механизму устойчивости к стрессу. Примечательно, что уменьшение белка Ahnak примерно на 25% в лизатах гиппокампа у устойчивых мышей (Рис. 4C) не может быть объяснено исключительно уменьшением Ahnak в интернейронах PV, которые составляют в лучшем случае ~ 5% от общего числа нейронов гиппокампа (79). Таким образом, наши результаты не исключают потенциального участия Ahnak, экспрессируемого в других типах нейронов или ненейрональных клетках, в устойчивости к стрессу.Фактически, Ahnak в высокой степени экспрессируется в эндотелиальных клетках кровеносных сосудов гиппокампа (20, 80), а плотные соединения в них обеспечивают свойство гематоэнцефалического барьера (81). Интересно, что эндотелиальные клетки были вовлечены в качестве мишени CSDS, а CSDS-индуцированная дисфункция ГЭБ была предложена в качестве механизма, лежащего в основе восприимчивости к стрессу (45). Таким образом, дальнейшее понимание функции Ahnak в других типах клеток продвинет наше понимание стрессоустойчивости. В целом, наше исследование создает основу, поддерживающую интернейроны Ahnak и PV в качестве потенциальных мишеней для манипулирования физиологией гиппокампа, связанной со стрессом, или нервно-психическими расстройствами, такими как MDD.

Подписи к рисункам

Дополнительный рисунок 1. Время взаимодействия в непобедимых контрольных, устойчивых и восприимчивых группах после CSDS . Время нахождения в зоне взаимодействия без (-) и с (+) агрессором (двусторонние повторные измерения ANOVA, Непобедимый (ND) (n=23), Устойчивый (Res) (n=23) и Восприимчивый (Sus) (п=15)).

Дополнительный рисунок 2. Хемогенетическая модуляция PV ^vDG предрасполагает к расходящемуся поведенческому результату в ответ на стресс социального поражения.(A, B) Эксперименты Gi DREADD. (A) Повторное воздействие CNO во время CSDS приводило к увеличению времени нахождения в зоне взаимодействия с агрессором по сравнению со временем в пустой зоне взаимодействия у мышей hM4Di, в то время как в контрольной группе mCherry различий не наблюдалось (двухфакторные повторные измерения ANOVA, Non -поражение: mCherry (n=8) и hM4Di (n=12), Побеждены: mCherry (n=15) и hM4Di (n=14)). (B) Острое лечение CNO у восприимчивых мышей приводило к увеличению времени нахождения в зоне взаимодействия с агрессором у мышей hM4Di по сравнению с контрольной группой mCherry и без лечения SI-тестами (SI-1 и SI-3) (двусторонний повторные измерения ANOVA, mCherry (n=6) и h5MDi (n=9)). (C-H) Гк Эксперименты DREADD. (C, D) Острая активация во время SSDS не изменяет отношение SI (C) или время, проведенное в зоне взаимодействия (D) у контрольных мышей hM3Dq или mCherry (двухфакторные повторные измерения ANOVA, без поражения: mCherry (n =8) и h4MDq (n=10), побежденные: mCherry (n=13) и h4MDq (n=18)). (E) Тенденция к уменьшению времени, проведенного в зоне взаимодействия у мышей hM3Dq по сравнению с контролем mCherry, была обнаружена после повторных инъекций CNO пост-SSDS (двухфакторные повторные измерения ANOVA, mCherry (n=12) и hM3Dq (n=12) и hM3Dq (n=12) =15)).( F, G ) Мыши без SSDS (без социальных поражений) не имели изменений отношения SI (F) или времени, проведенного в зоне взаимодействия (G) до или после повторных инъекций CNO (двухфакторный повторный анализ ANOVA , mCherry (n=8) и hM3Dq (n=10)). ( H ) Повторные инъекции CNO не изменили предпочтение сахарозы у мышей без SSDS (непарный двусторонний t-критерий, mCherry (n=8) и hM3Dq (n=9)). Данные выражены как среднее ± SEM, и изображены отдельные точки данных. Post-hoc Множественные сравнения Бонферрони использовались для дисперсионного анализа.* р <0,05, ** р <0,01.

Дополнительный рисунок 3. Молекулы, связанные с митохондриальной дисфункцией и передачей сигналов mTOR, изменяются в нейронах гиппокампа PV в группах мышей с дивергентным поведением после CSDS. (A, B) Тепловые карты DEG, участвующих в митохондриальной дисфункции и передаче сигналов mTOR. Использовали среднее значение экспрессии гена (без поражения (n=4), Res (n=4) и Sus (n=3)).

Дополнительный рисунок 4. Хронический стресс вызывает изменения экспрессии Ahnak в гиппокампе.(A) Гиппокампальный Ahnak обратно коррелирует со временем, проведенным в зоне взаимодействия с мышью-агрессором (pearson r : r = -0,5071, p< 0,0001, n=61 мышей) ( B ) мРНК Ahnak puncta обратно коррелирует со временем пребывания в зоне взаимодействия с агрессором (pearson r : r = -0,5071, p< 0,0001, n=10 мышей).

Дополнительный рисунок 5. Делеция Ahnak в нейронах vDG или PV придает устойчивость к CSDS .( A ) В непобежденных условиях как контрольная группа, так и группа Ahnak cKO ^vDG показывают большее количество времени, проведенное в зоне взаимодействия с агрессором, по сравнению со временем без агрессора. После CSDS контрольные мыши показывают значительно меньшее количество времени, проведенное в зоне взаимодействия с агрессором, по сравнению со временем без агрессора, но мыши Ahnak cKO ^vDG показывают одинаковое количество времени в зоне взаимодействия с агрессором или без него (два-три часа). способ повторных измерений ANOVA, Без поражения: Контроль (n=15) и cKO ^vDG (n=17), Побежденный: Контроль (n=18) и KO ^vDG (n=18)).( B) CSDS индуцирует уменьшение времени взаимодействия во время сеанса с агрессором по сравнению с сеансом в пустой клетке в контрольной группе (мыши Ahnak с флоксом, fl/fl), в то время как эффект CSDS на время взаимодействия с агрессором отсутствует в Ahnak cKO ^{Мыши PV} (двусторонние повторные измерения ANOVA, без поражения: fl/fl (n=12) и cKO ^PV (n=12), с поражением: fl/fl (n=21) и cKO ^PV ( п=19)). Данные выражены как среднее ± SEM, и изображены отдельные точки данных. Post-hoc Множественные сравнения Бонферрони использовались для дисперсионного анализа.* p <0,05, *** p <0,001, **** p <0,0001 и ns, недостоверно.

Дополнительный рисунок 6. Влияние селективной делеции Ahnak PV на физиологические свойства нейронов PV в vDG. (A) Схема цельноклеточного пластыря. ( B ) Репрезентативные следы от нейронов PV с фиксированным током цельных клеток в vDG мышей fl / fl и Ahnak cKO ^PV , демонстрирующие возбуждение потенциала действия (AP) клеток в ответ на шаг 500 пА инъекции Текущий. (C) AP частота нейронов PV в vDG снижается у мышей Ahnak cKO ^PV при возрастающих шагах инъецируемого тока (двусторонний ANOVA, fl/fl (n=10 нейронов/4 мыши) и cKO ^PV (n=9 нейронов/4 мыши)). Данные выражены как среднее ± SEM. Post-hoc Множественные сравнения Бонферрони использовались для дисперсионного анализа.