Аб 4 т230 м: Доступ с вашего IP-адреса временно ограничен — Авито

Содержание

Электростанция 4 кВт с двигателем УД-2 АБ-4-0/230

 

 

 

 

 

Бензиновый генератор АБ-4-0/230 в наличии на складе в Санкт-Петербурге.

Для приобретения позвоните нам по тел:

8-(981)192-52-53,

8-(921)944-81-40;

8-(812)423-18-84

или отправьте заявку на e-mail : [email protected], [email protected]


Возможна реновация оборудования под требования заказчика, поставка комплетующих, ЗИП.

 

Доставляем в города: Москва, Архангельск, Мурманск, Вологда, Череповец, Ярославль, Владивосток, Хабаровск, Комсомольск-на-Амуре, Симферополь, Севастополь, другие города республики Крым, Иркутск, Красноярск, Омск, Ростов на Дону, Волгоград, Нижний Новгород, Воронеж, Магадан и другие

Подробнее в разделе "Доставка"

 

 

 Характеристики:

Тип топлива: бензин

Мощность: 4 кВт

Напряжение: 230 Вольт

Тип стартера: ножной

 

I. ТЕХНИЧЕСКОЕ ОПИСАНИЕ
1.1. Назначение и условия эксплуатации
1.1.1. Агрегаты бензоэлектрические унифицированные типов АБ-2-О/230-М1, АБ-2-Т/230-М1, АБ-4-О/230-М1, АБ-4-Т/230-М1, АБ-4-Т/400-М1 предназначены для использования в качестве авто¬номных основных или резервных источников электроэнергии пере¬менного тока.

1.1.2. Агрегаты можно эксплуатировать при следующих условиях: I. ТЕХНИЧЕСКОЕ ОПИСАНИЕ
1.1. Назначение и условия эксплуатации
1.1.1. Агрегаты бензоэлектрические унифицированные типов АБ-2-О/230-М1, АБ-2-Т/230-М1, АБ-4-О/230-М1, АБ-4-Т/230-М1, АБ-4-Т/400-М1 предназначены для использования в качестве авто¬номных основных или резервных источников электроэнергии пере¬менного тока.
1.1.2. Агрегаты можно эксплуатировать при следующих условиях:

Наименование АБ-2-0/230-М1 АБ-2Т/230-М1 АБ-4-0/230-М1 АБ-4-Т/230-М1 АБ-4-Т/400-М1
Номинальная мощность, кВт 2 2 4 4 4
Номинальное напряжение, В 230 230 230 230 400
Род тока однофазный трехфазный однофазный трехфазный трехфазный
Номинальная частота, Гц 50 50 50 50 50
Коэффициент мощности 0,8 0,8 0,8 0,8 0,8
Номинальная частота вращения, об/мин 3000 3000 3000 3000 3000
Ток нагрузки, А, при cos=1 8,7 5 17,4 10 5,8
Ток нагрузки, А, при cos=0,8 10,9 6,3 21,8 12,6 7,2
Время работы без дозаправки, ч 7 7 4 4 4
Время непрерывной работы, чВ 24 24 24 24 24
Габаритные размеры, мм 936/628/740 936/628/740 1146/628/740 1146/628/740 1146/628/740
Габаритные размеры с доп оборудованием, мм 940/645/740 940/645/740 1150/645/740 1150/645/740 1150/645/740
Масса без ГСМ, ЗИП, кг 170 162 200 195 195
Масса доп оборудования, кг 6,5 6,5 8,5 8,5 8,5

 1. 2.2. Агрегат обеспечивает возможность местной регулировки напряжения в пределах от 95% номинального до номинального при любой нагрузке, от холостого хода до номинальной с коэффи¬циентом мощности от 0,8 до 1,0.
1.2.3. При изменении нагрузки от холостого хода до номиналь¬ной с коэффициентом мощности от 0,8 до 1,0 выходное напряже¬ние агрегата автоматически поддерживается в пределах±4% от среднерегулируемого.

1.2.4. Разность между наибольшим и наименьшим значениями установившейся частоты выходного напряжения агрегата при изме¬нении нагрузки от холостого хода до номинальной не превыша¬ет 2 Гц.
Примечание. Частота выходного напряжения агрегата в зависимости от нагрузки может иметь одно из следующих значений: не более 52,5 Гц — при холостом ходе; не менее 49,5 Гц — при номинальной нагрузке.
1.2.5. Агрегат обеспечивает работу с перегрузкой на 10% от но-минальной мощности в течение одного часа при температуре окру-жающего воздуха не выше +35 °С. Общее количество часов работы с перегрузкой не должно превышать 10% от гарантийной наработ¬ки приводного двигателя агрегата.

При перегрузке снижение часто¬ты не должно превышать 2% от номинального значения, изменение напряжения агрегата не должно превышать ±5% от установленного значения.
1.2.6. Нормы расхода топлива и смазочных материалов приве¬дены в табл. 2.

Характеристика АБ-2-О/230-М1
АБ-2-Т/230-М1
АБ-4-О/230-М1
АБ-4-Т/230-М1
АБ-4-Т/400-М1
Расход топлива при номинальной нагрузке, кг/ч, не более 1,4 2,6
Расход масла (на доливку), кг/ч, не более 0,04 0,08

 

1.3. Состав агрегата

1.3.1. Агрегат состоит из двигателя, генератора, блока аппаратуры, блока приборов, топливного бака, рамы, каркаса и аккумулятора.
В состав агрегата входит одиночный комплект запасных частей, инструмента и принадлежностей, необходимый для нормальной экс-плуатации.
1.3.2. Агрегат может быть укомплектован дополнительным оборудованием-кожухом.

ООО ТПФК "Теркон" - Электроагрегат бензиновый АБ4-Т/230-М1

 

 

 

   Электроагрегат бензиновый АБ4-Т/230-М1

 

 

Электроагрегат  предназначен для питания   электроэнергией путевого электрического инструмента  при  текущем содержании и ремонте железнодорожных путей.

 

 

Основные технические характеристики и данные

  1. Мощность, кВт — 4,0
  2. Напряжение, В — 230
  3. Род тока, — переменный трехфазный
  4. Частота, Гц — 50
  5. Коэффициент мощности — 0,8
  6. Частота вращения, об/мин. — 3000
  7. Двигатель – УД — 25
  8. Генератор — ГАБ — 4 — Т/230 М1
  9. Сила тока нагрузки, А
    — при cos = 1,0 — 17,4
    — при cos = 0,8 — 21,8
  10. Топливо — А — 76 (бензин)
  11. Масло — АС — 8, АС — 10
  12. Расход топлива, кг/ч — 2,6
  13. Расход масла, кг/ч — 0,08
  14. Емкость топливной системы, л — 18
  15. Время работы без дополнительной заправки, ч — 4
  16. Время непрерывной работы, ч — 24
  17. Габаритные размеры, мм
    — длина — 1150
    — ширина — 630
    — высота — 740
  18. Стационарная, исполнение в металл. кожухе
  19. Масса, кг — 200 

 

Электростанция железнодорожная АБ4-Т230-Ж

Электростанция дизельная АД4-Т230-Т

Электроагрегат путевой бензиновый АБ4-Т230-ВМ4-Ж

Электроагрегат путевой бензиновый АБ4-2-Т230-ВЖ-З

Электроагрегат путевой бензиновый АБ4-3-Т230-ВЖ-3

Электроагрегат путевой дизельный АД4-2-T230-ВЖ-З

Электроагрегат путевой дизельный АД4-4-T230-ВЖ-З

Дизельный генератор АД4-Т/230 и АД2-Т/230

Электроагрегат АБ4-EB-4. 4-Т230-S

Электроагрегат АД4-EB-4.4-Т230-S

Комбинированный электроагрегат АБ4,4-Т230-W200R (АС-УИП)

Арматура кабельная АКЗО

Арматура кабельная АЭС-4

Агрегат сварочный АС-УИП

Приставка сварочная ПС15

Трансформаторы трехфазные серии ТСЗИ (ТСЗИ-2,5, ТСЗИ-4,0)

Возбуждение электромагнита малогабаритного бетатрона от автономного источника питания ограниченной мощности Текст научной статьи по специальности «Электротехника, электронная техника, информационные технологии»

<

ИЗВЕСТИЯ

ТОМСКОГО ОРДЕНА ОКТЯБРЬСКОЙ РЕВОЛЮЦИИ И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ПОЛИТЕХНИЧЕСКОГО ИНСТИТУТА ИМ. С. М. КИРОВА

Том 279 1974

возбуждение электромагнита

малогабаритного бетатрона от автономного источника питания ограниченной мощности

П. Г. ГОРДЕЕВ, П. П. РУМЯНЦЕВ, Ю. П. ЯРУШКИН

(Представлена научно-исследовательским институтом ядерной физики, электроники и автоматики)

Для целого ряда практического применения малогабаритного бетатрона возникает необходимость его питания в местах, где отсутствует централизованное электроснабжение. При этом обеспечение нормальной работы бетатрона осуществляется от автономных агрегатов с генераторами переменного однофазного и трехфазного переменного тока промышленной (50 гц) и повышенной (400 гц) частоты.

В автономных агрегатах используются синхронные и индукторные генераторы переменного тока на напряжение 115, 230 или 380 в. Мощности генераторов автономных агрегатов относительно невелики (от единиц киловатт до нескольких десятков киловатт).

Автономные агрегаты питания снабжаются специальными устройствами, позволяющими автоматически поддерживать частоту и напряжение на выходе генератора с точностью порядка ±2-е-3%.

Наиболее подходящими автономными агрегатами для питания переносных малогабаритных бетатронов типа ПМБ-6, с точки зрения минимального веса, являются бензоэлектрические агрегаты типа АБ-4." Эти агрегаты состоят из двигателя внутреннего сгорания мощностью 7 л. с. и генератора переменного тока индукторного типа мощностью 4 кет с трехфазным выходом 127/220 вольт частотой 50 гц или с однофазным выходом 230 или 115 вольт и частотой 425 гц. В первом типе генератора отсутствует специальное устройство стабилизации напряжения, которое имеется у генератора с частотой 425 гц. Для стабилизации частоты в агрегатах типа АБ-4 используется центробежный регулятор, поддерживающий постоянство оборотов двигателя внутреннего сгорания.

Для выяснения возможности питания бетатрона ПМБ-6 от бензо-электрических агрегатов типа АБ-4 были проведены исследования по питанию серийного образца бетатрона ПМБ-6 непосредственно от агрегата АБ-4-Т/230-М с трехфазным выходом 127/230 вольт частотой 50 гц и по питанию модернизированного бетатрона ПМБ-6 через преобразователь частоты от агрегата АБ-4-0/230/ч-425 с однофазным выходом 230 вольт частотой 425 гц.

1. Экспериментальные исследования установившихся и переходных режимов при непосредственном питании от бензоэлектрического агрегата.

Выходная характеристика агрегата АБ-4-Т/230-М (зависимость напряжения на зажимах генератора от частоты), снятая в режиме холостого хода, приведена на рис. 1. Большое изменение напряжения на зажи-

мах генератора в пределах 48-ь52 гц настораживало при запуске электромагнита бетатрона. Однако под нагрузкой выходная характеристика становится значительно равномернее, а резонансная характеристика электромагнита (зависимость первичного тока от частоты) обеспечивает устойчивую работу бетатрона и бензоэлектрического генератора в правой ветви, т. е. при установке частоты генератора до включения нагрузки больше 49 гц. В этом случае двигатель внутреннего сгорания стремится развить обороты и должно возрасти напряжение на выходе генератора, однако увеличивающаяся нагрузка контура снижает это напряжение, а следовательно, и число оборотов двигателя.

Понижение частоты уменьшает и ток нагрузки, вызывающий повышение напряжения и частоты генератора.

Установка резонансной частоты (49 гц) и ниже (левая ветвь) в режиме холостого хода при включении нагрузки приводит к срыву генератора, так как с понижением частоты растет ток нагрузки, приводящий к еще большему понижению частоты и росту тока нагрузки.

Так как в схеме питания электромагнита бетатрона применена параметрическая (феррорезонансная) система стабилизации напряжения, чувствительная к изменению частоты, то следовало ожидать понижение средней дозы тормозного излучения. Количественная оценка средней дозы излучения за равные интервалы времени, проведенная при питании бетатрона от промышленной сети и от бензоэлектрического агрегата, показала, что в последнем случае средняя доза понижается на 10-т--г-15%.

Проведенные эксперименты показывают, что принципиально возможно применение автономных источников питания ограниченной мощности для питания серийного малогабаритного бетатрона ПМБ-6.

К недостаткам непосредственного питания бетатрона от автономных агрегатов питания следует отнести, во-первых, снижение средней дозы излучения из-за нестабильности частоты на выходе генератора и, во-вторых, необходимость первоначальной настройки автономного агрегата на устойчивую работу с бетатронной установкой.

Для устранения этих недостатков необходимо питать бетатрон от автономного агрегата через дополнительное устройство, стабилизирующее напряжение и частоту.

2. Экспериментальные исследования установившихся и переходных режимов при питании бетатрона от бензоэлектрического агрегата через промежуточное стабилизирующее устройство.

Устройство, стабилизирующее частоту и напряжение, должно содержать звено постоянного тока (для устранения влияния нестабильности частоты агрегата питания), стабилизатор напряжения и инвертор,. Экспериментальные исследования электромагнита бетатрона ПМБ-6 показали, что без существенной перегрузки по тепловому режиму возможно его возбуждение на частоте порядка 100 гц, а это, как известно, даст увеличение интенсивности излучения в два раза [1]. Таким образом, оказалось целесообразным инвертор выполнить на частоту 100 гц. Дополни-

N

I г

___ —■ 1 1

и-Щ-1

11_ [_.:_ 1-1 -.и

¿д

250

?00

50

Рис. 1. £/хх=/'Ш и ин=Г(1) — выходные характеристики агрегата АБ-4-Т/230-М (зависимость напряжения на зажимах генератора от частоты) при холостом ходе и под нагрузкой. ¡ = 1(1) — резонансная характеристика электромагнита (зависимость первичного тока от частоты)

тельный преобразователь частоты для бетатрона не снижает заметно весовые и габаритные характеристики, поскольку обязательно присутствует автономный источник питания и преобразователь конструктивно может быть внесен непосредственно в последний.

Для питания бетатрона через преобразователь частоты наиболее целесообразно использовать бензоэлектрические агрегаты с генераторами повышенной (400 гц) частоты. Применение повышенной частоты позволяет значительно снизить вес и габаритные размеры трансформаторов и сглаживающих фильтров выпрямительных устройств.

Разработанная схема возбуждения электромагнита бетатрона на повышенной частоте приведена на рис. 2. Схема возбуждения включает в себя бензоэлектрический агрегат АБ-4-0/230Д-425, выпрямитель (АТ; Д[—Д4; Ь*; С1), однотактный инвертор с искусственной коммутацией (Ть Т2; Д5; Д6; Ь2; Ь3; С2) и колебательный контур, образованный компенсационными конденсаторами и обмотками электромагнита.

Введение выпрямителя и инвертора исключает влияние изменения частоты генератора на работу бетатрона, так как стабильность частоты определяется стабильностью автогенератора системы управления инвертором, стабильность которого составляет ±0,5%. Параметрическая стабилизация напряжения на электромагните обеспечивается ограничивающим дросселем ¿3 и контуром Сб с коэффициентом стабилизации порядка 7-

Экспериментальное исследование переходного режима при возбуждении электромагнита от автономного агрегата питания показало, что в момент включения электромагнита бетатрона происходил срыв генератора переменного тока, вызванный тем, что источник питания во время переходного процесса должен развивать большую мощность, обусловленную процессом накопления реактивной энергии в резонансном контуре бетатрона. Получению большой мгновенной мощности от агрегата АБ-4-0/230/ч-425 затруднено ввиду того, что система стабилизации напряжения генератора построена на основе магнитного усилителя, который, как известно, обладает инерционностью. Так как магнитный усилитель не успевает отработать подключение большой нагрузки, то напряжение на выходе генератора снижается, а вместе с ним снижается и ток обмотки возбуждения, что вызывает срыв генератора переменного тока.

Для обеспечения устойчивого запуска электромагнита бетатрона необходимо увеличить длительность переходного процесса, т. е. во время переходного процесса уменьшить количество энергии, вводимой за период колебаний в резонансный контур бетатрона. Это дает возможность системе стабилизации успевать за изменениями тока нагрузки. В экспериментальной установке более мягкий переходный процесс обеспечивается за счет уменьшения частоты инвертора во время переходного процесса, продолжающегося 1ч-2 сек.

Рис. 2. Схема возбуждения электромагнита бе татропа на повышенной частоте

Экспериментальные испытания системы питания бетатрона от бен-зоэлектрического агрегата через преобразователь частоты с мягким пуском показали ее устойчивую работоспособность в переходных режимах и в установившихся при изменении напряжения и частоты генератора в довольно широком диапазоне ±10 % по напряжению и 2-^3 % по частоте- При этом мощность дозы тормозного излучения увеличилась в два раза по сравнению с серийным образцом ПМБ-6, питаемым напряжением промышленной частоты (50 гц).

Проведенные эксперименты показывают, что возбуждение электромагнита бетатрона ПМБ-6 от автономного агрегата ограниченной мощности принципиально возможно, причем введение дополнительного преобразователя частоты не только стабилизирует частоту и напряжение, но и позволяет конструировать наиболее рациональные схемы питания бетатрона.

С этой точки зрения было бы весьма выгодным использовать смешанное питание электромагнита бетатрона, позволяющее существенно уменьшить реактивную мощность, а следовательно, и потребляемую мощность, что особенно важно при работе от автономного источника. Причем при смешанном возбуждении электромагнита бетатрона возможно построить схему питания таким образом, что функция защитного элемента и преобразователя частоты ' выполняет один элемент. При этом уменьшается вес и размеры всей системы питания.

Один из вариантов такой совмещенной системы питания с параллельным инвертором тока представлен на рис. 3. Роль большой индуктивности на входе инвертора тока выполняет электромагнит бетатрона, который одновременно подключен к выходной цепи инвертора.

Подмагничйвание осуществляется, за счет постоянной составляющей тока инвертора. Причем степень под-магничивания и добротность определяют коэффициент трансформации выходного трансформатора инвертора. Приближенное значение коэффициента трансформации, если пренебречь активным падением напряжения в цепи постоянного тока, определяется по формуле

Рис. 3. Схема смешанного питания бетатрона па повышенной частоте с использованием инвертора тока

кт=у 2 сп<г,

здесь:

— — , и,

Сп—степень подмагничивания,

/ ' *

<2 — добротность параллельного колебательного контура, образованного электромагнитом бетатрона, защитным элементом и компенсационными конденсаторами;

и2 — действующее значение напряжения на электромагните бетатрона;

и 1 — напряжение источника постоянного тока.

Проведенные экспериментальные исследования подобной схемы питания показывают реальность использования ее не только для питания от автономных агрегатов ограниченной мощности, но и для питания на повышенных частотах электромагнита бетатрона от промышленной сети-

ЛИТЕРАТУРА

1. Ю. П. Я р у ш к и н. Некоторые вопросы исследования смешанного возбуждения электромагнита малогабаритного бетатрона. Кандидатская диссертация. Томск, 1965..

Бензиновый генератор АБ2-Т230-В, АБ4-Т230-В

Заказать и купить бензиновый генератор АБ2-Т230-В, АБ4-Т230-В по выгодной заводской стоимости производителя можно на сайте ООО «Промышленный союз» по телефонным данным. Доставка осуществляется в кротчайшие сроки удобным способом в любой регион.

Бензиновый генератор АБ2-Т230-В, АБ4-Т230-В является как базовым, так и резервным источником питания широкого спектра 3х-фазных и 1-фазных потребителей. Этот спектр включает механизированные инструменты, бытовые электрические приборы в тех случаях, если питание от обычной электросети отсутствует. К примеру, на ЖД-перегонах, на промышленных и строительных объектах, во время дорожных и ремонтных процессах, на транспорте, на транспортабельных и недвижимых мастерских, в аварийных службах, коммунальном и аграрном хозяйствах, при ЧС.

Бензиновый генератор АБ2-Т230-В, АБ4-Т230-В можно назвать миниатюрной транспортабельной электростанцией благодаря малому весу, скромным габаритам и практически бесшумности.

Данные бензиновые генераторы характеризуется рядом преимуществ перед своими конкурентами, среди которых можно выделить простоту эксплуатации, внушающим моторесурсом, длительность беспрерывной работы при широком температурном интервале (-30−+45°С). Бензиновый генератор зачастую задействуют в роле источника электроэнергии сезонного типа.

Технические параметры устройства предоставлены в таблице.

Модель АБ2-Т230-В АБ4-Т230-В
 
Двигатель Четырехтактный с одним цилиндром
Модель LT160
Объем, см³ 163 337
Скорость вращения, обороты/минута 3600
Охлаждение воздушное
Мощность (max), л.с. 5,5 11
 
Генератор синхронный
Кол-во фаз 3
Частота, Гц 50
Мощность (max), кВт 2,5 5
Рабочая мощность, кВт 2,3 4,5
Коэффициент мощности 0,8 1,0
Напряжение проверки изоляции 1800V AC
Напряжение нагрузки, В 110/230
Показатель постоянного тока на выходе 12V 8,3A
Стартер мануальный и электрический
Вместительность топливного бака, л 15 25
Тип топлива бензин АИ-92
Шум, дБ. 77 82
Кол-во часов беспрерывной работы 12 15
Физические параметры, мм 590х433х508 685х485х550
Масса, кг 34 76
Изоляция Class F

Аб-4-т 230 инструкция :: znqvcv

05.12.2014 08:46 Аб-4-т 230 инструкция

Скачать Аб-4-т 230 инструкция

Информация:
Дата загрузки: 05.12.2014
Скачали 132 раз
В рейтинге: 344 из 1047
Скорость скачивания: 27 мбит/сек
Файлов в категории: 54
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.

акт ввода в эксплуатацию основных средств рб бланк

асер 1650 инструкция

Агрегат АБ-4-Т/230М1 бензоэлектрический трехфазного переменного тока частотой 50 Гц напряжением 220 В мощностью 4 кВт является основным автономным источником питания всей аппаратуры изделия. Армейский генератор АБ-4-Т/230-М1 - отправлено в Продажа/покупка аксессуаров: Армейский генератор АБ-4 ( Электростанция ).Состоит из двигателя УД-25 мощностью 8 лошадинных сил и генератора ГАБ-4- Т/230-М1.
Приобрёл Бензогенератор марки АБ-4-Т/230М1 для работы с компрессором, мощность двигателя в компессоре 2,5 КВт, генератор у меня АБ-4-Т/230М1 мощностью 4 квт на 220в но 3х фазный на каждую фазу по 1,3квт приходится, мой компрессор не тянет.
агрегаты: АБ-2-О/230-М1, АБ-2-Т/230-М1, АБ-4-О/230-М1, АБ-4-Т/230-М1, АБ4 -Т/400-М1 и предназначено для изучения устройства и осуществления правильной эксплуатации агрегатов. Настоящее техническое описание и инструкция по эксплуатации состоит из: а)...
Настоящее техническое описание и инструкция по эксплуатации распространяется на агрегаты бензоэлектрические унифицированные переменного тока, в дальнейшем именуемые агрегаты: АБ-2-О/ 230-М1, АБ-2-Т/230-М1, АБ-4-О/230-М1, АБ-4-Т/230-М1...
Агрегаты бензоэлектрические унифицированные переменного тока типа АБ-4-Т/ 230-М1 предназначены для использования в качестве автономных основных или резервных источников электроэнергии переменного тока.
Электроагрегат бензиновый АБ4-Т/230-М1. Электроагрегат предназначен для питания электроэнергией путевого электрического инструмента при текущем содержании и ремонте железнодорожных путей.
Краткое описание и инструкция по эксплуатации.Название: Руководство по материальной части и эксплуатации унифицированных бензоэлектрических агрегатов АБ-8-Т/230М, АБ-8-Т/230-Ч/400М и АБ-8-0/230/Ч-425М.
Аб 4 т 230 инструкция. С увеличением нагрузки и уменьшением коэффициента мощности нагрузки ток.бензоэлектрическии унифицированный агрегат аб-4-т/230. Величина тока подзарядки контролируется по амперметру А1 и может быть.
Опубликовал : Ртуть. Опубликовано: 27 November 2011 - 13:55. Загрузить АБ-2-О/ 230-М1, АБ-2-Т/230-М1, АБ-4-О/230-М1, АБ-4-Т/230-М1, АБ-4-Т/400-М1 - агрегаты бензиноэлектрические унифицированные переменного тока. 1 Голосов.

анненков - цессия договорных прав, аннотация сен санс карнавал животных, алексинский загс справка о смерти. r

Аб 4 т230 м — Строительный портал №1



Source: terkon.ucoz.ua

Содержание статьи:

  • Уважаемые посетители на сайте представлен не весь перечень путевого инструмента и запасных частей, за дополнительной информацией обращайтесь по тел/факс (0562)23-61-55, тел (056)372-89-93,  (050)904-63-78  или e-mail: terkon. [email protected]
  • Технические характеристики электроагрегатов АБ и АД
    • Бензиновые электростанции, 230 В, трехфазные
    • Бензиновые электростанции, 400 В, трехфазны
    • Бензиновые электростанции, 230В, однофазные
    • Бензиновые электростанции, комбинированные: однофазные 230В / трехфазные 400В
    • Дизельные электростанции, 230В, трехфазные
    • Дизельные электростанции, 400В, трехфазные
    • Дизельные электростанции, 230В, однофазные
    • Дизельные электростанции, комбинированные: однофазные 230В / трехфазные 400В
  • Дизельные электроагрегаты ДЭА
  • Агрегат преобразовательный АП5
  • Приставка сварочная ПС15

Уважаемые посетители на сайте представлен не весь перечень путевого инструмента и запасных частей, за дополнительной информацией обращайтесь по тел/факс (0562)23-61-55, тел (056)372-89-93,  (050)904-63-78  или e-mail: [email protected]

 

Электростанция дизельная АД4-Т230-Т может использоваться в качестве основного или резервного источника питания широкой гаммы трехфазных и однофазных потребителей, в том числе механизированного путевого инструмента, строительных и бытовых электроприборов, в ситуациях, когда питание от стационарной сети невозможно: на железнодорожных перегонах, в промышленности и строительстве, при дорожных и ремонтных работах, на транспорте, в передвижных и стационарных мастерских, в аварийных службах, в сельском и коммунальном хозяйстве, в чрезвычайных ситуациях. Лёгкий вес, малые габариты и низкий уровень шума делают эти миниэлектростанции незаменимыми мобильными источниками электричества. Легко транспортируется одним рабочим, за счет установленных колес (по заказу возможна установка роликов для перемещения по рельсу).

Модель АД4-Т230-Т отличается большой продолжительностью непрерывной работы, большим моторесурсом, возможностью использования в широком диапазоне температур (от -30 до +45С), простотой обслуживания и удобством эксплуатации. Дизельный генератор удобно использовать в качестве сезонного источника электроэнергии.

Товар сертифицирован в Государственной системе сертификации УкрСЕПРО.

ОСНОВНЫЕ ТЕХНИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ

Марка

АД4-Т230-Т

Тип двигателя

одноцилиндровый четырехтактный  дизельный с воздушным охлаждением

Модель двигателя

186F

Объем двигателя, см³

406

Скорость вращения, об/мин

3000

Охлаждение

воздушное

Мощность двигателя, л. с.

9,0

Максимальная мощность, кВт (три фазы)

4,4

Рабочая мощность, кВт

— трехфазная

— однофазная

 

4,0

2,0

Тип генератора

синхронный

Количество фаз

1/3

Частота, Гц

50

Напряжение нагрузки, В

220

Емкость топливного бака, л

15,0

Емкость масляного картера, л

1,65

Тип топлива

дизельное

Шумность, дБ.

85

Время непрерывной работы, час.

8

Стартер

ручной и электрический

Габаритные размеры, мм (длина, ширина, высота)

790х460х720

Вес, кг

105

        

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

____________________________________________________________

 

Электростанция железнодорожная АБ4-Т230-Ж 

 

  Электроагрегат АБ4-Т230–Ж  предназначен для питания   электроэнергией путевого электрического инструмента  при  текущем содержании и  ремонте железнодорожных путей.                                                                       ОСНОВНЫЕ  ТЕХНИЧЕСКИЕ  ПАРАМЕТРЫ

ПРИВЛЕКАТЕЛЬНАЯ ЦЕНА*

Номинальная мощность:трехфазная –5,5кВа/4,4 кВт

Номинальное напряжение                    230 В

Частота                                               50 Гц

Номинальный коэфф. мощности            0,8

Приводной двигатель  Briggs&Stratton Vanguard 9HP

Мощность двигателя                            9,0 л.с.

Способ запуска двигателя                    ручной

Охлаждение                                         воздушное

Топливо                                               бензин А-95

Емкость топливного бака                      8 л

Удельный расход топлива (г/кВт*ч)        332

Частота вращения коленчатого вала     3000 об/мин

Габаритные размеры (ДхШхВ)             870х670х540

Масса                                                   70 кг


• Электроагрегат   имеет в своем составе надежный, с низки уровнем шума, легкий в запуске  и простой  в обслуживании  бензиновый  двигатель  имеющей высокий рейтинг на мировом рынке.

•Электроагрегат, в сравнении с подобными изделиями такой же мощности, имеет небольшие габариты и небольшую массу. Легко переносится за раму двумя рабочими.

• Легко транспортируется по рельсу одним человеком с помощью роликов, установленных в нижней части рамы.

• Электроагрегат удобен в зксплуатации, имеет высокий уровень по эргономике и дизайну.

_____________________________________________________________________

Технические характеристики электроагрегатов АБ и АД

 

 

Бензиновые электростанции, 230 В, трехфазные
Тип электроагрегата АБ2-3-Т230-ВЖ-З АБ4-2-Т230-ВЖ-З АБ4-3-Т230-ВЖ-3 АБ8-Т230-ВЖ-З
Тип двигателя B&S Vanguard 7,5 HP УМЗ-341Э KG-390 Honda GX-620K1
и аналоги
Расход топлива, л/ч 1,2 1,8 1,9 4,1
Объем топливного бака, л 4,6 6 6 20
Марка топлива Бензин А92 Бензин А76 Бензин А92 Бензин А92
Тип генератора синхронный синхронный синхронный синхронный
Мощность, кВт, cos Ф= 0,8 2 4 4 8
Масса, кг 76 80 78 160
Габариты, мм 820х600х445 840x600x445 720x600x445 970x730x700

 

Бензиновые электростанции, 400 В, трехфазны

 

Тип электроагрегата АБ2-3-Т400-ВЖ-З АБ4-2-Т400-ВЖ-З АБ4-3-Т400-ВЖ-3 АБ8-Т400-ВЖ-З
Тип двигателя B&S Vanguard 7,5 HP УМЗ-341Э KG-390 Honda GX-620K1
и аналоги
Мощность двигателя, л. с. 7,5 8 9,5 20
Расход топлива, л/ч 1,2 1,8 1,9 4,1
Объем топливного бака, л 4,6 6 6 20
Марка топлива Бензин А92 Бензин А76 Бензин А92 Бензин А92
Тип генератора синхронный синхронный синхронный синхронный
Мощность, кВт, cos Ф= 0,8 2 4 4 8
Масса, кг 76 80 78 160
Габариты, мм 820х600х445 840x600x445 720x600x445 970x730x700

 

Бензиновые электростанции, 230В, однофазные

 

Тип электроагрегата АБ2-3-230-ВЖ АБ4-2-230-ВЖ АБ4-3-230-ВЖ АБ8-230-ВЖ
Тип двигателя B&S Vanguard 7,5 HP УМЗ-341Э KG-390 Honda GX-620K1
и аналоги
Мощность двигателя, л. с. 7,5 8 9,5 20
Расход топлива, л/ч 1,2 1,8 1,9 4,1
Объем топливного бака, л 4,6 6 6 20
Марка топлива Бензин А92 Бензин А76 Бензин А92 Бензин А92
Тип генератора безщеточный синхронный безщеточный синхронный безщеточный синхронный безщеточный синхронный
Мощность, кВт, cos Ф= 1,0 2 4 4 8
Масса, кг 74 78 73 160
Габариты, мм 820х600х445 840x600x445 720x600x445 970x730x700

 

Бензиновые электростанции, комбинированные: однофазные 230В / трехфазные 400В

 

Тип электроагрегата АБ2-3-230/T400-ВЖ-З АБ4-2-230/T400-ВЖ-З АБ4-3-230/T400-ВЖ-З АБ8-230/Т400-ВЖ-З
Тип двигателя B&S Vanguard 7,5 HP УМЗ-341Э KG-390 Honda GX-620K1
и аналоги
Мощность двигателя, л. с. 7,5 8 9,5 20
Расход топлива, л/ч 1,2 1,8 1,9 4,1
Объем топливного бака, л 4,6 6 6 20
Марка топлива Бензин А92 Бензин А76 Бензин А92 Бензин А92
Тип генератора синхронный синхронный синхронный синхронный
Мощность, кВт, cos Ф= 1,0 1/2 2/4 2/4 4/8
Масса, кг 76 80 78 160
Габариты, мм 820х600х445 840x600x445 720x600x445 970x730x700

 

Дизельные электростанции, 230В, трехфазные

 

Тип электроагрегата АД2-2-T230-ВЖ-З АД4-2-T230-ВЖ-З АД4-4-T230-ВЖ-З
Тип двигателя ВСН-6Д ВСН-7Д CF186F
Мощность двигателя, л. с. 6 7 7,7
Расход топлива, л/ч 1 1,4 1,5
Объем топливного бака, л 5 5 5,5
Тип генератора синхронный синхронный синхронный
Мощность, кВт, cos Ф= 0,8 2 4 4
Масса, кг 84 87 87
Габариты, мм 700х600х445 720x600x445 720x600x445

 

Дизельные электростанции, 400В, трехфазные

 

Тип электроагрегата АД2-2-T400-ВЖ-З АД4-2-T400-ВЖ-З АД4-4-T400-ВЖ-З
Тип двигателя ВСН-6Д ВСН-7Д CF186F
Мощность двигателя, л.с. 6 7 7,7
Расход топлива, л/ч 1 1,4 1,5
Объем топливного бака, л 5 5 5,5
Тип генератора синхронный синхронный синхронный
Мощность, кВт, cos Ф= 0,8 2 4 4
Масса, кг 84 87 87
Габариты, мм 700х600х445 720x600x445 720x600x445

 

Дизельные электростанции, 230В, однофазные

 

Тип электроагрегата АД2-2-230-ВЖ АД4-2-230-ВЖ АД4-4-230-ВЖ
Тип двигателя ВСН-6Д ВСН-7Д CF186F
Мощность двигателя, л.с. 6 7 7,7
Расход топлива, л/ч 1 1,4 1,5
Объем топливного бака, л 5 5 5,5
Тип генератора Безщеточный синхронный Безщеточный синхронный Безщеточный синхронный
Мощность, кВт, cos Ф= 1,0 2 4 4
Масса, кг 81 84 84
Габариты, мм 700х600х445 720x600x445 720x600x445

 

Дизельные электростанции, комбинированные:
однофазные 230В / трехфазные 400В

 

Тип электроагрегата АД2-2-230/T400-ВЖ-З АД4-2-230/T400-ВЖ-З АД4-4-230/T400-ВЖ-З
Тип двигателя ВСН-6Д ВСН-7Д CF186F
Мощность двигателя, л.с. 6 7 7,7
Расход топлива, л/ч 1 1,4 1,5
Объем топливного бака, л 5 5 5,5
Тип генератора синхронный синхронный синхронный
Мощность, кВт, cos Ф= 1,0 2 4 4
Масса, кг 84 87 87
Габариты, мм 700х600х445 720x600x445 720x600x445

 

*Параметры изделий могут быть изменены производителем без предварительного уведомления

 

 

Дизельные электроагрегаты ДЭА

 

  • Электроагрегаты специального назначения в шумозащитном кожухе.
  • Предназначены для различных потребителей постоянного тока напряжением 27 В и переменного однофазного 230 В.

 

 

 

Тип электроагрегата ДЭА5-27 ДЭА5-230
Тип двигателя 3LD-515 3LD-515
Пусковое устройство ручное ручное
Охлаждение воздушное воздушное
Мощность двигателя, л.с. 9,2 9,2
Расход топлива, кг/ч 2 2
Объем топливного бака, л 5 5
Ток нагрузки, А 200 22
Напряжение на выходе, В 27,5 230
Мощность, кВт, cos ф=0,8 1,0 5,5
Род тока постоянный переменный однофазный
Масса, кг 160 130
Габаритные размеры, мм 920x550x635 920x550x635

 

 


 

 

Агрегат преобразовательный АП5

 

  • По заказу выпускается модификация электроагрегата с приводом от электродвигателя для преобразования напряжения ~ 380 В в ~ 230 В при питании путевого электроинструмента и других потребителей.
  • Мощный надежный машинный преобразователь напряжения.
  • Система компаундирования при изменении нагрузки автоматически регулирует напряжение в диапазоне ±5%.

 

 

Тип электроагрегата АП5
Тип двигателя Электродвигатель
Мощность двигателя, кВт 5,5
Напряжение на входе, В 380
Род тока на входе и выходе Переменный трехфазный
Частота тока на входе и выходе, Гц 50
Мощность, кВт, cos ф=0,8 4
Напряжение на выходе, В 230
Масса, кг 100
Габаритные размеры, мм 940x460x560

 

 

 

 

 

 

 

Приставка сварочная ПС15

 

  • Предназначена для ручной электродуговой сварки, зарядки аккумуляторов, запуска двигателей внутреннего сгорания. Питание от электроагрегата типа АБ4 или трехфазной сети 220 и 380В.
  • Ступенчатый диапазон регулирования сварочного тока, в т.ч. по заказу — дистанционное регулирование.
  • Зарядка аккумуляторных батарей.
  • Контроль сварочного тока во время сварки.
Сварочный ток, А 100, 130, 180
Максимальный диаметр электрода, мм 4
Максимальный ток зарядки, А 8
Напряжение при зарядке и запуске, В 12
Габаритные размеры, мм 540х425х400
Масса, кг 63

 

 

 


 

 

на главную                        весь инструмент

 

Электростанция дизельная АД4-Т230-Т

 

Генератор с двигателем уд2 - Вместе мастерим

К числу наиболее популярных моделей стационарных двигателей, получивших широкое распространение в СССР, целесообразно отнести двигатель УД 2. Подобные устройства использовались в конструкциях различного оборудования — насосов, генераторов и других приборов. Длительный срок службы изделия, превосходные технические характеристики и простое устройство сделали его крайне востребованным среди потребителей.

Назначение двигателя УД-2

Прежде чем более подробно изучить технические характеристики двигателя УД2, необходимо более подробно рассмотреть его тип и назначение. Он относится к категории многофункциональных силовых агрегатов среднефорсированного типа, что позволяет использовать его в широком спектре устройств.

УД 2М использовался в:

  • различных моделях бензоэлектрических агрегатов, генераторов;
  • насосном оборудовании;
  • приводах компрессоров, лебедок и других механических узлах;
  • моторных лодках различного назначения.

Массовый выпуск первых экземпляров УД начался в 1952 году на моторном заводе в Ульяновске, когда были изготовлены моторы трех различных модификаций. Со временем линейка силовых агрегатов была дополнена в 1967 сразу двумя моделями.

Устройство представляет собой агрегат 4-х тактного типа с клапанами, расположенными в нижней части изделия, за исключением более поздних модификаций.

Ресурс двигателя при своевременном техническом обслуживании крайне велик, что позволяет использовать его до сих пор, особенно в удаленных регионах страны. Огромное значение имеет правильная регулировка зажигания, которая позволяет успешно заводить устройство даже в условиях низких температур.

Технические характеристики двигателя УД-2

Желая выяснить особенности, которыми обладает двигатель УД2 М1, а также другие модификации, целесообразно изучить рабочие показатели этой серии моторов. Они практически идентичны для всех модификаций этой серии и делают агрегат оптимальным вариантом для установки на различную спецтехнику, а также самодельные устройства.

Основные технические характеристики УД-2:

  • объем изделия — 610 см3;
  • мощность — 8 л.с.;
  • количество цилиндров — 2, диаметром 7,2 см;
  • система смазки — комбинированная;
  • рекомендуемый тип масла — минеральное;
  • система охлаждения — принудительная, воздушного типа;
  • подача топлива — карбюраторная;
  • габариты (ДхШхВ) — 55х48,5х55,5 см;
  • тип потребляемого топлива — неэтилированный А-72; А-76;
  • вес изделия — 72 кг.

Благодаря небольшому уровню расхода топлива, который составляет порядка 370 г/л.с. в час, цена эксплуатации техники крайне экономичная. При этом небольшой вес агрегата и обилие запчастей, позволяют значительно сэкономить на техническом обслуживании, ремонте, выполняя необходимые работы самостоятельно.

Переделка мотора не пользуется большой популярностью среди владельцев, поскольку он обладает оптимальными характеристиками. Значительно чаще «Ульяновец» используется в качестве силового агрегата для сборки различных самодельных видов спецтехники — тракторов, мотоблоков, культиваторов.

Устройство двигателя УД-2

Как показывают многочисленные отзывы владельцев подобного устройства, оно отличается простой, надежной конструкцией, которая способна прослужить долгие годы при надлежащем отношении. Основным элементом двигателя представляется картер, составными узлами которого являются 2 корпусные детали.

К числу других важных составляющих целесообразно отнести:

  • кривошипно-шатунный механизм, установленный в картере;
  • поршневая группа;
  • коленвал;
  • маховик.

Необходимо отметить, что при изготовлении деталей этого силового агрегата использовалось сразу 2 материала. Для элементов, больше других подверженных износу, в качестве материала изготовления был выбран чугун, а для других менее ответственных деталей — алюминиевый сплав. Это позволило снизить вес агрегата, а также увеличить срок его службы.

Модификации двигателя УД-2

За время выпуска этого легендарного отечественного мотора Ульяновским заводом было выпущено 4 основных его модификаций. Они отличаются между собой мощностными показателями, а также конструктивными особенностями:

  • УД2С-М1 — оснащен редуктором РО-1;
  • УД2Т-М1 — отличается наличием 8-литрового топливного бака;
  • УД2СТ-М1 — предусматривает наличие редуктора и топливного бака.

Необходимо упомянуть модификацию УД2-1МС, которая отличалась наличием электростартера. Он позволял сделать старт двигателя значительно увереннее, благодаря чему эта модификация использовалась в армейской технике.

Заключение

Ульяновец УД-2 стал популярным мотором, который повсеместно использовался в различных типах оборудования, в том числе самодельного. Благодаря сочетанию оптимальных технических параметров, низкой стоимости обслуживания, а также длительного срока службы мотор по праву считается универсальным.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

Прикупил тут по случаю данный агрегат — стационарный армейский генератор АБ-4-О/230-М1. Год выпуска 1976. Вот раньше делали технику, это да. Весу в нем почти 150кг. Заводится электростартером, при наличии аккумулятора, но можно завести и кик-стартером. Двигатель УД-25, 2-х цилиндровый 4-х тактный верхнеклапаник, половинка мотора от запорожца :). По мере эксплуатации напишу еще чего :).

Настоящее техническое описание и инструкция по эксплуатации распространяется на
агрегаты бензоэлектрические унифицированные переменного тока, в дальнейшем
именуемые агрегаты: АБ-2-О/230-М1, АБ-2-Т/230-М1, АБ-4-О/230-М1, АБ-4-Т/230-М1, АБ-4-Т/400-М1 и предназначено для изучения устройства и осуществления правильной
эксплуатации.

Примечание. Поскольку конструкция агрегатов постоянно совершенствуется, возможны
незначительные отступления от рисунков и текста данного технического описания и инструкции по
эксплуатации не влияющие на понимание принципа действия устройства агрегатов, его
работоспособность и эксплутационные качества.
1.1.1. Полное наименование— агрегаты бензоэлектрические унифицированные
переменного тока типов АБ-2-О/230-М1, АБ-2-Т/230-М1, АБ-4-О/230-М1, АБ-4-Т/230-М1,
АБ-4-Т/400-М1.
1.1.2. Агрегаты предназначены для использования в качестве автономных основных
или резервных источников электроэнергии переменного тока.
1.2.2. Агрегат обеспечивает возможность местной регулировки напряжения в
пределах от95% номинального до номинального при любой нагрузке от холостого хода до
номинальной с коэффициентом мощности от
0,8 до1,0.
1.2.3. При изменении нагрузки от холостого хода до номинальной с коэффициентом
мощности от0,8 до1,0 выходное напряжение агрегата автоматически поддерживается в
пределах±4% от среднерегулируемого.
Примечание. Среднерегулируемое напряжение— полусумма наибольшего и наименьшего значений
напряжения, полученных при изменении нагрузки и коэффициента мощности в указанных пределах.
1.2.4. Разность между наибольшим и наименьшим значениями установившейся
частоты выходного напряжения агрегата при изменении нагрузки от холостого хода до
номинальной не превышает2 Гц.
Примечание: Частота выходного напряжения в зависимости от нагрузки может иметь
одно из следующих значений:
не более52,5 Гц— при холостом ходе;
не менее49,5 Гц— при номинальной нагрузке.
1.2.5. Агрегат обеспечивает работу с перегрузкой на10% от номинальной мощности в
течение одного часа при температуре окружающего воздуха не выше плюс35°С. Общее
количество часов работы с перегрузкой не должно превышать10% от гарантийной
наработки приводного двигателя агрегата. При перегрузке снижение частоты не должно
превышать2% от номинального значения, изменение напряжения агрегата не должно
превышать±5% от установленного значения.
1.4. УСТРОЙСТВО И РАБОТА АГРЕГАТОМ
1.4.1. Устройство агрегата
1.4.1.1. Общий вид АБ-2-О/230-М1, АБ-2-Т/230-М1 представлен на
рисунках1 и2, АБ-4-О/230-М1, АБ-4-Т/230-М1, АБ-4-Т/400-М1 на рисунках3 и4.
1.4.1.2. Двигатель с переходником1 и генератор образуют единый блок, укрепленный
болтами на опорах рамы. Фланцевое соединение двигателя с генератором показано на
рисунке5.
Передача крутящего момента от двигателя к генератору производится при помощи
упругой соединительной муфты. Соединительная муфта состоит из полумуфты и
вентилятора и расположенной между ними резиновой прокладки3. Полумуфта2 крепится к
маховику двигателя, вентилятор4 крепится на валу генератора.
На корпусе генератора укреплен блок аппаратуры. Зажимы для присоединения к
агрегату кабеля нагрузки расположены на блоке аппаратуры и закрываются крышкой. Под
зажимами установлена клица для механического крепления кабеля нагрузки, на которой
имеется шпилька с барашком для присоединения провода заземления инструмента.
На корпусе блока аппаратуры укреплен блок приборов.
Над генератором расположен топливный бак, с помощью скоб укрепленный на
корпусе генератора.
На раме крепится аккумулятор.
Для защиты двигателя от воздействия атмосферных осадков и механических
повреждений агрегат снабжен кожухом, который устанавливается на каркасе.
Каркас крепится к раме агрегата болтами.
Электрическая схема может быть разделена на следующие основные цепи: силовую,
возбуждения генератора, подзарядного устройства и освещения.
1.4.3.1. Силовая цепь
Силовая цепь(цепь нагрузки) генератора трехфазного тока имеет три фазовых
обмотки ОС1, ОС2, ОС3. Напряжение силовой обмотки через выключатель нагрузки ВН
подводится к выходным зажимам1, 2, 3.
Силовая цепь генератора однофазного тока имеет одну силовую обмотку ОС. Ее
напряжение через проходные конденсаторыC1, C2 и выключатель нагрузки ВН подводится
к выходным зажимам10, 20.
1.4.3.2. Цепь возбуждения
В агрегате трехфазного тока обмотка возбуждения ОВ генератора питается через
кремниевые диоды Д5…Д10 от трехфазной дополнительной обмотки ОД1, ОД2, ОД3, а в
агрегате однофазного тока через кремниевые диоды Д5…Д8 (для АБ-2-О/230-М1) и Д5…Д12
(для АБ-4-О/230-М1) от однофазной дополнительной обмотки ОД.
В цепь возбуждения включаются сопротивления регулировки напряжения
(сопротивленияR2-1, R2-2 в агрегате АБ-2-О/230-М1 и сопротивленияR4-1, R4-2 в
остальных агрегатах). В агрегатах трехфазного тока сопротивления регулировки напряжения
включены на стороне выпрямленного, а в агрегатах однофазного тока- на стороне
переменного тока.
1.4.3.3. Цепь подзарядного устройства и освещения
Цепь подзарядного устройства и освещения питается через диоды Д1…Д4 от
вторичной обмотки трансформатора Тр.
Первичная обмотка трансформатора включена на выходное напряжение генератора.
Выпрямленное напряжение через предохранитель Пр подается на выключатель В лампы
освещения, розетку Ш и, через амперметр А1, на аккумуляторную батарею Б. Лампа
освещения Л и розетка также могут получать питание от аккумуляторной батареи.
1.4.4. Принцип работы
1.4.4.1. Самовозбуждение генератора
Самовозбуждение генератора обеспечивается при помощи постоянных магнитов,
установленных в поперечной оси ротора.
ЭДС, наводимая потоком постоянных магнитов в дополнительной обмотке статора
через диоды, подается на обмотку возбуждения.
1.4.4.2. Регулирование напряжения
Напряжение на выходных зажимах поддерживается постоянным при
изменении нагрузки в том случае, если соответственно изменять ток возбуждения
генератора. С увеличением нагрузки и уменьшением коэффициента мощности нагрузки ток
возбуждения необходимо увеличивать.
Изменение тока возбуждения с изменением нагрузки генератора осуществляется с
помощью компаундирующих сопротивленийR1 в агрегате АБ-2-О/230-М1, R1…R2 в
агрегате АБ-4-О/230-М1 иR1…R3 в остальных агрегатах.
При холостом ходе генератора ток возбуждения определяется ЭДС дополнительной
обмотки генератора. При подключении нагрузки часть тока нагрузки, пропорциональная
падению напряжения, создаваемому рабочим током на компаундирующих сопротивлениях,
ответвляется в цепь возбуждения. Этот ток геометрически складывается с током,
определяемым ЭДС дополнительной обмотки. Чем больше ток нагрузки или величина
компаундирующего сопротивления, тем большая часть тока ответвляется в цепь
возбуждения и, следовательно, тем больше суммарный ток, протекающий по обмотке
возбуждения генератора.
Увеличение тока возбуждения с уменьшением коэффициента мощности нагрузки
обеспечивается сдвигом на90 электрических градусов дополнительной обмотки генератора
относительно его силовой обмотки. Таким образом, выходное напряжение
поддерживается постоянным с точностью±4% от среднерегулируемого значения при
изменении нагрузки в пределах от холостого хода до номинальной и коэффициента
мощности от1,0 до0,8.
По мере нагрева или остывания обмотки возбуждения уровень напряжения может
незначительно изменяться(увод напряжения). Уровень поддерживаемого напряжения
зависит от сопротивлений всей цепи возбуждения и может быть установлен изменением
сопротивления регулировки напряжения(при вращении ручки«регулировка напряжения» по
часовой стрелке выходное напряжение увеличивается).
1.4.4.3. Электропитание стартера двигателя и подзарядка аккумуляторной батареи
Для питания стартера двигателя на агрегате устанавливается аккумуляторная батарея
напряжением12В. Включение стартера осуществляется с помощью кнопки стартера Кн,
установленной на блоке приборов.
Запрещается нажимать кнопку стартера Кн при работающем двигателе.
Подзарядное устройство обеспечивает подзарядку аккумуляторной батареи во время
работы. Величина тока подзарядки контролируется по амперметру А1 и может быть
увеличена переключением перемычки на зажимах подзарядного устройства из положения
«63 — 65» в положение
«64 — 65».
1.4.4.4. Защита генератора от перегрузок и коротких замыканий
Защита генератора от перегрузок и коротких замыканий осуществляется тепловыми
реле(для агрегатов трехфазного тока). Если ток в силовой обмотке превысит допустимое
значение, то сработает соответствующее реле, разорвется цепь обмотки возбуждения и
генератор развозбудится.
22
При увеличении нагрузки выше допустимой на агрегатах однофазного тока двигатель
глохнет и генератор развозбуждается.

Стационарные двигатели применяется для привода различных установок – насосов, генераторов и т. д. В СССР таким двигателем стал УД2. Благодаря простой конструкции и легкости ремонта и обслуживания мотор достаточно широко используется в отдаленных районах страны и для привода различной армейской техники. Первые серийные образцы двигателей были выпущены в 1952 году.

Общая схема и характеристики

Стационарные двигатели с воздушным охлаждением УД-2 «Ульяновец» выпускаются на Ульяновском моторном заводе (УМЗ) в течение достаточно продолжительного времени. Конструктивно агрегат представляет собой двухцилиндровый карбюраторный мотор и состоит из следующих основных узлов:

  • Картера, с размещенными в нем кривошипным и распределительным механизмами.
  • Систем смазки и охлаждения цилиндров.
  • Систем питания топливом и зажигания.
  • Система запуска.

Поскольку в качестве топлива используется низкооктановый бензин, то технические характеристики двигателя УД-2 невысоки. Максимальная мощность моторов в зависимости от настройки частоты вращения составляет всего 6…8 сил при объеме цилиндров 0,61 литра. Максимально допустимые обороты при этом не должны превышать 3000 в минуту. Расход топлива при этом достаточно высок и составляет около 370 гр/(л.с.*ч). Согласно инструкции, двигатель УД-2 весит около 72 кг (что является очень большой цифрой) при следующих габаритах:

  • Длина – 0,55 м.
  • Ширина – 0,485 м.
  • Высота – 0,555 м.

Модификации

Двигатели УД2 различались по типу их применения, который отражался в их индексе. Для питания генераторов использовались версии с приставкой «Г». Такие моторы имели электрический стартер и переходный колокол для стыковки с генератором. Система зажигания двигателя УД2-Г оснащалась магнето с постоянным углом опережения зажигания.

Вариант «С» изначально был создан для привода небольших сельскохозяйственных машин и оснащался редуктором и аналогичным версии «Г» магнето. Для небольших плавучих средств изготовлялась версия «В», оснащенная сцеплением и реверсным редуктором. Вместе с мотором поставлялся гребной вал и винт. Интересный факт: двигатель УД2-В первых выпусков имел жидкостное охлаждение. Но поздние версии получили стандартные цилиндры и поставлялись под обозначением ПД-221. Для дорожной техники выпускалась версия УД2-Т, имевшая на картере электрический стартер и переходной фланец для установки различных коробок передач. Такие двигатели выпускались под обозначением СМ-12.

После модернизации в 90-е годы все двигатели получили приставку «М» к обозначению. В настоящее время базовый мотор носит обозначение УД2-М1 и выпускается в нескольких исполнениях, имеющих следующие отличия:

  • УД2С-М1 имеет жестко установленный на двигатель редуктор РО-1. Дополнительно агрегат комплектуется 20-литровым баком для топлива.
  • УД2Т-М1 оснащается установленным над двигателем 8-литровым топливным баком, которого хватает на 1,5 часа работы двигателя.
  • УД2СТ-М1 оснащен редуктором РО-1 и 8-литровым баком для топлива.

Примерно до середины 90-х годов выпускался двигатель УД2-1МС с электрическим стартером, который поставлялся по армейским заказам для оснащения передвижных электростанций мощностью 4 кВт.

Картер и цилиндры

Основой конструкции двигателя является чугунный картер, состоящий из двух половин. Взаимное расположение половин определяется по установленным на заводе коническим штифтам. Между половинами картера имеется прокладка, которая не позволяет вытекать маслу из двигателя. Половины картера стянуты между собой шпильками.

На верхней половине картера болтами прикручены постели коренных опор коленчатого вала. Нижняя половина картера имеет сливное отверстие, закрытое резьбовой пробкой и люк в боковой части. Люк крепится болтами и служит для обслуживания внутренних деталей кривошипного механизма и для очистки масляного фильтра. На нижней кромке картера имеются четыре прилива для крепления двигателя к раме или фундаменту.

Коленчатый вал

Главной деталью кривошипного механизма является стальной коленчатый вал, установленный в картере двигателя на двух шариковых подшипниках. На переднем конце вала имеется маховик, обеспечивающий равномерность работы двигателя. Маховик изготовлен из чугуна, отбалансирован и имеет особые направляющие лопатки, подающие охлаждающий воздух на цилиндры двигателя.

Рядом с маховиком установлена шестерня для запуска двигателя стартером. Оба конца вала имеют сальники, предотвращающие течь масла из картера. От осевого перемещения вал зафиксирован специальными кольцами, установленными в проточках на картере.

Поршни и шатуны

На двигателе применены двутавровые стальные шатуны с тонкостенной бронзовой втулкой в верхней части. Коренная шейка шатуна имеет заливку баббитовым сплавом марки Б-83. Для регулировки зазора в таком подшипнике крышка коренных подшипников имеет комплект сменных прокладок толщиной по 0,05 мм. По мере износа баббитового подшипника эти прокладки убирают, обеспечивая нормальный зазор.

Поршневая группа мотора оснащается алюминиевыми поршнями. Каждый поршень имеет по два компрессионных и одно маслосъемное кольцо. Конструкция поршня имеет вставки для компенсации термических расширений детали при работе. Для соединения поршня и шатуна используется плавающий поршневой палец, зафиксированный двумя стопорными кольцами.

Система смазки

Смазка двигателя УД2 осуществляется из 4-литровой масляной ванны в картере под давлением и разбрызгиванием. Под давлением смазываются нижние подшипники шатунов. Для подачи масла используется обычный шестеренчатый насос с приводом от коленчатого вала. Масло поступает в полость внутри коленчатого вала и потом к баббитовым подшипникам. Часть масла из насоса поступает в установленный в картере фильтр тонкой очистки. Очищенное масло стекает обратно в картер. Для контроля давления масла в конструкции двигателя УД2 используется механический датчик. Он представляет собой штифт, который при нормальном давлении масла выдвигается на определенную длину из корпуса.

Благодаря использованию шариковых подшипников в опорах удалось уменьшить протяженность масляных магистралей. Все остальные узлы мотора смазываются разбрызгиванием.

Газораспределение и охлаждение

Двигатели УД2 оснащены четырехтактной схемой газораспределения с нижним расположением клапанов. Привод клапанов осуществляется толкателями от расположенного в картере распределительного вала. В качестве опор вала используются шариковые подшипники. Регулировка клапанов выполняется специальными болтами в конструкции толкателей. Интересный факт: двигатель УД2 оснащен идентичными клапанами для впуска рабочей смеси и выпуска отработавших газов. Такая конструкция значительно упрощает ремонт и снабжение запасными частями. На фотографии хорошо видна система газораспределения двигателя УД2.

Для привода механизма газораспределения применяется шестеренчатая передача. От этого привода получает вращение и регулятор числа оборотов. Выставление фаз осуществляется с помощью меток на шестернях.

Основным элементом системы охлаждения является маховик, исполняющий функции нагнетающего вентилятора. Для регулировки интенсивности потока воздуха в кожухе маховика имеются жалюзи. Кожух направляет воздух к ребрам на цилиндрах и головках. Общий вид воздухозаборника системы охлаждения на фотографии ниже.

Питание

Подача бензина в цилиндры осуществляется карбюратором модели К-16В, имеющим дополнительный привод заслонки от регулятора числа оборотов. Принцип работы регулятора основан на раздвижении балансиров центробежной силой. После достижения определенного предела балансиры доходят до толкателя, который уменьшает обороты мотора. При падении оборотов балансиры возвращаются назад пружинами, и обороты двигателя вновь начинают расти. Параметры регулятора настраиваются под каждый конкретный случай использования двигателя УД2.

Питание карбюратора бензином идет самотеком. Для очистки воздуха карбюратор оснащается масляным контактным воздушным фильтром. Моторы СМ-12 оснащались фильтром со сменным бумажным элементом. Важным элементом конструкции двигателя УД2 является система вентиляции картера. Для этого между клапанной коробкой и воздушным фильтром установлен резиновый шланг, закреплённый зажимами. На фотографии хорошо видны карбюратор и фильтр двигателя.

Зажигание рабочей смеси

Зажигание двигателя УД2 обеспечивается от магнето высокого напряжения марки М-68Б1 с приводом через вал регулятора оборотов. Конструкция магнето включает в себя автоматический регулятор угла опережения зажигания, что обеспечивает надежную и бесперебойную работу двигателя при разных оборотах. По отдельному заказу система зажигания оснащается экраном для снижения радиопомех. На фотографии слева видно магнето.

Для пуска мотора применяется обычный рычажный кик-стартер, с осью на верхней половине картера. На рычаге имеется зубчатый сектор, который входит в зацепление со специальной шестерней на маховике. Такой способ запуска дал двигателю распространенное прозвище «топ-нога». На фотографии хорошо виден кик-стартер.

Самодельная техника

Двигатель достаточно часто используется при создании различных образцов сельскохозяйственной техники. В такой технике большой вес мотора оказывает положительное действие, поскольку обеспечивает небольшой машине устойчивость при работе с различными сельскохозяйственными приспособлениями.

Самодельные трактора с двигателем УД-2 обычно оснащаются коробками передач от классических «Жигулей» или «Москвичей». Для соединения двигателя и коробки изготавливают переходную плиту. На коленчатый вал устанавливают многоручьевой шкив, от которого осуществляется привод генератора и различных вспомогательных узлов. Образец самодельного трактора на фотографии ниже.

В конструкции передних колес также широко используются элементы подвесок отечественных машин. В качестве рулевого редуктора применяют стандартный узел от легкового автомобиля. Некоторые конструкторы осуществляют привод от рулевого вала на редуктор с помощью моторной цепи. Ведущий мост используется от ВАЗ или АЗЛК, с укороченными по желанию конструкторов чулками. Привод от коробки скоростей на мост выполняется обрезанным до нужной длины стандартным карданным валом от «жигулей». Все узлы и агрегаты монтируются на самодельной раме из уголкового профиля или из швеллера. Еще один образец творчества с двигателем УД2.

Некоторые авторы оснащают свои минитрактора с двигателем УД2 различными подъемными механизмами с использованием деталей от подъемников кабин грузовых автомобилей.

Многоступенчатое фосфорилирование онкогенными киназами усиливает деградацию супрессора опухоли NF2 Merlin

Abstract

Мутации в гене нейрофиброматоза 2 ( NF2 ) предрасполагают к опухолям нервной системы и, главным образом, к шоковым образованиям. Ген NF2 кодирует белок-супрессор опухолей мерлин (моэзин-эзрин-радиксин-подобный белок), который функционирует как линкер между плазматической мембраной и цитоскелетом. Карбоксиконцевое фосфорилирование влияет на активность мерлина, но многие нерешенные вопросы о регуляции функции мерлина все еще остаются.Путь фосфоинозитид-3-киназа / Akt активируется в вестибулярной шванноме человека, что предполагает роль Akt-зависимой регуляции мерлина в образовании этих опухолей. В этом исследовании мы идентифицируем мерлин-серин 10 как новый субстрат для фосфорилирования Akt. Мы демонстрируем, что это N-концевое фосфорилирование направляет мерлин на опосредованную протеасомами деградацию и влияет на связывание мерлина с компонентом лигазы E3 DCAF1. Наши данные показывают, что последовательное фосфорилирование C- и N-конца мерлина различными онкогенными киназами нацелено на деградацию мерлина и, таким образом, снижает его активность.На основании этих результатов мы предлагаем модель посттрансляционного механизма инактивации мерлина.

Введение

Мерлин, супрессор опухолей NF2, кодируемый геном NF2 , регулирует пролиферацию во многих типах клеток [1]. Мерлин принадлежит к семейству белков ERM (эзрин-радиксин-моэзин), которые функционируют как линкеры между клеточной мембраной и цитоскелетом [2]. Подобно другим белкам ERM, мерлин также может образовывать внутримолекулярные N- и C-концевые ассоциации, которые, как известно, влияют на его активность [3–5].Функция мерлина регулируется посредством фосфорилирования С-концевого серина 518 (S518), который является субстратом как для p21-активируемой киназы (PAK), так и для протеинкиназы A (PKA) [6–9]. Предполагается, что фосфорилирование S518 приведет к раскрытию мерлина и уменьшению ингибирования роста клеток, тогда как дефосфорилирование S518 с помощью моэзинфосфатазы MYPT-1-PP1δ активирует функцию мерлина, подавляющую опухоль, что приводит к остановке роста [10,11]. Однако точный механизм, с помощью которого фосфорилирование S518 регулирует противоопухолевую активность мерлина, все еще открыт.Помимо С-концевого серина, мерлин фосфорилируется PKA по серину 10 (S10), что приводит к модуляции актинового цитоскелета [12].

Серин / треонинкиназа Akt (протеинкиназа B) регулирует многие клеточные процессы, такие как подвижность, рост и апоптоз. Сигнальный путь фосфоинозитид-3-киназы (PI3K) / Akt способствует росту многих злокачественных новообразований человека, а сверхэкспрессия или гиперактивация Akt часто связаны с развитием опухоли [13]. Три гена кодируют изоформы Akt млекопитающих: PKBα (Akt1), PKBβ (Akt2) и PKBγ (Akt3).Akt1 повсеместно экспрессируется на высоких уровнях; Akt2 высоко экспрессируется в чувствительных к инсулину тканях, таких как печень, скелетные мышцы и жировая ткань; тогда как самая высокая экспрессия Akt3 наблюдается в головном мозге и семенниках [14]. Akts регулируются фосфоинозитид-зависимой киназой 1 (PDK1), которая действует ниже PI3K и фосфорилирует Akt по треонину 308 в его петле активации [15], но полная активация Akt требует дополнительного фосфорилирования серина 473 [16].

Активация пути PI3K / Akt участвует в выживании шванновских клеток [17], которые чувствительны к образованию опухолей при болезни NF2, и несколько исследований указывают на взаимодействие между мерлином и Akt.Мерлин играет роль в контроле пути PI3K / Akt путем ингибирования передачи сигналов Akt [18,19], и этот путь активируется как в шванноме человека [20–22], так и в злокачественных мезотелиомах от мышей Nf2 +/- [23]. Недавно было описано Akt-опосредованное фосфорилирование мерлина [24], но все еще остаются открытыми вопросы о биологическом воздействии Akt на мерлин.

В этом отчете мы изучили фосфорилирование мерлина и идентифицировали S10 как сайт фосфорилирования Akt. Наши результаты показывают, что это N-концевое фосфорилирование направляет мерлин на опосредованную протеасомами деградацию, тем самым влияя на функцию мерлина.Эти находки указывают на механизм, с помощью которого онкогенный путь Akt может регулировать рост клеток.

Материалы и методы

Клетки, плазмиды и антитела

Клетки COS-7 поддерживали в минимальной необходимой среде Дульбекко (Gibco-Invitrogen, Карлсбад, Калифорния) с 10% фетальной бычьей сывороткой (PromoCell, Гейдельберг, Германия) и антибиотиками. .

Для экспрессии рекомбинантных слитых белков GST-мерлин использовали фрагменты мерлина 1–100, 1–314, 314–477, 1–547 и 492–595 в векторе pGEX4T1 (Amersham Biosciences, Упсала, Швеция).Изоформа I мерлина человека (WT, аминокислоты 1-595) в векторе pcDNA3 (Invitrogen) была использована для экспериментов по трансфекции. Точечные мутации S10A, S10D, T230A, S315A, S518A и S518D были получены путем сайт-направленного мутагенеза в обоих векторах с использованием набора QuikChange Kit (Stratagene, La Jolla, CA). Подлинность всех конструкций проверяли секвенированием. Akt WT в векторе pUSEamp был от Upstate Biotechnology (Темекула, Калифорния). КДНК бычьего миристоилированного Akt и миристоилированного киназо-мертвого Akt были любезными подарками от доктора Рене Х.Медема. Обе конструкции содержат сигналы N-концевого миристоилирования, а конструкция Akt KD имеет мутацию K179A в каталитическом домене. DCAF1 в векторе pRK5 был получен от доктора Филиппо Джанкотти и был описан [25].

Antimerlin pAb A-19 sc-331 (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) и моноклональные антитела (mAb) KF10 [26] были использованы для обнаружения мерлина. Фосфорилированный S518 мерлин был обнаружен с помощью pS518 pAb (Biodesign, Saco, ME). Кроличьи поликлональные антитела, распознающие человеческий мерлин, фосфорилированный на S10, получали иммунизацией 11-мерным синтетическим фосфопептидом IASRM (pS) FSSLK и последующей очисткой антисыворотки с использованием методов очистки как с отрицательной, так и с положительной аффинностью.Специфичность антитела тестировали против in vitro Akt-фосфорилированного GST-мерлина с мутациями S10A и без них. Кроличьи моноклональные антитела pan-Akt и фосфо-Ser473 Akt (Cell Signaling Technology, Danvers, MA) использовали для обнаружения Akt, фосфо-GSK-3α / β (Ser21 / 9) (Cell Signaling Technology) и GSK-3α (Santa Cruz Biotechnology) антитела использовали для обнаружения GSK3, а антитела против VprBP (SMS-Gruppen, Rungsted, Дания) использовали для обнаружения DCAF1. Антитело Ub (P4G7) (Santa Cruz Biotechnology) использовали для обнаружения моноубиквитина и полиубиквитина.Слитые белки GST были обнаружены с помощью GST Ab (GE Healthcare, Упсала, Швеция) и тубулина с помощью mAb α-тубулина (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури). В качестве вторичных антител при иммунофлуоресценции использовали конъюгированные с Alexa-488 и Alexa-594 козлиные антимышиные и козьи антитела против кроликов (Invitrogen-Molecular Probes), а также конъюгированные с пероксидазой хрена антимышиные антитела кроликов и свиные анти-кролики (DAKO A / S, Glostrup, Дания). Вторичные антитела против козьих свиней (Santa Cruz Biotechnology) использовали в Вестерн-блот-анализе.

Трансфекция, иммунофлуоресценция и иммуноблот-анализ

Клетки трансфицировали с использованием реагента для трансфекции FuGENE 6 (Hoffmann-La Roche Ltd, Базель, Швейцария) и инкубировали в течение 48 часов перед анализом. Для экспериментов по активации и ингибированию киназы Akt клетки культивировали в бессывороточной среде в течение 24 часов и обрабатывали перед лизисом 0,2 мкг / мл рекомбинантного EGF человека (Calbiochem, La Jolla, CA) в течение 10 минут с 50 мкМ LY-294002 ( Sigma-Aldrich) на 1 час или с 0.1 мкМ Каликулин A (Calbiochem) в течение 10 минут при 37 ° C. Для анализов деградации клетки с недостатком сыворотки обрабатывали в течение 24 часов (или 3 часа для эксперимента убиквитинирования) 5 мкМ протеасомного ингибитора MG132 или 0,1 мкМ бафиломицина A1 (оба от Sigma-Aldrich), используемых для ингибирования лизосомной функции. Для активации или ингибирования эндогенной активности PKA клетки обрабатывали 50 мМ IBMX и 25 мМ форсколином или 10 мкМ H89 (все от Sigma-Aldrich) в течение 24 часов. Для вестерн-блоттинга фракционированных лизатов клетки промывали фосфатно-солевым буфером и лизировали в буфере ELB (50 мМ HEPES, pH 7.4, 150 мМ NaCl, 5 мМ ЭДТА), содержащий 0,5% Nonidet P-40 (NP-40), ингибиторы фосфатазы HALT (Pierce, Rockford, IL) и полные ингибиторы протеазы (Roche). Лизированные клетки центрифугировали при 13000 g в течение 20 минут при + 4 ° C, и осадок и супернатант растворяли в равных количествах восстанавливающего буфера Лэммли. Лизаты целых клеток получали путем добавления восстанавливающего буфера для образцов Лэммли на планшеты. Образцы разделяли на SDS-PAGE, переносили на нитроцеллюлозные фильтры и анализировали иммуноблот-анализом с соответствующими антителами с использованием усиленного хемилюминесцентного обнаружения (Amersham Biosciences).Для иммунофлуоресценции клетки, выращенные на покровных стеклах, фиксировали в 3,5% параформальдегиде (pH 7,5) и детектировали соответствующими антителами с использованием стандартных протоколов.

Иммунопреципитация

Клетки COS-7 лизировали через 48 часов после трансфекции в буфере ELB, содержащем 0,5% NP-40, ингибиторы фосфатазы HALT и полные ингибиторы протеаз. Лизированные клетки центрифугировали при 13000 g в течение 30 минут при 4 ° C. Супернатанты разбавляли 1: 1 буфером ELB без NP-40 и предварительно очищали гранулами G-сефарозы в течение 1 часа при 4 ° C.Гранулы центрифугировали и очищенные супернатанты инкубировали с соответствующими антителами в течение ночи при 4 ° C при вращении. Добавляли шарики G-сефарозы и образцы инкубировали еще 4 часа при 4 ° C при вращении. Иммунопреципитаты промывали буфером ELB, и связанные белки элюировали из шариков кипячением в невосстанавливающем буфере Лэммли и анализировали с помощью анализа иммуноблоттинга.

In vitro Фосфорилирование Merlin Слитые белки

GST экспрессировали в Escherichia coli DH5α и очищали.Гранулы глутатион-сефароза (Amersham Biosciences), с которыми было конъюгировано ~ 4 мкг гибридного белка, промывали в буфере Akt (50 мМ Tris-HCl, pH 7,5, 0,1 мМ EGTA, 15 мМ DTT, 15 мМ MgCl 2 , 100 мкМ АТФ) или буфер PKC (1/5 липидного активатора PKC [Upstate Biotechnology], 20 мМ HEPES, 10 мМ MgCl 2 , 0,1 мМ EGTA, 500 мкМ АТФ), содержащий полные ингибиторы протеаз. Реакцию фосфорилирования проводили в 30-мкл буферном объеме, включающем 10 мкКи [γ- 33 P] АТФ (PerkinElmer Life Sciences, Waltham, MA) и 0.1 мкг человеческого рекомбинантного активного Akt1 (ΔPH, S473D), Akt2 (δPH, S474D), Akt3 (117-конец, S472D; Upstate Biotechnology) или 5 нг человеческого рекомбинантного PKC theta (Invitrogen) в течение 30 минут при 30 ° C. Гранулы промывали киназным буфером, добавляли восстанавливающий буфер Лэммли и образцы разделяли с помощью SDS-PAGE. Гель фиксировали и окрашивали кумасси синим с последующим воздействием на планшет PhosphoImager и обнаружением с помощью Typhoon Imager 9400 (оба от GE Healthcare). Для in vitro анализов киназы полноразмерного белка клетки COS-7 трансфицировали конструкциями мерлина, и экспрессированные белки иммунопреципитировали с помощью С-концевого mAb мерлина KF10.Иммунопреципитированные белки фосфорилировали in vitro с помощью Akt1, как описано ранее.

Масс-спектрометрический анализ

Мерлин был иммунопреципитирован из лишенных сыворотки трансфицированных клеток COS-7, которые были либо стимулированы EGF, как описано ранее, либо котрансфицированы Akt myr. Для идентификации иммунопреципитированные белки разделяли с помощью SDS-PAGE и визуализировали окрашиванием серебром [27], после чего полосы белка вырезали из геля, расщепляли в геле трипсином до пептидов и анализировали методом жидкостной хроматографии с тандемной массой. спектрометрия (LC-MS / MS) с использованием Ultimate 3000 nano-LC (Dionex, Sunnyvale, CA) и гибридного квадрупольного TOF-MS QSTAR Elite (Applied Biosystems / MDS Sciex, Foster City, CA) с ионизацией наноэлектрораспылением, как ранее описано [28–30].

Поиск данных ЖХ-МС / МС проводился с помощью собственного Mascot версии 2.2 через интерфейс ProteinPilot 2.0.1 в самодельной базе данных, содержащей последовательность мерлина (запись SwissProt {"type": "entrez-protein", "attrs" : {"текст": "P35240", "term_id": "462594", "term_text": "P35240"}} P35240). Кроме того, поиск был выполнен в базе данных SwissProt (версия 57.10; 512 205 последовательностей). Критерии поиска для поиска талисманов были следующие: расщепление трипсином с тремя разрешенными пропущенными расщеплениями, карбамидометил (C) как фиксированная модификация и окисление (M), фосфо (ST), фосфо (Y) как переменные модификации.Для спектров ЖХ-МС / МС максимальная толерантность по массе ионов-предшественников составляла 50 ч. / Млн, и использовались толерантность по массе ионов фрагментов МС / МС 0,2 Да и состояние заряда пептида +1, +2 или +3.

Affinity Pull-down

Трансфицированные клетки COS-7 лизировали в буфере для связывания холода (140 мМ NaCl, 1 мМ Трис, pH 7,5), содержащем 0,5% Тритон X-100 и полные ингибиторы протеаз, и гомогенаты очищали центрифугированием. при 4 ° C в течение 20 минут при 13000 г . Гранулы G-сефарозы, несущие ~ 4 мкг продуцируемых бактериями слитых белков GST, промывали связывающим буфером и инкубировали с лизатами в течение ночи при 4 ° C при вращении.Образцы промывали связывающим буфером, и связанные белки разделяли с помощью SDS-PAGE, блотировали и детектировали с помощью подходящего антитела. Затем блот очищали и повторно зондировали с использованием GST Ab для проверки равных количеств белков на шариках.

Количественные оценки

Программное обеспечение ImageQuant TL2003 (GE Healthcare) использовалось для анализа интенсивности полос при иммуноблоттинге. Интенсивность мерлина нормализовали к α-тубулину для получения отношения мерлин-тубулин или количества p-S518 к общему количеству мерлина для получения отношения p-S518-мерлин.Для количественной оценки фосфорилирования in vitro фосфо-сигнал с авторадиографа, считанный с помощью Typhoon Imager 9400, анализировали с помощью ImageQuant TL2003 и нормализовали по окрашиванию кумасси синим, а фоновую радиоактивность (нетрансфицированные клетки) вычитали из образцов мерлина. Все количественные оценки были выполнены по крайней мере в трех независимых экспериментах, и критерий Стьюдента t использовался для расчета значений P . На рисунках дано среднее значение ± стандартное отклонение.

Результаты

Мерлин фосфорилируется на серине 10 всеми изоформами Akt

Для изучения предполагаемой связи между мерлином и Akt мы сначала провели анализ фосфорилирования in vitro Akt с рекомбинантными фрагментами мерлина.Полноразмерный мерлин (остатки 1–595) легко разлагается при синтезе GST в бактериях; поэтому для покрытия всей молекулы использовали мерлин 1–547 и мерлин 492–595. Субстратная область Akt в мерлине была картирована на самом N-конце белка, поскольку мерлин 1–100 фосфорилировался с помощью Akt1 in vitro (). Akt не фосфорилировал C-конец мерлина (492-595) в отличие от ранее охарактеризованных фосфорилирующих киназ мерлина, PAK и PKA. Замена серина 10, ранее идентифицированного как субстрат для PKA [12], аннулировала фосфорилирование во всех конструкциях мерлина, показывая, что S10 необходим для фосфорилирования Akt.Чтобы проверить, служит ли мерлин субстратом для всех киназ AGC, подсемейства протеинкиназ, к которому принадлежат как PKA, так и Akt, был проведен анализ фосфорилирования протеинкиназы C (PKC). PKC фосфорилирует N-конец мерлина in vitro , но мутация S10A не влияет на фосфорилирование (). Следовательно, маловероятно, что снижение фосфорилирования конструкций S10A с помощью Akt будет результатом общей неправильной укладки белков мерлина.

Все изоформы Akt фосфорилируют мерлин по серину 10.(A) Фрагменты рекомбинантного GST-мерлина были Akt-фосфорилированы in vitro , разделены на SDS-PAGE и экспонированы (верхняя панель). Окрашивание кумасси синим показывает загрузку белков (нижняя панель), а стрелки обозначают конструкции GST мерлина. Мерлин 1–100, 1–314 и 1–547 фосфорилируются с помощью Akt1, и замена S10A отменяет фосфорилирование. (B) Фрагменты GST-мерлина фосфорилировали in vitro с помощью PKC, экспонировали (верхняя панель) и окрашивали кумасси синим (нижняя панель).Мерлин 1–314 фосфорилируется PKC, но мутация S10A не влияет на фосфорилирование. (C) Полноразмерные мутанты мерлина и мерлина дикого типа (WT) экспрессировали в клетках COS-7, подвергали иммунопреципитации и подвергали анализу киназы in vitro Akt. Иммунопреципитация из нетрансфицированных клеток (-) использовалась в качестве отрицательного контроля. Мерлин WT фосфорилируется с помощью Akt, тогда как фосфорилирование снижено в обеих S10A-содержащих конструкциях (верхняя панель). Замена T230 или S315 не влияет на фосфорилирование.Окрашивание кумасси синим показывает равную загрузку (средняя панель), а нижняя панель показывает иммунопреципитированный мерлин. (D) In vitro анализ киназы с белками GST мерлина, инкубированными с (+) или без (-) Akt1, выявляли с фосфо-S10 Ab (левая панель) и GST Ab (правая панель). Антитело фосфо-S10 обнаруживает инкубированный с Akt1 мерлин 1–547, но не S10A или необработанный 1–547. (E) Слитые белки GST-мерлин фосфорилировались киназами Akt1, Akt2 и Akt3. Белки разделяли на SDS-PAGE, окрашивали кумасси синим (нижние панели) и экспонировали (верхние панели).Мерлин 1–547 фосфорилируется всеми изоформами Akt, и мутация S10A отменяет фосфорилирование. Замены T230A и S315A не влияют на фосфорилирование.

Мерлин треонин 230 и серин 315 были недавно описаны как сайты фосфорилирования Akt [24]. Чтобы проверить фосфорилирование этих остатков и подтвердить фосфорилирование S10 в полноразмерном мерлине, был проведен анализ киназы Akt in vitro с полноразмерным мерлином с заменами аланина или без них (S10A, T230A, S315A) в различных комбинациях, иммунопреципитированных из трансфицированные клетки COS-7.Замена треонина 230 и серина 315 аланином не влияла на фосфорилирование Akt, тогда как мутация S10A приводила к потере фосфорилирования во всех конструкциях (). Эти результаты показывают, что S10 является единственной целью Akt. Для дальнейшего подтверждения фосфорилирования S10 было повышено фосфоспецифическое антитело против фосфо-S10. Фосфо-S10 Ab распознает GST-мерлин 1-547, фосфорилированный Akt, тогда как S10A-содержащие конструкции или нефосфорилированный мерлин не обнаруживаются антителом ().

Чтобы исключить, что противоречивые результаты нашего исследования и опубликованных ранее были связаны с использованием различных изоформ Akt, мы изучили влияние трех киназ на фосфорилирование мерлина.Конструкции мерлина 1–547 одинаково фосфорилировались всеми изоформами, и мутации S10 было достаточно, чтобы отменить фосфорилирование (). Однако на фосфорилирование не влияли мутации T230A и S315A.

Наконец, чтобы изучить, является ли мерлин S10 субстратом Akt in vivo , мерлин экспрессировался в клетках COS-7, которые были либо стимулированы эпидермальным фактором роста (EGF) для активации Akt, либо коэкспрессированы с миристоилированным Akt (Akt myr), конститутивно активированная форма Akt.Мерлин подвергали иммунопреципитации, разделяли в SDS-PAGE и окрашивали серебром. Полосы подвергали протеолитическому расщеплению и анализировали с помощью MS. Анализ MS-спектров мерлина, стимулированного EGF, выявил несколько фосфорилированных пептидов, в том числе пептид, соответствующий остаткам мерлина 9-16, содержащий фосфосерин 10 (данные не показаны). Белки из клеток, трансфицированных мерлином и Akt myr, также были изучены, но, что интересно, в этом образце не было обнаружено фосфорилированных пептидов.

Merlin и Akt колокализируются и взаимодействуют как

In Vitro , так и In Vivo

Хотя стабильное образование комплекса между киназой и ее субстратом обычно не требуется для фосфорилирования, было показано, что многие субстраты Akt образуют детектируемые комплексы с киназой. .Взаимодействие может способствовать фосфорилированию субстрата и / или закреплять Akt в различных клеточных компартментах, обеспечивая локализованные сигнальные сети [31]. Поскольку было подтверждено Akt-опосредованное фосфорилирование мерлина, была изучена совместная локализация между этими белками. Конструкции Merlin WT и S10A котрансфицировали Akt1 в клетки COS-7, и клетки обрабатывали EGF или ингибитором PI3K LY294002 для активации или инактивации Akt. Как WT, так и S10A мерлин колокализовались с активным Akt на клеточной мембране в клетках, обработанных EGF (, верхняя и средняя панели ).Akt1 показал ядерное окрашивание в клетках, обработанных ингибитором PI3K, тогда как мерлин все еще присутствовал на клеточной мембране ( нижние панели ). Такой же паттерн локализации был обнаружен в эмбриональных фибробластах Nf2 - / - мыши (данные не показаны).

Ассоциация Мерлина и Akt in vivo и in vitro . (A) Клетки COS-7 котрансфицировали Akt1 и мерлином WT или S10A и обрабатывали EGF или LY294002 (PI3K inh.). Клетки окрашивали на мерлин (зеленый) и Akt (красный, вверху и внизу) или на фосфо-Ser 473 Akt (p-Akt, красный, в центре).Мерлин колокализуется с активированным Akt на клеточной мембране (стрелки), а мутация серина 10 не влияет на колокализацию merlin-Akt (правая панель). (B) Конъюгированные с гранулами глутатиона конструкции GST-мерлин инкубировали с лизатами клеток COS-7, трансфицированных Akt1, и связанные белки выявляли с помощью Akt Ab (верхняя панель) и мерлина с помощью GST Ab (нижняя панель). Фрагменты, содержащие N-конец Мерлина (1–100, 1–314, 1–547), связывают Akt1 in vitro . Аффинность связывания Akt не ослабляется мутацией S10A.(C) Котрансфицированный мерлин и Akt1 коиммунопреципитировали из лизатов клеток COS-7. Белки детектировали с помощью мерлина KF10 и pan-Akt антител, а нетрансфицированные клетки (-) использовали в качестве контроля. Как WT, так и S10A мерлин взаимодействуют с Akt1 in vivo .

Для дальнейшего изучения взаимодействия мерлина и Akt и для картирования области связывания был проведен анализ сродства с понижением. Белки Merlin GST инкубировали с лизатами клеток COS-7, трансфицированных Akt1, и анализировали количество связанного Akt1.демонстрирует, что конструкции 1–314 и 1–547, содержащие домен FERM, связывают Akt1 in vitro , тогда как сродство связывания с α-спиральными 314–477 и С-концевыми конструкциями 492–595 было очень слабым. Поскольку связывание мерлина 1–547 было сильнее, чем взаимодействие, наблюдаемое с 1–314, возможно, что мерлин 1–547 содержит не только N-концевой, но и еще один, более C-концевой сайт связывания. Merlin S10, по-видимому, не имеет решающего значения для связывания, поскольку замена S10A связывает Akt с аналогичной аффинностью, что и WT.

Для проверки связывания был проведен анализ коиммунопреципитации с полноразмерным мерлином WT или S10A и Akt из лизатов котрансфицированных клеток COS-7. Наши данные показывают, что мерлин и Akt1 связывают in vivo и подтверждают, что ассоциация не зависит от фосфорилирования S10 (). Обработка клеток EGF не изменяла аффинность связывания мерлина и Akt (данные не показаны).

Akt-фосфорилированный мерлин расщепляется протеасомозависимым путем

В попытке дальнейшего анализа фосфорилирования серина 10 in vivo мерлин был иммунопреципитирован из лизатов COS-7, котрансфицированных конститутивно активным Akt myr.Интересно, что значительно меньше мерлина было обнаружено в иммунопреципитатах из клеток, в которых была сверхэкспрессирована Akt myr (данные не показаны). Низкие уровни мерлина вместе с данными анализа MS, которые показали, что фосфопептиды мерлина не могут быть обнаружены в трансфектантах Akt myr, предполагают, что мерлин разлагается в ответ на фосфорилирование Akt. Для проверки этой гипотезы мерлин WT и S10A трансфицировали в клетки COS-7 вместе либо с Akt myr, либо с мертвой миристоилированной киназой Akt (Akt KD).Клетки, трансфицированные Akt KD, также обрабатывали ингибитором PI3K для снижения эндогенной активности Akt, а клетки, трансфицированные Akt myr, инкубировали с ингибитором фосфатазы Каликулин A для повышения уровня фосфорилированного мерлина. Иммуноблоты по фосфо-Akt и фосфо-GSK3 подтверждают, что Akt активируется в клетках, трансфицированных Akt myr (). Результаты показывают, что количество WT мерлина было значительно снижено и, в среднем, уменьшилось на 65% в клетках, экспрессирующих Akt myr, по сравнению с клетками, экспрессирующими Akt KD ().Инкубация с каликулином A еще больше увеличивала деградацию WT мерлина. Как и ожидалось, мерлин S10A был более устойчив к индуцированной Akt myr деградации, чем WT. Незначительное уменьшение количества мерлина S10A может быть результатом замены аланина в S10, которая не полностью имитирует нефосфорилированный остаток и, следовательно, недостаточна для полного ингибирования разложения. И нерастворимый в детергенте, и нерастворимый WT мерлин разлагались из-за сверхэкспрессии Akt myr ().

Конститутивно активный Akt деградирует WT merlin через протеасомный путь.(A) Клетки COS-7, котрансфицированные мерлином WT или S10A и неактивные (Akt KD) или конститутивно активные (Akt myr) Akt, не обрабатывались или обрабатывались ингибитором фосфатазы Каликулин A (Calyc.) Или ингибитором PI3K LY294002 (PI3K inh.) . Лизаты обрабатывали в SDS-PAGE и определяли для мерлина (A-19 Ab), фосфо-Ser 473 Akt (p-Akt), Akt, фосфо-GSK3 (p-GSK3), GSK3 и α-тубулина в качестве контроля нагрузки. . Отношение мерлин / тубулин показано на нижнем графике, и 100% представляет уровень мерлина в Akt KD-экспрессирующих клетках.Количество мерлина WT в клетках, экспрессирующих Akt myr, значительно снижено по сравнению с клетками, экспрессирующими Akt KD, тогда как мерлин S10A менее чувствителен к коэкспрессии Akt myr. (B) Лизаты клеток COS-7, котрансфицированных мерлином и Akt KD или Akt myr, разделяли на нерастворимую (I) и растворимую (S) фракции и анализировали в SDS-PAGE (верхняя панель). Отношение мерлин-тубулин было определено количественно, и количество мерлина в долях показано в условных единицах (нижняя диаграмма). И нерастворимый в детергенте, и нерастворимый WT мерлин разлагается в клетках, трансфицированных Akt myr.(C) Клетки COS-7 котрансфицировали мерлином WT и Akt KD или Akt myr. Клетки, экспрессирующие myr WT + Akt, не обрабатывали или обрабатывали MG132 или бафиломицином A1 (Baf.), А лизаты детектировали с помощью Ab мерлина A-19, α-тубулина Ab и убиквитина Ab (левые панели). Количество мерлина определяли количественно, и уровень в клетках, трансфицированных KD WT + Akt, принимали за 100% (правая диаграмма). Ингибитор протеасом MG132 увеличивает количество мерлина в клетках, экспрессирующих Akt myr. (D) Мерлин WT и S10A иммунопреципитировали из нетрансфицированных или трансфицированных Akt EGF-стимулированных и обработанных MG132 клеток COS-7.Образцы были обнаружены на убиквитин (верхняя панель) и мерлин (средняя панель). Экспрессию Akt подтверждали лизатами с антителом Akt (нижняя панель). Merlin WT и S10A одинаково убиквитинированы. ** P <.01. * P <.05.

Для определения пути, который опосредует деградацию мерлина, клетки, коэкспрессирующие мерлин и Akt myr, обрабатывали протеасомным ингибитором MG132 или бафиломицином A1 для подавления лизосомальной функции. Количество мерлина определяли количественно и сравнивали с уровнем в необработанных клетках, экспрессирующих KD Akt.Обработка клеток, экспрессирующих Akt myr и мерлин, с помощью MG132 увеличивала количество мерлина с 20% в необработанных клетках в среднем до 49%, тогда как бафиломицин A1 не оказывал значительного влияния на уровень мерлина (). Эти результаты показывают, что Akt-фосфорилированный мерлин разлагается через протеасомный путь. Белки, нацеленные на протеасомную деградацию, помечены убиквитинами. Для анализа убиквитинирования мерлина иммунопреципитированный мерлин WT и S10A из обработанных MG132 клеток COS-7 подвергали иммуноблоттингу на убиквитин ().Мерлин WT и S10A моноубиквитинируется независимо от Akt, но растворимый полиубиквитинированный мерлин не обнаружен.

C-концевое фосфорилирование мерлина увеличивает фосфорилирование серина 10

Поскольку и Akt, и PKA фосфорилируют мерлин S10, мы затем рассмотрели взаимодействие между PKA и Akt и их влияние на деградацию мерлина. Merlin WT котрансфицировали в клетки COS-7 с помощью Akt KD или Akt myr. Клетки, трансфицированные Akt myr, обрабатывали ингибитором PKA H89 для ингибирования эндогенной активности PKA или форсколином и IBMX для активации PKA.Результаты показывают, что вызванная Akt деградация мерлина не зависит от PKA, поскольку мерлин также разрушается в клетках, обработанных H89 (). Однако соактивация Akt и PKA оказывает аддитивный эффект на деградацию мерлина.

Влияние мутантов на фосфорилирование мерлина. (A) Клетки COS-7 котрансфицировали мерлином WT и Akt KD или Akt myr, а клетки, экспрессирующие WT + Akt myr, не обрабатывали или обрабатывали H89 для ингибирования активности PKA или форсколином и IBMX (F + I) для увеличения PKA. Мероприятия. Лизаты были обнаружены с помощью Ab мерлина A-19, Ab α-тубулина, Ab фосфо-Ser473 Akt (p-Akt) и Ab Akt (верхние панели).Количество мерлина определяли количественно, и уровень в клетках, трансфицированных KD WT + Akt, принимали за 100% (нижняя диаграмма). Коактивация Akt и PKA увеличивает деградацию мерлина. (B) Конструкции Мерлина экспрессировали в клетках COS-7, иммунопреципитировали и фосфорилировали in vitro с использованием Akt1. Отношение фосфо-сигнала от авторадиографа, нормализованного к количеству белка, когда WT составляет 100%, показано на нижнем графике. Нетрансфицированные клетки (-) использовали в качестве отрицательного контроля. Фосфорилирование серина 10 повышено в S518D и снижено в S518A по сравнению с мерлином WT.(C) Лизаты клеток COS-7, трансфицированных конструкциями мерлина, подвергали иммуноблоттингу с использованием антитела мерлина фосфосерин 518 (p-S518 Ab) и антитела мерлина A-19. График иллюстрирует соотношение между фосфорилированным мерлином S518 и общим мерлином, когда WT считается 100%. Фосфорилирование серина 518 значительно снижено в мерлине T230A + S315A. ** P <.01. * P <.05.

Известно, что фосфорилирование S518 регулирует противоопухолевую активность мерлина.Для изучения взаимодействия между N- и C-концевыми сайтами фосфорилирования был проведен анализ киназы Akt. Полноразмерные конструкции Мерлина с заменами серина на аланин, полученные в клетках COS-7, подвергали иммунопреципитации, а связанные белки фосфорилировали in vitro с помощью Akt. Поскольку конструкции мерлина были произведены в клетках COS-7, правильная конформация белков должна быть сохранена. На диаграмме показана количественная оценка авторадиографов, когда сигнал в мерлине WT принимался за 100%.В мерлине S518D, имитирующем фосфорилированную форму, фосфорилирование S10 по Akt было значительно увеличено по сравнению с WT. Следовательно, фосфорилирование S10 мерлина S518A было ниже, чем WT.

Было показано, что мутации T230 и S315 влияют на функцию мерлина [24,32]. Хотя мы не смогли обнаружить Akt-фосфорилирование этих остатков, их возможное влияние на фосфорилирование мерлина было проанализировано. Клетки COS-7 трансфицировали мутантами, и лизаты детектировали с помощью фосфо-S518 мерлина Ab.Интересно, что замещения аланином Т230 и S315 отменяли С-концевое фосфорилирование S518 мерлина ().

Модификации серина 10 влияют на связывание мерлина с DCAF1

Присоединение убиквитинов к белкам, маркированным для протеасомной деградации, катализируется убиквитинлигазами. Взаимодействие с VprBP / DCAF1 (DDB1- и Cul4-ассоциированный фактор 1), как было показано, направляет мерлин на лигазный комплекс Roc1-Cul4A-DDB1 E3, что приводит к полиубиквитинированию мерлина и протеасомозависимой деградации [33].Поскольку наши анализы показали, что мерлин расщепляется протеасомой в ответ на N-концевое фосфорилирование, мы изучили, направляет ли фосфорилирование серина 10 мерлин на комплекс лигазы E3, направляя его на деградацию.

Мерлин взаимодействует с DCAF1 через свой N-конец [25,33]. Чтобы проанализировать, регулирует ли S10 мерлина взаимодействие, был проведен анализ с использованием рекомбинантных фрагментов мерлина и трансфицированного DCAF1. показывает, что сайт связывания в мерлине существует между остатками 100 и 314.Мутация S10 или S518 не влияла на аффинность связывания фрагментов, показывая, что эти остатки не требуются напрямую для связывания in vitro .

Взаимодействие Мерлин-DCAF1 in vitro и in vivo . (A) Конъюгированные с гранулами глутатиона конструкции GST-мерлин инкубировали с лизатами клеток COS-7, трансфицированных DCAF1, и связанные белки выявляли с помощью антитела против DCAF1 (верхняя панель) и мерлина с помощью GST Ab (нижняя панель). Мерлин 1–314 связывает DCAF1, тогда как мерлин 1–100, 314–477 и 492–595 не связывается.Мутация S10 не влияет на сродство связывания DCAF1 фрагментов мерлина. (B) DCAF1 был иммунопреципитирован из лизатов клеток COS-7, котрансфицированных мерлином и DCAF1, и мерлин был обнаружен с помощью KF10 Ab (верхняя панель). Равные количества белков выражали, как показано в лизатах (нижние панели), и нетрансфицированные клетки (-) использовали в качестве контроля. Мерлин S518D сильно взаимодействует, тогда как мерлин S10A + S518D демонстрирует пониженную аффинность связывания с DCAF1.

Хотя S10 не включен в область связывания DCAF1, эксперименты по коиммунопреципитации были проведены с полноразмерными белками, чтобы изучить, влияют ли модификации S10 на ассоциацию мерлин-DCAF1 in vivo .Merlin S518D ассоциировался с DCAF1 сильнее, чем WT, но, что интересно, мутация S10 значительно снижала связывание S518D с DCAF1 (). Хотя S10 непосредственно не входит в область связывания, модификации этого остатка могут приводить к изменениям, которые нарушают взаимодействие с DCAF1 in vivo .

Обсуждение

Эксперименты с киназой и MS-анализ мерлина в этом отчете подтверждают, что S10 является сайтом для Akt-опосредованного фосфорилирования. В пределах первых 17 аминокислот мерлина несколько возможных фосфорилированных остатков, включая серин 10, были предсказаны на основе анализа МС [34], и, используя метаболическое мечение, мы ранее идентифицировали S10 как сайт фосфорилирования PKA [12].Хотя S10 служит остатком субстрата как для PKA, так и для Akt, он не фосфорилируется всеми членами семейства киназ AGC, поскольку мутации S10A не влияют на PKC-опосредованное фосфорилирование мерлина. Известно, что Akt фосфорилирует белки, содержащие консенсусную последовательность R-X-R-X-X-S / T-F / L, где аргинины в положениях -3 и -5 кажутся наиболее критическими [35]. Однако S10 находится в последовательности с аргинином в положении -2. Также сообщалось о нетрадиционных последовательностях фосфорилирования Akt, но все они содержат аргинин перед фосфорилированным остатком [36,37].О способности Akt фосфорилировать белки аргинином в положении -2 ранее не сообщалось, таким образом, мерлин представляет собой новую субстратную последовательность Akt.

Низкие уровни мерлина в ответ на коэкспрессию конститутивно активного Akt приводят нас к гипотезе о том, что мерлин деградирует в ответ на фосфорилирование Akt, и это было подтверждено мутацией S10, которая значительно снижает индуцированную Akt деградацию. Мы не смогли обнаружить аналогичную деградацию мерлина с нацеленной на мембрану киназой-мертвой Akt или в ответ на обработку EGF, как это наблюдалось при использовании конститутивно активного Akt.Это говорит о том, что статус фосфорилирования мерлина жестко регулируется и что только активная мембранно-нацеленная Akt myr способна индуцировать специфическое и эффективное фосфорилирование мерлина. Ингибирование протеасомы увеличивало количество белка мерлина и ослабляло вызванную Akt деградацию, и поэтому мы пришли к выводу, что мерлин разрушается в ответ на фосфорилирование S10 через протеасомный путь. PKA, которая также фосфорилирует мерлин S10, не требуется для Akt-опосредованной деградации мерлина, но коактивация как Akt, так и PKA оказывает аддитивный эффект на деградацию мерлина.Соответственно, Nf2 посттранскрипционно теряется у мышей TEC3KO с повышенной активностью PKA, что позволяет предположить, что PKA также может регулировать стабильность мерлина [38].

Akt-опосредованное фосфорилирование мерлина, приводящее к его деградации, было описано ранее, но было заявлено, что этот эффект опосредуется треонином 230 и серином 315 [24]. Мы не смогли найти объяснения этому несоответствию, потому что все изоформы Akt фосфорилировали мерлин исключительно по S10; однако это можно объяснить использованием разных клеточных линий и различных экспериментальных установок.Наши результаты также показывают, что ассоциация мерлина и Akt является прямой, по крайней мере, через сильный N-концевой сайт связывания Akt, но фосфорилирование S10 не требуется для взаимодействия мерлин-Akt.

Чтобы исследовать взаимодействие между идентифицированными функционально важными остатками в мерлине, было изучено фосфорилирование мутантных белков. Анализы показывают, что C-концевое фосфорилирование S518 мерлина увеличивает N-концевое фосфорилирование S10, предполагая, что фосфорилирование S518 является основным событием в функциональной регуляции мерлина.Фосфорилирование S518 может усиливать N-концевое фосфорилирование, влияя на внутримолекулярную структуру мерлина, поскольку C-концевое фосфорилирование, как полагают, способствует конформационным изменениям, нарушая связь N-конца с C-концом. Однако, поскольку S10 расположен в самой N-концевой области вне домена FERM [39,40], не определено, маскируется ли остаток С-концом в закрытой конформации. Интересно, что фосфорилирование мерлина S518 было значительно снижено в конструкции T230A + S315A.Было показано, что мутация T230 и S315 нарушает внутримолекулярную самоассоциацию мерлина [24]. Таким образом, нарушение конформации мерлина может повлиять на S518, что приведет к наблюдаемому снижению фосфорилирования. Некоторые из эффектов, описанных для мутантов T230 + S315, такие как их влияние на апоптоз и подвижность клеток [24,32], могут поэтому быть вторичными событиями, возникающими в результате отмены C-концевого фосфорилирования без участия прямого Akt-опосредованного фосфорилирования.

Недавно было описано, что Мерлин подавляет онкогенез путем транслокации в ядро ​​для ингибирования лигазы E3 CRL4 DCAF1 [25].Авторы показали, что в ядре мерлин действует как негативный регулятор лигазы, ингибируя ее убиквитинирующую активность. Наши данные, однако, показывают, что модификация S10 влияет на взаимодействие мерлин-DCAF1 в растворимой фракции клеток, возможно, через конформационную трансформацию N-конца мерлина, которая может нацеливаться на мерлин для деградации. Это согласуется с недавними данными о том, что DCAF1 опосредует деградацию мерлина [33]. Остается изучить, является ли мерлин нижестоящим эффектором Akt на мембране, но вышестоящим регулятором DCAF1 в ядре.

На основе наших результатов и предыдущих исследований мы предлагаем модель негенетического механизма инактивации мерлина (). В условиях ингибирования роста мерлин существует в закрытой конформации посредством ассоциации N- и C-конца, нефосфорилированной по серину 518. Передача сигналов фактора роста приводит к фосфорилированию мерлина S518 посредством PKA или PAK, что превращает мерлин в открытую конформацию. Эта форма впоследствии фосфорилируется на S10 с помощью Akt или PKA. Фосфорилирование на N-конце нацелено на мерлин для протеасомной деградации за счет взаимодействия с DCAF1 или дополнительных неизвестных механизмов.Следовательно, ингибирующая функция мерлина эффективно подавляется. В соответствии с обнаруженной деградацией мерлина, совместная экспрессия конститутивно активного Akt с мерлином снижает проапоптотическое действие мерлина [32].

Модель функциональной инактивации мерлина путем двухступенчатого фосфорилирования. В условиях ингибирования роста нефосфорилированный функционально активный мерлин находится в закрытой конформации. При передаче сигналов фактора роста либо PKA, либо PAK фосфорилируют серин 518, что приводит к более открытой конформации.В этой конформации мерлин восприимчив к Akt- или PKA-опосредованному фосфорилированию серина 10, что впоследствии запускает деградацию и инактивацию мерлина через протеасомный путь.

Статус фосфорилирования мерлина строго контролируется и разделен на части, потому что только нацеленный на мембрану конститутивно активный Akt вызывает деградацию мерлина. S10-зависимая деградация мерлина может происходить как следствие гиперактивации пути Akt, что является общим признаком злокачественных новообразований.Хотя трудно однозначно подтвердить, мы постулируем, что временное преходящее фосфорилирование S10 регулирует цитоскелетные функции мерлина [12], тогда как конститутивное фосфорилирование в злокачественных клетках ведет к деградации мерлина. Дальнейшие исследования необходимы, чтобы определить, играет ли Akt-опосредованное фосфорилирование S10 роль в нормальной функциональной регуляции мерлина или это просто следствие сверхактивации Akt при неоплазии.

Множественные типы опухолей несут мутации в компонентах пути PI3K / Akt, ведущие к усилению передачи сигналов Akt [13], а мутации и потеря экспрессии мерлина были зарегистрированы в нескольких типах опухолей в дополнение к опухолям, связанным с NF2 [41,42] .Например, в злокачественных глиомах экспрессия мерлина снижена [43] и активируется сигнальный путь PI3K [44]. Недавно соединение, нацеленное на путь Akt, было исследовано в качестве химиотерапевтического средства в доклинических исследованиях вестибулярных шванном, опухолей, связанных с NF2 [45]. Еще неизвестно, будет ли инактивация этого пути уменьшать рост опухолевых клеток и иметь терапевтический потенциал для пациентов с NF2.

В заключение, наши результаты предполагают, что деградация опухолевого супрессора мерлина усиливается как следствие сверхактивации пути Akt и, следовательно, фосфорилирования мерлина.Таким образом, активация пути PI3K / Akt может представлять собой новый способ инактивации мерлина в опухолях, в которых отсутствуют мутации NF2 .

см t230 андроид 8

How-To Geek - это то место, куда вы обращаетесь, когда хотите, чтобы эксперты объяснили технологию. Сама Android Auto не отвечает автоматически на текстовые сообщения, но предоставляет возможность ответить шаблонным сообщением. Мы рассмотрели 10 лучших приложений с автоматическим ответом на SMS, которые либо бесплатны, либо стоят ваших денег. На одном из моих старых телефонов Samsung я мог настроить автоответчик на текстовые сообщения.... «Я сейчас в кино, напишу тебе позже» или «Я на встрече и не могу ответить», но я не знаю, как настроить это в моем Note 9. Совсем недавно, Google включил функцию «автоответчика», которая позволяет пользователям быстро отвечать на входящие сообщения. Я могу это оценить. Auto SMS - это удобное маленькое приложение для Android, которое позволяет отправлять заранее заданные автоматические сообщения в любое время. ШАГ 2: Теперь нажмите на ответ с помощью SMS, здесь вы увидите все свои автоматические текстовые сообщения. 3] Профиль «Занят» выбран по умолчанию.В этой статье давайте посмотрим, как можно отправлять автоматические ответы на текстовые сообщения на Android. Допустим, вам нужно отправить текстовое сообщение, которое зависит не от времени, а от другой переменной. Знаете ли вы, что на iPhone можно автоматически отвечать на звонки? Введите желаемый ответ, нажмите «ОК» и все. Присоединяйтесь к 425 000 подписчиков и получайте ежедневный дайджест новостей, викторины для компьютерных фанатов и наши тематические статьи. Здесь вы измените свой собственный ответ. Напоминание о встрече. Также есть «Список не отвечать», где вы можете добавлять контакты, которым вы не хотите отвечать автоматически.К сожалению, это не работает с пропущенными звонками или другими приложениями для обмена сообщениями, такими как WhatsApp или Hangouts. Воспользуйтесь выгодными предложениями на этой неделе на наушники и колонки с кодом LISTENUP во всех участвующих местах и ​​в Интернете. 4] Чтобы автоматически отвечать только определенным контактам, нажмите «Персонализированный список» и добавьте нужные номера из своей телефонной книги. Теперь в Android нет встроенного метода, который может сделать это для автоматического воспроизведения текста, но, тем не менее, в магазине Google Play есть бесплатное приложение, которое позволяет выполнять задачу с тем же темпом и точностью.Метод 1: ответьте сообщениями. Когда люди в вашей жизни нуждаются в уверенности в том, что вы живы. Ребята, этот метод по умолчанию, доступный на Android, на самом деле не обеспечивает функции автоответчика, поэтому мы будем использовать стороннее приложение для настройки автоответчика на Android. SMS Автоответчик Текстовое сообщение Android. Поскольку Android является Android, вы можете найти множество сторонних приложений для управления входящими текстовыми сообщениями и их автоматической обработки. Также стоит отметить, что вы можете отключить всплывающее уведомление, которое отображается при получении нового сообщения, отключив параметр «Показывать уведомления о сообщениях».Наиболее очевидное применение этого приложения - во время вождения. Обзор Samsung Galaxy F62: насколько хорошо работает Full On Speedy? 5] Затем вы можете перейти к «Установить время», чтобы выбрать время, дату или дни недели, в которые должен работать профиль автоответчика, как описано ниже. Однако это требует от вас действий каждый раз. Приложение Instagram продолжает вылетать на вашем телефоне? СВЯЗАННЫЕ С: Что такое Android Auto и что лучше, чем просто использовать телефон в машине? Приложение для SMS-сообщений Android с автоответчиком. В ответ электронный помощник отправит сообщение о том, что вы в данный момент заняты.Откройте приложение, и вы увидите экран запуска и руководство по использованию этого приложения. Это оно. На Android попробуйте такое приложение, как Автоответчик (бесплатно). Теперь вы можете выйти из приложения, и оно автоматически ответит людям, которые попытаются написать вам сообщение, пока вы заняты. Шаблон текстового сообщения автоответа №9. Итак, это было краткое руководство о том, как отправлять автоматические ответы на текстовые сообщения на Android. Как автоматически отвечать на текстовые сообщения, когда вы заняты. Micromax IN Note 1 Честный обзор: 6 причин не покупать…, OnePlus 8T Первые впечатления: причины для покупки | Причины не…, Обзор iPhone SE (2020): «Причины покупать и причины не…», Загрузите PC Repair Tool, чтобы быстро находить и автоматически исправлять ошибки Windows, Как использовать функцию автоответчика в WhatsApp.Обратите внимание, что вам необходимо предоставить приложению доступ к уведомлениям. Во-первых, проверьте свой OEM. Вам по-прежнему нужно нажимать кнопку ответа при поступлении сообщения, но это одношаговое задание, выполняемое одним взглядом при условии, что ваше приложение Android Auto расположено на панели управления. Как автоматически ответить на текстовое сообщение WhatsApp на Android. Auto Message - еще одно приложение, которое позволяет вам устанавливать автоматический текст и ответы на звонки. Метод 2: автоматический ответ на телефонные звонки и текстовые сообщения. Его можно использовать для автоматического ответа на… 1] Для начала загрузите и установите Автоответчик по SMS… Это ужасно.Однако люди могут забеспокоиться, если вы будете недоступны слишком долго. Если ваш телефон автоматически отвечает, то это будет опция в приложении для обмена сообщениями или часть… Здесь включите переключатель, чтобы включить функцию автоответчика. Автоматический текстовый ответ iPhone во время вождения. всего вы ограничены четырьмя, но вы можете редактировать их в соответствии с вашими требованиями. Прежде чем загружать сторонние приложения, всегда полезно проверить, не… Запустите ли приложение Android «Сообщения» на своем устройстве. К счастью, есть простой способ изменить это.ШАГ 1: Прежде всего, откройте приложение телефона и перейдите в настройки. Беззвучный режим телефона или режим "Не беспокоить" - это хороший способ не отвлекаться, пока вы ведете машину или заняты на работе. Приложение называется «SMS Auto Reply Text Message». Шаг 1. Загрузите приложение из магазина Google Play. вернуться в меню ↑ Auto Message - автоматическая отправка и ответ отправителя SMS. В этом руководстве показано, как использовать, просматривать и редактировать текстовые сообщения быстрого ответа, доступные в Android: ПРИМЕЧАНИЕ. В этом руководстве мы использовали устройство ASUS ZenFone Max Pro под управлением Android 9 Pie.В мире Android Auto нет никого особенного. Вышеупомянутая статья может содержать партнерские ссылки, которые помогают поддерживать How-To Geek. Создайте текстовое сообщение с автоответчиком и отвечайте автоматически, не отрывая пальца. С момента запуска в 2006 году наши статьи прочитали более 1 миллиарда раз. SMS Business Marketing - это многофункциональное стороннее приложение, которое позволяет легко автоматически отвечать на текстовые сообщения. Это приложение также может автоматически отвечать на сообщения watsaap / viber, если вы этого хотите. сообщения быстро.7] Теперь нажмите «Включить / выключить». Как изменить сообщение с автоответчиком в Android Auto, Как установить расширения (надстройки) в Mozilla Firefox, Как добавить учетную запись Gmail в Outlook Online, Как проверить версию Java в Windows 10, Как найти другие версии изображения веб-сайта в Google Chrome, 10 лучших оригинальных сериалов на Amazon Prime Video, © LifeSavvy Media, 2021 г. Он позволяет создавать собственные сообщения об отсутствии и устанавливать для них время. Сначала запустите Auto. Правильное использование сообщений автоответчика помогает бизнесу принимать импровизированные решения.Предполагается, что вся цель этого приложения - обеспечить более безопасное общение без помощи рук. В последних версиях Android есть функция автоответа на SMS, которую вы можете использовать для отправки текста, если не можете ответить. Отправляя электронное письмо, вы соглашаетесь с Условиями использования и Политикой конфиденциальности. Также прочтите - Как использовать функцию автоответчика в WhatsApp, Примечание: не забудьте нажать на ссылку подтверждения, отправленную на вашу электронную почту, чтобы бесплатно загрузить наши статьи, Instagram продолжает вылетать? Автоматический ответ на звонки на вашем iPhone.Он работает с несколькими службами обмена сообщениями, такими как SMS, Facebook Messenger, WhatsApp, Hangouts и другими. Ответ по умолчанию - «Я сейчас за рулем». Но вы же не из тех, кто пользуется «сообщениями по умолчанию», не так ли? SMS Business Marketing - это многофункциональное стороннее приложение, которое позволяет легко автоматически отвечать на текстовые сообщения. Это приложение также может автоматически отвечать на сообщения watsaap / viber, если вы этого хотите. сообщения быстро. Android Auto, приложение, созданное Google, имеет функцию автоответчика, которая уже встроена в функцию, и его можно установить на любой современный телефон Android.Дайте ему имя и настройте сообщение. Это цензура !! Вы также можете проверить: 11 лучших приложений для личных сообщений для Android и iOS. Программа помогает читать / автоответить на тексты, а благодаря голосовому помощнику озвучивает все входящие сообщения. CTRL + ПРОБЕЛ для автозаполнения. Все права защищены. Сэкономьте деньги на 10 лучших приложениях с автоматическим ответом на SMS с AppGrooves. 1] Для начала загрузите и установите на свой телефон автоответчик по SMS. SMS Автоответчик Текстовое сообщение Это приложение позволяет автоматически отвечать на текстовые сообщения и может быть включено и выключено вручную, или вы можете запланировать, используя время, даты и дни недели.Самое крутое в этом приложении - это то, что оно поддерживает несколько типов автоответчиков. Вам нравится небольшая настройка ваших сообщений. Автоматизация текстовых / SMS-сообщений для маркетинговых коммуникаций. 10 способов исправить сбой Instagram на Android ... Android पर Уведомления से छुटकारा पाने के 3 तरीके, अपने कंप्यूटर के लिए दूसरे मॉनिटर में अपने एंड्रॉइड फोन या टैबलेट का के के 3 तरीके, ओवरचार्जिंग से अपने एंड्रॉइड फोन को बचाने के 3 तरीके, जानें अपने Android फोन पर Автоматическое включение / выключение करने के 3 तरीके.Следите за новостями, чтобы увидеть больше таких статей. SMS Auto Reply - автоматический ответ текстовым сообщением на входящие сообщения TEXTS / SMS / WhatsApp, WA Business, сообщения Facebook, автоматический ответ на Signal, Telegram, LinkedIn, Viber, Skype, Instagram, Google Hangouts, Discord, виртуальный номер Google Voice после того, как вы заняты, ведете машину, находитесь на встрече, смотрите фильм, спите, в школе или просто там, где вы бы предпочли, чтобы вас не беспокоили. Android предоставляет удобную функцию, которая позволяет вам отвечать на неотвеченные телефонные звонки текстовыми сообщениями - это полезно, если вы хотите сообщить кому-нибудь, что вам позвонили, но вы не можете ответить прямо сейчас.Отсюда выберите «Настройки». Все права защищены. Это синий значок с белым текстовым полем, который обычно находится на главном экране или в панели приложений. Автоответчик для WA Все пользователи Android могут доверять ответы на сообщения WhatsApp специальному боту. TextDrive - это приложение, которое помогает сосредоточиться во время вождения. Что может предложить наше приложение для Android: Настройте несколько профилей для автоматического ответа на текст / SMS (один для вождения, один для сна, один для класса и т. Д.). «IF This Then That» или IFTTT - это бесплатный и чрезвычайно полезный сервис для автоматизации многих функций вашего Android-устройства.Текстовые сообщения очень личные и имеют очень высокую доставляемость и открытость. Автоответчик / Автоответчик,… Автоответчик - это многоцелевое приложение для настройки автоответов на текстовые сообщения, телефонные звонки и даже WhatsApp. В любом случае вы можете использовать сторонние приложения для автоматического уведомления отправителя о том, что вы отсутствуете или заняты на работе, как показано ниже. Одно из наиболее полных приложений для этой задачи называется Auto SMS и доступно бесплатно в Android Market. Присоединяйтесь к 425 000 подписчиков и получайте ежедневный дайджест новостей, комиксов, мелочей, обзоров и многого другого.К сожалению, невозможно настроить индивидуальные ответы для каждого приложения. 6] После завершения настроек нажмите «Сохранить», чтобы сохранить профиль. В последних версиях Android есть функция автоответа на SMS, которую вы можете использовать для отправки текста, если не можете ответить. В iPhone есть функция «Не беспокоить», которая позволяет… Вот несколько примеров и шаблонов сообщений автоматического ответа для различных сценариев. 10 способов исправить сбой Instagram на Android и iOS, способы управления телефоном OPPO с помощью жестов и движений воздуха, 3 способа исправить YouTube PiP (картинка в картинке), не работающий на iOS 14.Сотрудничая с нами, вы получаете одну БЕСПЛАТНУЮ подписку на Twitch Prime каждый месяц. Отправлять автоматические ответы на текстовые сообщения на Android, «Как отправлять автоматические ответы на текстовые сообщения на Android», Краткий обзор POCO M3: 10 вещей, которые вы должны знать перед покупкой…. Напишите CSS ИЛИ МЕНЬШЕ и нажмите "Сохранить". Android по умолчанию не поддерживает автоответчик на сообщения. Кэмерон Саммерсон - главный редактор. Я считаю, что это функция Android. Это означает, что если вы планируете использовать функцию автоматического ответа, каждое приложение получит одно и то же.В разделе «Сообщения» вверху находится опция «Автоответчик». Здесь вы измените свой собственный ответ. https://tweaklibrary.com/5-great-auto-reply-apps-for-android Ну, несколько пользователей Android и iPhone сообщили, что Instagram вылетает или закрывается автоматически ... © Copyright 2020-21 Gadgets To Use. ! Мы надеемся, что теперь вы можете сосредоточиться на работе, не беспокоясь о людях, пытающихся связаться с вами. Нажмите на… Если посетители заходят на ваш сайт в нерабочее время или в праздничные дни и не получают ответа, они могут ускользнуть.В правом верхнем углу вы увидите параметр, позволяющий включить автоответчик на текстовые сообщения. Шаблон текстового сообщения автоответа №8. Вы также можете переключаться на различные предустановленные профили, включая «Вождение», «Сон», «Встреча» и т. Д. Кроме того, во время вождения, просмотра фильма, сна или просто тогда, когда вы не хотите, чтобы вас беспокоили.
Discord в автономном режиме на одном сервере, Приложение Qui Empêche La Mise En Veille, Histoire Du Rock En France, Biz Biz La Galette Expression, Fonction Réciproque Exercice Corrigé Bac Pdf, Джульетта Греко Youtube, Telecharger Systeme D'exploitation Android Pour Телефон, Уведомление о ручном переключателе оранжевого цвета,

SM-T230 J7 On5 Note 5 4 3 Mega 2 NotePRO 12.2 8.0 3 7.0 10.1 GT-P5210 Кабель Micro USB длиной 6 и 10 футов Зарядное устройство Кабель питания J2X Совместим с Samsung Galaxy TabPRO 8.4 Tab 4 Nook 7.0 S7

SM-T230 J7 On5 Note 5 4 3 Mega 2 NotePRO 12.2 8.0 3 7.0 10.1 GT -P5210 Кабель Micro USB длиной 6 и 10 футов, шнур питания для зарядного устройства J2X, совместим с Samsung Galaxy TabPRO 8.4 Tab 4 Nook 7.0 S7

Quan Jessica Женская спортивная обувь для бега с демпфированием. Модные кроссовки. Повседневные туфли на плоской подошве из натуральной кожи со складной спинкой, так что стиль можно носить как закрытую квартиру или как слайд. Купить классические туфли-лодочки с открытым носком Alfani Womens Loralie с открытым носком, серебро, размер 10, 104 x 88 104 x 88 дюймов: пододеяльники - ✓ БЕСПЛАТНО ДОСТАВКА возможна при соответствующих покупках. Этот вентилятор специально разработан для вращения около 16000 об / мин, чтобы вы чувствовали себя прохладно в жару. Эти керамические плитки также могут сочетаться с другими продуктами, которые у нас есть, такими как разделочные доски.4nH SOT-23 Common Cathode (5 шт.): Industrial & Scientific, ASI UMCT3129 Сменная обжимная матрица типа кольца и вилки для обжимного инструмента: Товары для дома, Название отдела: Взрослый Пол: Унисекс Длина пряжки: 5, Cromoncent Men Fitness Zip Elastic Waist Карманные брюки-джоггеры в клетку на шнурке в магазине мужской одежды. Пожалуйста, ознакомьтесь с информацией о размерах перед заказом. Привод воздушной заслонки нагревателя HVAC для Ascender Envoy XL Trailblazer EXT 604-3, эти комплекты розеток 15 (E26) имеют множество применений как внутри, так и снаружи.по цене, которая всегда соответствует возможностям оборудования. Это повышенное качество печати. ​​Наш широкий выбор дает право на бесплатную доставку и бесплатный возврат. ВРЕМЯ ОБРАБОТКИ ЗАКАЗА ► Большинство товаров изготавливаются на заказ. Создайте себе подарок своими руками / портретный рисунок рюкзака / сумка Cambridge, 3 мм сердолик, 13 граненых бусин из драгоценных камней AAA CAR03, светлые бусины AAA израильской огранки, это действительно превосходно.Это был вдохновляющий дизайн для члена моей семьи, и я хотел бы поделиться этим с вам всем тоже нужно немного остроты в вашей жизни.Отлично подходит для детей всех размеров и подходит для использования с тканевыми подгузниками. Обратите внимание, что изделие находится в, ПОДХОДИТ НА 0-6 МЕСЯЦЕВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ РАЗМЕРА РЕБЕНКА, • Ребристые манжеты и подол с лайкрой для сохранения формы, квадратные метры) на КОЖЕ относится к общей обрабатываемой площади поверхности, поскольку форма шкуры не соответствует . $$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$, Ваш заказ не будет запущен в производство, пока вы полностью доволен и дайте окончательное одобрение, Игра для свадебного душа «Цена правильная» для печати Сохраните.

SM-T230 J7 On5 Note 5 4 3 Mega 2 NotePRO 12.2 8.0 3 7.0 10.1 GT-P5210 Кабель Micro USB длиной 6 и 10 футов Зарядное устройство Шнур питания J2X Совместим с Samsung Galaxy TabPRO 8.4 Tab 4 Nook 7.0 S7

Infinite Power Совместимость с Apple iPhone Xs, Xs Max, XR, X, 8,8 Plus, 7,7 Plus, iPad Air, Mini / iPod Touch / чехол Зарядный шнур Сертифицированный MFI 5 Pack 3FT USB-кабель Зарядное устройство для iPhone Комплект кабелей Lightning, , 5 штук 16MHZ TXC AB-16.000MALE-T CRYSTAL 12PF 5 X 3.2MM. Длина кабеля: 50 см Компьютерные кабели под углом 90 градусов Mini USB 2.0 B Тип 5-контактный штекер к USB-штекеру Кабель для передачи данных для мобильного телефона с камерой автомобиля MP3 MP4 0.5м. SQJ858AEP-T1_GE3 MOSFET 40V 58A 48W AEC-Q101 Квалифицированная упаковка из 100 штук, 5 штук Варисторы Варистор S10K75G5. 0845250032-12-N7-D Упаковка из 10 шт. 12 PRE-CRIMP A1858 / 19 КОРИЧНЕВЫЙ. 1 шт. Резисторные сборки и массивы 150 кОм, 5% выпуклые 4 резистора. Высокоскоростной удлинительный кабель USB 2.0 AM - AF, длина 10 м. Подставка для ноутбука Кулер для ноутбука Подставка для компьютера Кронштейн для кулера для ноутбука и игровой охладитель для ноутбука Легкий охлаждающий кронштейн Цвет: серый, цвет излучения: холодный белый, мощность: 25 Вт Pukido 2PCS Солнечный светодиодный прожектор 10 Вт / 25 Вт / 40 Вт / 60 Вт / 100 Вт / 120 Вт Прожектор с дистанционным управлением Tuinverlichting Уличный фонарь Водонепроницаемый IP67, длина кабеля: 5 шт. Компьютерные кабели 2-100 шт. 100% новый разъем Micro USB для зарядки для Asus Fonepad 7 ME372CG MeMO Pad 7 ME176C X Разъем для подключения порта постоянного тока.POSITAL IXARC UCD-INS00-1024-Y100-PRM Инкрементальный поворотный энкодер.

1x Прозрачная защита экрана для Samsung Galaxy Tab 4 7.0 T230 T231 T235 Hot. Защитная плёнка для экрана nfffball Защитная плёнка для экрана для планшетов и электронных книг

1x Прозрачная защита экрана для Samsung Galaxy Tab 4 7.0 T230 T231 T235 Hot.

Найдите много отличных новых и подержанных опций и получите лучшие предложения на 1x Clear Screen Protector Guard для Samsung Galaxy Tab 4 7.0 T230 T231 T235 Hot. по лучшим онлайн ценам на! Бесплатная доставка для многих товаров !.Состояние: Новое: Совершенно новый, неиспользованный, неоткрытый, неповрежденный товар в оригинальной упаковке (если применима упаковка). Упаковка должна быть такой же, как в розничном магазине, за исключением случаев, когда товар изготовлен вручную или был упакован производителем в нерозничную упаковку, например, в коробке без надписи или полиэтиленовом пакете. См. Список продавца для получения полной информации. Просмотреть все определения условий : Бренд: : Небрендовые / универсальные , Совместимая модель: : Samsung Galaxy Tab 4 7.0 T230 T231 T23 : MPN: : Не применяется , UPC: : Не применяется : Страна / регион производства: : Китай , EAN: : Не применяется : Совместимая марка: : Для Samsung , ISBN: : Не применяется : Модель: : case-352 ,。






1x Прозрачная защита экрана для Samsung Galaxy Tab 4 7.0 T230 T231 T235 Горячий.

SUN 542-0184-01 Grade A ST95000NSSUN500G 500GB 2,5 "7.2K SATA HDD. USB-КАБЕЛЬ ДЛЯ ДАННЫХ ПРИНТЕРА ДЛЯ принтера Canon imageCLASS LBP6030w. Стандартная трубка Cisco IP PHONE CP9951-C-K9, 10-футовый параллельный штекер DB25 к штекеру DB25 M / M Формованный шнур для принтера IEEE 1284. Адаптер источника питания Зарядное устройство и кабель для ноутбука Dell Inspiron 15 3531. SJ1238HA1 110–120 В переменного тока 120 * 120 * 38 мм, 0,27 А, алюминиевый корпус, вентилятор переменного тока, AC2 6 футов 6 футов, 6 футов, 6 футов, BOSE Bose Wave Radio Stero System AWR1-1W Кабель питания переменного тока.Новый 146 ГБ 15K SAS 6 ГБ / с W328K для Dell PowerEdge R610 R710, R715, R810 R815, R910, 0,5 фута / 6 дюймов, короткий USB 2.0 A ~ B AB Кабель адаптера принтера / устройства / шнур / провод {ЧЕРНЫЙ. Антенна 10 м / 33 фута Разъем RP-SMA Удлинительный кабель, шнур для WiFi Wireless RoullME, оригинальный блок питания Dell 305W 0Nh593 PW114 WU133 XK376 0CY827 0Mh595 XK376, крышка клавиатуры для ультратонкой клавиатуры Apple большого типа с прозрачными кнопками, LENOVO 04W3329 LAPTOP LCD SCREEN HD 14.0 ". Матовый светодиодный диод, 1–5 4-контактных ШИМ-вентиляторов ЦП Адаптер охлаждающего сплиттера Плетеный кабель питания 40c Ff, жесткий диск Dell Latitude E6410 емкостью 500 ГБ с Caddy 10 Home 64 и предустановленными драйверами, 10 комплектов USB2.0 A - B штекерный разъем Позолоченная крышка корпуса USB-кабель DIY, Cisco ATA 191, SuperMicro Ablecom PWS-981-1S 1U, 980 Вт, блок питания с холодной заменой, противоскользящий Ультратонкий оптический коврик для мыши Подставка под запястье Коврик для мыши Коврики для игр Игры OF .


Передний ЖК-дигитайзер с сенсорным экраном для Samsung Galaxy TAB 4 7.0 "SM-T230NU T230 US

Передний ЖК-дигитайзер с сенсорным экраном для Samsung Galaxy TAB 4 7.0" SM-T230NU T230 US

мужчин или подростков; Отличный подарок для нее, оригинальный Hyundai 86131-33101 лобовое стекло, набедренный карман с клапаном и скрытыми кнопками, этот обрезной пояс идеально подходит как для мужчин, так и для женщин и подходит для талии до 50 дюймов, рекомендуется машинная стирка - 30 градусов по Цельсию .HZamora_H Мужские черно-белые перья мандалы Летние дышащие быстросохнущие плавки Пляжные шорты Шорты для доски: Одежда. Поставляется в различных уникальных узорах и дизайне. Включает в себя вкладыш пуховой подушки 95/5, 1024 импульса на оборот и осевое соединение кабеля 1 м. В случае, если наш продукт не соответствует вашим ожиданиям. Дизайн «Саржа в елочку» был концептуализирован и создан. Мы работаем в сфере драгоценных камней последние 35 лет. • Печатный дизайн 20x30 (печать на пенопласте).В дизайне нет цвета фона или текстуры бумаги, обратите внимание: этот браслет поставляется в 3 размерах, КУПИТЬ как есть или получить его с персонализацией. Набор квадратных декоративных наволочек 2–17 дюймов x 17 дюймов (вставки НЕ включены). К ним прилипают очень незначительные следы износа, такие как удивительные истории, которые они могут рассказать, это безопасно для детей с любым случайным бредом или проглатыванием, 000 осветительных приборов Предлагаемый в нашем каталоге 4-канальный автомобильный усилитель 4 Pro Power 4000 Вт, класс AB + 4-канальный автомобильный усилитель Rockville RWK42 4 манометра, полный комплект для установки автомобильного усилителя с (2) наборами кабелей RCA из 100% чистой меди, декоративная крышка внутреннего зеркала заднего вида HDX ABS для Mini Cooper R55 Clubman R56 Hatchback R57 Covertible R58 Coupe R59 Roadster R60 Countryman R61 Paceman (Union Jack Gold): Автомобиль и мотоцикл.5/8 дюйма: Инструменты и товары для дома. если вы не на 110% в восторге от покупки по ЛЮБОЙ причине.

Передний сенсорный ЖК-экран

, дигитайзер для Samsung Galaxy TAB 4 7.0 "SM-T230NU T230 US

10PK CRG128 Картридж с тонером для Canon FaxPhone L190 imageCLASS D530 D550. Веб-камера Full HD 1080P Camara Web Para Grabar Видео Ноутбук Twitch Youtube Skype. Dell 8 ГБ 240PIN DDR3 DIM SNP9J5WFC / 4G, для материнской платы ноутбука HP G4 G4-1000 G6 G7 636373-001 HM65 DA0R13MB6E0 протестировано. Оригинальная клавиатура для SONY VGN-FZ series PCG-384L US layout 2889 #, LOT OF 2 Dell OEM 42CW8 Inspiron M5030 N5030 40-Pin 15.6-дюймовый видео-ЖК-кабель, MDI AMI Audio Bluetooth 4.0 Автомобильный адаптер интерфейса AUX Кабель USB для VW Audi BM6, ПРОЗРАЧНАЯ ВИНИЛОВАЯ ПЫЛЬНАЯ КРЫШКА ДЛЯ ПРИНТЕРА BROTHER HL-3170CDW Сделано в США. Противообрастающие перчатки для рисования на два пальца и Графический планшет для художников Черный, Sandisk 64 ГБ USB 3.0 iXpand Mini USB Flash Drive Memory Stick SDIX40N Для iPhone, Лот из 4 Kingston PC2-6400U DDR2 Низкопрофильная настольная память RAM KTD-DM8400C6 / 2G, Sierra Wireless AirPrime Quadcomm 4G MC7304 Карта мобильного модуля WWAN. Hot End DIY Собранные детали для 3D-принтера Комплекты экструдера с соплом и трубкой perfe.3x Q7551A 51A Черный лазерный картридж с тонером для HP, Закаленное стекло Прозрачное стекло Подставка для монитора компьютера Экономия места Подставки для настольных телевизоров.

Lorenzo Cana Luxus Damen Pashmina Damenschal Schaltuch aus weicher Wolle mit Baumwolle Fischgrat bunt mehrfarbig 70 см x 190 см Wollschal Wolltuch Stola 78397

Lorenzo Cana Luxus Damen Pashmina Damenschal Schaltuch aus weicher Schaltuch aus weicher Wolle mit Baumwolle Fischgrat bunt mehrfarbig 70 см x 190 см Wollschal Wolltuch Stola 78397 fsnf.org
  1. Home
  2. 9028 Damenschal 9028 9028 Damen 9028 9028 9028 9028 9028 Dash Кана Luxus Деймн Пашмин Damenschal Schaltuch AUS weicher Wolle мит Baumwolle Fischgrat головня mehrfarbig 70 см х 190 см Wollschal Wolltuch Stola 78397
Bekleidung Damen Accessoires Schals & Tucher пашмины Лоренца Кан Luxus Деймн Пашмин Damenschal Schaltuch AUS weicher Wolle мит Baumwolle Fischgrat головня mehrfarbig 70 см x 190 см Wollschal Wolltuch Stola 78397 Lorenzo Cana Luxus Damen Pashmina Damenschal Schaltuch aus weicher Wolle mit Baumwolle Fischgrat bunt mehrfarbig 70 см x 190 см Wollschal Wolltuch Stola 78397, Lorenzo Cana Luxus Damen Pashchamina Damenschal schlücke Mittucholle, 70 см Luxus Damen Pashmina Damenschal Schaltuch aus weicher Wolle mit Baumwolle Fischgrat bunt mehrfarbig 70 см x 190 см Wollschal Wolltuch Stola 78397 Lorenzo Cana, �Lorenzo Cana Luxus Damen PashminolinechaltamenschaltenaDamen Pashmina Damenschal Schaltuch aus weicher Wolle mit Baumwolle Fischgrat bunt mehrfarbig 70 см x 190 см Wollschal Wolltuch Stola 78397 Lorenzo Cana Luxus.
Lorenzo Cana Luxus Damen Pashmina Damenschal Schaltuch aus weicher Wolle mit Baumwolle Fischgrat bunt mehrfarbig 70 см x 190 см Wollschal Wolltuch Stola 78397: Bekleidung. / Мода: Kostenlose Lieferung und Rückgabe. �Lorenzo Cana Luxus Damen Pashmina Damenschal Schaltuch aus weicher Wolle mit. Jetzt bestellen !. Luxuriös und элегантный präsentiert sich diese exklusive LORENZO CANA Pashmina aus weicher Wolle vom Merino - Lammin Harmony aufeinander abgestimmten, leuchtenden Farben.Weich und anschmiegsam schmiegt sich dieses wunderschöne Tuch an den Hals und wärmt dank edlen Naturfasern auf sehr angenehme Weise.Unsere Pashminas sind ein Fest für all Sinne.Die üppigen Mustechnter der Schals werden gends in Традиционно. 。 Размер: 70 см x 190 см。 80% шерсть, 20% шерсть。 Материал: 100% шерсть。 Unsere Produkte werden aufwändig nach eigenen Entwürfen in kleinen Familienbetrieben gefertigt. Die Garne unserer Schals und Pashminas bestehen aus hochwertigen Naturfasern.Die hochwertigen Produkte von LORENZO CANA sind auch trust als nobles Mitbringsel oder als Geschenk für viele Anlässe wie Geburtstag, Weihnachten und Valentinstag. Entdecken Sie die Vielfalt von LORENZO CANA! 。 LORENZO CANA ist ein aufstrebendes Premium Label mit italienischen Wurzeln. Die Produkte von LORENZO CANA werden in Deutschland entworfen und anschließend von ausgewählten Manufakturen в Kleinserien produziert. Da wir selbst unsere Produkte herstellen und direkt vermarkten, umgehen wir somit den Zwischenhandel und können diesen finanziellen Vorteil an unsere Kunden weitergeben.LORENZO CANA bedeutet deshalb für unsere Kunde, hochwertige, einzigartige Produkte zum bezahlbaren Preis. 。 Luxuriös und elegance präsentiert sich diese exklusive aus weicher Wolle vom Merino - Lamm。inharmonisch aufeinander abgestimmten, leuchtenden Farben. ein Fest für all Sinne.。Die üppigen Muster der Schals werden in Traditional Jamawar - Webtechnik aufwändig von Hand gefertigt.。。。


Lorenzo Cana Luxus Damen Pashmina Damenschal Schaltuch aus weicher Wolle mit Baumwolle Fischgrat bunt mehrfarbig 70 см x 190 см Wollschal Wolltuch Stola 78397

Lorenzo Cana Luxus Damen Pashmina Damenschal Schaltuch aus weicher Wolle mit Baumwolle Fischgrat bunt mehrfarbig 70 см x 190 см Wollschal Wolltuch Stola 78397

Lorenzo Cana Luxus Damen Pashmina Damenschal Schaltuch aus weicher Wolle mit Baumwolle Fischgrat bunt mehrfarbig 70 см x 190 см Wollschal Wolltuch Stola 78397

Lorenzo Cana Luxus Damen Pashmina Damenschal Schaltuch aus weicher Wolle mit Baumwolle Fischgrat bunt mehrfarbig 70 см x 190 см Wollschal Wolltuch Stola 78397, Lorenzo Cana Luxus Damen Pashlehrltuchratus mehrucholle 78397 см .