Бамбуковая мозаика: Мозаика из бамбука — бамбуковая мозаика

Содержание

Мозаика из бамбука - бамбуковая мозаика

Мозаика из бамбука

Бамбуковая мозаика - это распиленные и отполированные фрагменты ствола бамбука различных форматов, наклеенные на мозаичную сетку. Размер мозаики 305х305 мм. Разнообразные размеры, геометрические формы и способы обработки фрагментов дают декоративную мозаику различного вида.

Область применения мозаики из бамбука обширна, её применяют как для внутренних декоративно облицовочных работ, так и в качестве напольного покрытия. Мозаикой из бамбука облицовывают различные предметы интерьера, мебель, двери.

  • Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 15х15 
    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  8

     

    535 ₽

  • Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 23х23 
    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  8

     

    535 ₽

  •  

    Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 15х15
    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  8

     

    535 ₽

  • Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 15х30(15) 
    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  8

     

    560 ₽

  • Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 15х15 
    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  6

     

    560 ₽

  • Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 23х23 
    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  8

     

    560 ₽

  • Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 15х30
    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  8

     

    560 ₽

  • Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 15х15
    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  8

     

    560 ₽

  • Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 23х23

    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  6

     

    560 ₽

  • Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 15х15
    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  8

     

    560 ₽

  • Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 23х23
    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  8

     

    560 ₽

  • Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 23х23 
    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  8

     

    560 ₽

  • Цена указана за 1 шт., в упаковке 11шт.

    Размер модуля, мм: 30х15 
    Размер сетки, мм: 315х315 
    Толщина плитки, мм:  8

     

    560 ₽

↑ камышовые маты

Мозаика из бамбука Natural Bamboo BM-07-15, цена

Мозаика из бамбука Natural Bamboo BM-07-15 Мозаика из бамбука Natural Bamboo BM-07-15 - атмосфера тропиков с доставкой на дом! Одним из наиболее необычайных явлений в мире декоративно-отделочного искусства является мозаика из бамбука – удивительного материала, наполняющего помещение аурой тропических джунглей и теплом растительной энергетики. Благодаря натуральной основе, бамбуковая мозаика не только экологична, но и чрезвычайно красива. Множество вариантов  цветов и узоров, …

Читать далее
Вид работы ? Наружные работы - это любые работы, проделываемые с фасадом здания, а также с прилегающей территорией.

Внутренние работы - работы, проводимые непосредственно внутри помещений. Они определяются назначением помещения, видом образующих его конструкций, условиями его эксплуатации и капитальностью здания. При этом учитывают не только физическую долговечность покрытий, но и сроки морального старения, удобства эксплуатации, условия санитарно-гигиенического содержания и т. д.

Внутренние
Материал ? В мозаике могут употребляться самые различные материалы. Наряду со ставшей уже привычной стеклянной и керамической мозаикой все большую популярность набирает мозаика из натуральных материалов - камня, дерева, кокоса и морских раковин. Подробнее
Бамбук
Объекты применения ? Мозаика, как правило, выпускается в виде стандартных квадратов (30х30 см) и стандартной толщины от 4 до 10 мм, состоящих из нескольких десятков или сотен элементов. Тессеры могут быть самых разных размеров и формы: прямоугольные, квадратные, круглые, в виде шести или восьмиугольников, с покрытием или без, глазурованные или матовые. Такое разнообразие декоративных возможностей позволяет эффективно использовать мозаику на сетке вместо кафельной или керамической плитки:
  • Для устройства пола;
  • Облицовки стен;
  • Устройства «фартука» на кухне;
  • Отделки бассейнов;
  • Облицовки потолка;
  • Для декорирования мебели;
  • Для наружной декоративной отделки дома.

Подробнее
Для пола, Для стен
Основа ? Укладка мозаичной плитки может производиться принципиально разными способами. Дело в том, что существуют отдельные виды матриц.
Выпускаются следующие варианты:
  • На бумажной основе. Укладка мозаики с соединением на бумажной основе выполняется плиткой к клею. В таком случае важно учитывать, что происходит зеркальное отражение рисунка. После того как монтаж будет завершен бумагу удаляют, полностью освобождая квадратики мозаики.
  • На сетчатой основе. Так как в данном случае скрепляющий элемент не удаляется, положить мозаику следует лицевой стороной наружу. Сетка плотно соединяется с раствором и создает прочное крепление для облицовки.
Сетка
Помещение ? Благодаря своим технологическим характеристикам и разнообразному дизайну керамическая плитка широко используется в различных помещениях, дополняя и украшая любой интерьер. Несомненно, классика жанра – это использование мозаики в бассейнах, ванных и туалетных комнатах, бани и сауны. Все большую популярность приобретают мозаичные панно, которые преображают стены в гостиной или даже спальной комнате.
Подробнее о помещениях, где может использоваться мозаика, можно прочитать здесь
Для ванной, Для кухни
Размер чипа ?

Размер чипа - габаритные характеристики одного элемента мозаичного полотна. Как правило, размеры чипа мозаики варьируются в пределах от 10х10 мм до 305х305 мм. У мозаики с чипами неправильной формы данная характеристика не определяется.

15х15 мм

Мозаика из бамбука Natural Bamboo BM-12-23 в Саратове за 4 684.42 руб. в наличии

Мозаика из бамбука Natural Bamboo BM-12-23 - атмосфера тропиков с доставкой на дом!

Одним из наиболее необычайных явлений в мире декоративно-отделочного искусства является мозаика из бамбука – удивительного материала, наполняющего помещение аурой тропических джунглей и теплом растительной энергетики. Благодаря натуральной основе, бамбуковая мозаика не только экологична, но и чрезвычайно красива. Множество вариантов  цветов и узоров, созданных самой природой, помогут придать одновременно роскошный, солидный и очаровательный, милый вид любому интерьеру.

В эксклюзивной серии Natural Bamboo встречается мозаика разнообразной формы, размера, цветовой гаммы. Любителям нестандартных решений придется по вкусу сочетание разных по цвету плиток или, наоборот, создание единой картины из маленьких, качественно обработанных фрагментов растения. Мозаичные модули, состоящие из отполированных древесных элементов, наклеенных на сетку, могут иметь разное дизайнерское решение. Материал выполнен в натуральных природных оттенках, что обеспечивает легкую, непринужденную атмосферу в помещении.

В производстве мозаики из бамбука Bamboo используются только отборные, самые твердые виды тропического растения. Но прежде чем побеги станут отделочным материалом, их ждет сложная многоэтапная процедура подготовки. В процессе производства сырья для мозаики бамбук проходит через стадии обезжиривания, обработки горячим паром, высушивания, шлифовки,  полировки. Естественная обработка, исключающая применение химикатов, дает возможность сохранить полученному материалу природную красоту и чистоту, наделяя бамбук новыми качествами: влагостойкостью, не подверженностью гниению, развитию плесени, появлению насекомых. Завораживающая красота древесного узора придает элегантности и необычности как жилым помещениям, так и офисным, ресторанным интерьерам.

Изысканно смотрится бамбуковая мозаика, которая гармонично подобрана под современный дизайн в африканском, японском или восточном стиле «этно». Декорирование мебели или использование мозаики в качестве напольного покрытия гарантированно станет удачным экспериментом.

Мозаика из бамбука – это бесподобная отделка для оригинальных интерьеров! Необыкновенно красивая, «живая» бамбуковая древесина бескорыстно одаривает хозяев природной силой и энергией. Мозаика из бамбука – это чистота и тепло, гармония и совершенство девственной природы. Воспользуйся этим бесценным даром, создай свою ауру комфорта! 

Преимущества мозаики из бамбука  Bamboo:
  • натуральность и экологичность:
  • природная чистота и красота;
  • водостойкость;
  • противодействие распространению грибка и плесени;
  • устойчивость к выгоранию;
  • долговечность.

Деревянная мозаика

              Деревянная мозаика и ее разновидности

   Мозаика из дерева - Мозаичный ряд плиток из традиционных материалов стекла и камня гармонично, хоть и несколько неожиданно, дополняет дерево различных пород. Все, что сейчас считается экстравагантным, придумали задолго для нас. Паркетные полы вековой давности считаются прообразом сегодняшней деревянной мозаики, также как и техника маркетри (мозаика) – облицовка мебели тончайшими деревянными пластинами из ценных пород дерева.

Деревянные чипы - натуральный материал, который дает безграничную фантазию дизайнерам из-за разнообразной и очень красивой структуры пород дерева.

                   Деревянные мозаичные покрытия

- Экологичные

- Стойки к истиранию

- Влагоустойчивы и долговечны, благодаря применению современных технологий.

Виды деревянной мозаики

Традиционно плитки изготавливались из очень твердых пород дерева:

- Ясеня

- Дуба

- Лиственницы

- Кедра

Сегодня безусловным лидером строительного рынка и фаворитом дизайнеров является мозаика из кедра. Область ее применения традиционна – напольные покрытия. Если же вспомнить далекие времена, то в гробнице Тутанхамона были найдены предметы, включающие вставки из кедра. Они прекрасно сохранились до наших дней.

Это свойство кедра используют создатели роскошной дорогой мебели, покрывая ее тонкими кедровыми пластинами.

К группе деревянных плиток относится и экзотический отделочный материал:

- Кокосовая мозаика

- Мозаика из бамбука

Свое широкое применение «экзоты» находят в создании оригинальных интерьеров жилых комнат, бань и саун. Многофункциональность деревянной мозаики состоит и в том, что она применяется для облицовки пола и стен, за исключением чипов из бамбука. Бамбук является травой, а не деревом, структура чипов рыхлая, пористая, не защищена от влаги и от больших механических нагрузок. Плитка из бамбука значительно дешевле дерева и кокоса, но по своей красоте стоит с ними в одном ряду, уступая лишь в прочности облицовки.

                          Кокосовая мозаика

Мозаика из кокоса- Первоначально использовалась для инкрустации мебели в гостиничных комплексах Италии. Оттуда началось ее шествие по странам Европы и мира. В России недавно используют этот экзотический отделочный материал – он применяется для создания оригинальных домашних интерьеров. Зарекомендовал себя как очень прочный материал в напольных покрытиях – скорлупа кокосового ореха тверже дуба.

Кокосовыми плитками облицовывают стены и потолки. Для придания целостности интерьеру такими же тонкими пластинами украшают мебель.

Из недостатков материала можно отметить лишь его дороговизну, которая объясняется сложной и кропотливой технологией изготовления крошечных чипов, собранных мастерами в квадратную пластину.

                                                Бамбуковая мозаика

Мозаика из бамбука-    Применение в отделке деревянных плиток придают комфорт и уют дому, здесь прекрасно дышится. Бамбуковая мозаика создает теплое, солнечное настроение и атмосферу уюта.

 

 

 

 

 

 

 

 

                                                               Главная страница.      Карта сайта .

         По всем вопросам  обращайтесь по телефону    8 916 663 16 57                                                                                           Александр

Бамбуковая мозаика в интерьере кухни и комнат

 

 

 

Бамбуковая мозаика – уникальный и инавационный вид мозаики, появившийся благодаря невероятной изобретательности китайских мастеров компании Natural Mosaic, создавших оригинальную коллекцию декоративной мозаики на основе бамбуковой древесины.

Мозаика серии “Bamboo” фирмы Natural Mosaic – это необычная коллекция декоративной мозаики, созданная из лучших пород бамбука. Она предназначена для людей, предпочитающих использовать для отделки интерьера исключительно натуральные материалы. Удивительные узоры и рисунки, созданные самой природой, делают эту мозаику по-настоящему красивой и уникальной. Такая мозаика способна преобразить любой интерьер, кухни или комнаты, придав помещению роскошный и благородный вид. Оригинальная фактура, необычность цветов и узоров бамбуковой мозаики китайской фабрики Natural Mosaic привлекает внимание как дизайнеров, так и частных заказчиков, поскольку бамбуковая плитка-мозаика позволяет создавать уникальные интерьеры, которые не оставят равнодушными гостей и запомнятся им надолго.

Декоративная мозаика из бамбука – это органичное сочетание великолепного внешнего вида, исключительной долговечности и прекрасных технических характеристик. Она подарит интерьеру вашего дома непередаваемую оригинальность оформления и создаст особую атмосферу в доме, наполнив его природной красотой и шармом бамбука. Разнообразие форм и естественных красок позволяет создать реально живой и уютный интерьер помещения, наполненного теплотой натурального материала. Бамбуковая мозаика настолько необычна и элегантна, что способна стать настоящим украшением интерьера, придав ему оттенок особой изысканности.

 

 

Размеры плиток и технология изготовления мозаики

 


Мозаика серии Bamboo от Natural Mosaic представляет собой полированные бамбуковые фрагменты естественных оттенков различных размеров, нанесенные на мозаичную сетку. Благодаря применению специальной технологии обработки бамбука, на поверхности мозаичных плиток сохраняется натуральный рисунок, а сама она оказывается надежно защищенной от истирания. Типовой размер каждой плитки (сетки) 305х305 мм, при толщине 6 мм, которой вполне достаточно, чтобы выдерживать даже серьезную механическую нагрузку.

Коллекция натуральной бамбуковой мозаики Bamboo фабрики Natural Mosaic производится в Китае на современном оборудовании. Процесс ее изготовления основан на традициях и опыте мастеров далекого прошлого, объединенных с самыми передовыми технологическими достижениями в данной области. Бамбуковое сырье, предназначенное для производства, проходит тщательный отбор, и для изготовления мозаики отбираются только самые твердые сорта китайского бамбука. Технологический процесс производства мозаики включает несколько стадий: обезжиривание, обработка паром при высокой температуре, тщательная сушка, шлифовка, полировка. Благодаря этому, обеспечивается высокий уровень защиты от влаги, плесени, коррозии, грибков. В процессе производства мозаики не используются химические вещества, а применяются исключительно натуральные компоненты, что делает ее абсолютно безвредной для здоровья человека и позволяет сохранить природную красоту и шарм бамбука.

 

 

Область применения декоративной мозаики из бамбука

 


Мозаика из бамбука практически не подвержена деформации. Она устойчива даже к сильным механическим воздействиям и является очень прочным отделочным материалом. Долговечность этой мозаики конечно же меньше, чем мозаики из натурального камня, но она, в отличие от каменной, способна привнести в помещение подлинную теплоту и уют. Причем, за счет крепления отдельных элементов к сетке, мозаика обладает повышенной гибкостью, и с ее помощью можно отделывать непрямоугольные поверхности (арки, колонны), что делает бамбуковую мозаику универсальным материалом для внутренней отделки помещений самого разного назначения. Кроме того, она очень проста в обращении.

Декоративную мозаику из бамбука можно использовать не только в гостиной или рабочем кабинете, но и в спальне, детской, на кухне, или в домашней оранжерее. Ее применяют как для внутренних декоративно-облицовочных работ, так и в качестве напольного покрытия. Кроме того, бамбуковой мозаикой часто облицовывают различные предметы интерьера, мебель, двери и многое другое. Плитка-мозаика из бамбука Bamboo Natural Mosaic дает неограниченную свободу творчества, особенно в сочетании с другими отделочными материалами из натурального бамбука. Причем, бамбуковую мозаику можно с успехом сочетать как с камнем или стеклом, так и с любыми другими натуральными материалами. Конечно, наилучшего сочетания бамбуковой мозаики удается достичь с элементами интерьера, имеющими природное органическое происхождение (деревянная мебель, натуральные ткани), или хотя бы натуральное (камень, мрамор).

Бамбук практически не подвержен температурным колебаниям и изменениям влажности. Причем, древесина бамбука обладает важными для современного отделочного материала свойствами: исключительной прочностью, феноменальной жесткостью и легкостью. Поэтому бамбуковая мозаика может использоваться как для внутреннего, так и для внешнего декора. В обоих случаях она будет служить одинаково долго, ни утратив ни малейшей частицы своей привлекательности даже по прошествии десятилетий.

Несмотря на свое растительное происхождение, серия бамбуковой мозаики Bamboo от Natural Mosaic не подвержена воздействию влаги, поэтому ее можно с успехом использовать при декорировании ванной комнаты, душа, а также других помещений с повышенной влажностью воздуха, таких как: сауны, бани, бассейны. При постоянном контакте с водой бамбуковая мозаика не теряет своей привлекательности и своих свойств. Ей не страшны набухания, плесень, грибки. Однако, при использовании мозаики из бамбука во влажных помещениях рекомендуется ее лакировать специальным защитным лаком для дерева.

Бамбуковая мозаика изготавливается в различной цветовой гамме приятных, натуральных тонов. Спектр ее цветов достаточно широк и разнообразен. В коллекции “Bamboo” можно найти мозаику как песочных, так и темно-коричневых оттенков, что позволяет ее использовать для декорирования помещений самой разной направленности. Если стандартной цветовой гаммы окажется мало, то бамбуковой мозаике можно придать желаемый цвет с помощью колеровочных лаков. Многообразие цветовых оттенков колеровки предоставляет практически безграничные возможности в плане цветового оформления помещений, позволяя создавать насыщенные цвета и причудливые орнаменты.

Конечно, с помощью мозаики из бамбука не возможно точно передать рисунки и разнообразные художественные композиции, но вполне можно создавать различные орнаменты и узоры, путем сочетания сегментов различных оттенков. Кроме того, различные формы выкладки позволяют добиться оригинальных очертаний. Мелкие квадратики мозаики вносят в интерьер некоторую пестроту, но сдержанные и благородные тона дерева позволяют сделать фон максимально гармоничным и приятным для глаз, а многочисленные хаотичные вкрапления отличных от основного фона тонов создают уникальный декоративный эффект.

Мозаику из бамбука можно клеить на любые поверхности точно также, как и любую другую. Для приклеивания мозаики используют безусадочные полиуретановые клеевые составы, которые после высыхания устойчивы к любым механическим нагрузкам и не деформируются в процессе эксплуатации. Клей должен обладать хорошей адгезией к рабочим поверхностям, а также необходимой вязкостью, особенно в том случае, если планируется клеить мозаику на вертикальные поверхности. При укладке на пол используется раствор для мрамора. Промежутки между элементами мозаики рекомендуется затереть водоотталкивающим раствором.

 

Смотрите также:

Мозаика из бамбука | Мозаика

02-03-2018

Каждый владелец квартиры или дома хочет удивить каждого своего гостя, делая оригинальный дизайн. Для создания атмосферы заморских стран, специалистами рекомендовано приобретение уникальной мозаики из бамбука. Благодаря такой отделке можно без труда разбавить интерьер экзотическими нотками, создавая превосходный дизайн любой комнаты. Бамбуковая мозаика представлена переплетением стеблей тропического растения в различном положении.

Благодаря такой облицовке можно стать обладателем настоящей мощи и силы  живой природы. Кроме того, применять материалы натурального происхождения в помещениях помогает сохранить здоровье каждого его жителя.

На заметку: Если вам нужна облицовка натуральным камнем, то http://www.kam-company.ru/services/oblicovka_tsokolya.htm всегда придет на помощь. Компания отличается от конкурентов наличием собственной производственной базы для проведения всех необходимых процедур по предоставлению высококачественного камня. Примечательно то, что компания не только обеспечит быструю доставку на объект, но и также проведет квалифицированный монтаж натурального камня. Обращаясь к ГК КАМ, каждый получит высокое качество обслуживания от профессионалов.

Преимущества

Благодаря качественной мозаики из бамбука можно не создать уникальный интерьер почти в любом помещении: в ванной, кухне, спальне, гостиной. Основные преимущества такого материала заключены в натуральности и экологичности, водостойкости, противодействии распространению грибка и плесени, устойчивости к выгораниям, а также долговечности.

Всем хочется, чтобы дом имел оригинальную отделку, и бамбуковая мозаика – это отличное решение. Благодаря такому материалу предоставляется возможность воплощения даже самых смелых мечтаний в реальность. Стоит отметить, что материал отлично сочетается с другим сырьем, что позволяет получить уникальные композиционные решения. Так, достаточно хорошо смотрится сочетание бамбуковой мозаики с ракушками или сланцем. Да и стоимость такой продукции достаточно приемлема.

Если обращаться к профессиональному магазину, то всегда можно осуществить правильный и качественный выбор, а квалифицированные сотрудники монтажа помогут в создании неповторимого природного интерьера, который покорит сердце каждого. Использование оригинальной и качественной мозаики из бамбука – это лучший выбор для сохранения экологически чистой атмосферы дома и создания превосходного дизайна любого помещения.

БАМБУК. Натуральные природные материалы из бамбука.

Бамбук. Бамбуковые стволы, половинки, опоры.

Бамбук всегда был популярен в качестве декоративного материала. С помощью бамбука создают оригинальные интерьеры помещений. Бамбуковые стволы используются для оформления стен и потолка. Широкое применение в сфере ландшафтных работ. Фото бамбука.

В основе бамбуковых обоев планки натурального бамбука равной ширины, наклеенные на тканевую основу. Ширина бамбуковых обоев может быть от 0,9 м до 2,5 метров. Бамбуковые обои можно наклеивать на стены и потолок, мебель. Бамбуковое полотно устойчиво к механическим повреждениям и атмосферным воздействиям, отлично подходит для отделки помещений любого назначения.

Бамбуковые и тростниковые заборы.

Используются при создании декоративных навесов, заборов, беседок. Допускается использование как внутри, так и снаружи помещений. Большое преимущество декоративных заборов в лёгком монтаже и демонтаже. В некоторых случаях при невозможности строительства капитальных заборов служат отличной альтернативой.

Натуральные обои.

С лицевой стороны натуральных обоев наклеены нити натуральных и смешанных волокон таких природных материалов, как бамбук, джут, маранта, тростник, златоцвет, сизаль, мандариновый бамбук, китайская крапива, листья дерева Будды, листья магнолии, зебрано, японское дерево, лён, папирус и т.д. Основой натуральных обоев служит неотбелённая натуральная бумага или флизелиновая основа. Натуральные обои предоставляют неограниченный выбор в оформлении вашего интерьера.

Натуральные природные материалы

Материалы и товары из натуральных материалов. Бамбуковые панели и плиты. Кокосовая мозаика. Тростниковое полотно. Деревянные панели. Пальмовое полотно.

Натуральные канаты и верёвки.

Применяются в качестве декоративной отделки. Канаты отличаются по цвету, что позволяет подобрать канат под любой интерьер. В декоративных целях канаты чаще всего используются для отделки помещений, оформления внутренних и внешних интерьеров. Обладают большой устойчивость к повреждениям и плесени. Все канаты изготовлены из экологически чистых материалов.

Взаимодействие между белком репликации вируса бамбуковой мозаики и белком оболочки имеет решающее значение для перемещения вируса в растительных хозяевах

Abstract

Вирус мозаики бамбука (BaMV) представляет собой РНК-вирус с положительным смыслом, принадлежащий к роду Potexvirus . Открытая рамка считывания 1 (ORF1) кодирует вирус репликации белка, который состоит из домена кэпирующего фермента, домена, подобного геликазе (HLD), и домена РНК-зависимой РНК-полимеразы от N до C-конца. ORF5 кодирует вирусный белок оболочки (CP), необходимый для инкапсидации генома и перемещения вируса в растениях.В этом исследовании применение теста с двумя гибридными дрожжами выявило взаимодействие между вирусным HLD и CP. Однако это взаимодействие не повлияло на активность NTPase HLD. Чтобы идентифицировать критические аминокислоты CP, взаимодействующие с HLD, была создана случайная библиотека мутаций CP с использованием подверженной ошибкам ПЦР, и мутации, отрицательно влияющие на взаимодействие, были проверены с помощью бактериальной двухгибридной системы. В результате было обнаружено, что мутации A209G и N210S в CP ослабляют взаимодействие.Чтобы определить значимость взаимодействия, мутации были введены в инфекционный клон BaMV, и были исследованы мутационные эффекты на репликацию вируса, движение и инкапсидацию генома. Эффекта на накопление ЦП BaMV и геномных РНК в протопластах не наблюдалось; однако перемещение вируса от клетки к клетке в растениях было ограничено. Выравнивание последовательностей показало, что A209 CP BaMV консервативен во многих потексвирусах. Мутация соответствующего остатка в вируса мозаики лисого хвоста CP также снижает вирусное взаимодействие HLD-CP и ограничивает движение вируса, что позволяет предположить, что взаимодействие между CP и широко консервативным HLD в репликационном белке потексвируса имеет решающее значение для передачи вируса через плазмодесматы.

ВВЕДЕНИЕ

Для распространения среди хозяев вирусы растений развили ряд путей, позволяющих их потомству проходить через плазмодесмы в соседние клетки и перемещаться по сосудистой системе (8, 26). Белки перемещения, кодируемые вирусами, играют ключевую роль посредством различных механизмов в межклеточном и сосудистом транспорте. Вспомогательные белки, например белки вирусной оболочки (CP) в некоторых случаях, и факторы хозяина также могут участвовать в этих процессах.Были проведены многочисленные исследования для выяснения механизмов движения. Многие результаты обобщены в ряде недавних обзоров (23, 28, 30). Они провели углубленное обсуждение таких вопросов, как идентификация и характеристика задействованных вирусных белков и белков хозяина, а также транспортные модели для некоторых примеров вирусов, таких как вирус табачной мозаики (TMV) и Potato virus X (PVX). Несмотря на эти усилия, многие детали процессов остаются неуловимыми.

Члены рода Potexvirus имеют геном РНК с положительной цепью, который содержит пять открытых рамок считывания (ORF), 5'-метильную кэп и 3'-поли (A) хвост. ORF1 кодирует вирусный репликационный белок, состоящий из домена кэпирующего фермента, геликазеподобного домена (HLD) и домена РНК-зависимой РНК-полимеразы (RdRp) от N-конца до C-конца (16, 17). HLD обладает активностью РНК-5'-трифосфатазы и нуклеозидтрифосфатазы (NTPase) (18). Благодаря согласованным действиям HLD и домена кэпирующего фермента кэп-структура может формироваться на 5'-конце вирусной РНК (17).ORF2 к ORF4 перекрываются. Они кодируют белки вирусного движения, называемые белком тройного блока генов 1 (TGBp1), TGBp2 и TGBp3. ORF5 отвечает за выработку белка оболочки. На основании исследований перемещения многих потексвирусов, таких как PVX и вирус мозаики белого клевера , вирусы этой группы нуждаются в белках TGB и CP для собственного транспорта (3, 7, 22, 25). TGBp1 способен увеличивать пределы исключения плазмодесмального размера (1, 11). Кроме того, он обладает активностью РНК-геликазы (12) и действует как супрессор подавления РНК (31).TGBp2 и TGBp3 являются белками, ассоциированными с эндоплазматическим ретикулумом (ER) (14, 24). Были предложены две модели для описания перемещения потексвирусов от клетки к клетке (22, 27). Основное различие между этими двумя моделями касается того, переносится ли комплекс вириона или рибонуклеопротеина (RNP) через плазмодесмы. В модели RNP комплекс состоит из вирусной РНК, TGBp1 и CP, и было предложено, что вирусный CP действует совместно с белками TGB, опосредуя транслокацию комплекса в соседние клетки.Недавно была предложена более сложная модель межклеточного транспорта с подавлением РНК потексвирусов (30).

Вирус мозаики бамбука (BaMV) - это потексвирус, обычно обнаруживаемый во многих разновидностях бамбука и искусственно заразный для Nicotiana benthamiana . Изучены функции белков TGB в движении BaMV у N. benthamiana . Замена R16 или R21 TGBp1 аланином снижает РНК-связывающую и NTP-азную активности белка и, следовательно, препятствует перемещению вируса (19).Мутации консервативных C109 или C112 TGBp2 уменьшают перемещение от клетки к клетке и серьезно ингибируют системный транспорт вируса (29). Сигнал сортировки в TGBp3 необходим и достаточен для нацеливания белка на кортикальные канальцы ER, шаг, необходимый для перемещения BaMV от клетки к клетке (32). Для поиска факторов хозяина, участвующих в репликации BaMV, каждый ферментативный домен вирусного репликационного белка был использован в качестве приманки для поиска взаимодействующих с ним белков из библиотек кДНК, полученных как из здоровых, так и из инфицированных BaMV N.benthamiana листьев. Было обнаружено, что предполагаемая метилтрансфераза растений связана с вирусным RdRp и может подавлять репликацию вируса (5). В этом отчете мы описываем еще один вывод: вирусный HLD имеет высокое сродство к собственному CP вируса. Более того, мутации CP, которые снижали взаимодействие с белками, ограничивали движение вируса. Никакого влияния на репликацию вируса или образование вирионов в ответ на эти мутации не наблюдалось. Подобные мутационные эффекты были обнаружены у вируса мозаики лисого хвоста (FoMV), что предполагает общую роль взаимодействия HLD-CP в перемещении потексвирусов от клетки к клетке.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Скрининг двугибридных дрожжей.

Дрожжевую систему Hybrid Hunter (Invitrogen) использовали для поиска белков, взаимодействующих с BaMV HLD, в библиотеке кДНК листьев, инфицированных BaMV, из N. benthamiana . Взаимодействие между приманкой и добычей в системе приведет к индукции генов his3 и lacZ . Конструирование библиотеки на основе pYESTrp2 было описано ранее (5), если только листья через 3 дня после инокуляции BaMV не использовались для выделения мРНК.Вкратце, область внутри ORF1, кодирующая аминокислоты с 513 по 900 вирусного репликационного белка, была добавлена ​​с сайтами EcoRI и PstI на 5'- и 3'-концах, соответственно, с помощью ПЦР. Амплифицированный фрагмент ДНК вставляли в расщепленный EcoRI-PstI pHybLex / Zeo, чтобы стать плазмидой-приманкой. Saccharomyces cerevisiae штамм L40, несущий плазмиду-приманку, трансформировали библиотекой кДНК pYESTrp2 плазмиды жертвы. Колонии, выращенные на чашках с селективным агаром YC-WHUK / Z300, дополнительно анализировали на их активность β-галактозидазы на основе как фильтровальных, так и количественных анализов.Плазмиды выделяли из плазмидов, проявляющих значительную активность β-галактозидазы, и трансформировали в Escherichia coli Top10F '. Плазмиды жертвы выделяли из трансформантов E. coli и снова трансформировали в экспрессирующий приманку штамм L40 для подтверждения взаимодействия приманка-жертва. Нуклеотидные последовательности фрагментов кДНК из отобранных плазмид-жертв определяли с помощью генетического анализатора ABI Prism 3100.

Для анализа активности β-галактозидазы дрожжевые клетки, прилипшие к фильтровальной бумаге, разрушали многократным замораживанием и оттаиванием.Бумагу пропитывали буфером, который содержал 100 мМ фосфата (pH 7,0), 10 мМ KCl, 1 мМ MgSO 4 и 1 мг / мл X-Gal до появления цвета. Для количественного анализа активности 100 мкл разрушенных клеток добавляли к 900 мкл реакционного буфера, как описано выше, за исключением того, что X-Gal был заменен 0,64 мг / мл O -нитрофенил-β-галактозидом. После инкубации при 30 ° C в течение 10 ч оптическую плотность при 420 нм определяли с помощью спектрофотометра и рассчитывали активность в соответствии с руководством производителя.

Бактериальный двухгибридный скрининг.

Двухгибридная система бактериальной аденилатциклазы (BACTH) (Euromedex) была использована для скрининга мутаций BaMV CP, которые снижали аффинность связывания вирусного CP с HLD. В этой системе взаимодействие между приманкой и добычей может регенерировать активность аденилатциклазы, что приводит к активации оперонов lac и mal . HLD-кодирующая область BaMV была добавлена ​​с сайтами PstI и BamHI на 5'- и 3'-концах соответственно с помощью ПЦР и вставлена ​​в PstI-BamHI-открытый pKT25, чтобы стать pKT25-HLD BaMV для продукции T25- Слитый белок HLD BaMV .Точно так же в CP-кодирующую область BaMV были добавлены сайты SphI и BamHI на 5'- и 3'-концах, соответственно, и вставлен в SphI-BamHI-открытый pUT18, чтобы стать pUT18-CP BaMV для продукции CP . Слитый белок BaMV -T18. Сила взаимодействия между BaMV HLD и CP определялась путем выращивания рекомбинантного E. coli BTh201 в минимальной среде M63 с добавлением 0,2% мальтозы, 40 мкг / мл X-Gal, 50 мкг / мл канамицина, 50 мкг / мл стрептомицина. , 100 мкг / мл ампициллина и 0.5 мМ изопропилтиогалактозид (IPTG).

Мутагенез.

Случайный мутагенез CP-кодирующей области в pUT18-CP BaMV выполняли с помощью подверженной ошибкам ПЦР с использованием набора для случайного мутагенеза GeneMorph II (Stratagene). Вкратце, 500 нг pUT18-CP BaMV использовали в качестве матрицы в 50-мкл раствора для ПЦР в течение 23 циклов. После секвенирования фрагментов ДНК, амплифицированных с помощью ПЦР, средняя частота мутаций составила 2 мутации на 1 т.п.н. ДНК. Амплифицированный CP-кодирующий участок снова вставляли в pUT18 с использованием сайтов вырезания SphI и BamHI для получения библиотеки мутаций pUT18-CP BaMV .Сайт-направленный мутагенез выполняли со специфическими праймерами в соответствии с протоколом набора для сайт-направленного мутагенеза QuikChange (Stratagene).

Получение

белков, экспрессируемых E. coli .

В область, кодирующую HLD BaMV, добавляли BamHI и SacI на 5'- и 3'-концах, соответственно, с помощью ПЦР и вставляли в открытый BamHI-SacI pETDuet для получения меченного His HLD BaMV. Вирусный белок был экспрессирован в виде телец включения в E. coli BL21 (DE3).Чтобы очистить вирусный белок, тельца включения растворяли и повторно укладывали согласно протоколу, описанному ранее (10). Более подробно, тельца включения растворяли в протеиновом буфере, который содержал 50 мМ Трис (pH 7,5), 20 мМ KCl, 0,1% Brij-35, 10% глицерин и 10 мМ β-меркаптоэтанол с добавлением 8 М мочевины. Раствор растворенного белка добавляли по капле к 40 объемам осторожно перемешиваемого белкового буфера для ренатурации белка. Супернатант белкового раствора смешивали со смолой Ni 2+ - нитрилотриуксусной кислоты (NTA).После обширной промывки протеиновым буфером с добавлением 1 M KCl и 20 мМ имидазола повторно свернутый BaMV HLD элюировали протеиновым буфером с добавлением 500 мМ имидазола. Аналогичным образом, ПЦР-амплифицированный фрагмент кДНК, кодирующий аминокислоты с 451 по 857 репликационного белка FoMV, был вставлен в pETDuet с использованием сайтов разрезания BamHI и EcoRI, и плазмидная конструкция была трансформирована в E. coli BL21 (DE3). Получение His-меченного FoMV HLD было таким же, как приготовление BaMV HLD, описанного выше.

Для получения слитого белка CP BaMV -T18 культуру рекомбинантного E. coli BL21, несущего pUT18-CP BaMV , обрабатывали 0,4 мМ IPTG в течение 16 часов при 37 ° C. Клетки разрушали обработкой ультразвуком, и белок в супернатанте собирали после 10-минутного центрифугирования при 15000 × g . Для получения слитого белка CP FoMV -T18, ПЦР-амплифицированный ORF5 FoMV был вставлен в pUT18 с использованием сайтов разрезания HindIII и EcoRI, и плазмидная конструкция pUT18-CP FoMV была трансформирована в E.coli BL21. Получение слитого белка было таким же, как описано для CP BaMV -T18.

Для продукции BaMV CP в E. coli , BaMV ORF5 был добавлен с NdeI и EcoRI на 5'- и 3'-концах соответственно с помощью ПЦР и вставлен в NdeI-EcoRI-открытый pET29. Затем плазмидной конструкцией трансформировали E. coli BL21 (DE3). Для индукции экспрессии белка в культуру рекомбинантной E. coli добавляли 0,5 мМ IPTG и культивирование продолжали при 30 ° C в течение 10 часов.Собранные клетки разрушали обработкой ультразвуком в буфере для экстракции белка, который содержал 50 мМ Трис (pH 8,0), 200 мМ NaCl, 10 мМ β-меркаптоэтанол и 1 мМ EDTA с добавлением 1 мМ фенилметилсульфонилфторида (PMSF). Экстракт доводили до содержания 300 мМ (NH 4 ) 2 SO 4 . После центрифугирования супернатант загружали в колонку с фенил-сефарозой (1,6 на 10 см; GE Healthcare), и белки, связанные с колонкой, элюировали с линейным градиентом (NH 4 ) 2 SO 4 (От 150 до 0 мМ) в буфере для экстракции белка.Фракции, содержащие BaMV CP, концентрировали и диализовали против буфера для экстракции белка без NaCl. Затем белковый раствор загружали в колонку DEAE-Sepharose (1,6 на 10 см; GE Healthcare), и элюирование выполняли линейным градиентом NaCl (от 0 до 1 M) в буфере для экстракции белка. Наконец, фракции, содержащие BaMV CP, были сконцентрированы, и CP внутри был дополнительно очищен с помощью колонки Sephacryl S-300 (1,6 × 60 см; GE Healthcare).

Анализ сдвига электрофоретической подвижности (EMSA).

Указанные количества E. coli -экспрессируемого ХП BaMV были смешаны с 1 фмоль 32 Р-меченая РНК-зонд в 12 мкл буфера, который также содержал 20 мМ Трис (pH 8,0), 3 мМ MgCl 2 , 10 мМ KCl, 2 мМ дитиотреитол (DTT) и 4% глицерин. После инкубации при комнатной температуре в течение 15 минут смесь разделяли на 6% -ном полиакриламидном геле и визуализировали с помощью авторадиографии. Зонд был приготовлен путем инкубации 5 мкг матричной ДНК, фрагмента 5'-нетранслируемой области (UTR) BaMV, которому предшествовал промотор Т7, с 0.5 мМ АТФ, 0,5 мМ CTP, 0,5 мМ GTP, 0,5 мкм UTP, 100 мкКи [α- 32 P] UTP (6000 Ки / ммоль), 1 мкл ингибитора РНКазы (40 Ед / мкл) и 3 мкл полимеразы Т7 (14 Ед / мкл) в 50 мкл транскрипционного буфера 1 × T7. После инкубации при 37 ° C в течение 2 часов матричная ДНК была удалена с помощью РНКазы E, и радиоактивно меченый зонд был очищен с помощью колонки MicroSpin G-50 (GE Healthcare).

Спектр кругового дихроизма.

E.coli -экспрессируемый BaMV CP очищали и доводили до концентрации 25 мкг / мл в 2 мМ фосфатном буфере (pH 7.2). Спектр в диапазоне от 190 до 250 нм регистрировали при комнатной температуре с помощью CD-спектрометра Jasco J-815, снабженного кварцевой кюветой с длиной пути 5 мм.

Опосредованная агробактериями экспрессия комплекса репликазы BaMV.

кДНК сателлитной РНК SF4 BaMV добавляли с последовательностями узнавания HindIII и ClaI на 5'- и 3'-концах соответственно с помощью ПЦР и вставляли в бинарную плазмиду pKn. Эта конструкция размещала кДНК SF4 ниже промотора 35S вируса мозаики цветной капусты (CMV).Точно так же ORF5 BaMV вставляли в pKn с использованием сайтов разрезания XhoI и KpnI для продукции вирусного CP в растениях. ORF1 BaMV, который был помечен последовательностью, кодирующей гемагглютинин (HA) на 3'-конце, был вставлен в бинарную плазмиду pEpyon с использованием сайтов разрезания SmaI и SacI. pEpyon содержит последовательность ω1 TMV, которой предшествует промотор CMV 35S, так что трансляция белка репликации BaMV может быть усилена. Agrobacterium tumefaciens LBA4404, несущий указанные бинарные плазмиды, инфильтрировали в 3-недельные N.benthamiana растений. Листья собирали через 5 дней после инокуляции и гомогенизировали в буфере, который содержал 50 мМ Трис (pH 8,0), 15 мМ MgCl 2 , 120 мМ KCl, 0,1% β-меркаптоэтанол, 20% глицерин, 1 мкМ пепстаин и 0,1 мМ фенилметилсульфонил. фторид (PMSF). После центрифугирования при 30000 × g в течение 1 ч мембранную фракцию (P30) собирали и солюбилизировали в детергентном буфере, который содержал 50 мМ Трис (pH 8,0), 150 мМ NaCl и 1,5% NP-40 для анализа коиммунопреципитации и эндогенного Анализ активности RdRp.

Анализ эндогенной активности RdRp.

Солюбилизированная фракция P30, содержащая указанные белки BaMV и РНК, была добавлена ​​в реакционный буфер, содержащий 30 мМ Трис (pH 8,8), 10 мМ MgCl 2 , 20 мМ DTT, 2 мМ АТФ, 2 мМ CTP, 2 мМ GTP. , 2 мкМ UTP и 100 мкКи [α- 32 P] UTP (6000 Ки / ммоль), и смесь инкубировали при комнатной температуре в течение 3 часов. Продукт реакции экстрагировали равным объемом фенол-хлороформа, и нуклеиновые кислоты осаждали этанолом.Радиоактивно меченые продукты РНК разделяли на 0,8% агарозном геле и визуализировали с помощью авторадиографии.

Анализ репликации вируса в протопластах.

Получение протопластов N. benthamiana и плазмидную трансфекцию выполняли, как описано ранее (5). Вкратце, 3 мкг pCBG, инфекционного клона BaMV, несущего ген зеленого флуоресцентного белка (GFP), или его производного смешивали с 1 × 10 5 протопластов в присутствии конечного 20% полиэтиленгликоля 4000.Протопласты были разрушены через 2 дня после трансфекции, и скопления вирусного CP и геномных РНК анализировали вестерн-блоттингом и нозерн-блоттингом соответственно.

Анализ инфекционности вируса в растениях.

Указанный инфекционный клон или его производное механически инокулировали в листья 3-недельного растения N. benthamiana или Chenopodium quinoa в дозе 2 мкг ДНК на лист, как описано ранее (21). Экспрессию GFP, представленную флуоресцентными пятнами, в инфицированных растениях в указанные дни после инокуляции визуализировали с помощью Kodak Image Station 2000MM.

Нозерн-блоттинг.

Общая РНК

была выделена из 1 × 10 5 трансфицированных протопластов с использованием набора TriSolution Reagent Plus (GeneMark). Каждый образец РНК (17 мкг) обрабатывали 3 М глиоксалем и разделяли на 0,8% агарозном геле. После переноса и фиксации на нейлоновой мембране образцы гибридизовали с радиоактивно меченным зондом, комплементарным 3'-UTR BaMV. Зонд был получен в результате реакции транскрипции in vitro , которая содержала 5 мкг расщепленного HindIII pBaMV-O / SB2.6, 0,5 мМ АТФ, 0,5 мМ CTP, 0,5 мМ GTP, 0,5 мкМ UTP, 100 мкКи [α- 32 P] UTP (6000 Ки / ммоль), 40 Ед ингибитора РНКазы и 3 мкл полимеразы SP6 (14 Ед. / мкл) в 50 мкл транскрипционного буфера 1 × SP6. После инкубации при 37 ° C в течение 30 мин матричная ДНК была удалена с помощью РНКазы E, и радиоактивно меченый зонд был очищен с помощью колонки MicroSpin G-50 (GE Healthcare).

Просвечивающая электронная микроскопия.

Полноразмерная кДНК BaMV была амплифицирована из pCBG с помощью ПЦР и вставлена ​​в pKn с использованием сайтов разрезания SbfI и SacI. A. tumefaciens LBA4404, несущий инфекционные клоны на основе pKn, был инфильтрирован в листья 3-недельного растения N. benthamiana . Листья собирали через 5 дней после инфильтрации, и вирусные частицы внутри очищали в соответствии с протоколом, описанным ранее (20). Очищенные вирусные частицы на медной сетке отрицательно окрашивали 3% уранилацетатом и наблюдали под просвечивающим электронным микроскопом (JEM-100CX II).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Скрининг двугибридных дрожжей.

Вирусы рекрутируют или захватывают факторы хозяина, чтобы завершить цикл репликации и ускользнуть от защитных механизмов хозяина. Для продолжения поиска растительных белков, которые взаимодействуют с белком репликации BaMV, вирусный HLD использовали в качестве приманки для скрининга против библиотеки кДНК BaMV-инфицированных листьев N. benthamiana . Первоначально было идентифицировано 60 колоний дрожжей, проявляющих гистидиновый автотрофный фенотип и значительную активность β-галактозидазы. Секвенирование ДНК показало, что 48 из этих 60 колоний содержали ген CP BaMV в своей добычной плазмиде (A).Высокая частота обнаружения CP в плазмиде жертвы предполагает сильное взаимодействие между двумя вирусными белками и / или обилие мРНК CP в инфицированных вирусом листьях. Количественный анализ активности β-галактозидазы показал более сильное взаимодействие между BaMV HLD и CP, чем взаимодействие положительного контроля (B). Для проведения анализа in vitro , меченный His HLD был экспрессирован в E. coli , которые образовали тельца включения, повторно свернули и очистили с помощью аффинной хроматографии с иммобилизованным металлом (IMAC).Очищенный HLD смешивали с неочищенной смолой E.coli -экспрессируемой BaMV CP и Ni 2+ -NTA. BaMV CP может быть обнаружен с HLD во фракции элюирования (C), что дополнительно подтверждает взаимодействие HLD-CP.

Взаимодействие между BaMV HLD и CP. (A) S. cerevisiae L40, экспрессирующие различные комбинации белков приманки и жертвы, выращивали на планшетах YC-WU / Z300, а затем переносили на фильтровальную бумагу для анализа активности β-галактозидазы. Клетки, экспрессирующие LexA-Fos2 и AD-Jun, использовали в качестве положительного контроля.(B) Дрожжевые клетки, экспрессирующие указанные белки приманки и жертвы, разрушали и инкубировали с O -нитрофенил-β-галактозидом в течение 10 часов. Активность определяли на основании оптической плотности, измеренной при 420 нм. (C) Совместная очистка ЦП BaMV с повторно свернутым His-меченным HLD с помощью IMAC. Ренатурация и очистка BaMV HLD описаны в разделе «Материалы и методы». Дорожки 2 и 3 представляют собой неочищенные экстракты E. coli , которые экспрессировали BaMV HLD и CP соответственно. Дорожка 4 показывает повторно свернутый HLD, очищенный из дорожки 2 с помощью IMAC.Дорожка 5 показывает совместную очистку HLD и CP с помощью IMAC. Следует отметить, что один только CP BaMV не может быть очищен с помощью IMAC (дорожка 6).

Агроинфильтрация-иммунопреципитация.

Комплекс репликазы

BaMV с эндогенной активностью RdRp во фракции P30 получали путем временной экспрессии HA-меченного вирусного репликационного белка с сателлитной РНК SF4 в листьях N. benthamiana через инфильтрацию Agrobacterium . Инкубация фракции P30 с меченными изотопами нуклеозидтрифосфатами приводила к образованию меченого изотопом SF4 (, дорожка 1).Чтобы определить взаимодействие in vivo и между репликационным белком BaMV и CP, два вирусных белка были коэкспрессированы в N. benthamiana . Коиммунопреципитация с использованием антисыворотки против НА показала, что CP можно было обнаружить в преципитате, если образец содержал вирус репликации вируса (дорожки 1 и 2). Поскольку оба вирусных белка обладают РНК-связывающей активностью, было неясно, связаны ли эти два белка косвенно через молекулы РНК. Удаление эндогенной сателлитной РНК SF4 нуклеазой микрококка не прерывает взаимодействия белков (дорожка 2), что позволяет предположить, что BaMV HLD и CP находятся в прямом контакте.

Взаимодействие in vivo между репликационным белком BaMV и CP. Рекомбинантные штаммы A. tumefaciens , несущие указанные плазмиды, экспрессирующие белок и РНК, инфильтрировали в листьев N. benthamiana , как описано в разделе «Материалы и методы». Фракцию Р30, выделенную из листьев, солюбилизировали и обрабатывали нуклеазой микрококка или без нее перед коиммунопреципитацией с использованием антисыворотки против НА (А). Вестерн-блоттинг указывает на присутствие CP в иммунном преципитате (A) и белка репликации BaMV (B) и CP (C) во фракции P30.Анализ эндогенной активности RdRp (D) использовали для подтверждения того, что сателлитная РНК SF4 во фракции P30 была удалена после обработки нуклеазой микрококков.

Бактериальный двухгибридный скрининг.

Сначала мы исследовали, может ли ферментативная активность HLD модулироваться CP. Присутствие CP не влияло на активность РНК 5'-трифосфатазы / NTPase HLD (данные не показаны). Для картирования областей CP, которые контактировали с HLD, ORF5 BaMV подвергали случайному мутагенезу с помощью подверженной ошибкам ПЦР.Бактериальная двухгибридная система была использована для скрининга мутантных CP, которые имели более слабую аффинность связывания с HLD по следующим причинам: (i) нет необходимости в трансформации между дрожжами и E. coli и ( ii) частота трансформации E. coli намного выше, чем у дрожжей. В этой системе аденилатциклаза была разделена на две части, Т18 и Т25; один был соединен с приманкой, а другой - с добычей. Взаимодействие наживки и добычи должно вернуть ферментативную активность для продукции цАМФ, что, в свою очередь, активирует транскрипцию оперонов lac и mal .Полезность этой системы скрининга в данном исследовании была впервые подтверждена путем выращивания рекомбинантного штамма E. coli BTh201, который продуцировал T25-HLD BaMV и CP BaMV -T18, на селективной среде M63, дополненной X-Gal и мальтозой. как единственный источник углерода. Взаимодействие между двумя вирусными белками будет поддерживать рост синих колоний на планшете со средой для отбора. Начальная плотность клеток, минимально необходимая для образования видимых синих колоний клеток, экспрессирующих T25-HLD , BaMV и CP , BaMV -T18, была на три порядка меньше, чем у клеток, не экспрессирующих вирусного слияния или не экспрессирующих только один вирус. белки (А).Более того, клетки, экспрессирующие два вирусных слитых белка, росли намного лучше, чем клетки, экспрессирующие T25-Zip и Zip-T18, используемые в качестве положительного контроля, что позволяет предположить, что взаимодействие между BaMV HLD и CP было относительно сильным в E. coli . Мутантные CP с более слабым сродством к HLD подвергали скринингу из случайно мутированной библиотеки CP. Впоследствии были идентифицированы три клона: CP (17-3), CP (1-22) и CP (7-1) (B). Секвенирование ДНК показало, что CP (1-22) содержал четыре аминокислотные мутации, а именно I130M, D170N, A209G и N218K, в то время как CP (17-3) и CP (7-1) имели одну мутацию N210S.Чтобы подтвердить дифференциальное взаимодействие вариантов CP с HLD, экстракты клеток E. coli , содержащие различные слитые белки CP-T18, были смешаны с очищенным His-меченным HLD и смолой Ni 2+ -NTA, и связанные белки были впоследствии элюируется. Количество CP дикого типа, совместно очищенного с His-меченным HLD, действительно было намного больше, чем количество двух мутантных CP (C).

Мутанты ЦП BaMV, которые имели более слабое сродство к вирусному HLD. (A) Аликвота 2 мкл E.coli BTh201 с указанной оптической плотностью добавляли на чашку с селективным агаром M63 и инкубировали при 30 ° C в течение 5 дней. Комбинации белков приманки и жертвы, экспрессируемые в клетках, были такими, как указано. Культуру клеток, экспрессирующих T25-Zip и Zip-T18, использовали в качестве положительного контроля. (B) Культуры клеток, экспрессирующие T25-HLD и указанные варианты CP-T18, выращивали на чашке с селективным агаром M63, как описано выше. (C) Экстракты клеток E. coli , содержащие указанные варианты CP BaMV -T18, смешивали с очищенным His-меченным HLD и смолой Ni 2+ -NTA.После промывания 20 мМ имидазолсодержащим буфером белки элюировали 500 мМ имидазолсодержащим буфером. CP BaMV -T18 во фракциях загрузки, промывки и элюата, а также HLD в промывке и элюате анализировали вестерн-блоттингом с использованием специфической антисыворотки.

Биохимическая характеристика мутантных ЦП.

Хотя существует четыре мутированных остатка CP (1-22), считалось, что A209 играет более важную роль, чем другие, потому что он находится рядом с остатком N210, который был заменен на серин в CP (17-3) и CP (7-1).Это предположение побудило нас предположить, что область вокруг A209 и N210 CP вносит значительный вклад во взаимодействие белков. Соответственно, две одиночные мутации, A209G и N210S, и одна двойная мутация, A209G / N210S, были созданы в векторе экспрессии CP на основе pET29. Чтобы определить, повлияют ли мутации на структуру белка, мы проанализировали спектры кругового дихроизма различных очищенных CP (). Почти идентичные спектры показали, что глобальная структура CP не была изменена мутациями.Основная функция CP - инкапсидирование вирусного генома. Мутационные эффекты на связывание РНК анализировали с помощью EMSA с использованием зонда, соответствующего 5'-UTR BaMV (). Результаты показали, что РНК-связывающая активность CP не изменилась в ответ на мутации.

Спектры кругового дихроизма различных КП BaMV. Приготовление белка и измерение CD были такими, как описано в разделе «Материалы и методы».

Аффинности связывания РНК различных CP BaMV. Сдвиги подвижности РНК-зонда, вызванные вариантами CP в нативном полиакриламидном геле, анализировали, как описано в разделе «Материалы и методы».Количество CP, использованное в анализе, составляло 0,23 мкг (1 ×) или 0,46 мкг (2 ×) на реакцию. Бычий сывороточный альбумин (BSA; 0,46 мкг) использовали в качестве отрицательного контроля.

Влияние мутаций CP на накопление BaMV в растениях.

Каждая из мутаций CP, A209G, N210S, A209G / N210S и делеция CP (ΔCP), была субклонирована в генетический фон pCBG и трансфицирована в протопластов N. benthamiana . Накопление вирусного ЦП и геномных РНК измеряли через 2 дня после трансфекции.Точечные мутации (A и B) не повлияли на накопление ЦП и геномной РНК. Однако уровень вирусных РНК был значительно снижен, когда ЦП отсутствовал (B). Различные инфекционные клоны также использовали для инокуляции N. benthamiana и C. quinoa . В этом исследовании зеленая флуоресценция, испускаемая GFP, была удобным маркером для мониторинга репликации и движения BaMV в растениях. В N. benthamiana инокуляция с использованием клона дикого типа привела к экспрессии GFP как в инокулированных, так и в системных листьях через 20 дней после инфицирования (dpi) ().Напротив, инокуляция с использованием любого из мутантных клонов не дала заметного количества GFP даже в инокулированных листьях. У C. quinoa на листьях, инокулированных клоном дикого типа, наблюдались четкие зеленые флуоресцентные пятна 7 dpi (A). Листья, инфицированные мутантом N210S, по-видимому, давали несколько тусклых флуоресцентных пятен. Однако не было четких признаков флуоресцентных пятен на листьях, инокулированных мутантом A209G, A209G / N210S или ΔCP. Отсроченное наблюдение показало, что мутант N210S действительно вызвал легкую инфекцию, поскольку отчетливые поражения появились на листьях в то время, когда листья, инфицированные клоном дикого типа, уже засохли (B).Уровни экспрессии GFP в инокулированных листьях N. benthamiana и C. quinoa , 20 и 7 точек на дюйм, соответственно, измеряли с помощью вестерн-блоттинга. Обилие GFP можно было обнаружить в обоих образцах растений, инокулированных клоном дикого типа; однако экспрессия GFP была редкой в ​​листьях, инфицированных мутантом N210S (). GFP не был обнаружен в листьях, инокулированных мутантом A209G или ΔCP. Взятые вместе, данные ясно показали, что мутации в A209 и N210 CP не оказывали вредного воздействия на репликацию вируса в растительных клетках; однако они действительно сильно задерживали перемещение вируса от клетки к клетке.Слегка различающиеся эффекты, вызванные мутациями A209G и N210S, побудили нас определить, коррелирует ли вредное воздействие на перемещение вируса с силой взаимодействия HLD-CP. Относительную аффинность связывания CP (A209G) и CP (N210S) с HLD сравнивали путем выращивания соответствующих клеток E. coli BTh201 на планшетах для селекции M63 с исходной плотностью клеток при 2-кратном серийном разведении (). Результаты показали, что CP (N210S) имел немного более сильную аффинность связывания с HLD, чем CP (A209G).

Влияние мутаций CP на репликацию BaMV в протопластах. pCBG и указанные производные трансфицировали в протопластов N. benthamiana , как описано в разделе «Материалы и методы». (A) Накопление ЦП BaMV в протопластах анализировали вестерн-блоттингом с использованием антисыворотки к ЦП BaMV. Количество окрашенной кумасси синим рибулозо-1,5-бисфосфаткарбоксилазы (l-RubisCO) использовали в качестве контроля загрузки белка. (B) Геномные и субгеномные РНК BaMV, накопленные в протопластах, анализировали методом Нозерн-блоттинга с использованием зонда, комплементарного 3'-UTR BaMV.На каждую дорожку загружали приблизительно 17 мкг общей РНК.

Влияние мутаций CP на инфекционность BaMV у N. benthamiana . Растения инокулировали pCBG или ее производными, как описано в разделе «Материалы и методы». Были получены флуоресцентные изображения листьев N. benthamiana с разрешением 20 dpi. Листья с 1 по 3 были инокулированными листьями; другие были верхними листьями.

Влияние мутаций CP на инфекционность BaMV у C. quinoa . (A) Листья C. quinoa инокулировали pCBG или ее производными, как описано в разделе «Материалы и методы».Флуоресцентные изображения инокулированных листьев C. quinoa получали с разрешением 8 dpi. (B) Влияние мутаций CP на развитие симптомов болезни. Фотографии инокулированных листьев были сделаны с разрешением 14 dpi.

Экспрессия

GFP в инокулированных листьях N. benthamiana (A) и C. quinoa (B). Инокулированные листья в и A гомогенизировали в буфере, который содержал 50 мМ Трис (pH 8,0), 2% SDS, 2 мМ DTT и 4% глицерина. Относительные количества GFP в образцах анализировали вестерн-блоттингом с использованием антисыворотки против GFP.На каждую дорожку загружали 1,5 мг общего белка.

Дифференциальное связывание различных CP BaMV с HLD. Аликвоту 2 мкл E.coli BTh201, экспрессирующую указанные белки-приманки и жертвы, выращивали на планшете с селективным агаром M63, как описано в разделе «Материалы и методы». Клетки, экспрессирующие Т25 и Т18, использовали в качестве отрицательного контроля.

Чтобы определить, компетентны ли мутантные CP в образовании вирусных частиц, мы решили выделить вирион BaMV из протопластов, трансфицированных различными клонами pCBG.Попытка не увенчалась успехом, так как выход продукции был очень низким. Чтобы преодолеть эту проблему, полноразмерный транскрипт BaMV был временно экспрессирован в N. benthamiana с помощью A. tumefaciens . Вирионы BaMV из агроинфильтрованных листьев выделяли и очищали. Многие изгибающиеся вирусные частицы можно было увидеть под просвечивающим электронным микроскопом в каждом препарате, независимо от того, был ли он приготовлен из листьев, инфицированных вирусом дикого типа или мутантного (А).Очищенные вирионы разрушали, и молекулы РНК внутри анализировали электрофорезом на агарозе (B). По-видимому, вирусная геномная РНК могла быть инкапсидирована как диким типом, так и мутантными CP.

Вирионы BaMV, образованные различными мутантами ЦП BaMV. (A) Вирионы получали и наблюдали под просвечивающим электронным микроскопом, как описано в разделе «Материалы и методы». Все масштабные линейки показывают 100 нм. (B) Вирионы BaMV нагревали в буфере, содержащем 6 мМ фосфата (pH 7.2), 0,2 мМ EDTA, 1% β-меркаптоэтанол, 1% бентонит и 1% SDS при 60 ° C в течение 5 мин с последующей экстракцией фенолом. Очищенные молекулы РНК анализировали электрофорезом в 0,8% агарозе.

Влияние мутаций CP на накопление FoMV в растениях.

Известно, что CP необходим для передвижения потексвирусов. Согласно приведенным выше данным, роль ЦП BaMV в движении вируса определяется его способностью связываться с HLD. Таким образом, было важно знать, широко ли это явление сохраняется среди потексвирусов.Чтобы ответить на этот вопрос, аминокислотные последовательности нескольких CP потексвируса были выровнены, и результаты показали, что остаток, соответствующий BaMV A209, был консервативным (). Соответственно, A230 из FoMV CP подвергали мутагенезу. HLD репликационного белка FoMV экспрессировали с помощью His-метки на его N-конце в E. coli . Подобно BaMV HLD, белок образовывал тельца включения; поэтому его денатурировали, повторно свернули и очистили по протоколу, который использовался для приготовления BaMV HLD.Активность NTPase повторно свернутого белка (данные не показаны) предполагала, что он имел правильную конформацию. FoMV CP также экспрессировался в E. coli в виде слитого белка (CP FoMV -T18). Взаимодействие между FoMV HLD и CP FoMV -T18 было подтверждено совместной очисткой двух белков с помощью IMAC (A). Значительное количество CP FoMV -T18 может быть обнаружено в элюате с FoMV HLD. Однако, когда мутация A230G была введена в CP, выход слитых белков CP в элюате резко снизился.Этот результат предполагает, что A230 участвует во взаимодействии HLD-CP. Такая же мутация была создана в инфекционном клоне FoMV pCF, и производное использовали для инокуляции C. quinoa . Поражения наблюдались на листьях, инокулированных pCF дикого типа 8 dpi; напротив, на листьях, получавших клон, несущий мутацию A230G (B), видимых повреждений не было.

Выравнивание частичных аминокислотных последовательностей CP среди нескольких представителей рода Potexvirus .Номера доступа GenBank для FoMV, PVX, вируса общей мозаики маниока (CcMV) и вируса кольцевой пятнистости гортензии (HrV): {"type": "entrez-protein", "attrs": {"text": " ABW25052 "," term_id ":" 158268262 "," term_text ":" ABW25052 "}} ABW25052, {" type ":" entrez-protein "," attrs ": {" text ":" CAA61265 "," term_id ": "872290", "term_text": "CAA61265"}} CAA61265, {"type": "entrez-protein", "attrs": {"text": "NP_042699", "term_id": "9628112", "term_text" : "NP_042699"}} NP_042699 и {"type": "entrez-protein", "attrs": {"text": "YP_224088", "term_id": "62326909", "term_text": "YP_224088"}} YP_224088 соответственно.Консенсусные мотивы и остатки заключены в рамку. Звездочкой обозначены остатки, которые были мутированы в этом исследовании.

A230G мутация CP FoMV, которая снижает взаимодействие CP-HLD и снижает вирусную инфекционность у C. quinoa . (A) Очищенный His-меченный FoMV HLD смешивали с экстрактом E. coli , который содержал указанные слитые белки CP FoMV -T18 и смолу Ni 2+ -NTA. Белки, связанные со смолой, очищали IMAC. CP FoMV -T18 во фракциях загрузки и элюата и HLD в элюате анализировали вестерн-блоттингом с использованием специфической антисыворотки.(B) Развитие поражений на листьях C. quinoa , которые были инокулированы диким типом или мутантом A230G FoMV. Фотографии инокулированных листьев были сделаны с разрешением 8 dpi.

ОБСУЖДЕНИЕ

CP рода Potexvirus - это многофункциональный белок, играющий роль в сборке вирионов (15), перемещении от клетки к клетке (7) и регуляции вирусной трансляции (2). Кроме того, сообщалось, что CP регулирует репликацию РНК в других вирусах растений. Например, репликация РНК вируса мозаики люцерны (AMV) сильно стимулировалась при низких концентрациях CP, но постепенно снижалась при более высоких концентрациях (9).В анализе протопластов мы обнаружили, что делеция CP в BaMV значительно снижает накопление геномной РНК. В настоящее время неизвестно, как ЦП влияет на накопление РНК. Возможно, он играет роль, аналогичную роли AMV CP в активации репликации РНК. С другой стороны, присутствие CP может защищать РНК от деградации РНКазы, что приводит к увеличению накопления РНК.

Понимание механизма, лежащего в основе требования CP для перемещения потексвирусов, является важным вопросом. В этом исследовании было установлено, что BaMV CP взаимодействует с вирусным HLD.Мутации A209G и N210S на CP снижали аффинность взаимодействия и ограничивали перемещение вируса от клетки к клетке; однако функция CP в связывании РНК и инкапсидации генома оставалась неизменной. Этот результат согласуется с предыдущим представлением о том, что С-концевая область CP PVX играет роль в перемещении вируса независимо от инкапсидации (6). Важность взаимодействия HLD-CP в движении BaMV предполагает, что белок репликации BaMV включен в инфекционный объект, который перемещается к плазмодесмам и через них.Весьма вероятно, что инфекционный объект представляет собой комплекс РНП, включающий TGBp1, CP, РНК и белок репликации. Участие белка репликации TMV в комплекс вирусных перемещений было предложено на основании значительной разницы между временем, необходимым для распространения TMV от первично инокулированных клеток во вторичные клетки (т. Е. От 18 до 20 часов после инокуляции) и временем, необходимым для распространения от вторичный по отношению к третичным клеткам (от 2 до 4 часов) (13). Такое расположение позволяет TMV немедленно реплицироваться, как только он откладывается в соседней клетке.С тем же аргументом привлечение белка репликации BaMV в комплекс RNP позволит вирусу быстро повторно инициировать репликацию во вновь пораженных клетках. Вмешательство во взаимодействие CP-HLD с FoMV также лишило вирус способности двигаться, подразумевая, что рекрутирование белка репликации в комплекс движения вируса может быть общей особенностью потексвирусов.

HLD белка репликации BaMV предпочтительно связывает структуру, подобную клеверному листу, в 3'-UTR РНК BaMV (4).Если включение белка репликации вируса в комплекс движения необходимо для эффективного распространения BaMV в растении, почему взаимодействия между HLD и вирусной РНК недостаточно для выполнения этой работы? Уровень экспрессии CP в подавляющем большинстве случаев больше, чем уровень экспрессии белка репликации в то время, когда вирус перемещается. Поэтому мы предполагаем, что обилие CP будет мешать взаимодействию между белком репликации и РНК. Чтобы преодолеть эту ситуацию, вирус вызывает перенос своего белка репликации в двигательном комплексе посредством связывания CP с HLD.Как только комплекс откладывается в соседних клетках, CP удаляется из вирусной РНК с помощью еще неизвестного механизма, и белок репликации может немедленно начать репликацию вирусной РНК.

Вирус мозаики бамбука - обзор

2.1 Элементы вирусной РНК

Геномы вирусной РНК как PVX, так и вируса мозаики бамбука (BaMV) включают особые последовательности и структуры в нетранслируемой области (NTR), которые функционируют как цис -активные элементы для репликации вирусной РНК.Как резюмировано в предыдущей обзорной статье Verchot-Lubicz, Ye, and Bamunusinghe (2007), три структуры стебель-петля РНК (5'SL1, 5'SL2 и 5'SL3), первый из пяти повторяющихся элементов последовательности ACCA, и последовательность GAAA в структурах 5'SL1 и 5'SL2 в 5'NTR геномной РНК (гРНК) PVX - все они необходимы для репликации вирусной РНК (Kim & Hemenway, 1996; Kwon & Kim, 2006; Miller, Kim, & Hemenway, 1999; Miller, Plante, Kim, Brown, & Hemenway, 1998; Park, Kwon, Choi, Hemenway, & Kim, 2008; рис.3.1B). 5'SL1, в частности, важен для трансляции PVX, репликации вирусной РНК и инициации сборки вириона PVX (Kim & Hemenway, 1997; Kwon & Kim, 2006). Взаимодействия между консервативной октануклеотидной последовательностью (5'-AACUAAAC-3 ') и комплементарной консервативной октануклеотидной последовательностью (5'-GUUAAGUU-3'), расположенной в субгеномных (sg) промоторных областях TGB и CP, необходимы для sgRNA и накопление плюс-цепи гРНК (Hu, Pillai-Nair, & Hemenway, 2007; Kim & Hemenway, 1997, 1999; рис.3.1A и B). Согласно недавнему сообщению (Park et al., 2008), область 5'NTR гРНК PVX содержит пять повторяющихся последовательностей ACCA. Делеция, добавление и сайт-направленная мутация 5'NTR, включая пять повторяющихся последовательностей ACCA, показали, что первый элемент ACCA (нуклеотиды 10–13) влияет на синтез плюс-цепи gRNA и sgRNA, но не минус-цепи РНК, четвертый элемент ACCA (нуклеотиды 29–32) слабо влияет на репликацию вируса, а мутации в пятом элементе ACCA (нуклеотиды 38–41) снижают репликацию вируса, нарушая структуру SL1 (Park et al., 2008).

3'NTR генома PVX содержит три структуры «стебель-петля» (3'SL1, 3'SL2 и 3'SL3) и поли (A) хвост (Pillai-Nair, Kim, & Hemenway, 2003; рис. 3.1C). Две перекрывающиеся последовательности (т.е. 5'-UAUAAA-3 'и 5'-AAUAAA-3', названные NUE1 и NUE2 соответственно), присутствующие в 3'SL1, важны для синтеза плюс-цепи гРНК и полиаденилирования (Pillai-Nair и др., 2003). Богатая U последовательность (5'-UAUUUUCU-3 ') в 3'SL2 влияет на накопление минус-цепи РНК и требуется для связывания с белками-хозяевами (Pillai-Nair et al., 2003; Sriskanda, Pruss, Ge, & Vance, 1996). Гексануклеотид (5'-ACAUAA-3 'в 3'SL3) и внутренние октануклеотидные последовательности (5-GUUAAGUU-3', расположенные в промоторных областях sg TGB и CP) важны для синтеза минус-цепи РНК (Hu и др., 2007).

Подобно PVX, BaMV содержит элементы РНК в 5 'и 3'NTR вирусной гРНК, которые необходимы для репликации вируса. Некоторые штаммы BaMV связаны со сателлитными РНК (сатРНК), которые представляют собой линейные молекулы РНК длиной 836 нуклеотидов.К настоящему времени две сатРНК BaMV (satBaMV) хорошо изучены. Одним из них является BSL6, который снижает накопление РНК BaMV и ослабляет симптомы, вызванные BaMV, у коинфицированных растений. Другой - неинфекционная сатРНК, BSF4 (Hsu, Lee, Liu, & Liu, 1998). Как BaMV, так и его сатРНК имеют повторяющуюся последовательность 5'-GAAA (A) -3 'в 5'NTR и консервативную апикальную вторичную структуру «шпилька-петля» (AHSL) в длинном SL (LSL) и малом SL (SSL; Chen, Desprez, & Olsthoorn, 2010; Chen, Lin, et al., 2010).Эти два элемента важны тем, что они обеспечивают определенный интервал для инициации синтеза РНК с положительной цепью из матриц с отрицательной цепью (Chen, Desprez, et al., 2010; Chen et al., 2012; Chen, Lin, et al. ., 2010; Lin et al., 2005; Lin & Hsu, 1994). AHSL включает апикальную петлю, за которой следуют две внутренние петли (IL-I и IL-II), расположенные в верхней части LSL в области 5'NTR. IL-I и IL-II являются критическими элементами для репликации satBaMV (Annamalai, Hsu, Liu, Tsai, & Lin, 2003; Chen, Hsu, & Lin, 2007; Hsu et al., 2006). Эти элементы также являются ключевыми детерминантами для вмешательства в репликацию BaMV с помощью satBaMV (Hsu et al., 2006; Figs. 3.1D и 3.2A).

Рисунок 3.2. цис--действующих элементов 5 'и 3'NTR областей satBaMV. (A) Элементы области 5'NTR в двух типах satBaMV (BSF4-5'NTR и BSL6-5'NTR). Открытые треугольники (Δ) указывают последовательности повторов GAAA (A) в областях 5'NTR. Консервативные AHSL, содержащие две внутренние петли (IL-I и IL-II) в областях 5'NRT BaMV и satBaMV, обозначены прямоугольниками.Три или четыре маленькие петли ствола (SSL) и одна длинная петля ствола (LSL) присутствуют в областях 5'NTR. (B) Элементы в области 3'NTR satBaMV. Открытый треугольник (Δ) указывает сигнал полиаденилирования (5'-AAUAAA-3 '). Последовательность 5'-ACCUAA-3 ', расположенная в SLC в 3'NTR, является гексануклеотидным элементом.

3'NTR гРНК BaMV содержит три вторичные структуры (SLA, SLB и SLC) в домене ABC, подобном клеверному листу, домену D (SLD) и домену третичного псевдоузла (SLE; Cheng & Tsai, 1999; Tsai et al., 1999). Домены SLB, SLC, SLD и SLE важны для репликации BaMV, тогда как элемент SLA играет роль в перемещении BaMV на большие расстояния (Chen, Meng, Hsu, & Tsai, 2003; Huang, Huang, Meng, Hsu , & Цай, 2001). Подобно вторичным структурам BaMV в 3'NTR, satBaMVs имеют сходные структурные домены, за исключением SLA и SLD, в 3'NTR. Однако эти структуры сатРНК не функционируют таким же образом, как сходные структуры в BaMV (Huang et al., 2009).

Первый отчет о полных геномных последовательностях индонезийских изолятов вируса мозаики бамбука и обнаружении событий геномной рекомбинации

  • Adams MJ, Candresse T, Hammond J, Kreuze JF, Martelli GP, Namba S, Pearson MN, Ryu KH, Vaira AM (2011) Семейство Alphaflexiviridae .В: King AMQ, Adams MJ, Carstens EB, Lefkowitz EJ (eds) Таксономия вирусов: девятый отчет Международного комитета по таксономии вирусов. Elsevier / Academic Press, Лондон, стр. 904–919

    Google Scholar

  • Angell SM, Davies C, Baulcombe DC (1996) Перемещение от клетки к клетке картофельного вируса X связано с изменением предела исключения размеров плазмодесм в трихомных клетках Nicotiana clevelandii . Вирусология 216: 197–201

    Статья PubMed CAS Google Scholar

  • Awasthi P, Ram R, Zaidi AA, Prakash O, Sood A, Hallan V (2015) Молекулярные доказательства того, что бамбук является новым естественным хозяином Вирус некротической ржавой крапчатости вишни .Для Pathol 45: 42–50

    Артикул Google Scholar

  • Bhardwaj P, Awasthi P, Prakash O, Sood A, Zaidi AA, Hallan V (2017) Молекулярное свидетельство естественного появления вируса бороздки стебля яблони на бамбуке. Деревья 31: 367–375

    Статья CAS Google Scholar

  • Brunt AA, Crabtree K, Dallwitz MJ, Gibbs AJ, Watson L, Zurcher EJ (1996) Вирусы растений онлайн: описания и списки из базы данных VIDE.http://sdb.im.ac.cn/vide/refs.htm. По состоянию на 1 июня 2018 г.

  • Chiu WW, Hsu YH, Tsai CH (2002) Анализ специфичности консервативных гексануклеотидов для репликации РНК потексвируса бамбуковой мозаики. Virus Res 83: 159–167

    Статья PubMed CAS Google Scholar

  • Elliott MS, Zettler FW (1996) Вирус бамбуковой мозаики обнаружен в декоративных видах бамбука во Флориде. Proc Fla State Hort Soc 109: 24–25

    Google Scholar

  • Фейсал Б., Кинасих П. (2010) Эксперименты с бамбуком как архитектурной и социокультурной особенностью.Пример из практики: бамбуковый дом в эко-песантрене Даарут Таухийд, Западный Бандунг, Западная Ява, Индонезия. В: Soemardi AR, Wibowo AS, Damajani RRD, Voragen R (eds) Arte-Polis 3 Международная конференция. Архитектурная программа, Бандунг, стр. 333–342

    Google Scholar

  • Howard AR, Heppler ML, Ju HJ, Krishnamurthy K, Payton ME, Verchot-Lubicz J (2004) Вирус X картофеля TGBp1 индуцирует стробирование плазмодесмат и перемещается между клетками в нескольких видах хозяев, тогда как CP перемещается только в N .benthamiana листьев. Вирусология 328: 185–197

    Статья PubMed CAS Google Scholar

  • Isagi Y, Kawahara T, Kamo K, Ito H (1997) Чистое производство и круговорот углерода в бамбуковом стенде Phyllostachys pubescens . Завод Ecol 130: 41–52

    Артикул Google Scholar

  • Krishnamurthy K, Heppler M, Mitra R, Blancaflor E, Payton M, Nelson RS, Verchot-Lubicz J (2003) Белок Potato virus X TGBp3 связывается с сетью ER для перемещения вируса от клетки к клетке .Вирусология 309: 135–151

    Статья PubMed CAS Google Scholar

  • Кумар С., Стечер Г., Тамура К. (2016) MEGA7: Анализ молекулярной эволюционной генетики версии 7.0 для больших наборов данных. Mol Biol Evol 33: 1870–1874

    Артикул PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • Lan P, Yeh WB, Tsai CW, Lin NS (2010) Уникальный богатый глицином мотив в N-концевой области белка оболочки вируса мозаики бамбука необходим для выражения симптома.Mol Plant Microbe Interact 23: 903–914

    Статья PubMed CAS Google Scholar

  • Li YI, Chen YJ, Hsu YH, Meng M (2001a) Характеристика AdoMet-зависимой активности гуанилилтрансферазы, которая связана с N-концом репликазы вируса мозаики бамбука . J Virol 75: 782–788

    Статья PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

  • Li YI, Shih TW, Hsu YH, Han YT, Huang YL, Meng M (2001b) Геликазоподобный домен репликазы потексвируса растений участвует в формировании 5'-кэп-структуры РНК, проявляя активность 5'-трифосфатазы РНК .J Virol 75: 12114–12120

    Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

  • Лин К.Ю., Лин Н.С. (2017) Мешающие сателлитные РНК вируса мозаики бамбука . Front Microbiol 8: 787

    Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Lin MT, Kitajima EW, Cupertino FP, Costa CL (1977) Частичная очистка и некоторые свойства Вирус мозаики бамбука .Фитопатология 67: 1439–1443

    Статья Google Scholar

  • Lin NS, Chai Y, Huang TY (1993) Заболеваемость потексвирусом бамбуковой мозаики на Тайване. Plant Dis 77: 448–450

    Артикул Google Scholar

  • Lin KY, Hsu YH, Chen HC, Lin NS (2013) Трансгенная устойчивость к вирусу мозаики бамбука путем экспрессии мешающей сателлитной РНК. Mol Plant Pathol 14: 693–707

    Статья PubMed CAS Google Scholar

  • Lin W, Gao F, Yang W, Yu C, Zhang J, Chen L, Wu Z, Hsu YH, Xie L (2016) Молекулярная характеристика и обнаружение рекомбинантного изолята вируса мозаики бамбука из Китая.Arch Virol 161: 1091–1094

    Артикул PubMed CAS Google Scholar

  • Lin W, Wang L, Yan W, Chen L, Chen H, Yang W, Guo M, Wu Z, Yang L, Xie L (2017) Идентификация и характеристика вируса мозаики бамбука изолятов из встречающихся в природе Коинфицирование в Bambusa xiashanensis . Arch Virol 162: 1335–1339

    Артикул PubMed CAS Google Scholar

  • Liu JS, Hsu YH, Huang TY, Lin NS (1997) Молекулярная эволюция и филогения сателлитной РНК, связанной с потексвирусом бамбуковой мозаики.J Mol Evol 44: 207–213

    Статья PubMed CAS Google Scholar

  • Lole KS, Bollinger RC, Paranjape RS, Gadkari D, Kulkarni SS, Novak NG, Ingersoll R, Sheppard HW, Ray SC (1999) Полноразмерные геномы вируса иммунодефицита человека типа 1 из сероконвертеров подтипа C в Индии , с признаками межподтиповой рекомбинации. J Virol 73: 152–160

    PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

  • Мартин Д.П., Мюррелл Б., Голден М., Хосал А., Мухир Б. (2015) RDP4: обнаружение и анализ паттернов рекомбинации в геномах вирусов.Virus Evol 1: vev003

    Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Mitra R, Krishnamurthy K, Blancaflor E, Payton M, Nelson RS, Verchot-Lubicz J (2003) Связь белка Potato virus X TGBp2 с эндоплазматическим ретикулумом играет роль, но недостаточна для вирусной клетки. -клеточное движение. Вирусология 312: 35–48

    Статья PubMed CAS Google Scholar

  • Thomas JE, Dodman RL (1999) Первая запись о потексвирусе бамбуковой мозаики из Австралии.Aust Plant Pathol 28: 337

    Артикул Google Scholar

  • Tseng YH, Hsu HT, Chou YL, Hu CC, Lin NS, Hsu YH, Chang BY (2009) Два консервативных остатка цистеина тройного белка генного блока 2 имеют решающее значение как для межклеточного, так и для системного взаимодействия. движение Вирус бамбуковой мозаики . Mol Plant Microbe Interact 22: 1379–1388

    Статья PubMed CAS Google Scholar

  • Voinnet O, Lederer C, Baulcombe DC (2000) Белок вирусного движения предотвращает распространение сигнала сайленсинга гена в Nicotiana benthamiana .Cell 103: 157–167

    Статья PubMed CAS Google Scholar

  • Wang IN, Hu CC, Lee CW, Yen SM, Yeh WB, Hsu YH, Lin NS (2014) Генетическое разнообразие и эволюция спутниковых РНК, связанных с вирусом мозаики бамбука . PLoS One 9: e108015

    Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

  • Индукция защитного иммунитета у свиней рекомбинантным вирусом мозаики бамбука, экспрессирующим эпитопы вируса ящура | BMC Biotechnology

  • 1.

    Woolhouse M, Chase-Topping M, Haydon D, Friar J, Matthews L, Hughes G, Shaw D, Wilesmith J, Donaldson A, Cornell S, Keeling M, Grenfell B: Epidemiology. Ящур под контролем в Великобритании. Природа. 2001, 411 (6835): 258-259. 10.1038 / 35077149.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 2.

    Barteling SJ, Vreeswijk J: Разработки вакцин против ящура. Вакцина. 1991, 9 (2): 75-88. 10.1016 / 0264-410X (91) -4.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 3.

    Браун Ф: Новые подходы к вакцинации против ящура. Вакцина. 1992, 10 (14): 1022-1026. 10.1016 / 0264-410Х (92) -В.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 4.

    Доэл TR: вакцины против ящура. Virus Res. 2003, 91 (1): 81-99. 10.1016 / S0168-1702 (02) 00261-7.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 5.

    Belsham GJ: Отличительные особенности вируса ящура, члена семейства пикорнавирусов; аспекты синтеза вирусного белка, процессинга и структуры белка. Prog Biophys Mol Biol. 1993, 60 (3): 241-260. 10.1016 / 0079-6107 (93) -Д.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 6.

    Саиз М., Нуньес Дж. И., Хименес-Клаверо М.А., Барановски Е., Собрино Ф .: Вирус ящура: биология и перспективы борьбы с болезнями.Микробы заражают. 2002, 4 (11): 1183-1192. 10.1016 / S1286-4579 (02) 01644-1.

    Артикул Google Scholar

  • 7.

    Доминго Э., Барановски Э., Эскармис С., Собрино Ф .: Вирус ящура. Comp Immunol Microbiol Infect Dis. 2002, 25 (5-6): 297-308. 10.1016 / S0147-9571 (02) 00027-9.

    Артикул Google Scholar

  • 8.

    Вольпина О.М., Суровой А.Ю., Жмак М.Н., Куприянова М.А., Короев Д.О., Чепуркин А.В., Толокнов А.С., Иванов В.Т .: Пептидная конструкция, содержащая В-клеточные и Т-клеточные эпитопы ящура. вирусный белок VP1 индуцирует эффективную противовирусную защиту.Вакцина. 1999, 17 (6): 577-584. 10.1016 / S0264-410X (98) 00236-9.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 9.

    Wang CY, Chang TY, Walfield AM, Ye J, Shen M, Chen SP, Li MC, Lin YL, Jong MH, Yang PC, Chyr N, Kramer E, Brown F: эффективная синтетическая пептидная вакцина для ящур у свиней. Вакцина. 2002, 20 (19-20): 2603-2610. 10.1016 / S0264-410X (02) 00148-2.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 10.

    Грубман MJ, Бакст B: Ящур. Clin Microbiol Rev.2004, 17 (2): 465-493. 10.1128 / CMR.17.2.465-493.2004.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 11.

    Oliveira E, Jimenez-Clavero MA, Nunez JI, Sobrino F, Andreu D: Анализ иммунного ответа против библиотек микотопных пептидов из основного антигенного сайта вируса ящура. Вакцина. 2005, 23 (20): 2647-2657. 10.1016 / j.vaccine.2004.10.041.

    Артикул Google Scholar

  • 12.

    Baxt B, Morgan DO, Робертсон BH, Timpone CA: Эпитопы на внешнем капсидном белке VP1 вируса ящура, участвующем в нейтрализации и прикреплении клеток. J Virol. 1984, 51 (2): 298-305.

    CAS Google Scholar

  • 13.

    Peng JM, Liang SM, Liang CM: VP1 вируса ящура индуцирует апоптоз через сигнальный путь Akt. J Biol Chem. 2004, 279 (50): 52168-52174. 10.1074 / jbc.M403686200.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 14.

    Usha R, Rohll JB, Spall VE, Shanks M, Maule AJ, Johnson JE, Lomonossoff GP: Экспрессия антигенного сайта вируса животных на поверхности частицы вируса растений. Вирусология. 1993, 197 (1): 366-374. 10.1006 / viro.1993.1598.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 15.

    Вигдоровиц А., Перес Филгейра Д.М., Робертсон Н., Каррилло С., Садир А.М., Моррис Т.Дж., Борка М.В.: Защита мышей от заражения вирусом ящура (ящур) путем иммунизации экстрактами листьев инфицированных растений с рекомбинантным вирусом табачной мозаики, экспрессирующим структурный белок VP1 ящура.Вирусология. 1999, 264 (1): 85-91. 10.1006 / viro.1999.9923.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 16.

    Wu L, Jiang L, Zhou Z, Fan J, Zhang Q, Zhu H, Han Q, Xu Z: Экспрессия эпитопов вируса ящура в табаке вектором на основе вируса табачной мозаики . Вакцина. 2003, 21 (27-30): 4390-4398. 10.1016 / S0264-410X (03) 00428-6.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 17.

    Ahlquist P, Schwartz M, Chen J, Kushner D, Hao L, Dye BT: детерминанты вируса и хозяина репликации и экспрессии вектора РНК-вируса. Вакцина. 2005, 23 (15): 1784-1787. 10.1016 / j.vaccine.2004.11.005.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 18.

    Бреннан Ф.Р., Джонс Т.Д., Лонгстафф М., Чепмен С., Беллаби Т., Смит Х., Сюй Ф., Гамильтон В.Д., Флок Д.И.: Иммуногенность пептидов, полученных из фибронектин-связывающего белка S. aureus, выраженного на двух различные вирусы растений.Вакцина. 1999, 17 (15-16): 1846-1857. 10.1016 / S0264-410X (98) 00485-X.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 19.

    Marusic C, Rizza P, Lattanzi L, Mancini C, Spada M, Belardelli F, Benvenuto E, Capone I: частицы химерного вируса растений в качестве иммуногенов для индукции иммунных ответов мыши и человека против вируса иммунодефицита человека 1 типа. J Virol. 2001, 75 (18): 8434-8439. 10.1128 / JVI.75.18.8434-8439.2001.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 20.

    Uhde K, Fischer R, Commandeur U: Экспрессия множественных чужеродных эпитопов, представленных как синтетические антигены на поверхности X-частиц вируса картофеля. Arch Virol. 2005, 150 (2): 327-340. 10.1007 / s00705-004-0402-z.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 21.

    Marconi G, Albertini E, Barone P, De Marchis F, Lico C, Marusic C, Rutili D, Veronesi F, Porceddu A: Производство двух пептидов вируса классической чумы свиней (CSFV) E2 гликопротеин, слитый с белком оболочки вируса X картофеля.BMC Biotechnol. 2006, 6: 29-10.1186 / 1472-6750-6-29.

    Артикул Google Scholar

  • 22.

    Паркер Л., Кендалл А., Стаббс Г.: Поверхностные характеристики вируса Х картофеля по дифракции волокон. Вирусология. 2002, 300 (2): 291-295. 10.1006 / viro.2002.1483.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 23.

    Hsu YH, Lin NS: Бамбуковая мозаика. Вирусы и вирусные заболевания Poaceae, Gramineae.Отредактировано: Lapierre H, Signoret PA. 2004, Париж, 723-724.

    Google Scholar

  • 24.

    Lin NS, Lin BY, Lo NW, Hu CC, Chow TY, Hsu YH: нуклеотидная последовательность геномной РНК потексвируса бамбуковой мозаики. J Gen Virol. 1994, 75 (Pt 9): 2513-2518.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 25.

    Янг С.С., Лю Дж. С., Лин С. П., С. Л. Н.: Нуклеотидная последовательность и филогенетический анализ изолята потексвируса бамбуковой мозаики из обычного бамбука (Bambusa vulgaris McClure).Bot Bull Acad Sin. 1997, 38: 77-84.

    CAS Google Scholar

  • 26.

    Li YI, Cheng YM, Huang YL, Tsai CH, Hsu YH, Meng M: Идентификация и характеристика экспрессируемой Escherichia coli РНК-зависимой РНК-полимеразы вируса мозаики бамбука. J Virol. 1998, 72 (12): 10093-10099.

    CAS Google Scholar

  • 27.

    Lin MK, Chang BY, Liao JT, Lin NS, Hsu YH: Arg-16 и Arg-21 в N-концевой области белка 1 тройного генного блока вируса мозаики бамбука необходимы для вирусное движение.J Gen Virol. 2004, 85 (Pt 1): 251-259. 10.1099 / vir.0.19442-0.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 28.

    Wang JH, Liang CM, Peng JM, Shieh JJ, Jong MH, Lin YL, Sieber M, Liang SM: индукция иммунитета у свиней с помощью очищенного рекомбинантного VP1 вируса ящура. Вакцина. 2003, 21 (25-26): 3721-3729. 10.1016 / S0264-410X (03) 00363-3.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 29.

    Lin NS, Chen CC: Ассоциация вируса бамбуковой мозаики (BaMV) и BaMV-специфических электронно-плотных кристаллических тел с хлоропластами. Фитопатология. 1991, 81: 1551-1555. 10.1094 / Фито-81-1551.

    Артикул Google Scholar

  • 30.

    Lin NS: Комплексы золото-IgG улучшают обнаружение и идентификацию вирусов в препаратах для окунания листьев. J Virol Methods. 1984, 8 (3): 181-190. 10.1016 / 0166-0934 (84)

    -0.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 31.

    Shieh JJ, Liang CM, Chen CY, Lee F, Jong MH, Lai SS, Liang SM: Повышение иммунитета к вирусу ящура путем прайминга ДНК и иммунизации с усилением протеина. Вакцина. 2001, 19 (28-29): 4002-4010. 10.1016 / S0264-410X (01) 00114-1.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 32.

    [http://www.oie.int/eng/normes/mmanual/a_00024.htm] МЭБ, Ящур, в: Руководство по стандартам диагностических тестов и вакцин 2000, ГЛАВА 2.1.1. 2002, Всемирная организация здравоохранения животных (МЭБ)

  • 33.

    Соренсен К.Дж., Мэдсен К.Г., Мадсен Э.С., Сальт Дж.С., Нкинди Дж., Маккей Д.К.: Дифференциация инфекции от вакцинации при ящуре путем выявления антител к неструктурным белкам 3D, 3AB и 3ABC в ELISA с использованием антигенов, экспрессируемых в бакуловирусе. Arch Virol. 1998, 143 (8): 1461-1476. 10.1007 / s007050050390.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 34.

    Jiang L, Li Q, Li M, Zhou Z, Wu L, Fan J, Zhang Q, Zhu H, Xu Z: модифицированный вектор на основе TMV способствует экспрессии более длинных чужеродных эпитопов в табаке. Вакцина. 2006, 24 (2): 109-115. 10.1016 / j.vaccine.2005.09.060.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 35.

    Meloen RH, Casal JI, Dalsgaard K, Langeveld JP: Синтетические пептидные вакцины: наконец-то успех. Вакцина. 1995, 13 (10): 885-886. 10.1016 / 0264-410Х (95) 00031-У.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 36.

    Пьятти П.Г., Беринштейн А., Лопес О.Дж., Борка М.В., Фернандес Ф., Шудель А.А., Садир А.М.: Сравнение иммунного ответа, вызванного инфекционным и инактивированным вирусом ящура у мышей. J Gen Virol. 1991, 72 (Pt 7): 1691-1694.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 37.

    Parida S, Oh Y, Reid SM, Cox SJ, Statham RJ, Mahapatra M, Anderson J, Barnett PV, Charleston B, Paton DJ: Производство интерферона-гамма in vitro из цельной крови стопы и- вакцинированный вирусом ящура и инфицированный крупный рогатый скот после инкубации с инактивированным ящуром.Вакцина. 2006, 24 (7): 964-969. 10.1016 / j.vaccine.2005.08.108.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 38.

    Zamorano P, Wigdorovitz A, Chaher MT, Fernandez FM, Carrillo C, Marcovecchio FE, Sadir AM, Borca MV: Распознавание В- и Т-клеточных эпитопов скотом, иммунизированным синтетическим пептидом, содержащим основной иммуногенный сайт VP1 FMDV 01 Кампос. Вирусология. 1994, 201 (2): 383-387. 10.1006 / viro.1994.1305.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 39.

    Zamorano P, Wigdorovitz A, Perez-Filgueira M, Carrillo C, Escribano JM, Sadir AM, Borca MV: 10-аминокислотная линейная последовательность VP1 вируса ящура, содержащая B- и T-клеточные эпитопы, индуцирует защиту у мышей. Вирусология. 1995, 212 (2): 614-621. 10.1006 / viro.1995.1519.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 40.

    Заморано П.И., Вигдоровиц А., Перес Филгейра Д.М., Эскрибано Дж.М., Садир А.М., Борка М.В.: индукция Т- и В-клеточных ответов против вируса ящура у крупного рогатого скота, иммунизированного пептидом, представляющим десять аминокислот VP1 .Вакцина. 1998, 16 (6): 558-563. 10.1016 / S0264-410X (97) 00244-2.

    Артикул CAS Google Scholar

  • Бамбуковая мозаика | Новый декоративный материал, заменяющий камень - керамика - стекло

    После многих лет исследований и разработок мы успешно разработали бамбуковую мозаику, которая представляет собой новую замену камню, керамике, стеклу и металлическим материалам, расширяя использование мозаики во многих областях. Мы занимаемся исследованиями и разработками, производством и маркетингом бамбуковых полов с 2001 года, и у нас есть богатый опыт борьбы с бамбуком без сахара, сухого бамбука и борьбы с вредителями, это делает бамбук технически более стабильным и уникальным, эти технологии широко распространены. Используется в бамбуковой мозаике в процессе исследований и разработок, а производственный процесс является адекватным для обеспечения качества продукта.

    Бамбуковая мозаика производится из высококачественного бамбука насыщенного цвета и текстуры, обезжиренной сухой механической обработки, шлифовки, полировки, антикоррозийной обработки, коллажа и других процессов обработки. Бамбуковая мозаика изящна, глубокого и яркого цвета, фактуры, нежна и внимательна. Бамбуковая мозаика - это энергосбережение, новый декор, хорошая стабильность размеров, удобство конструкции и монтажа.

    На протяжении многих лет область украшения высокого уровня была занята камнем, керамикой, стеклом, металлической мозаикой, их богатыми цветами, естественными текстурами, а также изменениями огранки, возникающими в результате ассоциации, дающими неограниченное наслаждение красотой, но недостатком является что у них общий дефект; «жесткий» и «полный» и не может дать людям ощущение мягкости и тепла, не может использоваться во многих местах, таких как гостиная, детская комната, клубы для пожилых людей, женские места.

    Бамбуковая мозаика использует бамбук в качестве сырья, резки, снятия сахара, высокотемпературного автоклава, изготовленного из сетчатой ​​ткани, адгезивных процессов новой мозаики.

    Особенности бамбуковой мозаики:

    Бамбуковые материалы дарят людям ощущение мягкости и тепла, они действительно отличаются от камня, стекла и металла, которые заставляют людей чувствовать холод.

    Самобытная текстура и цвет натурального бамбука.

    Расширить использование бамбукового декоративного материала, лучше приспособленного к высокой влажности и особым сухим местам

    Хорошая изоляция, энергосбережение

    Арт.: BM001 - NC

    Размер плитки: 300 x 300 x 8 мм

    Размер чипа: 48 x 48 мм

    Поверхность: горизонтальная

    Цвет: карбонизированный

    Номер позиции: BM002 - SN

    Размер плитки: 300 x 300 x 8 мм

    Размер чипа: 48 x 48 мм

    Поверхность: вертикальная

    Цвет: натуральный

    Номер позиции: BM003 - SC

    Размер плитки: 300 x 300 x 8 мм

    Размер чипа: 48 x 48 мм

    Поверхность: Пряди

    Цвет: Карбонизированный

    Арт.: BM004 - SZ

    Размер плитки: 300 x 300 x 8 мм

    Размер чипа: 48 x 48 мм

    Поверхность: Пряди

    Цвет: Tiger

    Купить Химачал Черный Бамбук 6x18 | Кварцитовая мозаика

    В Wallandtile плитка - это наша страсть. Обладая более чем 40-летним опытом и 18+ складами в 48 штатах, мы создали альянсы и партнерские отношения со многими поставщиками по всему миру. У нас есть доступ к последнему выбору поддонов, лучшему качеству натурального камня, керамогранита, мозаичной плитки, брусчатки, бортов бассейнов, камней для бухгалтерских книг и многому другому, импортируемому из более чем 30 стран. WALLANDTILE предлагает более 8000 наименований товаров, включая натуральный камень (гранит, мрамор, травертин, сланец, известняк, кварцит и песчаник), фарфор, керамику, стеклянную плитку, деревянную мозаику и металлическую мозаику. Наш девиз ясен: покупай, строй, люби. Поддерживайте низкие цены, низкую прибыль и доставку к вашему порогу в кратчайшие сроки.

    Мы понимаем, что покупательские привычки потребителей в США меняются. Мы понимаем, внедряем и действуем в соответствии с новейшими продуктами, задающими тенденции.Покупатели из США не хотят сильно завышать розничные цены в модных выставочных залах. Мы это понимаем. Интернет-продажи набирают обороты, поэтому мы прислушались и начали действовать.

    Наша продукция варьируется от кухонной плитки, напольных покрытий для ванных комнат, акцентного камня для стен, мозаичной плитки для фартуков, камня для каминов в интерьере до брусчатки, бортов бассейнов, булыжника, брусчатки и многого другого для наружных жилых помещений. Мы также помогаем вам визуализировать ваше пространство на нашем веб-сайте, прежде чем заказывать товары. Эта удивительная технология помогла нашим клиентам спроектировать пространство для переоборудования прямо здесь, на нашем веб-сайте.Если вы строите новый дом, мы можем помочь вам оценить ваши планы. Для крупных жилых или коммерческих рабочих мест, пожалуйста, позвоните, чтобы получить прямые низкие цены. Для прямых заказов на загрузку контейнеров наши самые низкие цены просто потрясающие. Спросите нас о проектах, которые мы завершили, включая аэропорты, больницы, отели и курорты, а также о более чем миллионе довольных домовладельцев. Наша торговая сеть обслуживает архитекторов, строителей, дизайнеров, производителей, дилеров по ландшафтному дизайну, розничных магазинов напольных покрытий, индустрии гостеприимства и домовладельцев.Наши хорошо обученные и знающие продавцы могут предоставить вам необходимые инструменты и информацию, необходимые для продажи натурального камня.

    Мы по-прежнему стремимся предоставлять нашим клиентам продукцию самого высокого качества по более низким ценам. Мы обещаем предложить «самые низкие цены на напольную плитку и мозаику» с лучшей политикой возврата и без каких-либо договоренностей, Wallandtile.com будет соответствовать или превзойти ЛЮБУЮ цену конкурентов.

    12 "x 12" Бамбуковые палочки Мраморная мозаика

    Восточно-белый и бежевый травертин выложены вертикальными и горизонтальными рядами, чтобы создать эту простую, но классически шикарную бамбуковую мозаику.Камни разрезают на прямоугольные части разного размера и укладывают в обоих направлениях, чтобы создать визуально привлекательный узор на сетке. Эта бамбуковая мозаика придает стильный вид своему окружению, сочетая в себе яркий белый мрамор и бежевые кусочки травертина. Цветовая гармония внутри плитки достаточно универсальна, чтобы вписаться в самые разные дизайнерские настройки и создать вневременной декор. Эта плитка из смеси мрамора и травертина может стать отличным фартуком на кухне практически любого цвета. Эта бамбуковая керамическая плитка также является хорошим выбором для акцентной полосы, которая может проходить через ваш фартук в сочетании с другими материалами и цветами.Плитка Bamboo Sticks может укладываться практически на любую поверхность, включая, помимо прочего, внешние и внутренние стены, полы, камин и красивые стены.

    * Естественные прожилки и вариации встречаются на всех каменных плитках, включая восточно-белый мрамор и травертин, и могут привести к различию внешнего вида между фотографиями и изделиями. Если вы хотите измерить различия между плитками перед заказом, пожалуйста, «Запросите фотографии текущей партии» выше, чтобы просмотреть материал перед отправкой.

    Продавец : лист

    Размер листа : 12 "x 12"

    Материал : Восточно-белый / бежевый травертин

    Цвет : бежевый / белый

    Поверхность : полированная

    Толщина : 3/8 дюйма

    Площадь использования:

    • Стена: внутри, снаружи
    • Этаж: Жилой, Коммерческий
    • Душевая стенка: есть
    • Душевая кабина: Есть
    • Парилка: No
    • Бассейн: №

    Информация о упаковке:

    • шт. В коробке: 5
    • кв.Ft. в ящике: 5.00
    • Лист или Кв. Вес FT: 4,4 фунта
    * Плитка из натурального камня может отличаться по цвету, отделке, прочности и сопротивлению скольжению. Белый мрамор может содержать естественные отложения железа, которые могут привести к обесцвечиванию при использовании во влажных или сырых местах или при воздействии агрессивных химических чистящих средств.