Minimag 161 схема: Ищу схему от полуавтомата MINIMAG-161

Содержание

Минимаг 161 схема - 5lx3sy5c.batcave.net

Скачать минимаг 161 схема txt

161 сварочного аппарата минимаг Cхемы сварочных инверторов. Подробности файла TELWIN Tecnica_ Схема TELWIN Минимаг Загрузил(а): Никола-борода Дата: Размер: 1,45 MB Скачано раз: Скачать схему TELWIN Tecnica_ Рейтинг: 6. Электросхема сварочного аппарата минимаг Принципиальная схема сварочного инвертора.

Принципиальная схема сварочного инвертора может несколько 161, но все они характеризуются минимаг и компактностью. Электросхема сварочного аппарата минимаг Схема и особенности работы сварочного инвертора.

Сотни гигабайт электрических схем, сервисных мануалов, прошивок, даташитов, справочной литературы и полезных программ. Полный и абсолютно бесплатный доступ к загрузке любых файлов.  Подробности файла TELWIN Tecnica_ Схема TELWIN Tecnica_ Загрузил(а): Никола-борода Дата: Размер: 1,45 MB Скачано раз: Скачать схему TELWIN Tecnica_ Рейтинг: 6.

1. Схема металлоискателя на TDA Решил наладить сбор простеньких МД по этой схеме. Уже пришли микросхемы из Китая, но не ясно от куда начинается отсчет по выводам. Ключа на них не вижу. Вот собственно ссылка на микросхемы которые заказал 5lx3sy5c.batcave.net 44fedEcXoh2 Так же скидываю фотки под схемой. Второй вопрос, можно ли будет запитать прибор от девяти вольтовой кроны, не от 3,7в как указанно в схеме?.

Добрый день всем! вчера мне попал в руки Prorab Форвард IGBT (за пиво). Состояние так себе, без кабелей вскрытый. с выпаянным уже сопротивлением R1. Остальные два R черные, но целые.После моей проверки было выявлено: отсутствие вышеуказанного сопротивления и сгоревшие силовые полевики, осталь. Ищу Схему Minimag Автор: Borodach, 9 ноября в Дайте схему!

Ответить в тему. Создать тему.  У друга сломался такой сварочный полуавтомат, если у кого есть, выручите пожалуйста схемой . minimag Цитата. Наверх. Электросхема сварочного аппарата минимаг Cхемы сварочных инверторов. Внимание!

Если вы хотите оставить запрос на поиск схемы.

EPUB, txt, fb2, djvu схема танка для детей

Схемы/Инструкции

Файл

Описание

Размер

prestige144. djvu

Принципиальная электрическая схема инверторного сварочного источника Prestige144, производства итальянской компании BLUEWELD.

507 Kb

sai200.djvu

Срисованная с оригинала принципиальная электрическая схема инверторного сварочного источника САИ 200, производства группы компаний ТСС.

383 Kb

inverter3200.djvu

Приципиальная электрическая схема инверторного сварочного источника Inverter 3200 TOP DC китайского производства.

318 Kb

deca_mos_168.djvu

Виды и приципиальная электрическая схема инверторного сварочного источника MOS 168, производства итальянской фирмы DECA.

383 Kb

B31-5A. gif

Приципиальная электрическая схема зарядного устройства B31-5A.

980 Kb

instructions.rar
service-doc.rar

Инструкции по настройке и схемы с описаниями на сварочные аппараты NEON ВД-161 и NEON ВД-201, производства ЗАО ЭлектроИнтел, Нижний Новгород.

1.11 Mb
605 Kb

telwin_140.pdf

Электрическая принципиальная схема на инверторный сварочный аппарат TELWIN-140, производства итальянской компании TELWIN.

48.2 Kb

Privod_EPU1-1.djvu

Паспорт на Электропривод унифицированный трёхфазный серии ЭПУ1...Д,М. Привод предназначен для регулирования и стабилизации скорости вращения двигателя постоянного тока в диапазоне до 1000 с постоянным моментом для однозонного исполнения, с ОС по скорости вращения и полным потоком возбуждения до номинальной скорости вращения и с уменьшением потока возбуждения выше номинальной для двухзонного исполнения.

2.82 Mb

mip200_300.pdf

Схема электрическая принципиальная малогабаритного источника питания типа МИП-200(250;300;250T;300T)У3, предназначенного для дуговой сварки.

353 Кb

vduch450.djvu

Схема силовой части инверторного сварочного источника ВДУЧ-350

194 Кb

ospz-2m.djvu

Инструкция по эксплуатации Осциллятора ОСПЗ-2М.

1.02 Mb

rks14.pdf

Паспорт и схема блока управления контактной сваркой РКС-14.

356 Kb

rus2004. djvu

Схема сварочного инвертора РУСЬ-2004,2005, нарисованная от руки во время ремонта.

114 Kb

mtr1201.djvu

Паспорт на машину контактной сварки типа МТР-1201 УХЛ. Машина контактной сварки предназначена для электрической контактной точечной сварки деталей из листовой низкоуглеродистой стали при повторно-кратковременном режиме.

211 Kb

rks502.djvu

Паспорт на регулятор контактной сварки РКС-502. Регулятор предназначен для комплектации контактных электросварочных машин и обеспечивает последовательность действия однофазных машин точечной контактной сварки. К сожалению в паспорте отсутствует принципиальная электрическая схема регулятора!

255 Kb

pa-107. zip

Неполная документация на п/а то-ли ПА-107, то-ли ПШ-107 или ПСШ-107. Буквы маркировки точно установить не удалось. П/а предназначен для сварки порошковой проволокой. Принципиальные схемы все есть, но монтажных схем и спецификаций элементов нет. Описание частично (%95) удалось восстановить.
Может у кого-то есть более полная версия документации ?

754 Kb

uza-150-80-y4.djvu

Паспорт, инструкция по эксплуатации, описание и принципиальная электрическая схема устройства зарядного автоматического типа УЗА-150-80-У4.

920 Kb

dc250_31.djvu

Описание, инструкция по эксплуатации и принципиальные схемы инверторного источника сварочного тока DC250.31, производства научно-производственного предприятия "Технотрон".

1.

23 Mb

Privod_ET-1.djvu

Полная документация на привод ЭТ-1Е1. Это тиристорный, однофазный, нереверсивный привод постоянного тока, с ОС по ЭДС. Частота вращения 72-3600 об/мин. Регулировка производится вниз от максимальной.

2.01 Mb

13rp.djvu

Отсканированный паспорт устройства поджига дуги типа 13РП, предназначенного для возбуждения дуги в плазмотронах. Что немаловажно, в паспорте есть намоточные данные трансформатора и дросселей.

493 Kb

VD-0801.djvu

Руководство по эксплуатации сварочного выпрямителя ВД-0801 (укр.).

214 Kb

dc250.rar

В архиве отсканированный паспорт инверторного сварочного источника DC250.
31 НПП "Технотрон", г.Чебоксары. Фотографии внутренностей аналогичного аппарата DC250.33 можно посмотреть здесь. DC250.33 отличается от DC250.31 тем, что в первом используются диоды 150EBU04 вместо модуля HEA320NJ40C на выходе. В последних 250.31 так же использовались выходные диоды 150EBU04. В инверторе использовано по 4 транзистора в плече + диод. в данный момент выпускаются только 250.33, в которых применены IRGPS40B120U либо IRG4PSH71U. диод - DSEP3012CR, либо HFA30PB120 (на отдельном радиаторе, аппарат снят с производства). Магнитопровод сварочного трансформатора 120х80х15 мм (за размеры точно не ручаюсь) производства ОАО Ашинский металлургический завод, из аморфного железа 5БДСР с немагнитным зазором. первичка намотана проводом ЛЭПШД1000х0,05 в три провода. Вторичка - ЛЭП119х0,1 (сколько жил не помню). оба провода - ЛИТЦЕНДРАТ, в обозначении которого диаметр жилок стоит после "х", только ЛЭПШД дополнительно в шелковой изоляции, а ЛЭП протянут в термоусадочную трубку. Выходной дроссель очень массивный, железо как у транса старых цветных телеков.
«Баяны» установлены на изолированные друг от друга дюралевые радиаторы каждый размером 90х210 мм. На радиаторе 7 рёбер 210х32 мм. Модуль (диоды) выходного выпрямителя установлен(ы) на радиатор размером 100х160 мм. На радиаторе 9 рёбер 160х32 мм

4.83 Mb

Agregat_ADD-3124.djvu

Документация на сварочный агрегат АДД-3124, который предназначен для использования в качестве автономного источника питания одного поста при ручной дуговой сварке,резке и наплавке металлов постоянным током.
Пределы регулирования сварочного тока 40-315А
Ном.сварочное напряжение 32,6В
Ном.частота вращения 1800+/-30 об/мин.

475 Kb

Privod_ET6.djvu

Документация и схемы на электропривод постоянного тока серии ЭТ-6, который предназначен для регулирования и стабилизации частоты вращения электродвигателя постоянного тока в диапазоне 1:10000 (если допустимо техническими условиями для данного электродвигателя).
В документацию так же включено описание тахогенератора ТП80-20-0,2, работающего совместно с этим приводом.

2.62 Mb

spektrometr.pdf

Схемы и описание тиристорного генератора импульсов от эмиссионного спектрометра POLYVAC E2000, применяемого для спектрального анализа железосодержащих сплавов (чугуны, стали и т.п.). Генератор достаточно мощный (1 - 1,5 кВт).

1.4 Mb

zariadka.djvu

Вид внутренностей мощного зарядного устройства, предназначенного для зарядки локомотивных аккумуляторов, на базе двух сварочных инвертеров.

357 Kb

klasik_141.djvu

Фотографии и, нарисованные от руки, схемы инверторного сварочного источника Klasik 141.

469 Kb

PDG-508m.djvu

Техническое описание, схема и инструкция по эксплуатации сварочного полуавтомата типа ПДГ-508М.

305 Kb

busp2.djvu

Техническое описание и инструкция по эксплуатации блока управления сварочным полуавтоматом типа БУСП-2У3.1.

1.71 Mb

vdg303-401.djvu

Принципиальные электрические схемы сварочных источников ВДГ-303-3, ВДГ-401 и полуавтомата ПДГ-312-4 производства фирмы СЭЛМА.

239 Kb

nname.djvu

Принципиальная электрическая схема однофазного полуавтомата типа ....

92 Kb

kama. djvu

Руководство на сварочный дизель-генератор компании KAMA.

1.19 Mb

Сварочный источник ВДУ-601

Схема промышленного универсального сварочного источника ВДУ-601.

185Кb

Выпрямитель ТПП-160-70-У3.1

Схема промышленного зарядного ТПП-160-70-У3.1 . Схема была срисована с агрегата при ремонте.

98Кb

Выпрямители ТПЕ ТПП

Схемы и описание выпрямителей ТПЕ и ТПП, предназначенных для зарядки тяговых аккум. батарей:
- щелочных на Uном=24-72 V и ёмкостью от 300 до 600 A*ч ,
- кислотных на Uном=24-80 V и ёмкостью от 160 до 400 А*ч .
Особенности схемы: Тиристорный 3-фазный выпрямитель с трехобмоточными трансформаторами тока на строне выпрямленного напряжения. УЭ всех тиристоров объединены.

407Кb

Инвертор
Блок управления

Срисованная с оригинала схема сварочного источника Telwin conica160. В схеме не прорисована цепь питания реле от сх. контроля залипания.

147Кb

Инструкция эксплуатации
Техническое описание
Альбом схем
Сигнатурный контроль
Преобразователь ВЕ178А5

Полная документация на электропривод асинхронный глубокорегулируемый комплектный Размер 2М-5-21, который предназначен для работы в системах автоматического регулирования частоты вращения электродвигателей двух механизмов подачи и электродвигателя шпинделя токарных станков с ЧПУ. В документацию входит инструкция по эксплуатации, техническое описание, альбом электрических схем, инструкция по сигнатурному контролю и техническое описание и инструкция по эксплуатации фотоэлектрического преобразователя угловых перемещений модели ВЕ178А5.

874Кb
1.88Mb
1.83Mb
797Кb
591Кb

vdu504.gif

Принципиальная электрическая схема сварочного источника ВДУ-504.

355Кb

mk300.djvu

Фотографии внутренностей инверторного сварочного источника МК300А.

283Кb

Telwin.rar

Принципиальная электрическая схема инверторного сварочного источника Телвин 130. Схему с образца, в процессе ремонта, срисовали. Для просмотра схемы потребуется как минимум Pcad2000.

92.1Кb

fors_upr.djvu

Фирменная принципиальная электрическая схема блока управления инверторного источника Форсаж, выпускаемого Рязанским приборостроительным заводом.

51.3Кb

Forsag125.rar

Инверторный сварочный источник Форсаж-125. Принципиальная схема силовой части и блока управления, а так же шесть фотографий с видами источника и куча осциллограмм!

995Кb

Udg-301.zip

Схемы и описание установок УДГ-301 и УДГ-501 (номинальные токи сварки 315А и 500А,соответственно) для сварки алюминия и его сплавов неплавящимся вольфрамовым электродом в среде аргона на переменном токе.

725Кb

Ru2005.djvu

Фотографии внутренностей инверторного сварочного источника Русь-2005

641Кb

etu3601.djvu

Техническое описание и принципиальные электрические схемы электропривода ЭТУ3601 предназначенного для создания, на основе высокомоментных электродвигателей постоянного тока, быстродействующих и широко регулируемых (с диапазоном регулирования 1:10000) приводов подач металлорежущих станков, в том числе станков с ЧПУ.

2.24Mb

invertorColt1300.djvu

Фотографии внутренностей, а так же принципиальная электрическая схема силовой части и драйверов сварочного инверторного источника COLT 1300, производства итальянской фирмы CEMONT

3.92Mb

UDG-101.rar

Техническое описание и схема сварочной установки типа УДГ-101 предназначенной для ручной apгоно-дуговой сварки неплавящимся (вольфрамовым) электродом на постоянном токе изделий из нержавеющих сталей, меди и ее сплавов малых толщин (от 0,2 до 2,5 мм).

3.71Mb

VDM4X301.djvu +
VDM4X301.rar

Техническое описание и схема сварочного универсального четырехпостового источника. В документации неплохо расписано формирование ВАХ со всеми ОС по току и напряжению. Также, в аппарате есть схема ограничения напряжения ХХ и компенсации падения напряжения в сварочных кабелях.

1.01Mb +
312Kb

RVI-501.djvu

Техническое описание регулятора времени на интегральных схемах серии РВИ. Регулятор предназначен для управления циклом сварки машин контактной сварки переменного тока.

980 Kb

A-547.djvu

Техническое описание и инструкция по эксплуатации на полуавтомат сварочный А-547Ум типа ПДГ-309, предназначенный для электродуговой сварки металла тонкой электродной проволокой в двуокиси углерода.

360 Kb

vdu-505.djvu

Техническое описание и схемы сварочного выпрямителя ВДУ-505, предназначенного для ручной дуговой сварки штучными электродами и для однопостовой механизированной сварки в среде углекислого газа и под флюсом.

472 Kb

ppk.djvu

Техническое описание и инструкция по эксплуатации ПРИБОРА ПРИВАРКИ КАТОДОВ (ППК). По сути, прибор является конденсаторной контактной сварочной установкой

1.28 Mb

vduch26.djvu

Силовая схема и схема блока управления тиристорного инверторного сварочного источника ВДУЧ-16

677 Kb

liga.djvu

Руководство по эксплуатации и принципиальная схема электролизёра ЛИГА-2.

156 Kb

VD-160i.pdf

Паспорт и руководство по эксплуатации инверторного сварочного источника ВД-160И У2 (ВД-200И-У2), производства ООО Линкор. Приведены схема электрическая принципиальная и осциллограммы в характерных точках.

337 Kb

Mpa.djvu

Описание микроплазменного сварочного аппарата предназначенного для резки низкотемпературной плазмой материалов, в том числе и тугоплавких, сварки и пайки чёрных и цветных металлов. В качестве плазмообразующей среды используется водяной пар.

739 Kb

Fora120.djvu

Фотографии внутренностей инверторного сварочного источника Фора-120.
Интересной особенностью источника является автогенераторный режим работы инвертора. Регулировка тока осуществляется за счёт изменения частоты генерации (управляющим генератором).

2.51 Mb

Plazmorez.djvu

Описание и схемы (правда пока без спецификации) на аппарат воздушно-плазменной резки АПР-150-1

216 Kb

alplaz_04.djvu

Инструкция и чертёжк Алплазу-04 и Мультиплазу 2500.
Мультиплаз 2500 прообраз алплаза и инструкции у них как две капли воды похожи, отличается он повышенной мощностью источника питания и возможностью работы с дугой прямого действия.

406 Kb

ultrasonik_400W.djvu

Схема ультразвукового генератора взятая из паспорта к установке ультразвукового искрового легирования.

44.4 Kb

ims1600.djvu

Фотографии внутренностей инверторного сварочного источника IMS1600.

232 Kb

BME-160.djvu

Фотографии внутренностей, а так же силовая электрическая схема отечественного инверторного сварочного источника BME-160.

102 Kb

PICO-160.djvu

Фотографии внутренностей, а так же силовая электрическая схема инверторного сварочного источника PICO-160.

436 Kb

MAXPOWER_WT-180S.djvu

Инструкция по эксплуатации и фотографии китайского инверторного сварочного источника MAXPOWER WT-180S.

497 Kb

lisa.djvu

Принципиальная электрическая схема подающего механизма LISA-12 фирмы KEMPPI.

443 Kb

pdg101.djvu

Нарисованные от руки схемы источника ПДГ-101 У3.1, предназначенного для полуавтоматической сварки в среде защитного газа. Источник также может быть использован как пускозарядное устройство.

110 Kb

 Vir101.rar

 Паспорт на ВОЗБУДИТЕЛЬ ДУГИ ВИРЦ101 УЗ.

 8.81 Kb

Piton.djvu

Руководство по эксплуатации и схемы сварочного полуавтомата ПИТОН (ПДГ-15-3У3, ПДГ-20-3У3 380В).

866 Kb

Osppz.djvu

Руководство по эксплуатации осциллятора ОСППЗ-300 М1.

157 Kb

pulsar220.djvu

Принципиальная электрическая схема силовой части и блока управления однофазного варианта полуавтомата ПУЛЬСАР.

55.5 Kb

vdu506.djvu

Техническое описание и инструкция по эксплуатации сварочного источника ВДУ-506.

1.53 Mb

Pylsar.djvu

Техническое описание и инструкция по эксплуатации сварочного полуавтомата ПУЛЬСАР.

334 Kb

ThermalArc250S.pdf

Руководство по эксплуатации(англ.) инверторного сварочного источника, ThermalArc model 250S DC CC, компании Thermadyne Company. По сравнению с ThermalArc model 160S, эта версия более мощная и питается от трёхфазной сети. В руководстве приведены функциональная и силовая схемы источника. Силовая схема интересна тем, что здесь используются два полумостовых преобразователя (каждый со своим трансформатором) включенных последовательно. Приводятся вольтамперные характеристики.

486 Kb

ThermalArc160S.pdf

Руководство по эксплуатации(англ.) инверторного сварочного источника, ThermalArc model 160S DC CC, компании Thermadyne Company. В руководстве приведены функциональная и силовая схемы источника. Силовая схема интересна тем, что здесь используется полумостовой преобразователь и сетевой выпрямитель с удвоением напряжения. Приводятся вольтамперные характеристики. При выходном напряжении менее 10В, в режиме TIG, внутреннее сопротивление источника становится отрицательным, благодаря чему снижается эрозия вольфрамового электрода при КЗ.

437 Kb

invertec_130.pdf

Инструкция по эксплуатации на инверторный сварочный источник Invertec V100 & V130(Англ.) известной фирмы Lincoln Electric, где кроме всего прочего приведена силовая электрическая схема источника

569 Kb

udgu301.djvu

Описание универсальной сварочной установки УДГУ-301. Установка предназначена для ручной аргонно-дуговой сварки неплавящимся электродом на постоянном и переменном токе (Рус.).

579 Kb

schemahf.djvu

Принципиальная электрическая схема универсальной сварочной установки MARC 500 HF mig финской фирмы KEMMPI. Установка предназначена для ручной аргонно-дуговой сварки неплавящимся электродом на постоянном и переменном токе.

98 Kb

lhf500.djvu

Принципиальная электрическая схема универсального осциллятора LHF500 финской фирмы KEMPPI.

123 Kb

osc.djvu

Две страницы из какой-то книги посвящённые осцилляторам.

15 Kb

maxstar150.djvu

Руководство для владельца по использованию сварочного аппарата Maxstar150 (Англ.). Имеются некоторые монтажные и принципиальные схемы.

710 Kb

timer.djvu

Инструкция по эксплуатации таймера TGE-2, модель 61925.

340 Kb

Доска объявлений OLX.uz, ранее Torg: сайт объявлений в Узбекистане

Ташкент, Мирзо-Улугбекский район Сегодня 06:02

Ташкент, Мирзо-Улугбекский район Сегодня 06:00

Андижан Сегодня 06:00

57 000 у.е.

Договорная

Ташкент, Чиланзарский район Сегодня 06:00

Ташкент, Яшнабадский район Сегодня 06:00

Ташкент, Юнусабадский район Сегодня 05:58

Ташкент, Яккасарайский район Сегодня 05:57

2 700 000 сум

Договорная

Ташкент, Яшнабадский район Сегодня 05:56

286 100 000 сум

Договорная

Карши Сегодня 05:56

Ходжейли Сегодня 05:55

Ходжейли Сегодня 05:55

На взрыволёте к Юпитеру / Хабр


Ограниченность химических ракет была ясна ещё до начала регулярных космических пусков. Формула Циолковского прямо говорит, что на привычных нам двигателях можно слетать на Луну (стартуя на ракете тысячи в три тонн начальной массы и вернувшись в кораблике в несколько тонн), с огромным трудом долететь до Марса (с во много раз худшим соотношением начальной/конечной массы), но вот покорить Солнечную систему на химических ракетах нельзя. Поэтому уже в середине двадцатого века стали появляться альтернативные проекты, наиболее ярким из которых стал атомный взрыволёт (импульсная ракета). В этом посте мы поговорим о его конструкции, истории создания, перспективах в 21 веке, а ещё слетаем на нём к Юпитеру в Orbiter'е.

Орион

Идея проекта

Реакции расщепления атома и атомного синтеза дали человечеству источник огромной энергии. Поэтому логично, что первыми придумали использовать атомные бомбы для движения в космосе разработчики атомного оружия. Согласно документу Лос-Аламосской лаборатории, Станислав Улам, участник Манхеттенского проекта, со-изобретатель схемы водородной бомбы Теллера-Улама, предложил идею ядерного ракетного двигателя в 1946 году. Согласно первоначальной идее, с корабля сбрасывалась атомная бомба, которая подрывалась и испаряла диск, сбрасываемый после бомбы. В 50-х годах эту идею развили Тед Тейлор и Фриман Дайсон (сфера Дайсона — тоже его идея). Полученный проект выглядел следующим образом:

Кормовая плита получала удар плазмы от ядерного заряда, и импульс плазмы через два уровня амортизаторов передавался на корабль. В качестве маршевых зарядов использовались атомные устройства, создающие направленный взрыв:

Формованная оболочка из оксида бериллия и урана делала взрыв ядерного заряда направленным, и вольфрам превращался в сигарообразный пучок плазмы, который бил по толкателю кормовой плиты. Толкатель отходил в крайне переднее положение, а затем, под действием системы амортизации, возвращался в исходное положение. Цикл повторялся.

История проекта

Проект «Орион» начался в 1958 году. Это была полноценная инженерная проработка, хотя, конечно, удивляющая своими масштабами — разрабатываемые проекты имели массу от 880 тонн для околоземного корабля до 8 000 000 тонн для «продвинутого межпланетного». Были построены масштабные модели корабля, использующие обычную взрывчатку, для проверки устойчивости полёта.

Очень короткое видео одного испытания:

Рассекреченная хроника 1958 года, испытания различных макетов:

В 60-х годах у проекта начались проблемы. Во-первых, аппарат получался большим и очень дорогим. В поисках денег выяснилось, что «Орион» заинтересовал военных, но поэтому его пришлось сделать вооруженным кораблём. Президент Кеннеди, увидев макет атомного взрыволёта с атомными пушками, ракетами и прочим вооружением, пришёл в ужас, и шансы на финансирование резко упали. Во-вторых, пуски всех типов кораблей, кроме самых маленьких, нужно было производить с Земли на маршевом ядерном двигателе, что означало сотни атомных взрывов в атмосфере, а это никого не вдохновляло на фоне общественных протестов против ядерных испытаний. В-третьих, испытания корабля затруднялись договором 1963 года о запрете ядерных испытаний в атмосфере, космосе и под водой. Тем не менее, плиту толкателя успели проверить на паре ядерных испытаний, и, в рамках единичных взрывов, расчеты подтверждались. В итоге, несмотря на то, что в какой-то момент проект «Орион» рассматривался как реальная альтернатива ракетам фон Брауна и лунной программе, в итоге «Орион» был закрыт в районе 1965 года.

Жизнь после закрытия

После закрытия проекта разработка переместилась в теоретическую плоскость. Атомно-импульсный привод обещал уникальные возможности, поэтому на его основе стали разрабатывать межзвездные корабли. Фриман Дайсон создал два проекта для исследования Альфы Центавра с пролётной траектории без торможения, один на сто тысяч тонн начальной массы (стомость 0,1 годового ВВП США, время полёта 133 года), другой на десять миллионов тонн (стоимость 1 годовой ВВП США, время полёта 1330 лет). Родственными «Ориону» являются проекты «Daedalus» и «Longshot», хотя они используют более сложные и ещё не освоенные двигатели. Также был придуман проект «Medusa», где вместо плиты толкателя использовался специальный парус-парашют. Несмотря на то, что к воплощению проектов никто не приступает и денег не дает, группы энтузиастов придумывают новые проекты. Например, в 2007 году вышла статья с описанием Mini-Mag Orion — небольшого «Ориона», в котором подрыв атомных зарядов осуществлялся магнитным полем.
Оценка проекта

Достоинства:
  1. «Орион» реализуем уже на уровне технологий сорокалетней давности.
  2. Уникальный двигатель, сочетающий большую тягу и большой удельный импульс. У химических ракет большая тяга, но маленький импульс, у ЭРД — большой импульс, но маленькая тяга.
  3. Возможность межзвездных путешествий. Ядерный «Орион» теоретически может разогнаться до 3%-5% скорости света, термоядерный — 8%-10%, на термоядерном приводе с аннигиляционным катализом — 10% и на аннигиляции «материя-антиматерия» — 50%-80%. Полёт к Альфе Центавра на 0,1 с займет 44 года и по 36 дней на разгон/торможение с ускорением 1 g.

Недостатки:

  1. Загрязнение Земли продуктами ядерных взрывов при старте с Земли и полёте в атмосфере.
  2. Наличие движущихся частей, это требует безусловной надежности второго амортизатора при условиях тысяч взрывов.
  3. Использование атомных зарядов — проблемы контроля и безопасности.
  4. Большой и дорогой. Замкнутый круг — пока нет серьезной необходимости выводить тысячи тонн на орбиту, никто не даст денег на разработку агрегата, который эти тысячи тонн способен вывести, и необходимость так и не появится.
Немного размышлений

В ближайшие десятилетия вряд ли человечество приступит к постройке межзвездных кораблей, если, конечно, не случится каких-нибудь счастливых изобретений. Поэтому говорить о наиболее применимой технологии для межзвездных полётов сложно. Тем не менее, на текущем технологическом уровне «Орион» смотрится весьма неплохо относительно других методов движения. Проектный удельный импульс взрыволёта, согласно документу NASA, находился в диапазоне 1800-6000 секунд, а на 1980-е годы с развитием технологии обещали УИ 10 -20 тысяч секунд. Что весьма любопытно, сходных показателей уже достигли электрореактивные двигатели (уже летали ЭРД с УИ 1600 с, перспективные ЭРД обещают до 20 000 с). Может быть, Солнечную систему покорит не брутальный атомный взрыволёт, а «культурный» ЭРД. Но без атомных устройств на кораблях не обойтись — только они могут обеспечить требуемые объемы энергии для освоения Солнечной системы.
Полёт

Если вам не интересно слетать к Юпитеру на взрыволёте, посмотрите вот это видео о полёте к Марсу, чтобы иметь представление о том, чем мы планируем заняться, и можете проматывать остаток поста:

Подготовка к полёту

Кроме самого Orbiter'a нам потребуется только один аддон — Orion 1.22. Также предполагается, что вы хотя бы читали мои посты по тегу Orbiter и имеете представление о терминологии.
Немного теории

В космической баллистике есть понятие «Гомановская траектория» (Hohmann transfer orbit). Это траектория наиболее экономичного передвижения между орбитами. Она состоит из двух импульсов, первый из которых дается в перицентре и поднимает апоцентр до нужной высоты, а второй дается в апоцентре и поднимает перицентр до нужной высоты. Если же мы хотим перейти на более низкую орбиту, то действия обратные. Первое — опускание перицентра, второе — опускание апоцентра. Вот картинка, иллюстрирующая идею:

Очевидно, что, если мы летим, например, к Юпитеру, он далеко не всегда окажется в противоположной старту точке орбиты к моменту нашего прибытия туда. Поэтому гомановская траектория возможна только в определенные временные отрезки — стартовые окна. Вне стартового окна полёт возможен, но он потребует бОльших затрат топлива и будет сложнее.

Также, планируя наш полёт к Юпитеру, мы исходим из того, что летим мы «на глазок», вручную, без серьезных баллистических расчетов или дополнительных МФД. Поэтому наш полёт будет весьма неэффективным с точки зрения затрат топлива, но интересным, и мы прилетим с отличной для полёта «на глазок» точностью.

План полёта

Наш полёт будет состоять из следующих этапов:
  1. Разгон с орбиты Земли.
  2. Коррекция траектории после покидания зоны гравитационного влияния Земли.
  3. Коррекция траектории — совмещение наклонений орбит (орбита Земли и орбита Юпитера имеют немного разное наклонение).
  4. При необходимости — коррекция траектории при подлёте к Юпитеру.
  5. Переход на орбиту вокруг Юпитера.
Этап 1. Разгон с орбиты Земли

Нам нужен сценарий «Orion 20m», в котором открыто стартовое окно к Юпитеру:


Русскую версию лаунчера можно взять здесь.

На первом этапе самым важным для нас является Transfer MFD. Переключим левый МФД в режим Transfer (Левый Shift — F1, Левый Shift — X). В качестве тела обращения выбираем Солнце (Левый Shift — R, выбрать Sun в меню). Выбираем режим старта с орбиты другого небесного тела (Левый Shift — S, выбрать Earth). MFD примет следующий вид:


Слева — оригинальный вид, справа — пояснение индикации.

Выберем в качестве цели Юпитер (Левый Shift — T, выбрать Jupiter в меню). Включим режим HTO (кнопка HTO на MFD), переместим точку старта чуть вперед от нашего местоположения (Левый Shift — </>) и установим расчетное приращение скорости до орбиты Юпитера клавишами Левый Shift — ±. Результат будет такой:

Небольшое несовпадение точки касания орбиты и положения Юпитера не страшно, мы его потом исправим.
Для разгона нам нужны два параметра:
Конечная скорость вычисляется как текущая орбитальная скорость OS + приращение скорости dV. Оба параметра подсвечены на скриншоте. Вычисляем: OS + dV = 7,558 k +8,839 k = 16, 397 k, т.е. 16,4 км/с. Учитывая, что мы будем отдаляться от Земли с каждой секундой, и наша скорость будет уменьшаться, лучше в качестве конечной скорости взять скорость на 1-2 км/с меньше, т.е. наша конечная скорость составит 15 км/с, потом поправим.
Направление вектора разгона. С точки зрения баллистики был бы нужен нулевой шаг — уменьшение наклонения орбиты или поправка на наклон орбиты при разгоне. К счастью, в сценарии наклонение начальной орбиты незначительное. Включаем режим автоподдержания положения по вектору орбитальной скорости (Prograde, [ ) Ждем, пока мы не окажемся на орбите на линии Солнце — Земля с наружной стороны (в тени), в этот момент короткая линия индикатора образует прямую с линией Солнце — Земля:

В этот момент стабилизируем корабль режимом KillRot (Num 5). Мы будем разгоняться на следующем витке. Двигатель «Ориона» очень мощный, поэтому начинаем разгон, когда до вектора орбитальной скорости будет 8-10 градусов:

Красиво:

По достижении требуемой скорости выключаем двигатель. На правом МФД видна гиперболическая орбита убегания.

Лететь нам далеко, так что вот эмбиент в дорогу:

Этап 2. Коррекция траектории после покидания зоны гравитационного влияния Земли

Ускорением времени проматываем полёт то тех пор, пока влияние Земли (G внизу правого МФД) не окажется меньше 0,05. Переключаем левый МФД в режим отслеживания нас, а не Земли (Левый Shift — S, By name, ввести имя корабля Lewis).

Упс, мы слишком разогнались. Значит, во-первых, надо затормозить.

Следующая проблема — несмотря на наши старания, Юпитер окажется позади нас, когда мы окажемся на его орбите. Поэтому нам надо сместить орбиту по часовой стрелке. Для этого мы занимаем положение под углом 90 градусов к вектору орбитальной скорости, вручную, автопилота такого нет.

Занимаем требуемое положение и включаем двигатель. Корабль на курсе 90 градусов надо удерживать вручную, к счастью, это не сложно. С точки зрения баллистики такой маневр — варварство, но, тем не менее, он работает:

Переключаем правый МФД в режим совмещения наклонений орбит (Правый Shift — F1, правый Shift — A), выбираем целью Юпитер (Правый Shift — T, Jupiter выбрать в меню).

Следующий узел у нас нисходящий (Descending Node), поэтому коррекция должна быть «вверх» от плоскости полёта. Подсказки игнорируем, проматываем время до нисходящего узла.

Этап 3. Коррекция траектории — совмещение наклонений орбит.

Оказывается, Земля нас ещё чуть-чуть затормозила. Поэтому, кроме совмещения орбит, выполним ещё и коррекцию траектории. Подсказка: у корабля очень мощные двигатели ориентации, небольшие смещения можно давать ими в линейном режиме.

Грубая коррекция проведена. Проведем здесь же точную коррекцию. Переключим правый МФД в режим Sync Orbit (Правый Shift — F1, правый Shift — Y, выбрать цель правый Shift — T, выбрать Jupiter) и, вспоминая пост о стыковке, маневрируя, уменьшаем параметр DTmin до значения близкого к нулю.

Как-то так. Значение будет колебаться, это нормально. Теперь уже включаем ускорение до подлёта к Юпитеру и долго ждём.

Этап 4. Коррекция траектории при подлёте к Юпитеру.

Мы провели хорошую коррекцию, поэтому этот этап не нужен. Но если у вас DTmin выросло больше миллиона, или появились другие признаки необходимости коррекции, можете её провести на подлёте к Юпитеру. Но не стремитесь свести DTmin совсем к нулю, иначе надо будет уклоняться от Юпитера, чтобы выйти на орбиту, а не врезаться в него.
Этап 5.Переход на орбиту вокруг Юпитера.

Подлетая к Юпитеру, переведем левый МФД в режим Orbit (Левый Shift — F1, левый Shift — O, выберем тело обращения левый Shift — R, Jupiter). Проверим, что мы пролетим мимо, а не врежемся в планету. В Orbiter'e Юпитер очень красивый, показан эффект вращающейся атмосферы. Дождемся перицентра, развернем корабль против вектора орбитальной скорости и начнём тормозить.

Всё, мы прилетели!

Заключение

Русскоязычный мануал.
Для навигации: посты по тегу «Orbiter».

Двигательная установка Fusion, если Fusion Bussard IEC работает

Продолжаются работы в направлении видения Роберта Бассарда инерционного электростатического синтеза.

digg_url = ‘http://advancednano.blogspot.com/2007/11/fusion-propulsion-if-bussard-iec-fusion.html’;
digg_topic = «Пробел»;

reddit_url = ’http: //advancednano.blogspot.com/2007/11/fusion-propulsion-if-bussard-iec-fusion.html’
reddit_title = ’Космический карнавал № 30 ′

ОБНОВЛЕНИЕ

: Том Лигон написал слайды и выступил с речью, в которой был представлен этот материал.

Fusion R&D
Этап 1 - Проверка и обзор результатов WB-6
Предлагаемые устройства WB-7 и WB-8 будут построены и испытаны в течение 2008 г.
1,5 - 2 года (к концу 2008 г.), 3-5 млн долл. США

Fusion R&D
Phase 2 - Design, Build and Test
Full Scale Fusion System 100 MW
5 лет (2009-2013), 200 млн долл. США

Если полная коммерческая система будет успешной, то с 2014-2029 + будет разработка космических аппаратов с ядерным синтезом.


Этот автомобиль приводится в движение двумя двигателями термоядерного синтеза мощностью 8 гигаватт.Смета в 100 раз меньше, чем у лучшей существующей сейчас системы.


20 часов для перехода с низкой околоземной орбиты на лунную. 24 часа, чтобы перейти от поверхности Земли к поверхности Луны с помощью этих систем.


Эти машины будут иметь три основных типа термоядерных двигателей. DFP, CSR (управляемый космический излучатель) и ARC показаны с разными ISP и уровнями тяги. CSR и ARC - это двигатели с бесшумным электрическим разрядом (QED) с ISP в диапазоне от 1500 до 70000.Они используют электродуговый нагрев реакционной массы.

DFP - это двигатели для разбавленных продуктов термоядерного синтеза. У них высокий ISP от 50 000 до 1,2 миллиона. Реакционная масса добавляется к продукту плавления прямо из реактора.


Вот блок-схемы двигателей QED типа


Вот размеры космического корабля дальнего действия с различными типами двигателей. Ракеты Bussard имеют длину от 1 до 2 футбольных полей.


Описание термоядерного корабля Mars Bussard. 33-38 дней до Марса в одну сторону.


Описание аппарата для полета к Титану, спутнику Сатурна.


Схема двигателя для разбавленных продуктов термоядерного синтеза (DFP)


Схема ракеты Fusion для миссии «Титан». Каждый путь займет 75-90 дней.

Транспортные средства позволят создать большие и недорогие космические колонии.

Лунная колония
4000 человек по 25 тонн каждая, 12,5 миллиардов долларов (оценка на 1997 год)

Колония на Марсе
1200 человек, по 50 тонн, 15,6 млрд долларов

Колония титанов
400 человек по 60 тонн, 16 долларов.2 миллиарда


Почему колонии и транспортные средства относительно дешевы

Если у нас есть относительно легкие работающие термоядерные реакторы с диапазоном мощности до 10 гигаватт и более каждый, тогда все виды космических двигателей становятся возможными.

Термоядерные реакторы могут питать массивные лазерные решетки или мощные двигательные установки типа «Орион».

Если получатся инерционные электростатические термоядерные реакторы Бюссара, мы все перепроектируем. Вся военно-морская и военная техника и вся наша цивилизация.Даже эти первые проекты позволили бы совершить полеты на Луну и орбиту, примерно равные стоимости старых билетов на самолет Concorde.

ДЛЯ ДАЛЬНЕЙШЕГО ЧТЕНИЯ
Заметки космической конференции 2006 г. по термоядерным ракетам Бассара

Презентация Power Point 2007 года с большинством слайдов для этой статьи

Статья с описанием инерционной электростатической термоядерной двигательной установки

Роберт Бюссар об инерционном электростатическом синтезе.

Этот проект снова финансировался ВМС США

У Аскмара есть ссылки на научные статьи по концепции Fusion

M Simon создал отличный сайт с большим количеством технической информации о реакторах IEC, включая проект Bussard

.

Брайан Ван - идейный лидер футуризма и популярный научный блоггер с 1 миллионом читателей в месяц.Его блог Nextbigfuture.com занимает первое место среди новостных научных блогов. Он охватывает многие прорывные технологии и тенденции, включая космос, робототехнику, искусственный интеллект, медицину, биотехнологию против старения и нанотехнологии.

Известный тем, что выявляет передовые технологии, он в настоящее время является соучредителем стартапа и сборщиком средств для компаний с высоким потенциалом на ранней стадии. Он является руководителем отдела исследований ассигнований на инвестиции в глубокие технологии и ангел-инвестором в Space Angels.

Часто выступает в корпорациях, он был спикером TEDx, спикером Университета сингулярности и гостем на многочисленных интервью для радио и подкастов.Он открыт для публичных выступлений и консультирования.

Магнитные частицы для разделения и очистки нуклеиновых кислот

Appl Microbiol Biotechnol. 2006; 73 (3): 495–504.

Sonja Berensmeier

Forschungszentrum Karlsruhe, Институт технической химии, технологий водоснабжения и геотехнологии, Hermann-v.-Helmholtz-Platz 1, 76344 Eggenstein-Leopoldshafen, Германия

Отдел водных технологий и геотехнологий, Hermann-v.-Helmholtz-Platz 1, 76344 Eggenstein-Leopoldshafen, Германия

Автор, ответственный за переписку.

Поступило 28 июня 2006 г .; Пересмотрено 4 сентября 2006 г .; Принято в 2006 г. 12 сентября.

Эта статья сделана доступной через PMC Open Access Subset для неограниченного повторного использования в исследованиях и вторичного анализа в любой форме и любыми средствами с указанием первоисточника. Эти разрешения предоставляются на время, пока Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) объявила COVID-19 глобальной пандемией.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Разделение нуклеиновых кислот становится все более важным инструментом молекулярной биологии. До того, как можно было использовать современные технологии, разделение нуклеиновых кислот было трудоемким и трудоемким процессом, основанным на нескольких этапах экстракции и центрифугирования, часто ограничиваемым небольшими выходами и низкой чистотой продуктов разделения и не подходящим для автоматизации и масштабирования. . В течение последних нескольких лет были разработаны специально функционализированные магнитные частицы.Вместе с соответствующей буферной системой они обеспечивают быструю и эффективную очистку непосредственно после экстракции из неочищенных клеточных экстрактов. Стадий центрифугирования избегали. Кроме того, новый подход обеспечил легкую автоматизацию всего процесса и выделение нуклеиновых кислот из больших объемов образцов. В обзоре описаны традиционные методы и методы очистки нуклеиновых кислот на основе магнитных частиц. Более подробно представлен синтез разнообразных магнитных частиц.Перечислены различные поставщики магнитных частиц для разделения нуклеиновых кислот, а также поставщики, предлагающие наборы на основе частиц для различных материалов образцов. Кроме того, упоминаются имеющиеся в продаже ручные магнитные сепараторы и автоматизированные системы для обработки магнитных частиц и жидкостей.

Ключевые слова: Магнитные частицы, Нуклеиновая кислота, Сепараторы, Автоматизация

Введение

Магнитное разделение - это новая технология, которая использует магнетизм для эффективного отделения пара- и ферромагнитных частиц микрометровых размеров от химических или биологических суспензий.Обогащение низкосортной железной руды, удаление ферромагнитных примесей из больших объемов котловой воды как на обычных, так и на атомных электростанциях или удаление слабомагнитных окрашенных примесей из каолиновой глины являются типичными примерами магнитной сепарации в традиционных отраслях промышленности. Применение этих методов в биологических науках было ограниченным до 1970-х годов. Идея использования методов магнитной сепарации для очистки биологически активных соединений (нуклеиновых кислот, белков и т. Д.)), клетки и клеточные органеллы вызвали возрождение интереса за последнее десятилетие. Новые магнитные частицы с улучшенными свойствами были разработаны для частично сложных процессов разделения в этих областях [см. Обзоры: Olsvik et al. 1994; Сафарик и Сафарикова 1999; Franzreb et al. 2006].

Магнитное разделение нуклеиновых кислот имеет несколько преимуществ по сравнению с другими методами, используемыми для той же цели. Нуклеиновые кислоты могут быть выделены непосредственно из сырых материалов пробы, таких как кровь, гомогенаты тканей, среды для культивирования, вода и т. Д.Частицы используются в периодических процессах, где практически нет ограничений в отношении объемов пробы. Благодаря возможности регулировки магнитных свойств твердых материалов, их можно относительно легко и выборочно удалять даже из вязких суспензий образцов. Фактически, магнитная сепарация - единственный возможный метод для извлечения мелких частиц (диаметром около 0,05–1 мкм) в присутствии биологического мусора и других загрязняющих материалов аналогичного размера. Кроме того, эффективность магнитной сепарации особенно подходит для крупномасштабных очисток (Safarik et al.2001; Franzreb et al. 2006 г.).

Эти предстоящие методы разделения также служат основой для различных автоматизированных процедур с низкой и высокой пропускной способностью, которые позволяют сэкономить время и деньги. Можно избежать этапов центрифугирования, и риск перекрестного загрязнения при использовании традиционных методов больше не возникает. Для очистки нуклеиновых кислот коммерчески доступны различные типы магнитных частиц, предлагаются магнитные сепараторы, работающие в ручном и автоматическом режиме. Краткое описание традиционных и магнитных методов разделения для выделения нуклеиновых кислот, вместе с кратким обзором периодических и автоматических сепараторов, будет дано ниже.

Методы очистки нуклеиновых кислот

Выделение ДНК или РНК является важным этапом перед многими биохимическими и диагностическими процессами. Многие последующие приложения, такие как обнаружение, клонирование, секвенирование, амплификация, гибридизация, синтез кДНК и т. Д., Не могут быть выполнены с сырым материалом образца. Наличие большого количества клеточных или других загрязняющих материалов, например белки или углеводы в таких сложных смесях часто затрудняют многие последующие реакции и приемы.Кроме того, ДНК может загрязнять препараты РНК и наоборот. Таким образом, методы эффективного, надежного и воспроизводимого выделения нуклеиновых кислот из сложных смесей необходимы для многих методов, которые используются сегодня и основаны на идентификации ДНК или РНК, например диагностика микробных инфекций, судебная медицина, определение группы тканей и крови, обнаружение генетических вариаций и т. д.

Традиционные немагнитные методы

Жидкая фаза

Известен ряд методов для выделения нуклеиновых кислот в жидкой фазе, но они, как правило, основаны на сложных сериях стадий осаждения и промывки, и их выполнение требует много времени и усилий.Таким образом, классические методы выделения нуклеиновых кислот из сложных исходных материалов, таких как кровь или ткани, включают лизис биологического материала детергентом или хаотропным веществом, возможно, в присутствии ферментов, разрушающих белок, с последующими этапами обработки с применением органические растворители, такие как фенол и / или хлороформ или этанол, которые в целом высокотоксичны и требуют специальной и, следовательно, дорогостоящей утилизации. Например, полное удаление белков из нуклеиновых кислот может быть достигнуто путем добавления перхлората натрия (Wilcockson 1973).Отделение РНК от ДНК требует этапов селективного осаждения с помощью LiCl или специального безнуклеазного выделения с помощью гидрохлорида гуанидиния или тиоцианата гуанидиния в сочетании с экстракцией фенолом и осаждением этанолом (Bowtell 1987). Такие методы не только громоздки и требуют много времени, но и относительно большое количество необходимых шагов увеличивает риск деградации, потери образца или перекрестного загрязнения образцов, особенно когда несколько образцов обрабатываются одновременно.В случае выделения РНК сравнительно высок риск заражения ДНК.

Твердая фаза

Помимо трудоемких и длительных традиционных методов были разработаны альтернативные методы разделения. Сорбционные процессы, основанные на (а) водородсвязывающем взаимодействии с недериватизированной гидрофильной матрицей, обычно диоксидом кремния, в хаотропных условиях, (б) ионном обмене в водных условиях с помощью анионита, (в) сродстве и (г) механизмах исключения по размеру были использованы для очистки ДНК.Твердофазные системы, адсорбирующие ДНК - частицы на основе диоксида кремния (Vogelstein and Gillespie 1979; Boom et al. 1990, 1999; Melzak et al. 1996; Tian et al. 2000; Breadmore et al. 2003), стеклянные волокна и анион -обменные носители (Ferreira et al. 2000; Endres et al. 2003; Teeters et al. 2003) - используются в хроматографических разделительных колонках [например, DE 41 43 639 C2 (Qiagen GmbH)], например.

Эти носители используются для выделения или очистки ДНК вместе с высококонцентрированными растворами хаотропных солей (например,грамм. йодид натрия, перхлорат натрия, тиоцианат гуанидиния). В патенте США 5075430 (BioRad), например, описано использование диатомовой земли в качестве материала носителя. Опять же, связывание происходит в присутствии хаотропной соли. Другие подходы основаны на детергентности вместе со связывающим нуклеиновую кислоту материалом (ЕР 0 796 327 B1, Dynal) или на использовании твердого носителя с ДНК-связывающими функциональными группами в сочетании с полиэтиленгликолем и солями в высоких концентрациях (WO / 1999/058664, Институт биомедицинских исследований Уайтхеда).

Магнитная сепарация

Растущее использование магнитных твердых носителей в процессах биохимии и молекулярной биологии имеет много преимуществ по сравнению с другими процессами немагнитной сепарации. Термин «магнитный» означает, что опора приобретает магнитный момент, когда находится в магнитном поле. Таким образом, его можно сместить. Другими словами, частицы, обладающие магнитным моментом, могут быть легко удалены приложением магнитного поля, например с помощью постоянного магнита. Это быстрый, простой и эффективный способ разделения частиц после стадии связывания нуклеиновой кислоты или стадии элюирования (см.рис.) и гораздо менее строгий метод, чем традиционные методы, такие как центрифугирование, которые создают силы сдвига, которые могут привести к деградации нуклеиновых кислот. Также возможно выделить компоненты клеточного лизата, которые ингибируют, например, ДНК-полимеразу следующей реакции ПЦР, такие как полисахариды, фенольные соединения или гуминовые вещества (Demeke and Adams 1992; Watson and Blackwell 2000).

Схематическая процедура очистки нуклеиновой кислоты с помощью технологии магнитных шариков (иллюстрация Chemagen Biopolymer-Technology AG, Германия)

Обычно достаточно приложить магнит к стороне сосуда, содержащего смесь образцов, для агрегации частиц вблизи стенку сосуда и сливая остаток образца (см. рис.).

Магнитные носители с иммобилизованными аффинными лигандами или полученные из биополимера, проявляющего сродство к целевой нуклеиновой кислоте, используются для процесса выделения. Многие магнитные носители коммерчески доступны и могут быть приготовлены в лаборатории. Такие материалы представляют собой магнитные частицы, полученные из различных синтетических полимеров, биополимеров, пористого стекла или магнитных частиц на основе неорганических магнитных материалов, таких как оксид железа с модифицированной поверхностью. Особенно подходят суперпарамагнитные частицы, которые не взаимодействуют между собой в отсутствие магнитного поля.Эти частицы намагничиваются под действием сильного магнитного поля, но не сохраняют постоянного магнетизма, когда поле убирается. Когда магнитная агрегация и слипание частиц предотвращаются во время реакции, обеспечивается легкое суспендирование частиц и равномерная экстракция нуклеиновой кислоты.

Диаметр частиц составляет приблизительно от 0,5 до 10 мкм. Для связывания нуклеиновых кислот предпочтительны материалы с большой площадью поверхности. Не вдаваясь в теоретические подробности, можно сказать, что процессу связывания нуклеиновой кислоты может способствовать «обертывание» нуклеиновой кислоты носителя.Такие опоры обычно имеют неровную поверхность и могут быть, например, пористыми. Твердые материалы, например шарики и, в частности, полимерные шарики, как правило, предпочтительны из-за их большей связывающей способности. Обычно используемая твердая подложка в виде частиц будет содержать сферические шарики.

Монодисперсные частицы (частицы в основном однородного размера) обладают тем преимуществом, что обеспечивают очень однородную воспроизводимость магнитной сепарации.

Подготовка магнитных частиц для разделения нуклеиновых кислот

В лаборатории коллоидный магнетит Fe 3 O 4 (или аналогичный магнитный материал, такой как маггемит γFe 2 O 3 или ферриты) частицы обычно являются поверхностными. модифицировано силанизацией.Голый оксид железа (Fe 3 O 4 ) обладает способностью адсорбировать ДНК (Davies et al. 1998), но агрегаты из-за сил притяжения уменьшают площадь поверхности, которая может быть использована для адсорбции. Известно, что силановые соединения, связанные с магнетитом, дериватизированным с карбоксильными группами, обладают способностью извлекать ДНК в растворах, содержащих PEG (Hawkins et al. 1994). Модифицированные частицы бактериального магнетита в присутствии аминосилановых соединений и гиперразветвленного полиамидоаминового дендримера используются для экстракции ДНК Yoza et al.(2002, 2003). Модифицированные частицы магнитного феррита кобальта были исследованы на предмет выделения ДНК при высоких концентрациях хлорида натрия и ПЭГ Проделаловой и соавт. (2004).

Поверхность магнитных наночастиц модифицируется алкоксисиланами (Брюс и др. 2004; Тан и др. 2004; Брюс и Сен 2005) или полиэтиленимином (Чианг и др. 2005; Вейрет и др. 2005). Вышеупомянутые магнитные коллоиды нелегко разделить с помощью классических магнитов. Это связано с малым размером частиц, при котором силы броуновского движения выше, чем приложенная магнитная сила.Для улучшения разделения фаз были приготовлены различные магнитные латексы, которые могут взаимодействовать с нуклеиновыми кислотами.

Магнитные микрошарики можно получить разными способами, но обычно магниточувствительные частицы (например, оксид железа) покрывают синтетическими или биологическими полимерами. Elaissari et al. (2003) описывают взаимодействие нуклеиновых кислот и различных полимеров. Биополимеры, такие как агароза, хитозан, κ-каррагинан и альгинат, можно легко получить в магнитной форме (Levison et al.1998; Проделалова и др. 2004 г.). В простейшем случае раствор биополимера смешивают с магнитными частицами, и после образования объемного геля образовавшийся магнитный гель разбивается на мелкие частицы. В качестве альтернативы раствор биополимера, содержащий диспергированный магнетит, капают в смешанный отверждающий раствор, или для получения сферических частиц используется метод суспензии вода в масле. По сути, тот же процесс можно использовать для приготовления магнитных частиц для отделения нуклеиновых кислот от синтетических полимеров, таких как гидрофобный полистирол (Ugelstad et al.1992) и гидрофильный полиакриламид (Elaissari et al. 2001) или поливиниловый спирт (Oster et al. 2001). Геномная ДНК была также успешно выделена из клеточного лизата на слабокислотных производных магнитных микрочастиц P (HEMA- co -EDMA) и P (HEMA- co -GMA) в присутствии PEG и хлорида натрия (Horak et al. 2005).

Первый подход к синтезу микрочастиц был опубликован Ugelstad et al. Они разработали интересную методологию, которая привела к созданию моноразмерных магнитных микросфер из полистирола, которые были изучены в различных биомедицинских приложениях (Ugelstad et al.1993). Эти частицы имеют превосходное распределение по размерам и сферическую форму, но их поверхность очень гидрофобна и приводит к большому количеству неспецифического связывания белков на поверхности частиц.

Другая возможность состоит в сочетании различных материалов полимерной матрицы с компонентами диоксида кремния (Grüttner et al. 2001; Müller-Schulte et al. 2005), которые специфически взаимодействуют с нуклеиновыми кислотами.

В зависимости от носителя и природы требуемой последующей обработки, высвобождение нуклеиновой кислоты из носителя может оказаться желательным или нежелательным.Прямое использование магнитных шариков, например в ПЦР или других амплификациях без элюирования нуклеиновой кислоты с поверхности нетривиально. Методы ферментативного обнаружения и амплификации будут тормозиться магнитными шариками, их стабилизаторами или их оксидами металлов (Spanova et al. 2004), что снижает чувствительность ПЦР или приводит к ложноотрицательным результатам ПЦР. Для многих методов обнаружения или идентификации ДНК элюирование не требуется. Хотя ДНК может случайным образом контактировать с поверхностью шарика и связываться в ряде точек за счет связывания водорода, ионных или других сил, обычно имеется достаточная длина ДНК, доступная для гибридизации с олигонуклеотидами и для амплификации.Однако при желании элюирование нуклеиновой кислоты может быть достигнуто с использованием известных методов, например более высокая ионная сила, нагревание или изменение pH.

Коммерчески доступные магнитные частицы

Коммерчески доступные магнитные частицы, которые подходят для разделения нуклеиновых кислот, могут быть получены от множества компаний. В основном матрицы основаны на кремнеземе, пористом стекле, целлюлозе, агарозе, полистироле и силане (см. Таблицы и). Более того, существуют некоторые важные патенты, которые описывают синтез магнитных носителей не только для разделения ядер:

Таблица 1

Выбор имеющихся в продаже магнитных частиц, используемых (или подходящих) для разделения ДНК, РНК и пДНК

Калифорния, США ДНК
Продукт Диаметр (мкм) Состав Площадь поверхности (м 2 г −1 ) Вид нуклеиновой кислоты Производитель / поставщик
AGOWA ® mag a 5–10 n.k. п. k. ДНК, РНК AGOWA, Берлин, Германия
Dynabeads ® ДНК a 1.05, 2.80 Полистирол 1–10 ДНК )
Магнитные шарики ДНК GenoPrep ™ a n. k. Поверхность кремнезема n. k. ДНК GenoVision, Осло, Норвегия (компания Qiagen)
MagaZorb ® a 1–10 Целлюлоза Пористая ДНК / РНК San Cortex pDNA
MagneSil a 5–8.5 Силанизация оксида железа 27 ДНК / РНК пДНК Promega, Мэдисон, Висконсин, США
MagPrep ® Частицы кремнезема b ~ 1 Силанизация оксида железа 14–25 DNA Merck KgaA, Германия
MagSi b 1, 2, 5 n. k. п. k. ДНК / РНК MagnaMedics, Ахен, Германия
MGP c n.k. Стеклянная оболочка без пор Непористая ДНК / РНК Roche Diagnostic
M-PVA a 0,5–1, 1–3, 5–8 Поливиниловый спирт Непористый ДНК / РНК пДНК Chemagen Biopolymer Technology, Баесвайлер, Германия
Sicastar ® -M b 1.5, 6 Сополимер стирена и малеиновой кислоты Micromod Partikeltechnologie, Росток, Германия
SiMAG a 0.5, 0,75, 1 Силанизация оксида железа 100 ДНК / РНК пДНК Chemicell, Берлин, Германия
Магнитные частицы SPHERO b 1-2 Полистирол Непористый 90-226 ДНК Spherotech, Libertyville, IL, USA

Таблица 2

Выбор имеющихся в продаже магнитных частиц, используемых (или подходящих) для разделения мРНК

состав / модификация поверхности
Продукт Диаметр (мкм) Полимер Площадь поверхности (м 2 г −1 ) Производитель / поставщик
BcMag ® мРНК 1 или 5 Силанизация оксида железа n.k. Bioclone, Сан-Диего, Калифорния, США
BioMag ® oligo (dT) 20 ∼1 Силанизация оксида железа 100 Bangs Lab., Fisher, IN, USA or Polysciences, США
Dynabeads ® oligo (dT) 25 1,05, 2,8 мкм Полистирол 1–10 Dynal, Осло, Норвегия (теперь Invitrogen)
μMACS oligo Декстран Непористый Miltenyi Biotech, Бергиш-Гладбах, Германия
MagaCell ™ oligo-dT 30 1–10 Целлюлоза San Cortexand Пористая CA США
MagneSphere ® ∼1 Магнетит, покрытый стрептавидином 100–150 Promega, Мэдисон, Висконсин, США
MPG streptavidin ol ) 25 ∼5 Пористое боросиликатное стекло 60 PureBiotech, Мидлсекс, Нью-Джерси, США
M-PVA-oligo (dT) 30 Различное (0.5–1; 1–3; 5–8) Поливиниловый спирт Непористый Chemagen AG, Баесвайлер, Германия
мРНК-целлюлоза 1–10 Целлюлоза n. k. Scipac Ltd., Ситтингборн, Великобритания
Nucleo-Adembeads 0,1–0,5 Полимер 100 Ademtech, Пессак, Франция
дигидроцилиндр M100 Целлюлоза 10 Vector Lab., Burlingame, USA
Sera-Mag oligo (dT) 30 1 Полистирол Непористый Серадин, Индианаполис, IN, США

Один из первых патентов на синтез частиц «процесс полимеризации Ugelstad», который описан, например, в EP 0 003 905 B2, US 5,459,378 и US 4,530,956 (SINTEF). Это приводит к получению монодисперсных магнитных частиц за несколько стадий набухания и полимеризации. В WO / 1992/016581 (Cornell Research Foundation) также описано получение монодисперсных частиц, в частности гранул макропористого полимера.В предлагаемом процессе используется трехфазная эмульсия, содержащая частицы растворимого полимера, фазу мономера и воду. Разделение нуклеиновых кислот с использованием магнитных шариков описано в (Alderton et al. 1992) и в WO / 1991/012079, а также в US 5 523 231 (Amersham). Эти магнитные шарики способны абсорбировать нуклеиновую кислоту после осаждения солью этанолом. Подходы не являются специфичными для нуклеиновых кислот, то есть магнитные шарики параллельно адсорбируют другие биологические вещества. Конечно, это недостаток этих подходов.

В декларации WO / 1996/041811 (Boehringer; Roche) описаны в основном частицы непористого стекла, содержащие частицы слюды и магнетита (Bartl et al. 1998). Во время их производства магнитные частицы и окружающее их стеклянное покрытие накладываются на слюдяную сердцевину. Недостатком этих продуктов является их склонность к седиментации. Кроме того, производственный процесс занимает много времени и основан на сложном процессе распыления. Другой подход к производству частиц из сферических ядер магнетита с поверхностным покрытием из диоксида кремния описан в заявке на европейский патент EP 1 468 430 A1.

Монодисперсные магнитные шарики описаны в WO / 1998/012717 (Merck). Они состоят из сердечника из SiO 2 , магнитные свойства которого придаются покрытию из оксида железа. После последующей силанизации покрытия из оксида железа частицы могут связывать нуклеиновые кислоты.

Многие патенты, касающиеся разделения нуклеиновых кислот, принадлежат компании Dynal. Они разработали монодисперсные полимерные магнитные частицы с различными размерами (коэффициент вариации менее 5%) (см. EP 0 796 327 B1), которые продаются с полистирольной матрицей под названием Dynabeads ® .Распределение малых размеров обеспечивает воспроизводимые свойства разделения. Протоколы разделения нуклеиновых кислот с помощью этих частиц описаны в EP 0512439 B1, а с олигонуклеотид-связанными частицами для специфического разделения нуклеиновых кислот - в US 5,512,439.

Магнитные шарики на основе слюды или полистирола, покрытые магнитным оксидом, достигают высокой удельной плотности, что приводит к быстрой седиментации. Таким образом, необходимо дополнительное механическое перемешивание. Главный недостаток частиц с покрытием состоит в том, что оксиды металлов могут находиться в прямом контакте с аналитическими растворами, несмотря на силанизацию.Все современные подходы к производству магнитных шариков трудоемки; время производственного процесса составляет несколько часов. Чтобы преодолеть эту проблему, в патентах США 6 204 033 и 6 514 688 (Chemagen Biopolymer Technologie AG) описываются сферические магнитные полимерные частицы на основе частиц поливинилового спирта, которые могут быть получены в короткие сроки с использованием обратной полимеризации суспензии. Полимерные частицы содержат реакционноспособные гидроксильные группы, с которыми могут быть связаны другие молекулы. Из-за своей гидрофильной поверхности частицы обладают только небольшими неспецифическими связями.Вместе с по меньшей мере частично силанизированной поверхностью (DE 100 13 955 A1 и EP 1 274 745 A1) или германийсодержащим соединением (DE 101 03 652 A1) они могут использоваться для специфического разделения нуклеиновых кислот.

Обратный процесс суспендирования для разделения нано- и микрочастиц кремнезема предложен в WO / 2002/009125 (Fraunhofer-Gesellschaft). Основная идея заключается в дисперсии водной кремнеземной подошвы, содержащей магнитные коллоиды, которые затвердевают до сферических частиц гидрофильного геля путем добавления подходящей основы.Эти частицы можно использовать для разделения нуклеиновых кислот с высокой связывающей способностью (WO / 2005/50 52 581 A3, MagnaMedics GmbH).

Общая ДНК / РНК

Общая ДНК и РНК разделены одними и теми же магнитными шариками. С целью удаления РНК из ДНК, РНК разрушается перед этапом разделения ДНК. Добавление РНКазы или щелочи, такой как NaOH, является подходящим процессом. И наоборот, РНК может быть отделена, если ДНК расщепляется ДНКазой.

Плазмидная ДНК

Основным методом очистки плазмид является отделение плазмидной ДНК (пДНК) от хромосомной ДНК и клеточной РНК бактерий-хозяев.Stadler et al. (2004) показывают, что даже в случае высококопийной плазмиды пДНК составляет не более 3% очищенного лизата и что большинство критических примесей имеют отрицательный заряд (РНК, кДНК, эндотоксин) и аналогичны по размеру (кДНК, эндотоксины) и гидрофобность (эндотоксины). Был разработан ряд методов для получения очищенного лизата, но они не способны удалять белки и липиды. Щелочной лизис собранных бактериальных клеток с последующей нейтрализацией, как первоначально описано Birnboim and Doly (1979), является процессом выбора.Протоколы очищенного лизата могут незначительно отличаться друг от друга в отношении концентрации соли, объема, pH, температуры и продолжительности стадии процесса (Hirt 1967; Holmes and Quigley 1981; Birnboim 1983). Эти методы используют различия в характеристиках денатурации и ренатурации ковалентно замкнутой кольцевой плазмидной ДНК и фрагментов хромосомной ДНК.

Например, суперпарамагнитные наночастицы, модифицированные поливалентным катионным полиэтиленимином, используются для выделения пДНК из очищенного бактериального лизата (Chiang et al.2005).

В таблице показаны некоторые коммерчески доступные магнитные частицы, используемые для выделения ДНК, РНК и пДНК. Многие магнитные частицы доступны с оптимизированными буферами и протоколами для небольших лабораторий и автоматизированных систем. Есть также некоторые компании, предлагающие частицы для очистки нуклеиновых кислот без какой-либо дополнительной информации.

Аффинный захват РНК и ДНК

Магнитный носитель снабжен связывающими растворами, способствующими селективному захвату нуклеиновых кислот.Например, могут использоваться комплементарные последовательности ДНК или РНК (Satokari et al. 2005) или ДНК-связывающие белки, а также вирусные белки, связывающиеся с вирусными нуклеиновыми кислотами. В этом обзоре будет дан краткий обзор мРНК эукариот и вирусной ДНК / РНК.

Существует несколько компаний (см. Таблицу), предлагающих олигодезокситимидин, иммобилизованный магнитными частицами, который можно эффективно использовать для быстрого выделения высокоочищенной мРНК из культур эукариотических клеток или препаратов тотальной РНК (Jacobsen et al.2004 г.). Эти процедуры основаны на гибридизации олигонуклеотидной последовательности dT со стабильными полиаденилированными 3-мя концами эукариотической мРНК. Длина комплементарной последовательности варьируется от 20 до 30 олигонуклеотидов. Эта последовательность напрямую связана ковалентно с поверхностью частицы или косвенно биотинилированными олигонуклеотидами и взаимодействием покрытых стрептавидином частиц. CPG и Dynal (теперь Invitrogen) предлагают MPG ® и Dynabeads ® с уже иммобилизованным биотинилированным олигонуклеотидом, но также другие компании предлагают модифицированные стрептавидином частицы, которые можно использовать для выделения мРНК, как описано, например, e.грамм. с помощью набора для выделения мРНК с MagneSphere ® от Promega. Почти все магнитные частицы (за исключением MagaCell ™ oligo-dT 30 и Sera-Mag oligo- (dT) 30 ) доступны вместе с оптимизированной буферной системой и полезными протоколами.

Автоматическая экстракция вирусной РНК и ДНК из мини-пула плазмы выполняется с помощью химического набора вирусных ДНК / РНК и химического модуля магнитного разделения I (Hourfar et al. 2005a, b; Pichl et al. 2005).

Быстрая диагностика энтеровирусной инфекции путем извлечения магнитных шариков была установлена ​​Muir et al.(1993). РНК энтеровируса можно выделить из проб воды большого объема с помощью системы NucliSens miniMAG (Rutjes et al. 2005). Hei и Cai (2005) разработали систему очистки РНК коронавируса SARS путем гибридизации определенной олигонуклеотидной последовательности, которая иммобилизована на поверхности магнитных шариков.

Магнитные сепараторы

На рынке доступно множество магнитных сепараторов, от очень простых концентраторов для одной трубки до сложных полностью автоматизированных устройств.Выделение нуклеиновых кислот в основном выполняется в периодическом режиме с использованием имеющихся в продаже лабораторных магнитных сепараторов (концентраторов частиц). Сепараторы обычно изготавливаются из сильных редкоземельных постоянных магнитов, предназначенных для удержания различного количества микротрубок или трубок.

Частицы диаметром более 1 мкм можно легко отделить с помощью простых магнитных сепараторов, в то время как для отделения более мелких частиц (магнитных коллоидов с размером частиц от десяти до сотен нанометров) может потребоваться использование высокоградиентных магнитных сепараторов.

Многие компании, которые в основном предлагают магнитные частицы, также имеют в своем портфолио сепараторы периодического действия. Выбор имеющихся в продаже магнитных сепараторов периодического действия представлен в таблице.

Таблица 3

Выбор имеющихся в продаже магнитных сепараторов периодического действия

-0. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Breadmore MC, Wolfe KA, Arcibal IG, Leung WK, Dickson D, Giordano BC, Power ME, Ferrance JP, Feldman SH, Norris PM, Landers JP. Микрочиповая очистка ДНК из биологических образцов. Anal Chem. 2003; 75: 1880–1886. DOI: 10.1021 / ac0204855. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Брюс И.Дж., Сен Т. Модификация поверхности магнитных наночастиц алкоксисиланами и их применение в магнитных биоразделениях.Ленгмюра. 2005; 21: 7029–7035. DOI: 10.1021 / la050553t. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Брюс И.Дж., Тейлор Дж., Тодд М., Дэвис М.Дж., Бориони Э., Сангрегорио С., Сен Т. Синтез, характеристика и применение нанокомпозитов кремнезем-магнетит. J Magn Magn Mater. 2004. 284: 145–160. DOI: 10.1016 / j.jmmm.2004.06.032. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Чианг К.Л., Сун Ц.-С, Ву Т-Ф, Чен Ц.-И, Сюй Ц.-И. Применение суперпарамагнитных наночастиц для очистки плазмидной ДНК от бактериальных клеток.J Chromatogr B. 2005; 822: 54–60. DOI: 10.1016 / j.jchromb.2005.05.017. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Дэвис М.Дж., Тейлор Д.И., Саксингер Н., Брюс И.Дж. Выделение плазмидной ДНК с использованием магнетита в качестве твердофазного адсорбента. Анальная биохимия. 1998. 262: 92–94. DOI: 10.1006 / abio.1998.2743. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Демеке Т., Адамс Р.П. Влияние полисахаридов растений и буферных добавок на ПЦР. Биотехники. 1992; 12: 332–334. [PubMed] [Google Scholar]
  • Elaissari A, Rodrigue M, Meunier F, Herve C.Гидрофильный магнитный латекс для экстракции, очистки и концентрирования нуклеиновых кислот. J Magn Magn Mater. 2001; 225: 127–133. DOI: 10.1016 / S0304-8853 (00) 01240-3. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Elaissari A, Ganachaud F, Pichot C. Биорелевантные латексы и микрогели для взаимодействия с нуклеиновыми кислотами. Top Curr Chem. 2003. 227: 169–193. DOI: 10.1007 / 3-540-36412-9_7. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Endres HN, Johnson JA, Ross CA, Welp JK, Etzel MR. Оценка ионообменной мембраны для очистки плазмидной ДНК.Biotechnol Appl Biochem. 2003. 37: 259–266. DOI: 10.1042 / BA20030025. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Fangan BM, Dahlberg OJ, Deggerdal AH, Bosnes M, Larsen F. Автоматизированная система очистки продуктов секвенирования с терминаторами красителей исключает предварительную очистку шаблонов. Биотехники. 1999; 26: 980–983. [PubMed] [Google Scholar]
  • Ferreira GNM, Cabral JMS, Prazeres DMF. Исследования периодической адсорбции плазмидной ДНК на анионообменных хроматографических носителях. Biotechnol Prog.2000. 16: 416–424. DOI: 10,1021 / bp0000196. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Францреб М., Симан-Херцберг М., Хобли Т.Дж., Томас ОРТ. Очистка белков с помощью частиц магнитного адсорбента. Appl Microbiol Biotechnol. 2006; 70: 505–516. DOI: 10.1007 / s00253-006-0344-3. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Grüttner C, Rudershausen S, Teller J. Улучшение свойств магнитных частиц за счет комбинации различных полимерных материалов в качестве матрицы частиц. J Magn Magn Mater. 2001; 225: 1–7.DOI: 10.1016 / S0304-8853 (00) 01220-8. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Хокинс Т.Л., О’Коннор-Морин Т., Рой А., Сантильян С. Очистка и выделение ДНК с использованием твердой фазы. Nucleic Acids Res. 1994; 22: 4543–4544. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Hei AL, Cai JP. Разработка метода концентрирования и очистки РНК коронавируса SARS с помощью системы захвата магнитных шариков. ДНК и клеточная биол. 2005. 24: 479–484. DOI: 10.1089 / dna.2005.24.479. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Хирт Б.Селективное извлечение ДНК полиомы из инфицированных культур клеток мыши. J Mol Biol. 1967. 26: 365–369. DOI: 10.1016 / 0022-2836 (67)
  • Компания Сепаратор Описание
    Ademtech Adem-Mag96 Планшет Adem-Mag96 96 12 × 1.Реакционные пробирки на 5 мл (смешивание и разделение)
    AGOWA GmbH AGOWA ® Sep 9600 96-луночный планшет (температура регулируется, контролируется компьютером)
    AGOWA ® Sep 7200 48-луночный планшет
    AGOWA ® maxisepPLUS 2400 24-луночный планшет (объем 5 мл)
    Bangs Laboratories, Inc. планшет с лунками
    BioMag ® 96-луночный сепаратор планшетов
    Bioclone, Inc. Bc ® Магнитный сепаратор Mag-2 2 пробирки по 1,5 мл
    Bc ® Магнитный сепаратор Mag-6 6 пробирок по 1,5 мл
    Bc ® Магнитный сепаратор Mag- 24 24 пробирки по 1,5 мл или 2 мл
    Bc ® Магнитный сепаратор Mag-50 1 пробирка по 50 мл + 1 пробирка по 15 мл
    chemagen Biopolymer-Technologie AG стенд для хемагена 2 × 12 12 × 1.5 мл + 12 пробирок по 2 мл
    стойка для хемагена 96 96-луночный планшет
    стойка для хемагена 50 k Тип A Общий объем 10–50 мл
    стойка для хемагена 50 k Тип B макс. Объем 15 мл
    Подставка для хемагена MultiTube 16 × 50 мл (перевернутая)
    Chemicell GmbH MagnetoPure 2 пробирки по 1,5 мл + 2 пробирки по 2 мл
    Cortex Biochem 96-21 Cortex Biochem магнитный сепаратор для лунок с нижним и боковым отводами
    CPG, Inc. 3-в-1 MPS ® 8 × 1,5 мл или 1 × 15 мл + 1 × 1,5 мл или 1 × 50 мл + 1 × 1,5 мл
    96-луночный MPS ® 96-луночный планшет
    Kisker GmbH Разделительный штатив Magna 5 × 1,5 / 2 мл для разделения плюс 5 × 1,5 / 2 мл для хранения
    Разделительный штатив VariMag Три различных комбинации
    Стойка для сепарации UltraMag 96-луночный планшет
    Miltenyi Biotech GmbH Сепараторы MACS ™ Различные модели
    Promega MagnaBot ® 96 Устройство магнитного разделения 96-луночный планшет

    Штативы предназначены для размещения различного количества микропробирок или пробирок.Магнитные сепараторы для пробирок позволяют отделять магнитные частицы из объемов от 5 мкл до 50 мл. Существует множество комбинаций с другими функциями, такими как функция смешивания (Ademtech) или возможность переворачивать сепаратор для удаления надосадочной жидкости (chemagen Biopolymer-Technologie AG). Другие устройства применяются для отделения магнитных частиц из лунок стандартных микротитровальных планшетов. В некоторых из них температура может контролироваться компьютером (AGOWA), другие устройства могут быть вставлены в устройства автоматического разделения.

    Автоматизация лабораторий приобретает все большее значение в молекулярной биологии и биотехнологии. Постоянно увеличивающееся количество анализов различных источников и объемов образцов привело к огромной важности гибких роботов или автоматизированных систем. Автоматизация также необходима для работы с большим количеством проб без человеческих ошибок.

    Многие инструменты были разработаны для автоматизации амплификации ПЦР, реакции секвенирования и обнаружения нуклеиновых кислот, но автоматизация экстракции ДНК традиционными методами с центрифугированием и этапами вакуума по-прежнему затруднена.Полное разделение твердой матрицы-носителя центрифугированием невозможно. Нельзя использовать опоры, заполненные материалами-носителями, поскольку неизбежные мертвые объемы опоры приводят к потере материала пробы в случае небольших количеств материалов пробы. Еще один недостаток - опасность взаимного заражения разных биологических образцов, особенно если непосредственно соседние опоры опорожняются вакуумом. Однако последнее десятилетие показывает, что очистка ДНК с использованием технологии магнитных шариков подходит для систем автоматизации, и было разработано несколько автоматизированных инструментов для работы с магнитными шариками (Alderton et al.1992; Wahlberg et al. 1992; Рольфс и Вебер 1994; Fangan et al. 1999; Obata et al. 2001; Акуцу и др. 2004; Vuosku et al. 2004 г.).

    Все больше и больше поставщиков предлагают коммерчески автоматизированные устройства для работы с магнитными частицами, например для очистки нуклеиновой кислоты (см. таблицу). Большинство систем предлагается вместе с оптимизированными для конкретной системы частицами, буферными системами и протоколами.

    Таблица 4

    Выбор имеющихся в продаже автоматических магнитных сепараторов

    Высокая производительность 96 909 902 902
    Компания Устройство Параллельные образцы Образцы за цикл Объем образца a
    chemagen Biopolymer-Technologie AG chemagic MSM I (96 штанговая головка) 96 96 10–400 мкл
    Qiagen GmbH BioSprint ® 96 96 100226 96 100226 мкл или 200 мкл
    Thermo Labsystems KingFisher ® 96 См. BioSprint ® 96 (Qiagen GmbH)
    Низкая и средняя производительность; большие объемы
    chemagen Biopolymer-Technologie AG Chemagic MSM I (12 штанговых головок) 12 12 1–10 мл
    Promega Maxwell ™ 16 10–400 мкл
    PSS Bio Instruments Magtration ® Система 8Lx 8 8 7 мл
    Qiagen GmbH BioRobot61 22 ® 9006 909 M48 макс.200 мкл
    BioRobot ® EZ1 6 6 макс. 200 мкл
    BioRobot ® 15 15 15 50–1000 мкл
    Roche Diagnostics GmbH MagNa Pure Compact 8 8 MagNa Pure LC 8 32 100–1000 мкл
    Cobas ® AmpliPrep 1 72 250–1 500 мкл
    King The Guardian Labisher 9021 См. BioRobot ® 15 (Qiagen GmbH)
    GenoVision GenoM ™ -6 См. BioRobot ® EZ1 (Qiagen GmbH)

    Устройства могут обрабатывать образцы параллельно и обычно настраиваются для небольших объемов буфера.Для больших объемов можно использовать Chemagic Magnetic Separation Module I (<10 мл) (см. Рис.) Или Magtration ® System 8 л × (7 мл).

    Chemagic Модуль магнитного разделения I, состоящий из ( A ) разделительной головки с намагничиваемыми стержнями [здесь 12-луночный формат для больших (50 мл) объемов; Также доступен 96-луночный формат для MTP], ( B ) электромагнит, ( C ) химический дозатор для параллельного заполнения всех необходимых буферных растворов (принадлежность) и ( D ) блок отслеживания.Принципиальная функциональность в отношении разделения и ресуспендирования магнитных шариков показана на схеме

    Заключение

    Настоящий обзор показал, что разделение нуклеиновой кислоты является высокодинамичной областью исследований и разработок. Все большее число коммерческих поставщиков предлагают магнитные частицы, также в форме набора, который оптимально подходит для желаемого применения. Растущее количество публикаций показывает, что в настоящее время проводятся исследования магнитных частиц с более высоким потенциалом.Перспективными подходами являются материалы с более специфическими связывающими свойствами и лучшей отделимостью. Более высокая степень автоматизации приводит к тому, что системы одновременно анализируют большее количество проб и более высокие объемы проб.

    Однако до сих пор не было реализовано реального масштабирования для очистки больших объемов (в литрах).

    Ссылки

    • Akutsu J-I, Tojo Y, Okochi M, Yohda M, Segawa O, Obata K, Tajima H. ​​Разработка интегрированной системы автоматизации с устройством очистки нуклеиновых кислот с помощью магнитных шариков для генетического анализа и манипуляции с генами.Biotechnol Bioeng. 2004. 86: 667–671. DOI: 10.1002 / бит.20049. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
    • Олдертон Р.П., Экклстон Л.М., Хоу Р.П., Рид К.А., Рив М.А., Бек С. Очистка шаблонов секвенирования ДНК M13 с помощью магнитных шариков. Анальная биохимия. 1992; 201: 166–169. DOI: 10.1016 / 0003-2697 (92)

      -I. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    • Бартл К., Венциг П., Клейбер Дж. Простая и широко применимая подготовка проб с использованием частиц магнитного стекла. Clin Chem Labor Med. 1998. 36: 557–559.DOI: 10.1515 / CCLM.1998.095. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
    • Birnboim HC. Метод быстрой щелочной экстракции для выделения плазмидной ДНК. Методы Энзимол. 1983; 100: 243–255. [PubMed] [Google Scholar]
    • Birnboim HC, Doly J. Процедура быстрой щелочной экстракции для скрининга рекомбинантной плазмидной ДНК. Nucleic Acid Res. 1979; 7: 1513–1523. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Boom R, Sol CJ, Salimans MM, Jansen CL, Wertheim-van Dillen PM, van der Noordaa J.Быстрый и простой метод очистки нуклеиновых кислот. J Clin Microbiol. 1990; 28: 495–503. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Boom R, Sol C, Beld M, Weel J, Goudsmit J, Wertheim-van Dillen P. Улучшенная процедура выделения ДНК из тиоцианата кремнезема и гуанидиния, основанная на избирательном связывании бычьего альфа -казеин к частицам кремнезема. J Clin Microbiol. 1999. 37: 615–619. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
    • Bowtell DD. Быстрое выделение эукариотической ДНК. Анальная биохимия.1987. 162: 463–465. DOI: 10.1016 / 0003-2697 (87)
    -5. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Холмс Д.С., Куигли М. Метод быстрого кипячения для приготовления бактериальных плазмид. Анальная биохимия. 1981; 114: 193–197. DOI: 10.1016 / 0003-2697 (81)
  • -5. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Horak D, Rittich B, Spanova A, Benes MJ. Магнитные носители микрочастиц с иммобилизованными селективными лигандами в ДНК-диагностике.Полимер. 2005; 46: 1245–1255. DOI: 10.1016 / j.polymer.2004.11.049. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Hourfar MK, Michelsen U, Schmidt M, Berger A, Seifried E, Roth WK. Высокопроизводительная очистка вирусной РНК на основе новой водной химии для выделения нуклеиновых кислот. Clinic Chem. 2005; 51: 1217–1222. DOI: 10.1373 / Clinchem.2005.048603. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Hourfar MK, Schmidt M, Seifried E, Roth WK. Оценка автоматизированного метода экстракции вирусных нуклеиновых кислот в больших объемах по сравнению с ручной процедурой с предшествующим обогащением.Vox Sang. 2005. 89: 71–76. DOI: 10.1111 / j.1423-0410.2005.00649.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Jacobsen N, Nielsen PS, Jeffares DC, Eriksen J, Ohlsson H, Arctander P, Kauppinen S. Прямое выделение поли (A) (+) РНК из 4 M тиоцианата гуанидина- лизированные клеточные экстракты с использованием заблокированного захвата нуклеиновой кислоты-олиго (Т). Nucleic Acids Res. 2004; 32: e64. DOI: 10.1093 / nar / gnh056. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Levison PR, Badger SE, Dennis J, Hathi P, Davies MJ, Bruce IJ, Schimkat D.Последние разработки магнитных шариков для использования в очистке нуклеиновых кислот. J Chromatogr A. 1998; 816: 107–111. DOI: 10.1016 / S0021-9673 (98) 00064-8. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Melzak KA, Sherwood CS, Turner RFB, Haynes CA. Движущие силы адсорбции ДНК на диоксиде кремния в растворах перхлоратов. J Colloid Interface Sci. 1996. 181: 635–644. DOI: 10.1006 / jcis.1996.0421. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Мьюир П., Николсон Ф., Джетман М., Неоги С., Банатвала Дж. Э. Быстрая диагностика энтеровирусной инфекции с помощью экстракции магнитных шариков и обнаружения РНК энтеровируса с помощью полимеразной цепной реакции в клинических образцах.J Clin Microbiol. 1993; 31: 31–38. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Мюллер-Шульте Д., Шмитц-Роде Т., Борн П. Сверхбыстрый синтез магнитных и люминесцентных шариков кремнезема для разнообразных биоаналитических приложений. J Magn Magn Mater. 2005. 293: 135–143. DOI: 10.1016 / j.jmmm.2005.01.088. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Obata K, Segawa O, Yakabe M, Ishida Y, Kuroita T, Ikeda K, Kawakami B, Kawamura Y, Yohda M, Matsunaga T., Tajima H. ​​Разработка нового метода работы с магнитными полями. частиц, Magtration Technology, и ее использование для автоматизации очистки нуклеиновых кислот.J Biosci Bioeng. 2001. 91: 500–503. DOI: 10.1263 / jbb.91.500. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Олсвик Э., Попович Т., Скьерве Э., Куджо К.С., Хорнс Э., Угельстад Дж., Улен М. Методы магнитной сепарации в диагностической микробиологии. Clin Microbiol Rev.1994; 7: 43–54. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Остер Дж., Паркер Дж., Брассард Л.А. Магнитные шарики на основе поливинилового спирта для быстрого и эффективного разделения специфических или неспецифических последовательностей нуклеиновых кислот. J Magn Magn Mater.2001; 225: 145–150. DOI: 10.1016 / S0304-8853 (00) 01243-9. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Пихл Л., Хейтманн А., Херцог П., Остер Дж., Сметс Х., Шоттштедт В. Технология магнитных шариков в вирусной РНК и экстракции ДНК из мини-бассейнов плазмы. Переливание. 2005. 45: 1106–1110. DOI: 10.1111 / j.1537-2995.2005.04356.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Проделалова Дж., Риттич Б., Спанова А., Петрова К., Бенеш М.Дж. Выделение геномной ДНК с использованием магнитного феррита кобальта и частиц кремнезема. J Хроматограф А.2004; 1056: 43–48. DOI: 10.1016 / j.chroma.2004.08.090. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Рольфс А., Вебер И. Полностью автоматизированное, нерадиоактивное твердофазное секвенирование геномной ДНК, полученной с помощью ПЦР. Биотехники. 1994; 17: 782–787. [PubMed] [Google Scholar]
  • Rutjes SA, Italiaander R, van den Berg HHJL, Lodder WJ, de Roda Husman AM. Выделение и обнаружение РНК энтеровируса из проб воды большого объема с использованием системы nucliSens miniMAG и амплификации на основе последовательностей нуклеиновых кислот в реальном времени.Appl Environ Microbiol. 2005; 71: 3734–3740. DOI: 10.1128 / AEM.71.7.3734-3740.2005. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Сафарик И., Сафарикова М. Использование магнитных методов для изоляции клеток. J Chromatogr B. 1999; 722: 33–53. [PubMed] [Google Scholar]
  • Сафарик И., Птацкова Л., Сафарикова М. Крупномасштабное разделение магнитных биоаффинных адсорбентов. Biotechnol Lett. 2001; 23: 1953–1956. DOI: 10,1023 / А: 1013742002533. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Сатокари Р.М., Катая К., Содерлунд Х.Мультиплексное количественное определение бактериальной 16S рРНК путем гибридизации в растворе с олигонуклеотидными зондами и аффинного захвата. Microb Ecol. 2005. 50: 120–127. DOI: 10.1007 / s00248-004-0136-1. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Спанова А., Хорак Д., Судкова Е., Риттих Б. Магнитные гидрофильные полимерные микросферы на основе метакрилата, разработанные для приложений полимеразной цепной реакции. J Chromatogr B. 2004; 800: 27–32. DOI: 10.1016 / j.jchromb.2003.09.010. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Stadler J, Lemmens R, Nyhammar T.Очистка плазмидной ДНК. J Gene Med. 2004; 6: S54 – S66. DOI: 10.1002 / JGM.512. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Tan W, Wang K, He X, Zhao XJ, Drake T, Wang L, Bagwe RP. Бионанотехнология на основе наночастиц кремнезема. Med Res Rev.2004; 24: 621–638. DOI: 10.1002 / med.20003. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Teeters MA, Conrardy SE, Thomas BL, Root TW, Lightfoot EN. Адсорбционная мембранная хроматография для очистки плазмидной ДНК. J Chromatogr A. 2003; 989: 165–173. DOI: 10.1016 / S0021-9673 (03) 00027-Х. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Tian H, Huhmer AFR, Landers JP. Оценка кремнеземных смол для прямого и эффективного извлечения ДНК из сложных биологических матриц в миниатюрном формате. Анальная биохимия. 2000. 283: 175–191. DOI: 10.1006 / abio.2000.4577. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Ugelstad J, Berge A, Ellingsen T., Schmid R, Nilsen T.-N, Sienstad P, Mørk PC, Hornes E, Olsvik Ø. Приготовление и нанесение новых моноразмерных полимерных частиц.Prog Polym Sci. 1992; 17: 87–161. DOI: 10.1016 / 0079-6700 (92)

    -S. [CrossRef] [Google Scholar]

  • Угельстад Дж., Морк П.С., Шмид Р., Эллингсен Т., Берге А. Получение и биохимические и биомедицинские применения новых моноразмерных полимерных частиц. Polym Intern. 1993. 30: 157–168. [Google Scholar]
  • Вейрет Р., Делэр Т., Пичот С., Элаиссари А. Аминосодержащие магнитные наноэмульсии: разработка и экстракция нуклеиновых кислот. J Magn Magn Mater. 2005. 295: 155–163. DOI: 10.1016 / j.jmmm.2005.01.008. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Фогельштейн Б., Гиллеспи Д. Препаративная и аналитическая очистка ДНК от агарозы. Proc Natl Acad Sci USA. 1979; 76: 615–619. DOI: 10.1073 / pnas.76.2.615. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Vuosku J, Jaakola L, Jokipii S, Karppinen K, Kamarainen T., Pelkonen VP, Jokela A, Sarjala T., Hohtola A, Haggman H. ДНК и РНК с помощью магнитной ловли работают на различные виды растений? Mol Biotechnol. 2004. 27: 209–215.DOI: 10.1385 / MB: 27: 3: 209. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Уолберг Дж., Холмберг А., Берг С., Халтман Т., Улен М. Автоматическая магнитная подготовка ДНК-матриц для твердофазного секвенирования. Электрофорез. 1992; 13: 547–551. DOI: 10.1002 / elps.11501301112. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Уотсон Р.Дж., Блэквелл Б. Очистка и характеристика общего компонента почвы, который ингибирует полимеразную цепную реакцию. Может J Microbiol. 2000; 46: 633–642. DOI: 10.1139 / cjm-46-7-633.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Wilcockson J. Использование перхлората натрия для депротеинизации при получении нуклеиновых кислот. Биохим Дж. 1973; 135: 559–561. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Йоза Б., Мацумото М., Мацунага Т. Экстракция ДНК с использованием модифицированных бактериальных магнитных частиц в присутствии аминосиланового соединения. J Biotechnol. 2002; 94: 217–224. DOI: 10.1016 / S0168-1656 (01) 00427-8. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Йоза Б., Аракаки А., Мацунага Т.Экстракция ДНК с использованием бактериальных магнитных частиц, модифицированных сверхразветвленным дендримером полиамидоамина. J Biotechnol. 2003. 101: 219–228. DOI: 10.1016 / S0168-1656 (02) 00342-5. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Патентные спецификации и заявки

    • DE 100 13 995 A1 / EP 1 274 745 A1 Magnetische, silanisierte Trägermaterialien auf Basis von Polyvinylalkohol (2001) Parker J, OsterÀ, Brassard L ; Chemagen Biopolymer-Technologie AG, Германия
    • DE 101 03 652 A1 Магнитный поливинилалкохолпартикель с модификатором Oberfläche zur Isolierung und Reinigung von Nukleinsäuren (2002) Брассард Л.А, Паркер Дж., Сметс Х, Остер Дж; Chemagen Biopolymer-Technologie AG, Германия
    • DE 41 43 639 C2 Verfahren zur Isolierung und Reinigung von Nukleinsäuren (1991) Colpan M; Qiagen GmbH, Германия
    • DE 41 27 657 A1 Perlförmige Polyvinylalkoholgele für die Aufreinigung und Auftrennung biologischer Flüssigkeiten, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung (1991) Müller-Schulte D; Германия
    • EP 0 003 905 B2 Способ получения водной эмульсии или дисперсии частично водорастворимого материала (1979) Ugelstad J; SINTEF, Норвегия
    • EP 0728198 B1 Выделение нуклеиновой кислоты (1994) Breivik J, Gaudernack G, Spurkland A; Qiagen GmbH, Германия
    • EP 0 796 327 B1 Выделение нуклеиновой кислоты (1995) Deggerdal AH, Larsen F; Dynal A / S
    • EP 1 468 430 A1 Siliziumhaltige Magnetpartikel: Verfahren zu deren Herstellung und Verwendung der Partikel (2003) Hennig G, Hildenbrand K; Bayer AG, Германия
    • US 4336173 Процесс приготовления водной эмульсии или дисперсии частично водорастворимого материала и, необязательно, дальнейшего превращения приготовленной дисперсии или эмульсии в полимерную дисперсию, когда частично растворимый в воде материал является полимеризуемым мономером ( 1980) Ugelstad J; SINTEF, Норвегия
    • US 4 530 956 Процесс приготовления водных дисперсий органических материалов и возможное дальнейшее превращение в полимерную дисперсию, когда органический материал представляет собой полимеризуемый мономер (1985) Ugelstad J, Berge A; SINTEF Norway
    • US 4 459 378 Монодисперсные полимерные частицы и их дисперсии (1982) Ugelstad J; SINTEF, Норвегия
    • US 5,075,430 Процесс очистки ДНК на диатомовой земле (1990) Little MC.; Bio-Rad Laboratories
    • US 5,512,439 Магнитные частицы, связанные с олигонуклеотидами, и их использование (1994) Hornes E, Korsnes L; Dynal AS, Осло, Норвегия
    • US 5,523,231 Метод выделения макромолекул с использованием магнитно притягивающихся шариков, которые не связывают макромолекулы специфически (1996) Reeve MA; Amersham International PLC, GB
    • US 5 234 809 и EP 0 389 063 B1. Процесс выделения нуклеиновой кислоты (1991) Boom WR, Adriaanse HMA, Kievits T, Lens PF; Akzo N.V., Нидерланды
    • US 6,204,033 Приготовление магнитных частиц на основе поливинилового спирта для связывания биомолекул (1998) Müller-Schulte D; Германия
    • США 6 514 688 Разделение, обнаружение или количественная оценка биологических материалов с использованием магнитно-сшитых частиц поливинилового спирта (2000) Müller-Schultem D; chemagen Biopolymer-Technologie AG, Германия
    • WO / 1991/012079 Способ выделения макромолекул с использованием магнитно притягиваемых шариков, которые не связывают макромолекулы специфически (1991) Reeve MA; Amersham International PLC
    • WO / 1996/041811 Магнитный пигмент (1996) Kleiber J, Walter T, Harttig H, Lesniak C, Mennig M, Riedling M, Schmidt H; Boehringer Mannheim GmbH, Германия
    • WO / 1998/012717 Сферические магнитные частицы (1996) Anselmann R, Pellatt MG; Merck Patent GmbH, Германия
    • WO / 2002/009125 Сферические магнитные частицы SiO 2 с регулируемыми частицами и размером пор и регулируемым магнитным наполнением.Способ их получения и использование частиц SiO 2 этого типа (2001) Müller-Schulte D, Fischer R; Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Германия
    • WO / 2005/50581 A3 Sphärische, magnetische Silicagel-Träger mit vergrößerter Oberfläche für die Aufreinigung von Nukleinsäuren (2003) Müller-Schulte D; MagnaMedics GmbH, Германия

    Разработка больших сверхпроводящих соленоидных магнитов с высокой плотностью тока для использования в экспериментах по физике высоких энергий.[Диссертация] (Технический отчет)

    Green, M. A. Разработка больших сверхпроводящих соленоидных магнитов с высокой плотностью тока для использования в экспериментах по физике высоких энергий. [Диссертация] . США: Н. П., 1977. Интернет. DOI: 10,2172 / 7278286.

    Грин, М. А. Разработка больших сверхпроводящих соленоидных магнитов с высокой плотностью тока для использования в экспериментах по физике высоких энергий.[Диссертация] . Соединенные Штаты. https://doi.org/10.2172/7278286

    Грин, М. А. Вс. "Разработка больших сверхпроводящих соленоидных магнитов с высокой плотностью тока для использования в экспериментах по физике высоких энергий. [Тезисы]". Соединенные Штаты. https://doi.org/10.2172/7278286. https://www.osti.gov/servlets/purl/7278286.

    @article {osti_7278286,
    title = {Разработка больших сверхпроводящих соленоидных магнитов с высокой плотностью тока для использования в экспериментах по физике высоких энергий.[Диссертация]},
    author = {Green, M A},
    abstractNote = {Описывается разработка уникального типа большого сверхпроводящего соленоидного магнита, характеризующегося очень высокой плотностью тока обмоток и двухфазной гелиевой трубчатой ​​системой охлаждения. Описана разработка концептуального дизайна магнита и конструкция двух тестовых соленоидов. Представлено успешное испытание сверхпроводящей катушки и ее трубчатой ​​системы охлаждения. Показано влияние программы испытаний на безопасность, окружающую среду и экономику на будущие разработки в области физики высоких энергий.Детекторы частиц с большим телесным углом для физики встречных пучков будут анализировать как заряженные, так и нейтральные частицы. Во многих случаях эти детекторы требуют, чтобы нейтральные частицы, такие как гамма-лучи, проходили через катушку магнита с минимальным взаимодействием. Катушки магнита должны быть как можно более тонкими. Использование сверхпроводящих обмоток позволяет минимизировать толщину излучения, в то же время максимизируя разрешение по импульсу заряженных частиц и экономя значительное количество электроэнергии.Результаты экспериментальных измерений показывают, что большие соленоидные магниты с высокой плотностью тока можно заставить работать при высоких накопленных энергиях. Описанная разработка сверхпроводящего магнита оказывает положительное влияние на безопасность и окружающую среду. Использование больших тонких сверхпроводящих соленоидов с высокой плотностью тока было предложено в двух экспериментах по физике высоких энергий, которые будут проведены в Стэнфордском центре линейных ускорителей и Корнельском университете в результате описанных успешных экспериментов.},
    doi = {10.2172 / 7278286},
    url = {https://www.osti.gov/biblio/7278286}, журнал = {},
    номер =,
    объем =,
    место = {США},
    год = {1977},
    месяц = ​​{5}
    }

    % PDF-1.6 % 4063 0 obj> эндобдж xref 4063 79 0000000016 00000 н. 0000009110 00000 п. 0000009238 00000 п. 0000009370 00000 п. 0000010113 00000 п. 0000010268 00000 п. 0000010422 00000 п. 0000010561 00000 п. 0000010707 00000 п. 0000010817 00000 п. 0000010927 00000 п. 0000011035 00000 п. 0000011063 00000 п. 0000011642 00000 п. 0000012567 00000 п. 0000012703 00000 п. 0000012846 00000 п. 0000012874 00000 п. 0000013506 00000 п. 0000014057 00000 п. 0000014665 00000 п. 0000015230 00000 п. 0000015806 00000 п. 0000016376 00000 п. 0000016527 00000 п. 0000016638 00000 п. 0000017199 00000 п. 0000018000 00000 н. 0000023336 00000 п. 0000023533 00000 п. 0000023603 00000 п. 0000024124 00000 п. 0000024152 00000 п. 0000029914 00000 н. 0000030133 00000 п. 0000030203 00000 п. 0000030699 00000 п. 0000034747 00000 п. 0000034969 00000 п. 0000035039 00000 п. 0000035456 00000 п. 0000041377 00000 п. 0000092886 00000 п. 0000092962 00000 н. 0000093038 00000 п. 0000097283 00000 п. 0000100080 00000 н. 0000100189 00000 н. 0000100575 00000 н. 0000100964 00000 н. 0000101054 00000 н. 0000101164 00000 н. 0000107400 00000 н. 0000107785 00000 н. 0000107984 00000 п. 0000108092 00000 н. 0000108120 00000 н. 0000108545 00000 н. 0000110236 00000 п. 0000110449 00000 н. 0000110519 00000 п. 0000110763 00000 н. 0000110791 00000 п. 0000111150 00000 н. 0000136413 00000 н. 0000136616 00000 н. 0000136686 00000 н. 0000136960 00000 н. 0000136988 00000 н. 0000137396 00000 н. 0000140588 00000 н. 0000140795 00000 н. 0000140865 00000 н. 0000141017 00000 н. 0000141045 00000 н. 0000141347 00000 н. 0000143785 00000 н. 0000153673 00000 н. 0000001876 00000 н. трейлер ] >> startxref 0 %% EOF 4141 0 obj> поток xZiX ׶_ B & d6 @@ & HDe6 * 25 H (8RkUp8`Wxs + cko / ms ~ ybv] z; * BH ! ăA CHt + r ֦ H, v = uL8Zw`ioǶ |! = ByG] tS ;; dJWU? N ݺ 9 i; vϓvYo` [qNmzf ?.~ Zª ֢ K *

    (PDF) HDAC6 регулирует стабильность микротрубочек и кластеризацию AChR в нервно-мышечных соединениях

    J. Neurosci. 28: 13094–13105. https://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.3074

    -08.2008

    Хабберт, К., А. Гвардиола, Р. Шао, Ю. Кавагути, А. Ито, А. Никсон, М.

    Йошида, X.-F. Ван, Т.-П. Яо. 2002. HDAC6 представляет собой деацетилазу, ассоциированную с микротрубочками

    . Природа. 417: 455–458. https://doi.org/10.1038/

    417455a

    Янке, К., и J.C. Bulinski. 2011. Посттрансляционная регуляция цитоскелета канальцев микро-

    : механизмы и функции. Nat. Rev. Mol. Cell Biol.

    12: 773–786. https://doi.org/10.1038/nrm3227

    Janke, C., and M. Kneussel. 2010. Посттрансляционные модификации тубулина:

    Функции кодирования

    на цитоскелете микротрубочек нейронов. Trends

    Neurosci. 33: 362–372. https://doi.org/10.1016/j.tins.2010.05.001

    Жасмин, Б.Дж., Дж. П. Ченжакс и Дж.Картаод. 1990. Компартментализация

    холодоустойчивых и ацетилированных микротрубочек в субсинаптическом домене

    волокон скелетных мышц цыплят. Природа. 344: 673–675. https://doi.org/10

    . 1038 / 344673a0

    Жасмин, Б.Дж., Дж. П. Чанже и Ж. Картаод. 1991. Организация и динамика

    микротрубочек в электроците Torpedo marmorata: избирательная ассоциация

    со специализированными доменами постсинаптической мембраны. Неврология.

    43: 151–162.https://doi.org/10.1016/0306-4522(91)

    -M

    Jasmin, B.J., C. Antony, J.P. Changeux и J. Cartaud. 1995. Нервозависимая

    пластичность комплекса Гольджи в волокнах скелетных мышц: компартмент-

    тализация в субнейральной саркоплазме. Евро. J. Neurosci. 7: 470–479.

    https://doi.org/10.1111/j.1460-9568.1995.tb00343.x

    Jaworski, J., L.C. Капитеин, С. Гувейя, Б. Дортланд, П.С. Вульф, И.Григорьев,

    П. Камера, С.А. Спанглер, П.Ди Стефано, Дж. Деммерс и др. 2009. Dy-

    Намические микротрубочки

    регулируют морфологию дендритных шипов и синаптическую пластичность

    . Нейрон. 61: 85–100. https://doi.org/10.1016/j.neuron.2008.11

    .013

    Джонс, Р.А., К.Д. Райх, К. Диссанаяке, Ф. Кристмундсдоттир, Г.С. Findlater,

    R.R. Ribchester, M.W. Simmen и T.H. Gillingwater. 2016. NMJ-

    morph выявляет основные компоненты влияния синаптической морфологии

    на структурно-функциональные взаимосвязи в нервно-мышечном соединении.

    Открытая биол. 6. 160240. https://doi.org/10.1098/rsob.160240

    Калебич, Н., С. Соррентино, Э. Перлас, Г. Боласко, К. Мартинес и П.А. Hep-

    пеносталь. 2013. αTAT1 является основной α-тубулинацетилтрансферазой у мышей.

    Нат. Commun. 4: 1962. https://doi.org/10.1038/ncomms2962

    Калуза, Д., Дж. Кролл, С.Гесерих, Т.-П.Яо, Раун, Э.Хергенрейдер, М.Тжва,

    Л.Ро

    ossig, E. Seto, HG Augustin, et al. 2011. HDAC6 класса IIb регулирует

    миграции эндотелиальных клеток и ангиогенез путем деацетилирования корактина.

    EMBO J.30: 4142–4156. https://doi.org/10.1038/emboj.2011.298

    Кавагути Ю., Дж. Дж. Ковач, А. МакЛорин, Дж. М. Вэнс, А. Ито, Т. Яо.

    2003. Деацетилаза HDAC6 регулирует образование агресом и жизнеспособность клеток

    в ответ на стресс неправильно свернутого белка. Клетка. 115: 727–738.

    https://doi.org/10.1016/S0092-8674(03)00939-5

    Ким С. и П.Г. Нельсон. 2000. Участие кальпаинов в дестабилизации

    кластеров рецепторов ацетилхолина в мышечных трубках крыс.J. Neurobiol. 42:

    22–32. https://doi.org/10.1002/(SICI)1097-4695(200001)42:1<22::AID

    -NEU3> 3.0.CO; 2- #

    Kim, N., A.L. Stiegler, T.O. Кэмерон, П. Хэллок, А. Гомес, Дж. Хуанг,

    S.R. Хаббард, М. Дастин и С.Дж. Груз. 2008. Lrp4 является рецептором

    Agrin и образует комплекс с MuSK. Клетка. 135: 334–342. https: // doi

    .org / 10.1016 / j.cell.2008.10.002

    Kovacs, J.J., P.J.M. Мерфи, С. Гайяр, Х. Чжао, Дж.-Т. Ву, C.V. Nicchitta, M.

    Yoshida, D.O. Тофт, У. Пратт, Т.-П. Яо. 2005. HDAC6 регулирует ацетилирование

    Hsp90 и шаперон-зависимую активацию коидного рецептора глюкокорти-

    . Мол. Клетка. 18: 601–607. https://doi.org/10.1016/j.molcel

    . 2005.04.021

    Куммер, T.T., T. Misgeld, J.W. Lichtman и J.R. Sanes. 2004. Nerve-

    независимое образование топологически сложного постсинаптического аппарата

    ratus. J. Cell Biol. 164: 1077–1087.https://doi.org/10.1083/jcb.200401115

    Лам, Х.К., С.М. Клунан, А. Бхашьям, Дж. А. Хаспел, А. Сингх, Дж. Ф. Сатир-

    апонгсасути, М. Черво, Х. Яо, А. Л. Чунг, К. Мизумура и др. 2013.

    Селективная аутофагия, опосредованная гистон-деацетилазой 6, регулирует дисфункцию ресничек, ассоциированную с ХОБЛ-

    . J. Clin. Вкладывать деньги. 123: 5212–5230. https: // doi

    .org / 10.1172 / JCI69636

    Laufer, R., and J.P. Changeux. 1989. Зависимая от активности регуляция экспрессии гена

    в мышечных и нейрональных клетках.Мол. Neurobiol. 3: 1–53. https: //

    doi.org/10.1007/BF02935587

    Ли, J.-Y., Y. Nagano, J.P. Taylor, K.L. Лим, Т.-П. Яо. 2010. Болезнь

    , вызывающая мутации в паркине, нарушает убиквитинирование митохондрий, аг-

    грегатирование и HDAC6-зависимую митофагию. J. Cell Biol. 189: 671–679.

    https://doi.org/10.1083/jcb.201001039

    Ли, Дж.-Х., А. Махендран, Ю. Яо, Л. Нго, Г. Вента-Перес, М.Л. Чой, Н. Ким,

    W.-S. Хэм, Р. Бреслоу и П.А. Маркс. 2013. Разработка ингибитора деацетилазы 6 гистона

    и его биологические эффекты. Proc. Natl. Акад. Sci.

    США. 110: 15704–15709. https://doi.org/10.1073/pnas.1313893110

    Lieuvin, A., J.C. Labb´

    e, M. Dor´

    ee, и D. Job. 1994. Внутренняя стабильность микротрубочек

    в интерфазных клетках. J. Cell Biol. 124: 985–996. https://doi.org/10

    .1083 / jcb.124.6.985

    Мадхаван Р. и Х. Пэн. 2003. Акт синаптического уравновешивания: локальная и глобальная передача сигналов

    в кластеризации рецепторов ACh в нейромусе позвоночных -

    кулярных соединений.J. Neurocytol. 32: 685–696. https://doi.org/10.1023/B:

    NEUR.0000020617.05656.68

    Мадхаван, Р., З.Л. Гонг, Дж. Дж. Ма, A.W.S. Чан и Х. Пэн. 2009. Функция

    кортактина в кластеризации рецепторов ацетилхолина в нервно-мышечном соединении позвоночных

    . PLoS One. 4. e8478. https://doi.org/

    10.1371 / journal.pone.0008478

    Мао, C.-X., X. Wen, S. Jin и Y.Q. Чжан. 2017. Повышенное ацетилирование

    микротрубочек

    спасает человеческие тау-индуцированные дефекты микротрубочек и

    аномалий нервно-мышечных соединений у дрозофилы.Дис. Модель. Мех.

    10: 1245–1252. https://doi.org/10.1242/dmm.028316

    МакЛендон, П.М., Б.С. Фергюсон, Х. Осинская, М.С. Бхуйян, Дж. Джеймс, Т.А.

    McKinsey и Дж. Роббинс. 2014. Гиперацетилирование тубулина является адаптивным в отношении протеотоксичности сердца

    , способствуя аутофагии. Proc. Natl. Акад. Sci.

    США. 111: E5178 – E5186. https://doi.org/10.1073/pnas.1415589111

    Мурильо, Б., и М. Мендес Соуза. 2018. Внутренняя регенеративная способность нейронов

    : влияние организации микротрубочек и аксонального транспорта.

    Дев. Neurobiol. 78: 952–959. https://doi.org/10.1002/dneu.22602

    North, B.J., B.L. Маршалл, М. Борра, Дж. М. Дену и Э. Вердин. 2003. Ортолог Sir2 человека

    , SIRT2, представляет собой НАД + -зависимую тубулиндеацетилазу.

    Мол. Cell.11: 437–444. https://doi.org/10.1016/S1097-2765(03)00038-8

    Osseni, A., M. S´

    ebastien, O. Sarrault, M. Baudet, Y. Cout´

    e, J. Faur´

    e, A. Fourest-

    Lieuvin и I. Marty.2016. Триадин и CLIMP-63 образуют связь между

    триадами и микротрубочками в мышечных клетках. J. Cell Sci. 129: 3744–3755.

    https://doi.org/10.1242/jcs.188862

    Ота, С., З.-К. Чжоу, М. Ромеро, Дж. Янг и П. Дж. Херлин. 2016. Дефицит или ингибирование HDAC6

    блокирует накопление FGFR3 и улучшает рост костей

    в модели ахондроплазии. Гм. Мол. Genet. 25: 4227–4243.

    https://doi.org/10.1093/hmg/ddw255

    Оуян, Х., Ю.О. Али, М. Равичандран, А. Донг, В. Цю, Ф. Маккензи, S.

    Dhe-Paganon, C.H. Эроусмит и Р. Чжай. 2012. Белковые агрегаты

    рекрутируются для агресомы с помощью гистондеацетилазы 6 через незакрепленные

    убиквитиновых С-концах. J. Biol. Chem. 287: 2317–2327. https://doi.org/10

    .1074 / jbc.M111.273730

    erez-Salvia, M., E. Aldaba, Y. Vara, M. Fabre, C. Ferrer, C. Масдеу, А. Зубиа,

    ES Себастьян, Д. Отаеги, П. Ллинь

    ас-Ариас и др.2018. In vitro и in vivo

    активность нового низкомолекулярного ингибитора HDAC6 в лимфоме мантийных клеток

    . Haematologica.103: e537 – e540. https://doi.org/10.3324/haematol

    .2018.189241

    Портран, Д., Л. Шедель, З. Сюй, М. Тх´

    и М.В. Начуры. 2017. Ацетилирование тубулина

    защищает долгоживущие микротрубочки от механического старения.

    Нат. Cell Biol. 19: 391–398. https://doi.org/10.1038/ncb3481

    Привс, Дж., А. Фултон, С. Пенман, М. Дэниелс и К. Кристиан. 1982.

    Взаимодействие каркаса цитоскелета с рецептором ацетилхолина

    на поверхности эмбриональных мышечных клеток в культуре. J. Cell Biol.92:

    231–236. https://doi.org/10.1083/jcb.92.1.231

    Памплин Д.У. и Дж. Стронг. 1988. Мембранные домены кластеров AChR

    культивируемых мышечных трубок крысы

    , выявленные быстрым замораживанием, глубоким травлением, ротационной репликацией

    . P. R. Health Sci. Дж.7: 96–99.

    Rahkila, P., K. V¨

    an¨

    anen, J. Saraste, and K. Metsikk

    o. 1997. Эндоплазматическая ре-

    тикулума по Гольджи, перемещая многоядерные волокна скелетных мышц.

    Exp. Cell Res. 234: 452–464. https://doi.org/10.1006/excr.1997.3633

    Ralston, E .. 1993. Изменения в архитектуре комплекса Гольджи и других

    субклеточных органелл во время миогенеза. J. Cell Biol. 120: 399–409.

    https: // doi.org / 10.1083 / jcb.120.2.399

    Ralston, E., Z. Lu, and T. Ploug. 1999. Организация комплекса Гольджи

    и микротрубочек в скелетных мышцах зависит от типа волокна. J. Neurosci.

    19: 10694–10705. https://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.19-24-10694.1999

    Равель-Шапюи, А., М. Вандромм, Ж.-Л. Томас и Л. Шеффер. 2007.

    Постсинаптический хроматин находится под нервным контролем в нервном соединении

    кулярного сочленения. EMBO J. 26: 1117–1128. https: // doi.org / 10.1038 / sj.emboj

    . 7601572

    Rivieccio, M.A., C. Brochier, D.E. Уиллис, Б.А. Walker, M.A. D’Annibale, K.

    McLaughlin, A. Siddiq, A.P. Kozikowski, S.R. Jaffrey, J.L. Twiss и др.

    2009. HDAC6 является мишенью для защиты и восстановления нервной системы. Proc. Natl. Акад. Sci. США. 106: 19599–19604.

    https://doi.org/10.1073/pnas.0

    5106

    Ryu, H.-W., D.-H. Ли, Д.-Х. Шин, С. Ким, С.Х. Квон. 2015. Ацерозид

    VIII - новый природный селективный ингибитор HDAC6, который синергетически действует на

    Osseni et al. Journal of Cell Biology 22 из 23

    Ацетилирование

    MT через HDAC6 регулирует структуру NMJ https://doi.org/10.1083/jcb.2019

    Перейти к основному содержанию Поиск